本發(fā)明涉及一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑及其應(yīng)用。屬于獸藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著社會經(jīng)濟的迅速發(fā)展，人民生活水平不斷提高，寵物們的生活飲食條件也越來越優(yōu)越。寵物犬、貓的肥胖問題日趨嚴(yán)重，已經(jīng)成為威脅寵物健康的頭號難題，日益受到廣泛關(guān)注。
首先，超額的脂肪堆積難免會影響寵物的外觀和動物福利，降低其生活質(zhì)量。更嚴(yán)重的是，肥胖問題本身與許多疾病的發(fā)生有著密切的關(guān)系，包括代謝異常疾病如高脂血癥、胰島素抵抗、脂肪肝和葡萄糖耐受等，內(nèi)分泌疾病如腎上腺皮質(zhì)機制亢進、甲狀腺功能減退和糖尿病等，骨科疾病如骨關(guān)節(jié)炎和椎間盤疾病等，心肺疾病如氣管萎陷、喉頭麻痹和呼吸系統(tǒng)損傷等，還有一系列泌尿生殖系統(tǒng)疾病、皮膚科疾病和形成腫瘤等。這些潛在的風(fēng)險對寵物犬、貓的日常活動、健康狀況以及壽命周期造成不容忽視的重大危害，使它們身心遭受巨大的痛苦。
雖然肥胖問題起初是寵物犬、貓飼喂過量或缺乏運動導(dǎo)致多余能量蓄積的結(jié)果，但肥胖本身也是一種疾病，由于脂肪細(xì)胞本身及其產(chǎn)生激素的影響，肥胖寵物的體重管理（減肥）和疾病控制仍然具有非常大的挑戰(zhàn)性。因此，人們對寵物犬、貓肥胖問題與肥胖管理（減肥）的認(rèn)識和理念應(yīng)不斷深入和更新，輕微的肥胖問題或許可以從避免飼喂過量和增加運動兩方面得到改善，但嚴(yán)重的肥胖問題必須采用科學(xué)膳食與藥物管理（減肥）相結(jié)合進行干預(yù)，用藥物治療方法抑制寵物的食欲或抑制營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量是更加直接有效的手段。
本發(fā)明選用奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿為藥物組合物。
奧利司他（orlistat），由羅氏制藥公司研發(fā)脂肪酶抑制劑類減肥藥，商品名為賽尼可?；上個世紀(jì)九十年代末率先在歐美上市，2001年在中國上市，并于2005年被中國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)轉(zhuǎn)為非處方藥。奧利司他的分子式為c29h53no5，常溫下為白色或類白色粉未，是一種用于減肥的強效、專一、長效的胃腸道脂酶抑制劑，其通過與胃和小腸腔內(nèi)胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性絲氨酸部位形成共價鍵使酶失活。食物中的脂肪不能分解為被人體吸收的游離脂肪酸和單?；视?，從而減少脂肪的吸收和人體的熱量攝入，發(fā)揮減重作用。奧利司他減重的同時也可改善與肥胖相關(guān)的其他疾病，包括高膽固醇血癥、ⅱ型糖尿病、糖耐量減低、高胰島素血癥、高血壓并可減少臟器中的脂肪含量。
作為非中樞抑制性減肥藥，奧利司他無需通過全身吸收就能發(fā)揮藥效，口服后很少吸收，主要隨糞便以原形排泄。由于奧利司他主要作用于消化道，長期服用會出現(xiàn)胃腸道不良反應(yīng)，主要表現(xiàn)為腹部不適、腹痛、腹瀉、大便緊迫感、脂性糞便、軟便直腸痛，同時還會偶有瘙癢、皮疹、蕁麻疹，血管神經(jīng)性水腫等過敏反應(yīng)，伴有輕微的肝臟損害、胰腺損害以及結(jié)腸癌風(fēng)險。同時奧利司他減肥效果起效周期長，停藥后容易出現(xiàn)反彈的現(xiàn)象。鑒于奧利司他的諸多不良反應(yīng)，將其與其他適宜藥物進行聯(lián)合用藥或許可以達到增強療效和降低毒副作用的效果。關(guān)于采用奧利司他組合物聯(lián)合用藥的專利國內(nèi)也有報道。
