顆粒組合物和含有其的醫藥組合物的制作方法
【專利說明】
[0001] 本申請是2010年8月31日提出的申請號為201080038549.X的同名專利申請的 分案申請。
技術領域
[0002] 本發明涉及可以作為藥物遞送系統（DDS)的載體使用的顆粒組合物（例如，高分 子微團），和具有該顆粒組合物與在其中內包的藥物的醫藥組合物（例如，高分子微團制 劑）。
【背景技術】
[0003] 相比于利用低分子化合物的以往型的醫藥品，利用諸如蛋白質和核酸的生物體高 分子的生物醫藥品，容易被酶分解或被免疫系統排除。專利文獻1~4從提高生物醫藥品 在生物體內的穩定性的觀點出發，公開了使生物體高分子內包于由脂質雙層膜構成的核糖 體的DDS。
[0004] 現有技術文獻
[0005] 專利文獻
[0006] 專利文獻1:國際公開第2001/034115號小冊子
[0007] 專利文獻2 :國際公開第1998/58630號小冊子
[0008] 專利文獻3 :國際公開第2005/092389號小冊子
[0009] 專利文獻4 :日本特表2001-504093
【發明內容】
[0010] 發明所要解決的課題
[0011] 在專利文獻1~3中記載的以往型DDS中，通過以脂質雙層膜保護作為藥物的生 物體高分子，雖然能夠提高藥物在生物體內的穩定性，但是藥物難以從載體釋放。另外，這 樣的以往型DDS，由于其粒徑大小和構成脂質雙層膜的脂質具有的電荷，從而容易被諸如 肺、肝臟和脾臟的網狀內皮系統捕捉，所以有時在到達投藥對象物以前會從血中被除去。在 專利文獻4中記載的DDS中，通過將核糖體隱形化，可以實現防止被捕捉到這樣的網狀內皮 系統，但仍然有藥物難以從載體釋放的傾向。
[0012] 相比于使用核糖體的以往型DDS，以高分子微團作為載體的DDS能夠將DDS顆粒大 幅度地小型化（例如，平均粒徑IOOnm以下），該高分子微團通過由疏水性聚合物鏈段和親 水性聚合物鏈段形成的嵌段共聚物單元構成。但是，這樣的以高分子微團作為載體的DDS， 如后述的比較例所示，由于將生物體高分子保持在DDS顆粒內的作用過弱，仍然有難以將 藥物適當輸送到投藥對象物中的情況。另外，在這樣的DDS中，有時在制造后的儲藏期間 中，藥物也會從載體脫離。
[0013] 用于解決課題的方法
[0014] 本發明提供一種顆粒組合物，其含有具有疏水性聚合物鏈段和親水性聚合物鏈段 的嵌段共聚物單元，多個上述嵌段共聚物單元以上述疏水性聚合物鏈段朝向內側，并且上 述親水性聚合物鏈片朝向外側的狀態放射狀配置，該顆粒組合物還具有帶電脂質，該帶電 脂質帶有與應該被內包的藥物的電荷相反的電荷，通過與該帶電脂質的靜電結合將上述藥 物保持在顆粒內，另一方面該帶電脂質以被吸引到上述疏水性聚合物鏈段側的狀態配置， 從而防止顆粒外周面帶有能夠吸引與上述帶電脂質帶有相反電荷的帶電性物質的電荷。
[0015] 從另一個側面，本發明提供一種醫藥組合物，其具有上述顆粒組合物、和在該顆粒 組合物中內包的帶有與帶電脂質相反電荷的藥物。發明的效果
[0016] 根據本發明，能夠提供適于DDS的藥物載體和利用該藥物載體的醫藥品，該藥物 載體藥物保持性優異，并且能夠防止生物體分子向載體表面的附著，該附著會導致妨礙藥 物向投藥對象物搬運。相比于以往型的DDS，這些藥物載體和醫藥品能夠向投藥對象物可靠 地輸送藥物。
【附圖說明】
[0017] 圖1(a)~（C)是表示本發明的顆粒組合物和醫藥組合物結構的一例的示意圖。
[0018] 圖2是表示在試驗例Ib中測得的顆粒組合物的電動電位（zetapotential)的絕 對值與在試驗例Ic中測得的顆粒組合物的血中凝集度的關系的圖表。
[0019] 圖3是表示在試驗例2b中的白蛋白-FITC熒光強度測定結果的圖表。
[0020] 圖4是表示在試驗例5a中的電泳結果的圖。
[0021] 圖5是用于說明在試驗例5c中測得的顆粒組合物的抗癌活性的圖表。
[0022] 圖6是用于說明在試驗例5d中測得的顆粒組合物在血清中的凝集性的圖表。
[0023] 圖7是表示在試驗例5b中測得的顆粒組合物的電動電位的絕對值與在試驗例5d 中測得的顆粒組合物的血中凝集度的關系的圖表。
[0024] 圖8是用于說明在試驗例5f中測得的藥物的臟器轉移性的圖表。
【具體實施方式】
[0025] 圖I(a)是表示本發明的顆粒組合物（以下，有時簡稱為"顆粒組合物"）結構的一 例的示意圖。圖1(b)是其部分放大圖。顆粒組合物1含有嵌段共聚物單元2和帶電脂質 3。嵌段共聚物單元2具有親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b，以疏水性聚合物 鏈段2b朝向內側，并且親水性聚合物鏈段2a朝向外側的狀態，放射狀配置在顆粒組合物1 內。另外，帶電脂質3帶有與應該內包的藥物的電荷相反的電荷，以吸引在疏水性聚合物鏈 段2b側的狀態配置。圖1(c)是表示本發明的顆粒狀醫藥組合物（以下，有時簡稱為"醫藥 組合物"）結構的一例的示意圖。醫藥組合物1'具有顆粒組合物1和帶有與帶電脂質3相 反電荷的藥物4,藥物4通過與帶電脂質3靜電結合被保持在顆粒組合物1內。
