本發明屬于獸藥制劑制備技術，具體涉及利用選擇的非離子表面活性劑制備含伊維菌素類藥物液體制劑，該制劑中含有的伊維菌素類藥物不易被酸或堿催化降解。
背景技術：
：藥物具有水可溶解性是藥物可以經口給藥的前提，也是藥物穿透細胞膜和在體內轉運的必要條件。對于難溶性藥物或溶出速度很慢的藥物來說，藥物在水中的溶解度或溶出(溶解)速度便成為影響藥物在體內吸收的主要因素。有資料顯示，藥物的溶解度低于0.1mg/ml時對其吸收不利。因此，提高難溶解性藥物的水溶解度和溶出速度常成為改善其口服給藥生物利用度的首要步驟。試驗和資料顯示：伊維菌素類藥物在水中幾乎不溶解。以伊維菌素為例，它在1升水中僅能溶解6-9微克。因此，在制備含伊維菌素類藥物的口服制劑時，改善藥物的水可溶性是需要解決的重要技術環節。伊維菌素類藥物的分子結構中具有2個糖苷鍵，它易被酸催化水解而失去糖殘基。例如伊維菌素易被酸催化水解而轉化成活性較低的單糖伊維菌素B1a(MSH2B1a)和H2B1a糖苷配基(見表1)。而豬、雞等動物的胃液多數呈酸性，其酸性最強可達到PH值1.0左右(約相當于0.1M鹽酸的酸度)。這提示我們：通過提高制劑的耐酸性能，以降低酸性胃液對伊維菌素類藥物的水解作用，同樣是保障含這類藥物的口服制劑能被更多的吸收的重要技術環節。為此，將水可溶性或溶出度(固體制劑)和它的酸催化水解率作為檢查和衡量伊維菌素類藥品的質量指標十分必要，這可從另一側面更進一步的監控和反映出產品的品質，可使這類藥品的質量控制和監督能夠更科學、準確和全面。伊維菌素類藥物在堿性環境中也不穩定，較容易被堿催化降解而失去活性。如伊維菌素，它在堿性條件中其分子結構中的C2位易發生差向異構而轉化為2-差向異構體H2B1a(以下簡稱2-epimerH2B1a)，它的驅蟲活性僅為H2B1a活性的1％左右；C3＝C4位的雙鍵易發生位移，轉化為活性很低的∧2，3H2B1a(見表2)；伊維菌素分子結構中具有的內酯鍵同樣易被OH-攻擊而遭到破壞。我們通過用含伊維菌素的制劑進行的試驗顯示，當制劑PH值大于6.2時，保質期內產生的雜質更多的是2-差向異構體伊維菌素B1a；當制劑PH值小于4.3時，保質期內產生的雜質更多的是單糖伊維菌素B1a。公開資料顯示，該類藥物在略偏酸條件下穩定，其適宜的PH值范圍在4-6之間。通過以上論述可見，含伊維菌素類藥物的制劑，除了存在氧化降解，還存在酸/堿催化降解的問題。因此，在制備含伊維菌素類藥物的制劑，尤其是制備口服制劑時，除了要解決藥物的水溶性問題，不可忽視的另一問題是如何防止藥物的酸/堿催化降解。表面活性劑作為增溶劑，不但可提高一些疏水性藥物的水可溶性，并且特定的表面活性劑的存在，可增強一些含有易氧化、易水解藥物制劑的穩定性，“這是因為藥物被嵌入到由表面活性劑形成的膠束中，形成了一種屏障”，這種裹著藥物的“膠束屏障”阻礙了氧、H+、OH-對易水解或易氧化藥物的進攻。但是，如果表面活性劑選擇不當，反而會使藥物更易被酸/堿催化降解。例如十二烷基硫酸鈉，它對伊維菌素的酸催化水解具有顯著的促進作用(見表3)。因此，通過應用表面活性劑的方法來提高疏水性藥物的水可溶性，同時要求制劑具有耐受酸的催化水解作用和提高制劑在保存期間的穩定性(指抵抗酸或堿或氧的破壞作用)，表面活性劑種類的選擇無疑是至關重要的研究環節。篩選試驗顯示：將伊維菌素類藥物與選擇的非離子表面活性劑等助劑組合，所制備的口服液體制劑，其水可溶性好，并具有顯著的低抗酸催化降解的性能(見實施例1至實施例6)，這意味著本發明制劑在體內會有顯著的抵抗胃酸的水解作用，會有更好的生物利用度為了能更清晰的了解本發明制劑特點，有必要將與本發明密切相關的主要基礎性試驗予以描述。1.伊維菌素的酸催化降解反應：分別取0.02M、0.1M、0.2M的鹽酸水溶液各10ml，與含伊維菌素6mg的甲醇溶液10ml混勻，制備酸濃度為0.01M、0.05M、0.1M的反應液；將反應液在36-37℃反應3小時，在0、1、2、3小時分別取樣，用HPLC測定反應液中的MSH2B1a和H2B1a，酸催化的降解程度以MSH2B1a峰面積值占H2B1a的峰面積值(％)表示，并計算H2B1a的降解率，計算公式為：(1-不同時間的H2B1a峰面積值/0小時H2B1a峰面積值)X100。試驗結果見表1。表1伊維菌素在不同濃度鹽酸溶液中的水解程度和H2B1a的降解率2.伊維菌素的堿催化降解反應：取0.6％伊維菌素/甲醇溶液1ml，與9ml甲醇混合后加入0.2M的氫氧化鈉水溶液10ml，混勻，在21-24℃反應930分鐘，不同時間取樣，用HPLC法測定反應液中2-epimerH2B1a、∧2，3H2B1a與H2B1a，計算2-epimerH2B1a/H2B1a的峰面積值之比(％)和∧2，3H2B1a與H2B1a的峰面積值之比(％)，以及不同時間的H2B1a峰面積值與0分鐘H2B1a峰面積值之比(％)。試驗結果見表2。表2伊維菌素在0.1MNaOH溶液(甲醇/水＝1∶1)中的降解3.