肥胖常伴隨著一系列心腦血管疾病，其中較為顯著的是高脂血癥/高膽固醇血癥等系列問題。目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多種他汀類化合物是有效的羥甲基戊二酰輔酶a（hmg-coa）還原酶抑制劑。此類藥物通過競爭性抑制內(nèi)源性膽固醇合成限速酶(hmg-coa)還原酶，阻斷細(xì)胞內(nèi)羥甲戊酸代謝途徑，使細(xì)胞內(nèi)膽固醇合成減少，從而反饋性刺激細(xì)胞膜表面（主要為肝細(xì)胞）低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein，ldl）受體數(shù)量和活性增加、使血清膽固醇清除增加、水平降低。
迄今為止，可用于治療高脂血癥/高膽固醇血癥的人用上市他汀類藥物包括普伐他?。ㄆ绽?sup>?，百時美施貴寶）、辛伐他汀（舒降之?，默克）、洛伐他?。澜抵?sup>?，默克）、氟伐他汀（來適可?，諾瓦提斯）以及羅伐他?。啥?sup>?，阿斯利康）。
奧利司他和他汀類化合物的減肥/降脂機制不同，由吸收到排泄，相互協(xié)同、共同作用，可健康高效地降低寵物體重、減少寵物脂肪。
另外，本發(fā)明同時選用左旋肉堿為另一組合物成分。
左旋肉堿（l-carnitine）化學(xué)名為（r）-3-羥基-4-（三甲基銨）丁酸，是一種參與機體能量代謝的類氨基酸。左旋肉堿是脂肪代謝過程中的一種關(guān)鍵的物質(zhì)，它通過酰基化與長鏈脂肪酸結(jié)合成脂酰肉堿，進而將長鏈脂肪酸運輸進入線粒體基質(zhì)中進行β-氧化而向機體提供能量。大多數(shù)生物都具有合成左旋肉堿的能力，正常情況下，動物體內(nèi)的左旋肉堿含量處于一個動態(tài)平衡狀態(tài)，構(gòu)成動物體左旋肉堿代謝池。動物體左旋肉堿代謝池既可以由動物體自身合成的左旋肉堿供應(yīng)，還可以由攝入外源性的左旋肉堿供應(yīng)。左旋肉堿作為轉(zhuǎn)運脂肪酸的載體，服用左旋肉堿能夠在減少身體脂肪、降低體重，而不減少水分和肌肉。
在國外，左旋肉堿早已作為一種飼料添加劑廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)，目前國內(nèi)這方面的應(yīng)用也逐漸增多。對于肥胖寵物犬、貓的體重管理可以通過提高寵物機體組織中肉堿的含量促進線粒體內(nèi)的脂肪酸β-氧化，進而提高機體組織對脂肪酸的氧化利用。
專利cn105343072a涉及一種含有奧利司他或新利司他與鹽酸羅格列酮的藥物組合物。作為人用制劑，該藥物組合物在降低血糖、體重方面存在明顯的協(xié)同作用。
專利cn105343056a公開了一種奧利司他和洛爾類藥物活性成分的口服藥物組合物。作為人用制劑，該組合物用于治療或預(yù)防肥胖型高血壓時，具有顯著的協(xié)同作用，可降低肥胖患者體重，高血壓并發(fā)心血管疾病地風(fēng)險。
專利cn101795684a公開了一種他汀類化合物與抗肥胖藥的組合。作為人用制劑，可降低患者的血清甘油三酯和/或血清膽固醇水平。
專利cn105232554a涉及一種含有奧利司他或新利司他與阿昔莫司的藥物組合物。作為人用制劑，該藥物組合物在降低血清總膽固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇方面存在著明顯的協(xié)同性作用。
專利cn105233288a公開了一種奧利司他和普利類藥物的藥物組合物。作為人用制劑，其在治療和預(yù)防肥胖型高血壓時具有顯著的協(xié)同作用。
目前國內(nèi)外還未見奧利司他、他汀類化合物以及左旋肉堿三者作為組合物制劑用于治療肥胖癥寵物的報道與應(yīng)用。
為了豐富寵物臨床用藥，本發(fā)明首次發(fā)明并公開了一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑及其應(yīng)用。