[0026] 在本說明書中，"帶電脂質"是指在生理性pH(例如pH7. 4)的水性介質中具有多于 正電荷的負電荷的陰離子性脂質，和在該水性介質中具有多于負電荷的正電荷的陽離子性 脂質。因此，在本說明書中，關于具有陽離子性基團和陰離子性基團的所謂兩性帶電脂質， 也根據上述基準處理。
[0027] 帶電脂質3在顆粒組合物1內通過靜電結合保持應該被內包的藥物4。帶電脂質 3只要至少在從顆粒組合物1形成的醫藥組合物1'的儲藏環境下，帶有與被內包的藥物4 的電荷相反的電荷即可。由此，能夠在制造后的儲藏期間中在顆粒組合物1內更可靠地保 持藥物4。帶電脂質3和藥物4優選即使以血中為代表的生理環境下（例如，pH7. 4)，也帶 有相反的電荷。由此，能夠更可靠地防止在向投藥對象物的輸送途中，藥物4從顆粒組合物 1脫離。
[0028] 帶電脂質3由下面的機理以吸引在疏水性聚合物鏈段側2b的狀態配置。顆粒組 合物1通過包括將嵌段共聚物單元2和帶電脂質3懸濁在水溶液中的工序的方法形成。嵌 段共聚物單元2的疏水性聚合物鏈段2b因為是疏水性的，所以在水溶液中不擴散地凝集 存在。親水性聚合物鏈段2a可以在水溶液中擴散并自由地運動。因此，嵌段共聚物單元2 在水溶液中，以疏水性聚合物鏈段2b朝向內側，親水性聚合物鏈段2a朝向外側的放射狀配 置。而且，帶電脂質3因為疏水性強，相比于水或親水性聚合物鏈段2a，與疏水性聚合物鏈 段2b的親和性高，所以被吸引在疏水性聚合物鏈段2b側，與顆粒組合物1的外周面離開配 置。由此，可以防止顆粒組合物1和醫藥組合物1'的外周面帶有能夠吸引帶有與帶電脂質 3相反電荷的帶電性物質（例如，血中的蛋白質）的電荷。
[0029] 而且，如果這樣操作懸濁在水溶液中，因為帶電脂質3和嵌段共聚物單元2以混合 的狀態顆粒化，所以如圖1(b)所示，帶電脂質3不是在顆粒組合物1的環向以連續的狀態 配置，而是在顆粒組合物1的環向以介于相鄰接的嵌段共聚物單元2之間的方式配置。由 此，在顆粒組合物1中，在顆粒組合物1的環向相鄰接的帶電脂質3之間的接觸被嵌段共聚 物單元2隔斷。因此，在顆粒組合物1中，在顆粒組合物1的環向相鄰接的帶電脂質3之間， 為形成有能夠容納嵌段共聚物單元2程度的間隙G的狀態，換而言之，處于相鄰接的帶電脂 質3之間形成間隙G，在該間隙G中配置有嵌段共聚物單元2的狀態。帶電脂質3和嵌段共 聚物單元2之間的結合力小于帶電脂質3之間的結合力。因此，如果相比于脂質在環向處 于被連續配置狀態的以往型DDS(核糖體），在顆粒組合物1中，容易產生由帶電脂質3的脫 落造成的顆粒形狀崩解，其結果，就可以防止應該被內包在顆粒（載體）內的藥物4被過剩 地保持。在專利文獻4中記載的以DDS為代表的隱形核糖體，因為通過在形成由脂質雙層 膜構成的核糖體主體后，使二嵌段共聚物附著在該主體表面而形成，所以，在環向相鄰接的 脂質之間的接觸沒有被嵌段共聚物等隔斷，脂質仍舊處于在環向連續配置的狀態。
[0030] 防止顆粒組合物1和醫藥組合物1'的外周面帶有可以吸引帶電性物質的電荷的 狀態，例如，能夠通過從顆粒組合物1和醫藥組合物1'測得的電動電位的絕對值在規定值 以下的范圍而確定。更具體而言，對于醫藥組合物1'，電動電位的絕對值希望為IOmV以下， 例如為5mV以下，或者例如為3mV以下，優選為2mV以下，更優選為ImV以下。由于在顆粒 組合物1中含有藥物4,醫藥組合物1'的電動電位的絕對值容易低于該顆粒組合物1固有 的電動電位的絕對值。因此，對于顆粒組合物1，電動電位的絕對值希望為15mV以下，例如 為12mV以下，或者例如為6mV以下，或者例如為3mV以下，優選為2mV以下，更優選為ImV以 下。電動電位如下測定：在pH為7. 4的IOmM的HEPES緩沖溶液中，以每ImL該緩沖溶液， 顆粒組合物1或醫藥組合物1'所含有的帶電脂質3的總量為0.Img的方式，添加顆粒組合 物1或醫藥組合物1'。
[0031] 在本說明書中，電動電位的絕對值作為將小數點以下四舍五入得到的數值處理。 例如，電動電位的絕對值為"2mV以下"的狀態包含小于2. 5mV的狀態。
[0032] 另外，如后述的實施例所示，通過控制顆粒組合物1或醫藥組合物1'的電動電位 的絕對值使其變低，能夠防止顆粒組合物1或醫藥組合物r的血中凝集。更具體而言，通過 將顆粒組合物1的電動電位的絕對值控制在規定范圍以下，就能夠防止在血中的凝集，使 得顆粒組合物1的