一種流感病毒神經氨酸酶的新型抑制劑及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種流感病毒神經氨酸酶的新型抑制劑，其具體為淫羊藿苷及其衍 生物。本發明還涉及該新型抑制劑在制備用于預防和/或治療流感病毒引起的疾病的藥 物、食品、保健品中的用途。屬于藥學和藥理學領域。
【背景技術】
[0002] 以下描述利于讀者理解。所提供的信息或引用的參考文獻都不能被認為是本發明 的現有技術。
[0003] 流行性感冒病毒（influenza virus)，簡稱流感病毒，是一種能夠引起人、狗、 馬、豬哺乳動物及禽類等流行性感冒的RNA病毒。在分類學上，流感病毒屬于正粘病毒科 (Orthomyxoviridae)，它會造成急性上呼吸道感染，并可通過空氣迅速傳播，在世界各地會 發生周期性大流行。該病毒最早是在1933年由英國人威爾遜·史密斯（Wilson Smith)認 識的，稱為H1N1。H代表血凝素；N代表神經氨酸酶。數字代表不同類型。人流感病毒分為 甲（A)、乙（B)、丙（C)三型，是流行性感冒（流感）的病原體。其中甲型流感病毒抗原易發 生變異，曾多次引起世界性大流行。
[0004] 流感病毒呈球形，新分離的毒株則多呈絲狀，其直徑在80至120納米之間，絲狀流 感病毒的長度可達400納米。流感病毒結構自外而內可分為包膜、基質蛋白以及核心三部 分。病毒的核心包含了存貯病毒信息的遺傳物質以及復制這些信息必須的酶。流感病毒的 遺傳物質是單股負鏈RNA，簡寫為ss-RNA，SS-RNA與核蛋白（NP)相結合，纏繞成核糖核蛋白 體（RNP)，以密度極高的形式存在。除了核糖核蛋白體，還有負責RNA轉錄的RNA多聚酶。甲 型流感病毒的RNA由8個節段組成。流感病毒的基因由8個單鏈RNA片段組成，分別為NA、 擬、即、厘、呢、？81、？82和？六基因。它們編碼10種蛋白：膜蛋白血凝素（他111&881此111111擬）， 神經氨酸（Neuraminidase NA)，基質蛋白（Matrix proteinlMl，核蛋白（Nucleoprotein NP)，3 種 RNA依賴聚（RNA-dependent RNA polymerase PBl、PB2 和 PA)離子通道蛋白（Ion channel protein M2)和非結構蛋白（Non-structural protein NSl 和 NS2)。
[0005] 基質蛋白構成了病毒的外殼骨架，實際上骨架中除了基質蛋白（Ml)之外還有膜 蛋白（M2)。M2蛋白具有離子（主要是Na+)通道和調節膜內PH值的作用，但數量很少。基 質蛋白與病毒最外層的包膜緊密結合，起到保護病毒核心和維系病毒空間結構的作用。當 流感病毒在宿主細胞內完成其繁殖之后，基質蛋白是分布在宿主細胞膜內壁上的，成型的 病毒核衣殼能夠識別宿主細胞膜上含有基質蛋白的部位，與之結合形成病毒結構，并以出 芽的形式突出釋放成熟病毒顆粒（Virion)。包膜是包裹在基質蛋白之外的一層磷脂雙分子 層膜，這層膜來源于宿主的細胞膜，成熟的流感病毒從宿主細胞出芽，將宿主的細胞膜包裹 在自己身上之后脫離細胞，去感染下一個目標。包膜中除了磷脂分子之外，還有兩種非常重 要的糖蛋白：血凝素和神經氨酸酶。這兩類蛋白突出病毒體外，長度約為10至40納米，被稱 作刺突。一般一個流感病毒表面會分布有500個血凝素刺突和100個神經氨酸酶刺突。在 甲型流感病毒中血凝素和神經氨酸酶的抗原會發生變異，這是區分病毒毒株亞型的依據。