本發(fā)明創(chuàng)造性地將奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿制備成藥物組合物。奧利司他通過與胃和小腸腔內(nèi)胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性絲氨酸部位形成共價鍵使酶失活；他汀類化合物作為hmg-coa還原酶抑制劑，可干擾膽固醇生物合成路徑中的一個中間體至另一個中間體的轉(zhuǎn)化，從而降低寵物血液脂肪。加之左旋肉堿作為轉(zhuǎn)運脂肪酸的載體，通過?；c長鏈脂肪酸結(jié)合成脂酰肉堿，進而將長鏈脂肪酸運輸進入線粒體基質(zhì)中進行β-氧化而消耗體內(nèi)脂肪。多種物質(zhì)通過不同的減肥降脂作用機制，協(xié)同增效。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
基于上述情況，本發(fā)明的目的是提供一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑及其應(yīng)用。
本發(fā)明所要解決的第一個技術(shù)問題是提供一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑。
本發(fā)明所要解決的第二個技術(shù)問題是提供一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑的給藥劑型。
本發(fā)明所要解決的第三個技術(shù)問題是一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑在寵物減肥中的應(yīng)用。
為解決上述第一個技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是。
本發(fā)明提供了一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑，它是由下列組分組成：奧利司他1-1,000份，他汀類化合物1-500份，左旋肉堿鹽酸鹽1-50,000份，牛肉香精或魚肉香精為矯味劑，加以其他必要輔料。
所述他汀類化合物可為普伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、阿伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀、西立伐他汀等，或為其鹽，或為其內(nèi)酯型。
為解決上述第二個技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是。
本發(fā)明提供了一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑，其給藥劑型可為普通片、分散片、緩釋片、膠囊、顆粒劑、散劑等固體制劑，軟膏劑、糊劑、凝膠劑等半固體制劑，糖漿劑、口服溶液劑等液體制劑中的一種或幾種組合。
為解決上述第三個技術(shù)問題，本發(fā)明對所述的一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑進行了犬的肥胖治療研究。實驗選用48只肥胖癥模型beagle犬，雌雄各半，體重20.8±0.54kg；隨機分為8組：第1組為單組分主藥奧利司他散劑組（orlistatpowders,op）；第2組為單組分主藥普伐他汀散劑組（pravastatinpowders,pp）；第3組為單組分主藥左旋肉堿散劑組（l-carnitinepowders,lp）；第4組為雙組分奧利司他和普伐他汀散劑組（orlistatandpravastatinpowders,opp）；第5組為雙組分奧利司他和左旋肉堿散劑組（orlistatandl-carnitinepowders,olp）；第6組為雙組分普伐他汀和左旋肉堿散劑組（pravastatinandl-carnitinepowders,plp）；第7組為復(fù)方奧利司他散劑組（compoundorlistatpowders,cop）；第8組為空白散劑對照組（blankpowders,bp）。實驗結(jié)果表明，奧利司他和/或普伐他汀和/或左旋肉堿對肥胖beagle犬有顯著的治療效果，包括體重的減輕、lee指數(shù)的降低、血糖降低、血脂降低等，其中復(fù)方奧利司他散劑組的療效最佳。