十二烷基硫酸鈉(SDS)對伊維菌素酸催化降解的影響：a.含SDS微乳劑的制備及酸催化的水解反應：取0.7gSDS、1，2丙二醇1ml、含0.15g伊維菌素的乙酸乙酯溶液0.75ml，攪拌混勻，加水至25ml，充分攪拌，即得澄清透明的微乳液；取微乳液1ml加0.01M鹽酸/水溶液19ml，36-37℃反應3小時。b.對照品制備及酸催化的水解反應：取含0.006g伊維菌素的乙酸乙酯溶液0.030ml，與9.97ml甲醇混勻，加入濃度為0.02M的鹽酸/水溶液10ml，混勻，36-37℃反應3小時。用HPLC法測定反應液中的MSH2B1a、H2B1aAG、H2B1a，記錄峰面積值，計算H2B1a降解率(％)、MSH2B1a與H2B1a的峰面積值之比(％)、H2B1aAG(H2B1a糖苷配基)與H2B1a的峰面積值之比(％)。試驗結果見表3。從表3可見，與不含SDS的對照品比較，SDS對伊維菌素的酸催化水解具有很強的促進作用。表3十二烷基硫酸鈉對伊維菌素的酸催化水解的促進作用技術實現要素：本發明主要解決的技術問題是克服伊維菌素類藥物在酸性條件下易水解的缺陷，以達到保護藥物在酸性胃液中不被破壞或較少被破壞的目的；其次是克服制劑在保存期間，其活性成份的酸/堿催化降解問題，使藥劑的有效成份降解的更少。本發明優選HEL-40或HEL-35與選擇的疏水性介質(苯甲酸芐酯或氮酮或十四烷酸異丙酯或它們的組合物)組合，來制得更耐酸/堿催化降解作用的液體制劑，以此來實現本發明目標。本發明所述的含伊維菌素類藥物的液體制劑，其所述制劑組成包含：1.0.1-6％伊維菌素類藥物(重量/體積百分比)；所述的伊維菌素類藥物包括阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、莫西菌素、乙酰胺基阿維菌素、塞拉菌素。2.親水親油平衡值(HLB值)大于等于11的聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物，它在液體制劑中的重量/體積百分比含量為1-48％，并且，在制劑中它與伊維菌素類藥物的重量之比應大于或等于3，適宜比例為5-16比1；所述的親水親油平衡值(HLB值)大于等于11的聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物包括聚氧乙烯(35)氫化蓖麻油(以下簡稱HEL-35)、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油(以下簡稱HEL-40)、聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油(HEL-50)、聚氧乙烯(60)氫化蓖麻油(HEL-60)中的一種。3.液體分散介質，加至液體制劑的100％體積。所述的液體分散介質包括有機溶劑或水和有機溶劑；選擇的有機溶劑包括乙醇、異丙醇、1，2-丙二醇、分子量小于400的聚乙二醇、甲醛縮甘油、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮中的一種或一種以上的組合物；水需和所述的有機溶劑組合使用，由此所制備的制劑還可稱之為含水的液體制劑或稱之為乳狀制劑(包括乳劑或亞微乳劑或微乳劑)。所述的乳狀制劑的PH值適宜范圍為4.2-5.7，最適的PH值范圍是4.5-5.4。在所述的液體制劑中還包含體積百分比含量為0.2-78％的疏水性介質，選擇的疏水性介質包括苯甲酸芐酯、氮酮、辛/癸酸三甘油酯、十四烷酸異丙酯、二丙二醇二苯甲酸酯、二乙二醇苯甲酸酯中的一種或一種以上組合物。試驗發現，在制劑中加入適量的疏水性介質，可更加有效的抑制酸/堿對伊維菌素類藥物的催化降解作用(見實施例1至實施例6)，其中抑制活性最強的是苯甲酸芐酯、二丙二醇二苯甲酸酯和氮酮。在每1升所述的乳狀制劑中還可加入3-60克阿拉伯膠。試驗過程中意外的觀察到，含有阿拉伯膠的乳狀制劑不需進行PH調節，并且，它比通過用酸調節PH的不含阿拉伯膠的乳狀制劑更穩定。這是含阿拉伯膠的乳狀制劑最顯著的特點。試驗顯示，按上述組成制備的含伊維菌素和苯甲酸芐酯的液體制劑，在鹽酸濃度為0.09-0.11M的溶液中，于36-37℃條件下保溫2小時，用HPLC檢測，單糖伊維菌素B1a的HPLC面積值與伊維菌素B1a的HPLC面積值之比小于3％，特別優選的液體制劑其單糖伊維菌素B1a的面積值與伊維菌素B1a的面積值之比小于1.5％(見表6和表7)。與表1比較可見，優選的制劑對酸的催化水解具有顯著的阻抑作用。本發明所述液體制劑可以通過以下方法制得。方法一：按配方所述的含量稱取伊維菌素類藥物和聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物，與有機溶劑混合，加入或不加入疏水性介質，在常溫至83℃條件下攪拌，使藥物完全溶解，得澄清透明的含伊維菌素類藥物的液體制劑。