使用白細胞介素-2藥劑的方法與流程

背景技術：

1、白細胞介素-2(il-2)是調節免疫系統活性的細胞因子。其由如t細胞、天然殺傷(nk)細胞、樹突狀細胞和巨噬細胞等白細胞產生以響應抗原性或促有絲分裂刺激。il-2對于t細胞增殖、b細胞刺激以及與免疫和耐受性相關的其它活性是重要的。其是身體的適應性免疫應答的一部分，并且在外源性抗原與宿主抗原之間進行區分。il-2通過與il-2受體結合來介導其效應，這繼而激活下游信號傳導事件。

2、人il-2是經fda批準的用于治療如轉移性腎癌和黑色素瘤等疾病的藥物。由于與il-2療法相關的嚴重毒性，有時限制在合格患者中使用il-2，并且實際上只有一小部分合格患者將接受療法。與il-2療法相關的毒性可以包含嚴重發熱、惡心、嘔吐、血管滲漏和嚴重低血壓。然而，盡管有這些毒性，但il-2通常對其批準的適應癥是有效的。

3、對于患有適合于用il-2治療的各種疾病和病狀的患者，對表現出足以開發安全和有效的治療劑的特征的新型基于il-2的藥劑的需求持續未被滿足。

技術實現思路

1、一方面，本公開提供了一種治療移植物排斥或其癥狀的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，由此治療所述移植物排斥或其所述癥狀。

2、在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。

3、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

4、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

5、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

6、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

7、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

8、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素(rapamycin)。

9、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

10、另一方面，本公開提供了一種預防移植物排斥或其癥狀的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，由此預防所述移植物排斥或其所述癥狀。

11、在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。

12、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

13、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

14、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

15、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

16、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

17、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素。

18、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

19、又一方面，本公開提供了一種調節(例如，增加或誘導)對移植物的免疫抑制的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，由此調節(例如，增加或誘導)對移植物的免疫抑制。

20、在一實施例中，在向所述受試者施用所述il-2藥劑時，所述受試者已接受、正在接受或將接受移植物。在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。

21、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

22、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

23、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

24、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

25、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

26、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素。

27、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

28、在仍另一方面，本公開提供了一種在移植之前調節受試者的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，由此在移植之前調節所述受試者。

29、在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。

30、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

31、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

32、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

33、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

34、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

35、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素。

36、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

37、另一方面，本公開提供了一種選擇性地增加treg的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其中所述受試者已接受、正在接受或將接受移植物，由此選擇性地增加treg。

38、在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。

39、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

40、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

41、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

42、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

43、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

44、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素。

45、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

46、又一方面，本公開提供了一種治療心臟病或其癥狀的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效量的本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白；以及向所述受試者提供心臟移植物，由此治療所述心臟病或其所述癥狀。

47、在一實施例中，在施用所述il-2融合蛋白之前、同時或之后，向所述受試者提供所述心臟移植物。

48、在一實施例中，與施用所述il-2融合蛋白之前受試者中的treg的水平相比，所述受試者中的所述treg的水平增加了約2、3、4、5、6、7、8、9、10倍或更多倍。在一實施例中，所述treg的水平是在來自所述受試者的樣品中確定的。

49、在一實施例中，所述il-2融合蛋白包括本文所述的il-2變體。

50、在一實施例中，所述il-2變體包括：(i)(a)氨基酸取代h16l或h16n，(b)氨基酸取代i92s，或(c)(a)和(b)兩者；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，對應于人il-2(seqid?no:1031)。在一實施例中，所述il-2變體進一步包括氨基酸取代t3a。在一實施例中，所述il-2變體包括seq?id?no:4、5、11、1000、1001或1002中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4或5個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

51、在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括fc區。在一實施例中，所述fc區包括igg1同種異型m3的fc區，所述igg1同種異型m3的fc區包括根據eu編號的n297g取代。在一實施例中，所述fc區包括seq?id?no:1003的氨基酸序列，或與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一實施例中，所述fc區與所述il-2變體的c末端融合。在一實施例中，所述il-2融合蛋白進一步包括接頭。在一實施例中，所述接頭包括(g4s)4(seq?id?no:48)。在一實施例中，所述融合蛋白形成二聚體。

52、在一實施例中，所述融合蛋白包括seq?id?no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任一者的氨基酸序列，與其至少95％相同或與其相差不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。

53、在一實施例中，所述方法進一步包括向所述受試者施用免疫抑制劑。在一實施例中，所述免疫抑制劑包括雷帕霉素。

54、在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

55、另一方面，本公開提供了一種組合，其包括本文所述的il-2藥劑，例如本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，以及移植物。在一實施例中，所述移植物是心臟移植物。在一實施例中，所述移植物進一步包括一種或多種另外的免疫抑制劑，例如，雷帕霉素。

56、在一實施例中，所述組合用于治療或預防受試者的移植物排斥。在一實施例中，所述移植物排斥是心臟移植物排斥。在一實施例中，在移植之前、期間和/或之后，向所述受試者施用所述il-2藥劑。

57、在一實施例中，所述組合用于調節(例如，增加或誘導)受試者的免疫抑制。在一實施例中，所述組合用于選擇性地增加受試者中的t調控細胞。在一實施例中，所述受試者是人或非人靈長類動物。在一實施例中，所述受試者是小鼠。

58、一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其在治療受試者的移植物排斥或其癥狀的方法中使用，如本文所述。

59、另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其在預防受試者的移植物排斥或其癥狀的方法中使用，如本文所述。

60、又一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其在調節(例如，增加或誘導)受試者的對移植物的免疫抑制的方法中使用，如本文所述。

61、仍另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其在移植之前調節受試者的方法中使用，如本文所述。

62、另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其在選擇性地增加受試者中的treg的方法中使用，如本文所述，例如，其中所述受試者已接受、正在接受或將接受移植物。

63、又一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白，其與心臟移植物組合在治療受試者的心臟病或其癥狀的方法中使用，如本文所述。

64、一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于制備用于治療受試者的移植物排斥或其癥狀的藥物，如本文所述。

65、另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于制備用于預防受試者的移植物排斥或其癥狀的藥物，如本文所述。

66、又一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于制備用于調節(例如，增加或誘導)受試者的對移植物的免疫抑制的藥物，如本文所述。

67、仍另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于制備用于在移植之前調節受試者的藥物，如本文所述。

68、另一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如，本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于制備用于選擇性地增加受試者中的treg的藥物，如本文所述，例如，其中所述受試者已接受、正在接受或將接受移植物。

69、又一方面，本公開提供了一種本文所述的il-2藥劑，例如本文所述的il-2變體或本文所述的il-2融合蛋白的用途，其用于與心臟移植物組合制備用于治療受試者的心臟病或其癥狀的藥物，如本文所述。