本發(fā)明制備的復(fù)方奧利司他組合物制劑可有效降低肥胖動物的體重、體重lee指數(shù)、血糖和血脂。給藥形式多樣，可滿足寵物用藥多種臨床需求。
本發(fā)明的優(yōu)越性在于。
1.在獸藥領(lǐng)域，首次提供了一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑。
2.在獸藥領(lǐng)域，首次提供了一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物的給藥劑型。
3.本發(fā)明首次將奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿組成復(fù)方，其減肥降脂原理不同，可實現(xiàn)一次給藥多重作用。
4.本發(fā)明首次將奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿組成復(fù)方奧利司他組合物制劑用于寵物減肥降脂，可顯著降低藥物的不良反應(yīng)。在奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿的聯(lián)合應(yīng)用中，其配伍減少了單獨的奧利司他、他汀類化合物或左旋肉堿的應(yīng)用劑量，可同時降低奧利司他的不良反應(yīng)和他汀類化合物的用藥風(fēng)險。
5.本發(fā)明可制備為不同給藥劑型，給藥方式和給藥劑量靈活多變，易于調(diào)整、方便操作。
6.本發(fā)明中述及的奧利司他復(fù)方組合物制劑的生產(chǎn)工藝簡便，生產(chǎn)流程易于自動化，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施方式
實施例1-10。
本發(fā)明一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑的處方（散劑，100g）為。
表1.實施例1-10處方。
制備方法包括以下步驟：將原藥粉末奧利司他和他汀類化合物、左旋肉堿鹽、牛肉香精或魚肉香精、乳糖置于烘箱中40℃干燥2h，取出，分別過120目篩。取適量乳糖置于研缽內(nèi)研磨使其內(nèi)壁飽和后傾出，將奧利司他和牛肉香精（或魚肉香精）置研缽中研合均勻，按等量遞加混合法逐漸加入普伐他汀鈉充分研磨，再等量加入左旋肉堿鹽酸鹽充分研合，接著按等量遞加混合法逐漸加入所需乳糖，研合均勻，最后以重量法將其分裝為單劑量散劑，包裝。
實施例11-20。
本發(fā)明一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑的單劑量處方（片劑）為。
表2.實施例11-20處方。
制備方法包括以下步驟：將原藥粉末奧利司他和他汀類化合物、左旋肉堿鹽、填充劑、潤滑劑硬脂酸鎂和助流劑微粉硅膠置于烘箱中40℃干燥2h，取出，分別過120目篩。取處方量的粉末充分混勻后，直接粉末壓片。
實施例21-30。
本發(fā)明一種用于寵物減肥降脂的復(fù)方奧利司他組合物制劑的處方（糖漿劑，100ml）為。
表3.實施例21-30處方。
制備方法包括以下步驟：常溫條件（25℃）下，將主藥奧利司他、他汀類化合物和左旋肉堿鹽、矯味劑牛肉香精/魚肉香精、防腐劑苯甲酸溶于一定量蒸餾水中；稱取處方量的蔗糖，在常溫攪拌下溶解于一定量蒸餾水中，濾過至凈。將兩部分溶液混合，常溫下攪拌均勻。
實施例31。
復(fù)方奧利司他組合物制劑的犬肥胖癥治療實驗。
