一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物及其灌注液的制備方法
【技術領域】
[0001]
[0002]本發明涉及獸藥制備領域，具體涉及一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物及其灌注液的制備方法。
【背景技術】
[0003]奶牛子宮內膜炎是發生于奶牛子宮內膜的炎癥，是奶牛產后常見的一種生殖器官疾病，也是導致奶牛不孕的主要原因之一。子宮內膜炎常引起奶牛子宮復舊延遲，卵泡發育和功能異常，繁殖力下降，產犢間期延長，屢配不孕，產奶量下降，致使治療費用和淘汰率增加，經濟效益降低，給奶牛養殖業造成嚴重的經濟損失。在我國奶牛子宮內膜炎的發病率約為20%?50%。在德國奶牛子宮內膜炎與陰道炎所造成的經濟損失約占奶牛產后繁殖疾病的50%，美國每年因為奶牛不孕癥損失達2.5億美元，而60%-95%的不孕癥是由子宮內膜炎引起的。據估計，每頭感染子宮內膜炎的奶牛在泌乳期平均花費為106美元，奶牛在產后患子宮疾病后所造成的經濟損失達285美元/頭；根據研宄表明，奶牛患子宮內膜炎后，產犢間期會延長2周甚至2個月，據估計每頭奶牛每天的經濟損失約為2.5-5.4美元，如果按照平均產犢間期延長I個月計算，每頭奶牛的經濟損失為75-162美元。可見，奶牛子宮內膜炎造成的經濟損失非常巨大。目前，子宮內膜炎的治療方法有局部療法、全身療法和生物學療法，治療藥物主要有抗生素、激素、防腐消毒藥及中草藥，這些藥物對奶牛子宮內膜炎都有一定的療效，但也有許多缺點。抗生素和激素在防治奶牛子宮內膜炎方面發揮著巨大的作用，但隨著其應用時間的延長，不但出現了毒副作用和耐藥性，引起奶牛生殖內分泌功能紊亂，而且易在牛奶中殘留，療效降低，甚至造成棄奶或降低奶價出售，殘留嚴重時還會危害人類的健康。中藥以其高效、低毒、低殘留和不易產生耐藥性等優點越來越受到國內外學者的青睞。利用中藥不但可以防治奶牛子宮內膜炎，而且可以發揮其對機體的調節作用，避免抗生素殘留和耐藥性等問題，而且綠色環保。
【發明內容】
[0004]本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一種不僅可以防治奶牛子宮內膜炎，還可發揮其對機體的調節作用，避免抗生素殘留和耐藥性等問題，且綠色環保的用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物。
[0005]為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為:一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物，是由按照重量份計的以下組分制備得到的:丹參酮II A 4?8份，連翹苷3?5份，鹽酸水蘇堿I?2份。
[0006]進一步的，上述的一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物，是由按照重量份計的以下組分制備得到的:丹參酮II A 6份，連翹苷3份，鹽酸水蘇堿I份。
[0007]本發明的第二個目的是提供了一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物灌注液的制備方法，包括以下步驟:
1)按照上述的配比，稱取丹參酮IIA 40?80g、連翹苷30?50g、鹽酸水蘇堿10?20g，粉碎成細粉，混勻，得到混合藥物粉；
2)在步驟1)得到的混合藥物粉中，加入聚乙二醇-2008000mL，60°C水浴2h，攪勾，冷卻至室溫，以4000r/min離心20min，將上清液合并后再加入聚乙二醇-200定容至lOOOOmL，分裝于棕色玻璃瓶中，100mL/瓶，100°C滅菌30min，得到藥物組合物灌注液。
[0008]進一步的，上述的一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物灌注液的制備方法，包括以下步驟:
1)按照上述的配比，稱取丹參酮IIA 60g、連翹苷30g、鹽酸水蘇堿10g，粉碎成細粉，混勻，得到混合藥物粉；
2)在步驟1)得到的混合藥物粉中，加入聚乙二醇-2008000mL，60°C水浴2h，攪勾，冷卻至室溫，以4000r/min離心20min，將上清液合并后再加入聚乙二醇-200定容至lOOOOmL，分裝于棕色玻璃瓶中，100mL/瓶，100°C滅菌30min，得到藥物組合物灌注液。
[0009]安全性檢測:
為了測定小鼠口服試驗藥物的急性毒性，為臨床安全用藥提供依據。按改良寇氏法設計進行預試驗，測定半數致死量(ld5CI)，結果小鼠全部存活，未能找出最小致死劑量，無法測出LD5Q，故采用最大給藥量法，將40只小鼠隨機分為2組，每組20只，分別為試驗組和對照組，試驗組按每1kg體重80ml藥物組合物灌胃，對照組按1kg體重80mL生理鹽水灌胃，分2次灌服，給藥后連續觀察7d，測定其1日最大給藥量，確定試驗藥物的急性毒性。結果大劑量給藥當天，試驗組小鼠精神沉郁，采食、飲水和自主活動減少，有些小鼠臥地不起，運動時步態不穩，給藥次日逐漸恢復正常。連續觀察7d，所有小鼠被毛有光澤，采食、活動均正常，無小鼠死亡。試驗結束時，試驗組和對照組小鼠解剖后肉眼觀察皮下、心、肝、脾、肺、腎和胃腸道等器官無明顯眼觀異常變化。表明試驗藥物不會引起實質性臟器的眼觀病理損傷。小鼠口服試驗藥物的1日最大給藥量為80ml/kg，相當于臨床奶牛(500kg)日用量的400倍，表明試驗藥物較為安全。
[0010]為了考察藥物對黏膜的刺激性和局部毒性，進行了家兔眼睛刺激性試驗和陰道刺激性試驗。眼睛刺激性，試驗選擇5只健康家兔，每日給試驗家兔左眼結膜囊內滴入生理鹽水，右眼結膜囊內滴入藥液，每次0.lmL，用手使家兔眼睛閉合8-lOs，連續滴眼7d，于每次滴眼前和首次滴眼后6h觀察記錄雙眼的局部反應情況，主要觀察家兔雙眼角膜是否混濁，虹膜有無充血、出血和腫脹，瞳孔對光有無反應，結膜有無充血、水腫和流分泌物等，停藥后繼續觀察7d,按眼刺激反應評分標準對角膜、虹膜及結膜分別進行評分，計算平均值，對同一家兔的左右眼評分進行比較，按眼刺激性評價標準做出判定。結果表明，試驗藥物滴眼后，眼睛觀察指標與對照組無明顯差異，表明該藥物對家兔眼睛無刺激性。
[0011 ] 陰道黏膜的刺激性試驗。取家兔10只，雌性，隨機分為試驗組和對照組，每組5只，試驗組用軟管將lmL藥液輕輕注入家兔陰道內，保持家兔仰臥5min，使藥液與陰道黏膜充分接觸；對照組同法灌注生理鹽水。連續給藥7d，末次給藥24h后處死，取出陰道組織，觀察黏膜有無充血、紅腫等現象，將陰道組織在10%福爾馬林中固定，石蠟切片，HE染色，進行病理組織學檢查。結果與對照組相比，試驗組陰道黏膜光滑，均未出現充血、紅腫等異常現象，陰道組織進行石蠟切片檢查，黏膜組織均完整，無異常變化。表明試驗藥物對黏膜無刺激性，黏膜給藥安全。
[0012]本發明的有益效果為:
本發明提供的一種用于治療奶牛子宮內膜炎的藥物組合物及其制備方法中，丹參酮
IIA對葡萄球菌、大腸桿菌、變形桿菌等細菌有抑制作用，還具有抗炎和促進組織的修