體外實驗顯示，應用方法一制備的液體制劑與水混合后可形成乳劑或微乳劑。這提示我們該給藥系統在體溫條件下，遇體液后可在胃腸道蠕動的促使下自發形成乳液，因此認為，用方法一制備的液體制劑是一種自乳化釋藥系統，可稱之為自乳化制劑(賈偉，高文遠主編，邱明豐副主編，藥物控釋新劑型，化學工業出版社，2005年4月第1版，第71-83頁)。該自乳化液體制劑可直接給動物灌服，也可兌水后灌服或供動物飲用，或混在飼料中飼喂；含有異丙醇、苯甲酸芐酯和少量氮酮的制劑或含有異丙醇、苯甲酸芐酯、十四烷酸異丙酯和少量氮酮的制劑也可作為澆潑劑，透皮給藥；含有甲醛縮甘油、苯甲酸芐酯、十四烷酸異丙酯的制劑還可作為注射劑，以皮下或肌內注射的方式給藥。方法二：按配方所述的含量稱取伊維菌素類藥物和聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物，與有機溶劑混合，加入或不加入疏水性介質，在常溫至65℃條件下攪拌，使藥物完全溶解，之后將溶液溫度降到室溫，邊攪拌邊加入適量的水，調PH值為4.7-5.4，或加入阿拉伯膠水溶液后，補加水至終體積，得外觀為透明或半透明(微乳液或亞微乳液)或乳白色(乳液)的液體，即所述的液體制劑。選擇以上兩種操作過程進行本發明制劑的制備，并不意味著本發明制劑的制備程序僅限于此。就是說，任何操作過程的改變并不意味著超出了本發明制劑組成的保護范圍。用本技術制備的制劑，由于選擇的表面活性劑具有很好的“膠束屏障作用”，使得其中包含的伊維菌素類藥物在酸性介質中具有優良的穩定性，如口服給藥，在一定程度上降低了藥物被酸性胃液水解的程度或概率，從而克服了因胃酸作用造成藥物利用率降低的缺陷。本發明提出了通過檢測制劑中2-差向異構體伊維菌素B1a的相對百分比含量和MSH2B1a的相對百分比含量來判定制劑的穩定性的方法；用本發明篩選出的聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物制備的液體制劑在保質期內MSH2B1a和2-epimerH2B1a產生的更少，穩定性更好，優于篩選過的其它表面活性劑。在本發明的研究過程中還觀察到，用選擇的非離子表面活性劑(如HEL-40)與一定量的苯甲酸芐酯或與氮酮或與辛/癸酸三甘油酯或與十四烷酸異丙酯組合使用，可更有效的抑制酸、堿對伊維菌素類藥物的催化降解作用(見實施例2至實施例6)，從而使產品保存期2-差向異構體H2B1a產生量減少，尤其是在微乳劑或亞微乳劑或乳劑中加入適量的阿拉伯膠，制劑更穩定。具體實施方式實施例1通過伊維菌素的酸催化水解試驗進行表面活性劑的篩選制劑組成：制劑中伊維菌素含量均為0.6g，表面活性劑含量均為6g，用乙酸乙酯/1，2-丙二醇/異丙醇(5∶5∶70)共溶劑溶解伊維菌素，制備的含0.6％伊維菌素、含6％表面活性劑的液體制劑的組成見表4。酸催化的降解反應：取表4中所示的液體制劑1ml、水17ml，與1M的鹽酸水溶液2ml混合，在36-37℃反應2小時，用HPLC測定反應液中的MSH2B1a、H2B1a，記錄峰面積，計算MSH2B1a與H2B1a的峰面積之比(％)。試驗結果見表4。由表4可見，聚氧乙烯氫化蓖麻油縮合物類表面活性劑和泊洛沙姆188對伊維菌素的酸催化降解具有更強的抑制作用。表4含不同表面活性劑的伊維菌素制劑的酸催化水解試驗結果表面活性劑MSH2B1a/H2B1a％H2B1a降解率％聚氧乙烯(35)蓖麻油對MSH2B1a峰面積有干擾4.1-4.3聚氧乙烯(90)蓖麻油對MSH2B1a峰面積有干擾4.1-4.5壬基酚聚氧乙烯醚(OP-10)5.3-5.84.3-4.8聚氧乙烯(23)月桂醇醚(芐澤35)5.6-6.94.8-5.7聚氧乙烯(20)鯨蠟醇醚(芐澤58)5.8-6.34.9-5.5聚乙二醇硬脂酸酯SG-406.2-7.14.9-5.3聚乙二醇硬脂酸酯SG-1006.5-6.94.6-5.3聚氧乙烯(9)月桂酸酯LAE-96.6-6.94.2-4.8聚乙二醇400單月桂酸酯6.9-7.53.3-3.9泊洛沙姆1882.8-3.22.7-3.3吐溫-804.3-4.93.8-4.5聚氧乙烯(35)氫化蓖麻油2.9-3.33.2-3.6聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油2.8-3.12.7-3.1聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油3.0-3.32.9-3.4聚氧乙烯(60)氫化蓖麻油3.3-3.63.1-3.6十二烷基硫酸鈉59.6-64.798.2-99.7實施例2含不同疏水性介質的制劑及其酸催化的水解試驗1.制劑的基本配方(重量比)：0.6％伊維菌素、10％HEL-40、16％1，2-丙二醇、疏水性介質按表5所示量添加、異丙醇加至100％。2.酸催化水解試驗：參考第【0039】段所述的方法進行檢測。