1.beagle犬肥胖癥模型的構(gòu)建。
1.1.肥胖癥模型構(gòu)建方法。
選用60只成年beagle犬，體重量15±0.5kg，雌雄各半，采用分籠進行飼養(yǎng)，每籠1只,每日定時定量喂食,自由飲水。
將60只beagle犬隨機分為對照組（thecontrolgroup,cg）和模型組（modelofobesity,mo），其中對照組6只，模型組54只。對照組全程給予標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)飼料（15084kj/d：27%蛋白質(zhì)，38%碳水化合物，35%脂肪）。模型組全程給予高脂高熱量飼料（21369kj/d：20%蛋白質(zhì)，27%碳水化合物，53%脂肪）。實驗周期設(shè)置16周，分別于4、8周時檢測模型組和對照組beagle犬空腹血糖、血脂變化、體質(zhì)量（kg）和鼻肛體長（cm），并計算lee指數(shù)。
lee(肥胖評定指數(shù))=
模型組于第8周靜脈推注小劑量鏈脲佐菌素（stz），劑量為25mg/kg（65.0g/l鏈脲佐菌素-檸檬酸溶液），分別于stz注射后1(stz-1wk)、4(stz-4wk)、8周(stz-8wk)檢測模型組和對照組beagle犬空腹血糖、血脂變化、體質(zhì)量（kg）和鼻肛體長（cm），并計算lee指數(shù)變化，以考察模型組beagle犬的肥胖程度。
1.2.結(jié)果與討論。
1.2.1體重量變化。
兩組beagle犬體重量測定結(jié)果如表4所示，隨著飼養(yǎng)周數(shù)的延長，模型組的體質(zhì)量在實驗4周后已高于對照組(p<0.05)，這種差異隨著時間延長逐漸加大(p<0.01)。模型組在8周的高脂熱量飲食后，平均體質(zhì)量是18.2±0.91kg，較對照組體質(zhì)量(15.6±0.93kg)高16.67%.模型組在stz注射后第4周和第8周體質(zhì)量呈加快增長趨勢，至stz注射后8周較對照組（16.4±0.78kg）體質(zhì)量高26.83%,表明模型組beagle犬已發(fā)生明顯肥胖癥。
表4.兩組beagle犬體質(zhì)量變化（mean±sd，kg）。
1.2.2.lee指數(shù)變化。
兩組beagle犬lee指數(shù)測定結(jié)果如表5所示，隨著飼養(yǎng)周數(shù)的延長，模型組的lee指數(shù)在實驗4周后已高于對照組（p<0.05），這種差異隨著時間延長逐漸加大，stz注射后1周模型組的lee指數(shù)與對照組對比顯著性增高（p<0.01）。lee指數(shù)是通常采用的實驗動物肥胖評定標(biāo)準(zhǔn)，lee指數(shù)與體內(nèi)脂肪呈顯著正相關(guān)，表明高脂高熱量飲食后模型組已發(fā)生肥胖。
表5.兩組beagle犬lee指數(shù)變化（mean±sd）。
1.2.3.血糖水平變化。
兩組beagle犬空腹血糖測定結(jié)果如表6所示，隨著飼養(yǎng)周數(shù)的延長，高脂高熱量飲食使模型組beagle犬空腹血糖逐漸升高，但兩組beagle犬stz注射前空腹血糖比較差異沒有顯著意義。stz注射后1周測定兩組beagle犬空腹血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），至stz注射后4周兩組動物空腹血糖有顯著差異（p<0.01）。模型組beagle犬空腹血糖由stz注射后逐漸達到糖尿病標(biāo)準(zhǔn)。
表6.兩組beagle犬空腹血糖變化（mean±sd,mg/dl）。
1.2.4.血脂水平變化。
