一種小鼠主動脈夾層動脈瘤模型的建立方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及人類疾病動物模型的制作技術領域中一種小鼠主動脈夾層動脈瘤模 型的建立方法及其應用。
【背景技術】
[0002] 主動脈夾層動脈瘤是指各種原因造成的主動脈壁內膜血管破裂并在內膜與中外 層之間，由于血液流體力學的壓力沿此層面縱行剝離，形成有活動的血液假腔，因夾層分 離，假腔擴大膨出。形成的夾層動脈瘤極易破裂，這使得該疾病成為心血管疾病中最致命的 重癥之一，在發病兩周內的死亡率高達70%。
[0003] 在西方主動脈瘤的發生較多，主要出現于腹主動脈，而在中國主動脈夾層動脈瘤 更為高發，多累及主動脈根部、升主動脈、弓部、胸主動脈。目前主要利用大鼠和小鼠建立主 動脈瘤動物模型進行研宄，由于以往的基因工程動物多為小鼠，而且小鼠飼養成本較低，易 于大量用于實驗，因此在小鼠中建立主動脈瘤疾病模型極為重要。
[0004] 腹主動脈瘤的小鼠模型的構建方法較為成熟，主要通過以下幾類方法構建：（1) 腹主動脈瞬時灌注彈力蛋白酶；（2)動脈外孵育氯化鈣；(3)不同品系小鼠間主動脈移植；
[4] ApoE或LDL受體缺失小鼠皮下植入微量滲透泵灌注血管緊張素 II。但是模型的建立往 往需要特異基因敲除的動物或者通過外科手術給予藥物處理，實驗動物雜交耗時長，并且 手術對實驗人員技術要求高，模型建立困難。在小鼠中建立主動脈夾層動脈瘤模型基本上 需要小鼠某些基因發生突變，功能受到影響，如Fbnl等；在正常野生型小鼠中建立主動脈 夾層動脈瘤鮮有報道，限制了其發病機制和治療手段的研宄。
[0005] 賴氨酰氧化酶（lysyloxidase, Iox)是一種糖蛋白，在銅離子的幫助下，能夠在細 胞外基質中氧化膠原蛋白和彈性蛋白上的特殊氨基酸殘基，使膠原蛋白和彈性蛋白形成共 價鍵。在血管壁中存在大量的彈力蛋白和膠原蛋白，它們交聯成網狀，從而維持血管的張力 和穩定性。
[0006] 因此在正常小鼠中建立簡便易行，費用更為經濟的模型，以用于大規模的病因學 和藥物篩查以及發病機制的研宄，是目前亟待解決的問題。
【發明內容】
[0007] 本發明所要解決的技術問題是如何建立有效、簡便易行和更為經濟的動物主動脈 夾層動脈瘤模型。
[0008] 為解決上述技術問題，本發明首先提供了 一種動物動脈瘤模型的構建方法。
[0009] 本發明所提供的一種動物動脈瘤模型的構建方法，包括將β -氨基丙腈的水溶液 作為受試動物的飲用水，給所述受試動物飲用所述飲用水進行給藥，獲得具有動脈瘤的動 物，所述具有動脈瘤的動物為動物動脈瘤模型。
[0010] 上述方法中，所述氨基丙腈的水溶液在配制后0-3天內作用于所述受試動物， 具體可為3天。
[0011] 上述方法中，所述β -氨基丙腈的水溶液中β -氨基丙腈的濃度可為6-8mg/mL，具 體可為 6mg/mL 或 8mg/mL。
[0012] 上述方法中，所述給藥的劑量可為Ig β -氨基丙腈/kg體重/天。
[0013] 上述方法中，所述給藥的時間可為14-28d，具體可為28d。
[0014] 上述方法中，所述給藥的方式為用β -氨基丙腈的濃度為6mg/mL的所述β -氨基 丙腈的水溶液按照Ig β -氨基丙腈/kg體重/天的給藥劑量給藥14天，自第一次給藥第15 天開始，用β -氨基丙腈的濃度為8mg/mL的所述β -氨基丙腈的水溶液按照Ig β -氨基丙 腈/kg體重/天的給藥劑量給藥14天。
[0015] 上述方法中，所述動物可為哺乳動物，進一步的，所述哺乳動物具體可為小鼠。
[0016] 上述方法中，所述動脈瘤可為主動脈夾層動脈瘤、周圍動脈瘤、腹主動脈瘤、胸腹 主動脈瘤或內臟動脈瘤中至少一種，具體可為主動脈夾層動脈瘤。
[0017] 實驗證明，本發明的小鼠主動脈夾層動脈瘤模型的建立方法簡便，可在短時間內 構建小鼠主動脈夾層動脈瘤模型，無需實施外科手術，減少了實驗小鼠的創傷，可操作性 強。造模組小鼠主動脈夾層動脈瘤發生率為90 %，破裂率為20 %，胸段及以上位置主動脈 夾層發生率為90 %，腹段發生率為20 %，誘導成功率高。主動脈夾層動脈瘤的夾層發生位 置與人類發病位置相似，易于用此模型研宄人類主動脈夾層動脈瘤的病理機制，進行可疑 致病基因篩選和治療研宄。
【附圖說明】
[0018] 圖1為利用β -氨基丙腈飼喂小鼠形成的主動脈夾層動脈瘤。
[0019] 圖2為造模組小鼠胸主動脈形成夾層的HE染色圖。
[0020] 圖3為造模組小鼠胸主動脈彈力纖維斷裂的彈力纖維染色圖。
【具體實施方式】
[0021] 下面結合【具體實施方式】對本發明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發明，而不是為了限制本發明的范圍。
[0022] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。
[0023] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0024] β -氨基丙腈（β-Alaninenitri le，BAPN)為 Sigma Aldrich 公司的產品，目錄 號為A3134。
[0025] 下述實施例中的C57BL/6小鼠為南京大學模式動物研宄所的產品，產品目錄號為 J000664。
[0026] 實施例1、小鼠主動脈夾層動脈瘤模型的建立
[0027] 本實施例采用飲水法構建小鼠主動脈夾層動脈瘤模型，具體方法如下：
[0028] 1、在動物房潔凈操作臺內，用電子天平稱取〇.6g0-氨基丙腈（BAPN)，溶于IOOmL 水中，顛倒震蕩混勻，至BAPN充分溶解，配置成BAPN的濃度為6mg/mL的BAPN水溶液，將該 BAPN水溶液作為造模組的小鼠飲用水，將其稱為造模組飲用水1。造模組飲用水1在配制 后3天內給造模組小鼠飲用，3天后重新配置造模組飲用水1。
[0029] 2、取3周齡SPF級雄性C57BL/6小鼠14只，隨機分為兩組，對照組4只，造模組10 只。將步驟1的造模組飲用水1按照Ig β -氨基丙腈/kg體重/天的給藥劑量給造模組小 鼠給藥14天；對照組小鼠給予等體積的水，水在3天內給對照組小鼠飲用，3天后重新給對 照組小鼠換水。
[0030] 3、在動物房潔凈操作臺內，用電子天平稱取0. 8g β -氨基丙腈（BAPN)，溶于IOOmL 水中，顛倒震蕩混勻，至BAPN充分溶解，配置成BAPN的濃度為8mg/mL的BAPN水溶液，將該 BAPN水溶液作為造模組的小鼠飲用水，將其稱為造模組飲用水2。造模組飲用水2在配制 后3天