試驗結果見表5。表5疏水性介質對伊維菌素的酸催化水解作用的影響從表5可見，苯甲酸酯類或氮酮與HEL-40組合使用對伊維菌素的酸催化降解的阻抑作用最強，其次是辛/癸酸三甘油酯、十四烷酸異丙酯和油酸乙酯。實施例3不同比例的伊維菌素/苯甲酸芐酯/HEL-40制劑及其酸催化的水解試驗1.制劑的基本配方(重量比)：1％伊維菌素、16％1，2-丙二醇、苯甲酸芐酯和HEL-40的含量按伊維菌素的重量比計算(見表6)，異丙醇加至100％。2.酸催化的水解試驗：取樣品0.3ml與0.1M鹽酸水溶液4.7ml混合，于36.5-37.5℃反應2小時，加10％氫氧化鈉溶液約225μl，混勻，加甲醇定容至10ml，過濾，用HPLC法檢測反應液中的MSH2B1a、H2B1a，記錄峰面積值，計算H2B1a的水解率，以MSH2B1a與H2B1a的峰面積值之比(％)衡量水解率的大小。試驗結果見表6。表6不同比例的伊維菌素/苯甲酸芐酯/HEL-40制劑其酸催化的水解試驗制劑編號伊維菌素/苯甲酸芐酯/HEL-40的重量比MSH2B1a/H2B1a％制劑11∶1∶62.23制劑21∶2∶61.94制劑31∶3∶61.67制劑41∶4∶61.29制劑51∶3∶92.01制劑61∶4.5∶91.58制劑71∶2∶92.31對照品-1乙酸乙酯替代苯甲酸芐酯，比例為1∶3∶94.27對照品-2乙酸乙酯替代苯甲酸芐酯，比例為1∶4∶64.22由表6可見，苯甲酸芐酯/HEL-40的重量比為1比1.5時(制劑4)MSH2B1a與H2B1a的比值最小。用乙酸乙酯替代苯甲酸芐酯時MSH2B1a與H2B1a的比值最大。實施例4不同比例的伊維菌素/氮酮/HEL-40制劑及其酸催化的水解試驗1.制劑的基本配方(重量比)：1％伊維菌素、3％1，2-丙二醇、氮酮和HEL-40的含量按伊維菌素的重量比計算(見表7)，異丙醇加至100％。2.酸催化的水解試驗：試驗方法與第【0051】段所述方法相同。試驗結果見表7。表7不同比例的伊維菌素/氮酮/HEL-40制劑其酸催化的水解試驗制劑編號伊維菌素/氮酮/HEL-40的重量比MSH2B1a/H2B1a％制劑81∶1∶62.86制劑91∶2∶61.99制劑101∶3∶61.72制劑111∶4∶61.46制劑121∶3∶92.20制劑131∶6∶91.62制劑141∶4.5∶91.85對照品-3乙酸乙酯替代氮酮，比例為1∶3∶94.23由表7可見，氮酮/HEL-40的重量比為1比1.5時(制劑11)MSH2B1a與H2B1a的比值最小。用乙酸乙酯替代氮酮時MSH2B1a與H2B1a的比值最大。實施例5含伊維菌素制劑的酸/堿催化降解試驗制劑組成及其酸、堿催化降解試驗結果見表8。堿催化的水解反應試驗方法為：取含2-6mg伊維菌素的溶液，用氫氧化鈉水溶液定容至20ml(反應液氫氧化鈉濃度為0.1M)，混勻，在21-24℃反應2小時，用酸中和后，用HPLC法測定反應液中2-epimerH2B1a和H2B1a，計算2-epimerH2B1a與H2B1a峰面積值之比(％)、H2B1a降解率(％)。酸催化的水解反應為：取含2-6mg伊維菌素的溶液，用鹽酸水溶液定容至20ml(反應液酸濃度為0.1M)，混勻，于36-37℃反應1小時，用氫氧化鈉溶液調PH值在5左右，用甲醇稀釋至100-300μg/ml，用0.45um的膜過濾，濾液用HPLC分析，記錄MSH2B1a峰面積值和H2B1a峰面積值，計算MSH2B1a峰面積值占H2B1a峰面積值的百分比(％)，并計算伊維菌素的酸催化降解率(％)。表8制劑組成及伊維菌素的酸/堿催化降解試驗實施例6含苯甲酸芐酯或氮酮的制劑與不含苯甲酸芐酯或氮酮的制劑的穩定性試驗將含氮酮(制劑14)或含苯甲酸芐酯的制劑15、16、17、18和不含氮酮或苯甲酸芐酯的制劑14-1、15-1、16-1、17-1、18-1，于40℃放置60天，于第30天、第60天取樣測定H2B1a的降解率、2-epimerH2B1a/H2B1a的相對百分比，結果示于表9。注：0天所有制劑均不含有2-epimerH2B1a，60天期間，MSH2B1a/H2B1a(％)的比值無明顯變化。表9苯甲酸芐酯或氮酮對制劑穩定性影響表9顯示，氮酮或苯甲酸芐酯對2-epimerH2B1a的產生有顯著的阻抑作用。實施例7含伊維菌素/苯甲酸芐酯/氮酮/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.5％伊維菌素、2.6％氮酮、3.5％苯甲酸芐酯、2.5％HEL-40，異丙醇加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、氮酮、苯甲酸芐酯、HEL-40和異丙醇，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后過0.45微米膜，即得本制劑。本制劑可兌水給羊灌服；也可作為澆潑劑，透皮給藥，按0.5-0.7mg/kg.b.w.