兩組beagle犬血脂變化測定結(jié)果如表7所示，通過檢測血清總膽固醇（totalcholesterol,tc）、低密度脂蛋白（low-densitylipoprotein,ldl）、高密度脂蛋白（high-densitylipoprotein,hdl）和三酰甘油（triglyceride,tg）這4個參數(shù)的水平監(jiān)測血脂變化情況。至實驗結(jié)束，模型組高密度脂蛋白與對照組相比有輕微的升高，但差異沒有顯著意義。模型組的血清總膽固醇、低密度脂蛋白、三酰甘油水平明顯高于對照組，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.01），提示模型組已產(chǎn)生部分代謝綜合征特征。
表7.兩組beagle犬血清tc、ldl、hdl和tg的變化情況（mean±sd,mmol/l）。
1.3.小結(jié)。
以上結(jié)果表明，模型組beagle犬體質(zhì)量大于對照組體質(zhì)量的20%，lee指數(shù)較對照組顯著增高，空腹血糖>126mg/dl，血脂中的血清總膽固醇、低密度脂蛋白、三酰甘油水平明顯高于對照組并存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異，表明beagle犬肥胖癥模型建立成功，能作為考察復(fù)方奧利司他散劑減肥效果的動物模型。
2.復(fù)方奧利司他散劑治療肥胖癥beagle犬的給藥方案及其療效評價。
2.1.藥物、實驗動物分組和給藥方案。
本研究所用復(fù)方奧利司他組合物制劑為實施例1制得；另用同樣的方法，以乳糖代替處方中的普伐他汀鈉或/和奧利司他或/和左旋肉堿鹽酸鹽，制備單組分奧利司他、單組份普伐他汀鈉、單組分左旋肉堿、雙組分奧利司他和普伐他汀、雙組分奧利司他和左旋肉堿、雙組分普伐他汀和左旋肉堿散劑或空白散劑。
選取成功構(gòu)建肥胖癥模型的beagle犬48只，雌雄各半，體質(zhì)量為19.9±0.47kg，隨機分為8組；第1組為單組分奧利司他散劑組（orlistatpowders,op），第2組為單組分普伐他汀散劑組（pravastatinpowders,pp），第3組為單組分主藥左旋肉堿散劑組（l-carnitinepowders,lp）；第4組為雙組分奧利司他和普伐他汀散劑組（orlistatandpravastatinpowders,opp）；第5組為雙組分奧利司他和左旋肉堿散劑組（orlistatandl-carnitinepowders,olp）；第6組為雙組分普伐他汀和左旋肉堿散劑組（pravastatinandl-carnitinepowders,plp）；第7組為復(fù)方奧利司他散劑組（compoundorlistatpowders,cop）；第8組為空白散劑對照組（blankpowders,bp）。將各組散劑按寵物每5kg（含以下）體重，每餐1g散劑拌入高脂高熱量飼料中喂養(yǎng)beagle犬，每餐一次。
實驗周期設(shè)置為8周，每2周檢測beagle犬空腹血糖、血脂變化、體質(zhì)量（kg）和鼻肛體長（cm），并計算lee指數(shù)。
2.2.結(jié)果與討論。
2.2.1.肥胖犬的體重量變化。
體重量的變化是肥胖癥程度的直觀指標(biāo)，8組beagle犬體重測定結(jié)果如表8所示，第1-7組beagle犬的體重量都有所降低，而第8組beagle犬的體質(zhì)量持續(xù)升高。其中，pp組能一定程度改善肥胖癥beagle犬的體重量，其值第8周時與bp組比較有明顯的下降(p<0.005)；op和lp組減重效果略強于pp組，該組beagle犬的體重量第6周時與bp組比較有所下降（p<0.05），第8周時這種差異進一步增大（p<0.001）；opp,olp和plp組相比較1-3單組分組，第6周和第8周時beagle犬的體重量下降更明顯，第8周時與bp組比較均有明顯差異（p<0.001）；cop組的beagle犬體重量在給藥4周后已低于bp組（p<0.05），這種差異隨著時間延長逐漸加大（p<0.001），在第8周時平均體質(zhì)量是16.32±0.53kg，較bp組體質(zhì)量（21.16±0.59kg）低22.87%（p<0.001），而且相比較1-6治療組，在第6周和第8周時該組的體重量顯著地降低得更多（p<0.001）。表明八組中，復(fù)方奧利司他散劑用于肥胖癥beagle犬的減重效果最顯著（p<0.001）。