[0006] 血凝素（HA)呈柱狀，能與人、鳥、豬豚鼠等動物紅細胞表面的受體相結合引起凝 血，故而被稱作血凝素。血凝素蛋白水解后分為輕鏈和重鏈兩部分，后者可以與宿主細胞膜 上的唾液酸受體相結合，前者則可以協助病毒包膜與宿主細胞膜相互融合。血凝素在病毒 導入宿主細胞的過程中扮演了重要角色。血凝素具有免疫原性，抗血凝素抗體可以中和流 感病毒。神經氨酸酶（NA)是一個呈蘑菇狀的四聚體糖蛋白，具有水解唾液酸的活性。成熟 的流感病毒以出芽的方式脫離宿主細胞之后，病毒表面的血凝素會經由唾液酸受體與宿主 細胞膜保持聯系，需要由神經氨酸酶將唾液酸水解，切斷病毒與宿主細胞的最后聯系，使病 毒能順利從宿主細胞中釋放，繼而感染下一個宿主細胞。因此神經氨酸酶也成為流感治療 藥物的一個作用靶點，針對此酶設計的奧司他韋（達菲類）是最著名的抗流感藥物之一。H 可分為17個亞型（Hl~H17)，N有10個亞型（NI~N10)。其中僅H1N1、H2N2、H3N2主要 感染人類，其它許多亞型的自然宿主是多種禽類和動物。其中對禽類危害最大的為H5、H7 和H9亞型毒株。一般情況下，禽流感病毒不會感染鳥類和豬以外的動物。但1997年香港 首次報道發生18例H5N1人感染禽流感病例，其中6例死亡，引起全球廣泛關注。1997年以 后，世界上又先后幾次發生了禽流感病毒感染人的事件。具有高致病性的H5N1、H7N7、H7N9、 H9N2等禽流感病毒，一旦發生變異而具有人與人的傳播能力，會導致人禽流感流行，預示 著禽流感病毒對人類已具有很大的潛在威脅。
[0007] 由于流感病毒抗原極易變異，常規疫苗目前尚不能及時有效地預防流感暴發與流 行，因此抗流感病毒藥物研宄在流感治療中具有重要意義。已應用和正在研宄的抗流感病 毒藥物有金剛烷胺類藥物、流感病毒神經氨酸苷酶抑制劑、流感病毒受體阻斷劑和抗流感 病毒反義寡核苷酸等。金剛烷胺和金剛乙胺是常用臨床治療藥物，但對B型流感無效，易產 生耐藥性并具有神經毒性；流感病毒神經氨酸苷酶抑制劑，如奧司他韋是目前最為有效的 抗流感病毒一線藥物；流感病毒受體阻滯劑具有明顯的抗病毒作用、抗流感病毒反義寡核 苷酸體外實驗證明能特異性抑制病毒復制，有可能成為新一代抗流感特效藥，但它們尚處 于研宄階段。
[0008] 淫羊藿苷，中文別名為淫羊藿戒，英文名為Icariin、Icariln、Ieariline，英文化 學名是 3-[(6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy]-7-(beta_D-glucopyranosy-loxy) -5_hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-8-(3-methyl-2-buten_l-yl)-4H-1-benzopyran_4-〇 ne，化學分子式是=C33H4tlO15。天然的淫羊藿苷存在于小檗科淫羊藿屬（E.pimedium)植物 中，主要分布于北溫帶，世界上常見的淫羊藿屬植物有23種，中國有13種，例如：淫羊藿 (E.brevicornum)，箭葉淫羊藿（E. sagitatum)，朝鮮淫羊藿（E. icoroanum)等。中國專利申 請CN1535976A詳細地描述了從淫羊藿屬植物中提取純化淫羊藿甙的方法。從淫羊藿屬植 物的干燥莖葉中提取，純化后的淫羊藿苷為淡黃色針狀結晶粉末。