豬、牛、羊寄生蟲病防治，一次給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性好，室溫存放1年，伊維菌素降解率小于標示量的0.8％，優于不含氮酮和苯甲酸芐酯的制劑(伊維菌素減少2.6-3.1％)。實施例8含伊維菌素/苯甲酸芐酯/HEL-35的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：1％伊維菌素、4.7％苯甲酸芐酯、13％HEL-35，15％1，2-丙二醇，異丙醇加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、苯甲酸芐酯、HEL-35、1，2-丙二醇和異丙醇，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后過0.45微米膜，即得本制劑。本制劑用于豬寄生蟲病防治，通過飲水方式給藥，使用時，兌水稀釋5000-8500倍(夏季稀釋8500倍左右，冬季稀釋5000倍左右)，連續飲用7-10天。本劑穩定性好，40℃放置90天，伊維菌素降解率為標示量的0.98-1.05％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.22-1.45％，而不含苯甲酸芐酯的對照樣品其伊維菌素降解率為標示量的3.18-3.32％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為2.41-2.67％。實施例9含伊維菌素/氮酮/苯甲酸芐酯/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.5％伊維菌素、2.8％氮酮、20％1，2-丙二醇、50％苯甲酸芐酯、4％HEL-40，異丙醇加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、氮酮、1，2-丙二醇、HEL-40和異丙醇，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后過0.45微米膜，即得本制劑。本制劑可兌水給豬、牛、羊灌服；也可作為澆潑劑，透皮給藥，按0.5-0.7mg/kg.b.w用于豬、牛、羊寄生蟲病防治，一次給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.92-0.98％，而不含氮酮和苯甲酸芐酯的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為2.53-2.88％。實施例10含伊維菌素/苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯/HEL-40的液體制劑1.制劑配方(重量比)：3％伊維菌素、57％苯甲酸芐酯、9％HEL-40，13％甲醛縮甘油，十四烷酸異丙酯加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、苯甲酸芐酯、HEL-40、甲醛縮甘油和十四烷酸異丙酯，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后過0.45微米膜，乙酰氨基阿維菌素即得本制劑。本制劑用于豬、牛羊寄生蟲病防治，通過注射方式給藥，給藥劑量為0.6-2.5毫克/公斤體重，一次給藥，寄生蟲驅凈率大于95％，藥效維持期為42-105天(給藥劑量越大藥效維持時間越長)。本劑穩定性好，40℃放置90天，伊維菌素降解率為標示量的0.98-1.05％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.22-1.45％，而不含苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯的對照樣品(用丙二醇和甲醛縮甘油替代苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯)其伊維菌素降解率為標示量的3.18-3.32％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為3.04-3.37％。實施例11含伊維菌素/苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯/HEL-40的液體制劑1.制劑配方(重量比)：5％乙酰氨基阿維菌素、60％苯甲酸芐酯、15％HEL-40，12％甲醛縮甘油，十四烷酸異丙酯加至100％。2.制備過程：按配方稱取乙酰氨基阿維菌素、苯甲酸芐酯、HEL-40、甲醛縮甘油和十四烷酸異丙酯，于配制罐中，攪拌，待乙酰氨基阿維菌素溶解后過0.45微米膜，即得本制劑。