表8.8組beagle犬體重質(zhì)量變化（mean±sd,kg）。
2.2.2.肥胖犬lee指數(shù)變化。
lee指數(shù)與體內(nèi)脂肪呈顯著正相關(guān)，八組beagle犬lee指數(shù)測定結(jié)果如表9所示，第1-7組的lee指數(shù)均有所下降，而第8組的指標(biāo)持續(xù)上升。給藥治療后的第8周，pp組的lee指數(shù)與bp組比較明顯下降（p<0.01）。在第6周時，op組和lp組的lee指數(shù)與bp組比較出現(xiàn)降低（p<0.05），在第8周時，降低的水平更加明顯（op:p<0.001;lp:p<0.005）。在第6周和第8周時，opp,olp和plp組相比較1-3單組分組，lee指數(shù)下降更明顯，且與bp組比較均有明顯差異（p<0.001）。cop組beagle犬的lee指數(shù)在給藥4周后已明顯低于空白散劑對照組（bps）（p<0.01），第6、8周時lee指數(shù)降低的水平更加顯著（p<0.001）；而且相比較1-6治療組，在第8周時該組的lee指數(shù)顯著地降低得更多（p<0.001）。lee指數(shù)是廣泛采用的評判實驗動物肥胖的標(biāo)準(zhǔn)，這8個組別中cop組最能快速顯著地改善beagle犬的肥胖水平（p<0.001）。
表9.八組beagle犬lee指數(shù)變化（mean±sd）。
2.2.3.肥胖犬的糖代謝水平變化。
8組beagle犬空腹血糖測定結(jié)果如表10所示，第1-7組beagle犬空腹血糖都呈下降的變化趨勢，而第8組beagle犬則持續(xù)上升。在第6周時pp組beagle犬的空腹血糖有所下降（p<0.05），第8周時下降水平更明顯（p<0.001）。lp組能明顯降低肥胖癥beagle犬的空腹血糖，其值從第6周開始與bp組形成顯著性差異(p<0.005)，并隨治療時間增長差異越明顯。op組降低空腹血糖強度大于lp組，該組beagle犬的空腹血糖值始終低于lp組。在第6周和第8周時，opp,olp和plp組相比較1-3單組分組，beagle犬的空腹血糖下降更明顯，且與bp組比較均有明顯差異（p<0.001），其中olp組的降血糖效果最明顯。cop組beagle犬的空腹血糖在給藥2周后已明顯低于bp組，兩組間的差異非常顯著(p<0.001)，并隨著治療期的延長空腹血糖水平得到了更好的控制，在第8周時空腹血糖水平是96.8±7.4mg/dl，空腹血糖水平基本恢復(fù)到正常范圍內(nèi)；而且相比較1-6治療組，在第8周時該組的血糖水平顯著地降低得更多（p<0.001）。以上這8個組別中，復(fù)方奧利司他散劑組（cops）能有效地緩解和控制伴有胰島b細(xì)胞功能的肥胖癥引發(fā)的血糖水平的升高。
表10.8組beagle犬空腹血糖變化（mean±sd,mg/dl）。
2.2.4.肥胖犬的脂代謝水平變化。
肥胖癥引發(fā)的代謝綜合征的特征之一就是血脂異常，通過檢測血清tc、ldl、hdl和tg的水平可以有效監(jiān)測血脂變化情況。八組beagle犬血脂測定結(jié)果如表11所示，第1-7組beagle犬的血脂水平整體均呈下降的變化趨勢，而第8組幾乎維持不變。至實驗結(jié)束，1、2和4-8組beagle犬的高密度脂蛋白雖呈下降的趨勢，但并未出現(xiàn)顯著性差異；第3組beagle犬的高密度脂蛋白基本上保持穩(wěn)定。op組能降低肥胖癥beagle犬的血清tc、ldl、tg水平，其中血清tc水平在第4周時與bp組形成明顯差異（p<0.05），并隨治療時間延長差異增大（p<0.001）;ldl和血清tg水平在第6周時與bp組形成明顯差異（p<0.05），在第8周時差異更加顯著（ldl:p<0.001;tg:p<0.005）。