含有透明質酸的陰道潤滑劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及身體潤滑劑，而尤其是涉及基于天然粘彈性生物聚合物，透明質酸 (HA)的陰道潤滑劑。這種陰道潤滑劑一般包含具有指定分子量分布的HA。這種HA有利地 是由微生物枯草桿菌生產。
【背景技術】
[0002] 透明質酸（也稱為玻尿酸或透明質酸鈉）縮寫為HA，是一種非硫酸化的糖胺聚糖， 廣泛地分布于結締組織、上皮組織和神經組織中。透明質酸是胞外基質的主要組分之一，而 顯著地有助于細胞增殖和遷移。HA也可以參與一些惡性腫瘤的發展。平均70kg的人在其 體內大致含有15g的HA，其中每天三分之一發生降解和合成。
[0003] 關節潤滑劑
[0004] HA是滑液的主要組分，而據發現HA是提高滑液的粘度。連同滑液一起，HA是滑液 主要潤滑組分之一。HA是關節軟骨的一種重要組分，其中，其涂覆每一細胞（軟骨細胞）。 當在連接蛋白存在下聚集蛋白聚糖單體結合至HA時，就會形成巨大的高度帶負電的聚集 體。這些聚集體吸收水分并負責軟骨的彈性（其耐壓縮性）。在軟骨中HA的分子量（尺 寸）隨著年齡增長而降低，然而，在軟骨中HA的含量卻隨著年齡增加而增加。
[0005] 皮膚組織修復的生物基質組分
[0006] HA是皮膚的主要組分，在皮膚中HA參與組織修復。當皮膚過度暴露于UVB射線 時，HA在皮膚中起到自由基清除劑作用，以吸收自由基。皮膚紅腫（曬傷）而在真皮中的 細胞就會停止生產正常量的HA。其降解速率也發生增加。暴露于UV之后，HA降解產物也 會在皮膚中累積。
[0007] 當HA在胞外基質中充足之時，但是HA也有助于組織流體動力學，細胞的遷移和增 殖，并參與許多細胞表面受體的相互作用，值得注意的是，這些包含了其主要的受體，⑶44。 CD44自身的上調，廣泛地作為淋巴細胞中細胞活化的標記而被接受。HA對腫瘤生長的貢獻 可以是由于其與CD44的相互作用。CD44參與了腫瘤細胞所需的細胞粘附作用。盡管HA結 合至CD44,但是有證據表明，HA降解產物通過Toll樣受體2 (TLR2)，TLR4或TLR2和TLR4 二者在巨噬細胞和樹突細胞中轉換器發炎信號。TLR和HA在先天免疫中都起到了作用。
[0008] HA的結構和合成
[0009] HA的結構已經被充分表征。HA由D-葡糖醛酸和D-N-乙酰葡糖胺的二糖重復單 元構成，經由交替的β_1，4和β-1，3葡糖苷鍵連接在一起。HA在長度上典型地具有高達 25, 000個二糖單元。HA分子量能夠在體內處于5, 000至20, 000, 000的范圍。在人體滑液 中的平均分子量為3至4百萬，而由人體臍帶純化的HA典型地為3, 140, OOODa。
[0010] HA通過一類稱之為HA合成酶的整聯膜蛋白合成，其中脊椎動物具有三類：HAS1， HAS2和HAS3。隨著HA延長通過細胞膜進入胞外域，這些酶通過重復地將葡糖醛酸和N-乙 酰葡糖胺加到初生多糖而增長HA。商業上，HA能夠產自動物源，例如，來自公雞雞冠，臍帶 以及來自關節軟骨。可替代地，HA可以通過發酵獲得。HA的平均分子量根據其所獲得的來 源而不同。一般而言，HA的分子量為60, OOO至14, 000, 000。
[0011] 商購可獲得的HA -般產自動物源或來自細菌源。一般而言，HA通過發酵工藝方 法而獲自細菌源。發酵工藝方法涉及許多步驟，包括HA合成，分離和純化。HA純度取決于 其獲得來源，具體而言，取決于所使用的細菌以及工藝方法技術。HA的純度對其穩定性具有 顯著的影響。
[0012] HA的生物相容性和醫療應用