本制劑用于奶牛寄生蟲病防治，通過注射方式給藥，給藥劑量為0.3-0.9毫克/公斤體重，一次給藥，寄生蟲驅凈率大于95％，藥效維持期為48-112天(給藥劑量越大藥效維持時間越長)。本劑穩定性好，40℃放置90天，乙酰氨基阿維菌素降解率為標示量的0.72-0.95％，而不含苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯的對照樣品(用丙二醇和甲醛縮甘油替代苯甲酸芐酯和十四烷酸異丙酯)其乙酰氨基阿維菌素降解率為標示量的2.78-3.11％。實施例12阿維菌素制劑的組成與穩定性研究本實施例所述的6種阿維菌素(AVM)制劑的組成見下表。表中所述的AVM降解率測定方法是：取表中制劑1ml與0.1M鹽酸水溶液19ml混合，在37-38℃反應3小時，取5ml反應液于10ml容量瓶中，加入10％氫氧化鈉水溶液約250微升(PH值調到4-6范圍)，用甲醇定容到10ml，用孔徑為0.45微米的濾膜過濾，取濾液用HPLC測定阿維菌素含量，記錄峰面積值(A1)，同法測定0小時樣品中阿維菌素的含量，記錄峰面積值(A2)，按公式(A2-A1)/A2X100計算AVM降解率(％)，檢測結果見下表。實施例13乙酰氨基阿維菌素(Epr)制劑的組成與穩定性研究本實施例所述的6種乙酰氨基阿維菌素制劑的組成見下表。表中所述的乙酰氨基阿維菌素降解率測定方法是：取表中制劑1ml與0.1M鹽酸水溶液19ml混合，在37-38℃反應3小時，取5ml反應液于10ml容量瓶中，加入10％氫氧化鈉水溶液約250微升(PH值調到4-6范圍)，用甲醇定容到10ml，用孔徑為0.45微米的濾膜過濾，取濾液用HPLC測定乙酰氨基阿維菌素含量，記錄峰面積值(A1)，同法測定0小時樣品中乙酰氨基阿維菌素的含量，記錄峰面積值(A2)，按公式(A2-A1)/A2X100計算乙酰氨基阿維菌素降解率(％)，檢測結果見下表(在下表中簡稱為“降解率％”)。實施例14含伊維菌素/氮酮/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.2％伊維菌素、1.4％氮酮、20％1，2-丙二醇、4％HEL-40，水加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、氮酮、1，2-丙二醇、HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入部分水，充分攪拌，用磷酸調液體PH為4.7-5.3，補加水至終體積，過1微米膜，即得乳狀制劑。本制劑按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生蟲病防治，一次經口給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1.1％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.46-0.53％；不含氮酮的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.94-1.23％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含氮酮的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.45-1.82％；不含氮酮的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.5-5.3％；實施例15含伊維菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.2％伊維菌素、2％辛-癸酸三甘油酯、12％1，2-丙二醇、4％HEL-40，2％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取0.22克伊維菌素(純度90-91％)、2克辛-癸酸三甘油酯、12克1，2-丙二醇、4克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入30毫升水，充分攪拌，加入含2克阿拉伯膠的水溶液20毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，過1微米膜，即得乳狀制劑。