pp組展現(xiàn)出比op組更強的降低血脂的能力，其中l(wèi)dl、血清tc水平在第4周時即與bp組形成明顯差異（p<0.05），在第6周（p<0.005）和第八周（p<0.001）時差異逐步增大；血清tg水平在第6周時與bp組形成明顯差異（p<0.005），在第8周時差異更加顯著（p<0.001）。lp組對ldl、血清tc和tg均有降低能力，該組展現(xiàn)出的降低血脂能力略低于op組。opp和plp組相比較1-3單組分組，這兩組beagle犬的ldl、血清tc和tg水平下降更明顯，且與bp組比較均有明顯差異（p<0.001）；但是olp組的降低血脂能力低于單組分pp組。cop組beagle犬的ldl在給藥2周后已明顯低于bp組（p<0.01），在給藥4周時兩組間的差異非常顯著（p<0.001），在第8周時其值為0.47±0.28mmol/l，基本上恢復(fù)到正常范圍之內(nèi)。cop組beagle犬的血清tc和tg水平隨著治療期的延長也得到了很好的控制，二者在在第4周時明顯低于bp組（tc:p<0.05;tg:p<0.01），第6周時與bp組形成顯著性差異(p<0.001)，至實驗結(jié)束在第8周時其值也逐漸恢復(fù)到正常范圍之內(nèi)。以上這8個組別中，復(fù)方奧利司他散劑能有效地緩解和控制肥胖癥引發(fā)的血脂水平的升高。
表11.八組beagle犬血清tc、ldl、hdl和tg的變化情況（mean±sd,mmol/l）。
3.肥胖犬給藥后的不良反應(yīng)。
3.1.腹瀉。
在整個實驗周期中，bp組、pp組、lp組和plp組的beagle犬均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。op組犬的胃腸道不良反應(yīng)明顯，該組beagle犬4只出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉，1只出現(xiàn)輕微腹瀉，1出現(xiàn)便秘，同時該組beagle犬整體呈現(xiàn)出毛發(fā)黯淡無光、眼神無力、情緒低沉，推測是單組分奧利司他引起其他非直觀不良反應(yīng)綜合作用的結(jié)果。opp組、olp組和cop組較op組不良反應(yīng)有不同程度的減弱，其中cop組不良反應(yīng)顯著減弱該組beagle犬僅1只出現(xiàn)輕微腹瀉，其他未見異常，推測奧利司他與多種化合物的組合能降低奧利司他的不良反應(yīng)，減輕beagle犬的用藥后的副作用。
3.2.橫紋肌溶解。
在整個實驗周期中，持續(xù)檢測各組beagle血清中肌紅蛋白（myoglobin,mb）和肌酸激酶（creatinekinase,ck）的含量。研究發(fā)現(xiàn)，僅pp組的的mb和ck在第7周左右略高于正常值；而其余各組的mb和ck在整個實驗階段中均保持正常。
綜上所述，復(fù)方奧利司他組合物制劑一方面通過奧利司他產(chǎn)生抑制胃腸胰脂肪酶的功效，減少胃腸道脂肪營養(yǎng)物質(zhì)的吸收水平；另一方面利用他汀類化合物有效地降低寵物血液中的脂肪，保持心腦血管健康；另外，左旋肉堿的外源供給豐富了機體內(nèi)的肉堿水平，加速脂肪酸的轉(zhuǎn)運，更多地消耗體內(nèi)的脂肪儲備。肥胖癥beagle犬實驗結(jié)果表明這三種不同減肥機制的結(jié)合將發(fā)揮更好的減肥降脂的效果，可作為肥胖型寵物的理想用藥。
本發(fā)明的上述實施例僅是為了較為清楚地說明本發(fā)明而作的舉例，并非是對本發(fā)明實施方式的限定。對于相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，在上述說明和舉例的基礎(chǔ)上還可以做出其他各種形式的調(diào)整和變動。本說明書無法對所有的實施方式予以窮舉。凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的調(diào)整和變動仍處于本發(fā)明的保護范圍之列。