[0013] HA是無毒的，非免疫源性的和可生物降解的。HA通過一類稱之為透明質酸酶的酶 進行降解。在人體內，存在至少7種類型的類透明質酸酶的酶，其中幾種是腫瘤抑制劑。HA 降解產物，寡糖和分子量非常低的HA表現出促血管新生性能。另外，近來的研究已經證明， HA碎片，而不是高分子量HA組分，能夠誘導組織受損中和皮膚移植排異中巨噬細胞和樹突 細胞中的發炎響應。
[0014] 第一 HA生物醫藥產品，喜朗（Healon)，在20世紀70年代和20世紀80年代中開 發出來而批準用于眼科手術（即，角膜移植，白內障手術，青光眼手術和手術修復視網膜脫 落）。其它生物醫療公司也生產了各種牌子的眼科手術HA。
[0015] HA也用于治療膝蓋的骨性關節炎。這種治療，稱之為關節上腔粘彈補充療法，是按 照向膝關節注射一定療程而進行實施的，而據信能夠補充關節流體的粘度，由此潤滑關節， 緩沖關節并產生鎮痛效應。也有人提出，HA對軟骨細胞具有積極的生物化學效應。分子量 在750, 000至2百萬范圍內變化，而在一些制劑中HA是高度交聯的。然而，一些安慰劑對 照研究對HA注射產生了質疑，而HA主要推薦用作手術的無奈之選。HA 口服用途最近也被 提出，但是效能仍待證實。一些初步的臨床研究表明，口服給藥HA對骨關節炎具有積極效 應。
[0016] 由于其高度的生物相容性和其在組織胞外基質中的共存，HA正在組織工程研究中 作為生物材料支架而獲得知名度。
[0017] 在一些癌癥中，HA水平與惡性和差預后良好相關。HA因此經常用作前列腺和乳癌 的腫瘤標記。其也可以用于監控這些疾病的發展。
[0018] HA也可以用于手術后誘導組織愈合，尤其更適合于白內障手術后。傷愈的當前模 型認為，HA更大的聚合物看起來是在愈合的早期階段物理地為調節免疫響應的白血細胞制 造空間。
[0019] 個人潤滑劑
[0020] 天然酸性潤滑流體通常存在于陰道中，而在性欲期間，生產的流體量就會增加。產 生足夠的陰道潤滑作用的功能或許會受到損害，導致由于包括更年期期間或在卵巢手術摘 除之后和放射療法之后的雌性激素水平降低的諸多問題而使陰道組織干澀和發炎。這或許 會在性交期間產生疼痛和/或性交期間出血。口服避孕藥和某些藥物療法如抗組胺劑，抗 抑郁劑，血壓和心臟藥物也能夠有助于陰道干燥。另外，心理狀態包括壓抑，疲憊和焦慮，也 可以妨礙天然潤滑劑的產生。激素和心理因素的組合作用在分娩之后尤其是如果在母乳喂 養之后會導致暫時性的干燥。對于那些在IVF治療受孕之下的夫婦的壓力是另一個具體的 實例。
[0021] 常見的個人潤滑劑如硅樹脂和那些以商標Marks K-Y Jelly? and Vaseline?偉肖售 的那些，主要是基于合成物質如硅樹脂，石油。含有甘油的商業可獲得的潤滑劑是殺精的而 妨礙精子運動。甚至低濃度成分如甘油，都與這種殺精效應有關。因此，這種商業可獲得的 陰道潤滑劑并不是推薦用于尋求懷孕的婦女。
[0022] 含有HA作為潤滑組分的個人潤滑劑已知用于治療和緩解陰道干燥。
[0023] HA據發現適用于IVF治療。HA是哺乳動物，卵泡，輸卵管和子宮流體的正常組分 (Lee and Ax 1984, Suchanek et al 1994, Rodriguez-Martinez et al 1998)。在這些流體 中透明質酸的生理學濃度，例如，為〇. 04至I. 83mg/mL，占所有糖胺聚糖的16至39% (Kano et al 1998)，這由此提供了輸卵管和子宮內高度粘性的環境。在體內，透明質酸支持排卵 并輔助受孕過程期間的精子選擇，是已知的。
[0024] 商業上可獲得的HA是天然的可生物降解聚合物。在極端條件如高溫，高pH或低 pH(堿性和酸性條件）下，或在自由基或自由基前體存在下，是尤其不