本制劑按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生蟲病防治，一次經口給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性十分好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的0.83％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.12-0.23％；不含阿拉伯膠和辛-癸酸三甘油酯的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.65-1.82％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含十四烷酸異丙酯和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.91-2.45％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯膠的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.8-5.6％；實施例16含伊維菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.08％伊維菌素、1.5％辛-癸酸三甘油酯、12％1，2-丙二醇、3％HEL-40，1％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取0.0968克伊維菌素(純度90-91％)、1.5克辛-癸酸三甘油酯、12克1，2-丙二醇、3克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入30毫升水，充分攪拌，加入含1克阿拉伯膠的水溶液20毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，過1微米膜，即得乳狀制劑。本制劑按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生蟲病防治，一次經口給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性十分好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的0.77％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.18-0.36％；不含阿拉伯膠和辛-癸酸三甘油酯的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.9-2.2％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.71-2.14％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯膠的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.65-5..22％；實施例17含伊維菌素/辛-癸酸三甘油酯/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.5％伊維菌素、6.4％辛-癸酸三甘油酯、22％1，2-丙二醇、8％HEL-40，3％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取0.55克伊維菌素(純度90-91％)、6.4克辛-癸酸三甘油酯、22克1，2-丙二醇、8克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入30毫升水，充分攪拌，加入含3克阿拉伯膠的水溶液24毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，即得乳狀制劑。本劑穩定性十分好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的0.95％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.23-0.35％；不含阿拉伯膠和辛-癸酸三甘油酯的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為2.2-2.6％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.55-2.08％；不含辛-癸酸三甘油酯和阿拉伯膠的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.9-5.4％。