一種聚乙二醇修飾的白藜蘆醇磁性納米脂質體及其制備方法與流程

本發明涉及脂質體藥物技術領域，具體涉及一種聚乙二醇修飾的白藜蘆醇磁性納米脂質體及其制備方法。

背景技術：

白藜蘆醇是一種抗癌藥物，但是其極易發生光化學反應而轉化為弱活性的順勢結構并且其水溶性極差。而采用脂質體包裹白藜蘆醇可有效解決這一問題。但是普通的脂質體不穩定，容易相互融合形成大粒徑且不易被吸收的脂質體，引起藥物滲漏。現有技術通常采用多糖或聚乙二醇等修飾脂質體，但穩定性得到改善的同時，藥物包封率和脂質體粒徑也受到了影響。因此，獲得高包封率、粒徑合適且穩定性良好的白藜蘆醇脂質體是目前仍需解決的重要問題。另外，如何保證白藜蘆醇脂質體對腫瘤細胞的靶向性，降低對正常細胞的毒性也是該藥物研究的一個關鍵問題。

技術實現要素：

為了實現白藜蘆醇藥物的靶向輸入，本發明的目的是提供一種具有磁性的聚乙二醇修飾的白藜蘆醇藥物脂質體及其制備方法。本發明使用聚乙二醇修飾脂質體，減低脂質體在體內發生融合和聚集的概率，延長藥物循環時間，包裹四氧化三鐵后具有磁性，可由外加磁場控制實現藥物的靶向輸送。

為了實現上述目的，本發明所采用的材料配方是：

卵磷脂、磷脂酰膽堿、膽固醇、聚乙二醇、白藜蘆醇的質量比為2.5:5.5:2.1:0.32:1.8；磁性包裹物四氧化三鐵的納米粒徑為10-13nm。

以及一種聚乙二醇修飾的白藜蘆醇磁性納米脂質體的制備方法，聚乙二醇修飾白藜蘆醇脂質體，并包裹四氧化三鐵磁性納米顆粒，具體步驟如下：

1）將配方比例的卵磷脂、磷脂酰膽堿、膽固醇、白藜蘆醇混合溶解在足量的乙醇溶劑中；

2）將步驟1）得到的混合溶液在0.01~0.1mpa真空度下恒溫減壓蒸餾，去除溶劑；

3）待溶劑全部揮發，將步驟2）得到的混合物于20~35℃溫度條件下0.01~0.1mpa真空干燥3~5h；

4）用溶有聚乙二醇的足量的10mm、ph7.4的pbs緩沖液分散步驟3）得到的混合物，并加入含有3.4-6.5g四氧化三鐵納米顆粒懸液，40~55℃條件下水化2~4小時，得到懸浮液；

5）將步驟4）得到的懸浮液在冰浴條件下，超聲震蕩10~30min，即得聚乙二醇修飾的白藜蘆醇磁性納米脂質體。

所述步驟2）中的減壓蒸餾采用旋轉蒸發儀，在45℃恒溫下蒸發溶劑。

所述步驟4）中，采用旋轉或者攪拌的方式加速混合物在pbs緩沖溶液中的水化過程。

所述步驟5）的超聲震蕩采用超聲細胞粉碎儀，以每隔5s工作3s的方式，在功率780w的條件下進行分散。

與現有技術相對比，本發明取得的有益效果是：

1、本發明中的白藜蘆醇脂質體不僅穩定性良好，包封率高且粒徑均勻，具有磁性靶向性。

2、本發明中的有機溶劑為乙醇，無毒副作用。

3、本發明中的制備方法簡易。

附圖說明

圖1為實施例1得到的產品的粒徑分布圖；

圖2為實施例2得到的產品的粒徑分布圖；

圖3為實施例3得到的產品的粒徑分布圖。

具體實施方式

下面通過具體實施實例對本發明的內容作進一步詳細說明，但這些實施例并不限制本發明的保護范圍。

實施例1

分別稱取卵磷脂2.5g、磷脂酰膽堿5.5g、膽固醇2.1g、白藜蘆醇1.8g，使其質量比為2.5:5.5:2.1:1.8。將脂類和白藜蘆醇混合溶解在足量的乙醇溶劑中；將材料全部倒入200ml燒瓶中，充分混合。將充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋轉蒸發儀在45℃恒溫下蒸發溶劑，不斷提升真空度，至溶劑揮發完全，真空度達0.08mpa以上。將附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，20℃、0.01mpa條件下干燥3h。將溶有0.32g聚乙二醇的足量的10mm、ph7.4的pbs緩沖液分散步驟3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有3.4g四氧化三鐵納米顆粒懸液，在40℃條件下旋轉水化2小時，得到懸浮液，再用超聲細胞粉碎儀，在0℃冰浴條件下，探頭超聲10min，工作3s，間歇5s，功率780w。超聲后得粒徑在175nm左右的單室脂質體囊泡，白藜蘆醇包封率為91.8%，冷藏放置一周，粒徑變化較小。

實施例2

分別稱取卵磷脂2.5g、磷脂酰膽堿5.5g、膽固醇2.1g、聚乙二醇0.32g、白藜蘆醇1.8g，使其質量比為2.5:5.5:2.1:0.32:1.8。將脂類和白藜蘆醇混合溶解在足量的乙醇溶劑中；將材料全部倒入200ml燒瓶中，充分混合。將充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋轉蒸發儀在45℃恒溫下蒸發溶劑，不斷提升真空度，至溶劑揮發完全，真空度達0.08mpa以上。將附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，30℃、0.08mpa條件下干燥4h。將溶有聚乙二醇的足量的10mm、ph7.4的pbs緩沖液分散步驟3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有5.8g四氧化三鐵納米顆粒懸液，在45℃條件下旋轉水化3小時，得到懸浮液，再用超聲細胞粉碎儀，在0℃冰浴條件下，探頭超聲20min，工作3s，間歇5s，功率780w。超聲后得粒徑在160-175nm左右的單室脂質體囊泡，白藜蘆醇包封率為93.2%，冷藏放置一周，粒徑變化較小。

實施例3

分別稱取卵磷脂2.5g、磷脂酰膽堿5.5g、膽固醇2.1g、聚乙二醇0.32g、白藜蘆醇1.8g，使其質量比為2.5:5.5:2.1:0.32:1.8。將脂類和白藜蘆醇混合溶解在足量的乙醇溶劑中；將材料全部倒入200ml燒瓶中，充分混合。將充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋轉蒸發儀在45℃恒溫下蒸發溶劑，不斷提升真空度，至溶劑揮發完全，真空度達0.08mpa以上。將附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，35℃、0.08mpa條件下干燥5h。將溶有聚乙二醇的足量的10mm、ph7.4的pbs緩沖液分散步驟3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有6.5g四氧化三鐵納米顆粒懸液，在55℃條件下旋轉水化4小時，得到懸浮液，再用超聲細胞粉碎儀，在0℃冰浴條件下，探頭超聲30min，工作3s，間歇5s，功率780w。超聲后得粒徑在170-175nm左右的單室脂質體囊泡，白藜蘆醇包封率為90.6%，冷藏放置一周，粒徑變化較小。

實施例4

脂質體的納米粒徑評價。

采用動態光散射納米粒度儀檢測實施例1~3得到的白藜蘆醇磁性納米脂質體。具體步驟如下：制得脂質體5份，取相等適量，分別用pbs緩沖液（ph=7.4）稀釋5倍后，利用動態光散射納米粒度儀進行檢測并記錄。

檢測結果如圖1~3所示，其中，圖1為實施例1得到的產品的粒徑分布圖，圖2為實施例2得到的產品的粒徑分布圖，圖3為實施例3得到的產品的粒徑分布圖。

檢測結果顯示，本發明制備的藥物脂質體粒徑分布均勻，具有較好的分散性和均一性。

實施例5

藥物包封率檢測。

采用高效液相色譜法檢測實施例1-3得到的白藜蘆醇磁性納米脂質體，檢測結果顯示，實施例1、實施例2、實施例3中，白藜蘆醇包封率分別為91.8%、93.2%、90.65%，藥物包封效果良好。