實施例18含伊維菌素/氮酮/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：1％伊維菌素、5.3％氮酮、22％1，2-丙二醇、16％HEL-40，4％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取1.1克伊維菌素(純度90-91％)、5.3克氮酮、22克1，2-丙二醇、16克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入20毫升水，充分攪拌，加入含4克阿拉伯膠的水溶液24毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，即得乳狀制劑。本劑穩定性十分好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1.1％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.08-0.145％；不含阿拉伯膠和氮酮的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.98-2.26％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含氮酮和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.44-1.97％；不含氮酮和阿拉伯膠的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.65-5.12％。實施例19含伊維菌素/氮酮/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.1％伊維菌素、0.6％氮酮、16％1，2-丙二醇、2％HEL-40，0.6％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取0.11克伊維菌素(純度90-91％)、0.6克氮酮、16克1，2-丙二醇、2克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入20毫升水，充分攪拌，加入含0.6克阿拉伯膠的水溶液20毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，即得乳狀制劑。本劑穩定性十分好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1.23％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.33-0.45％；不含阿拉伯膠和氮酮的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.77-2.03％。在0.1摩爾鹽酸溶液中、在36.5-37.5℃反應3小時，含氮酮和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.56-2.41％；不含氮酮和阿拉伯膠的對照制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.82-5.32％。實施例20含伊維菌素/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.2％伊維菌素、2％阿拉伯膠、20％1，2-丙二醇、4％HEL-40，水加至100％。2.制備過程：按配方稱取伊維菌素、1，2-丙二醇、HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入部分水，充分攪拌，加入含2克阿拉伯膠的水溶液20毫升，混勻后補加水至終體積，混勻，過1微米膜，即得乳狀制劑。本劑按0.2-0.3mg/kg.b.w用于牛、羊寄生蟲病防治，一次經口給藥，藥效期可維持一個月。本劑穩定性好，室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1.3％，2-epimerH2B1a的相對百分比含量為0.11-0.23％；不含阿拉伯膠的對照樣品其2-epimerH2B1a的相對百分比含量為1.21-1.68％。實施例21含伊維菌素/二丙二醇二苯甲酸酯/阿拉伯膠/HEL-40的液體制劑制備1.制劑配方(重量比)：0.2％伊維菌素、0.9％二丙二醇二苯甲酸酯、16％1，2-丙二醇、2.8％HEL-40，0.6％阿拉伯膠、水加至100％。2.制備過程：按配方稱取0.11克伊維菌素(純度90-91％)、0.9克二丙二醇二苯甲酸酯、16克1，2-丙二醇、2.8克HEL-40，于配制罐中，攪拌，待伊維菌素溶解后，加入20毫升水，充分攪拌，加入含0.6克阿拉伯膠的水溶液20毫升，攪拌混勻，補加水至100毫升，即得乳狀制劑。本劑室溫存放2年，伊維菌素降解率小于標示量的1.11％，2-epimerH2B1a與H2B1a的峰面積比為0.23-0.35％；對照品2-epimerH2B1a與H2B1a的峰面積比為1.77-2.03％。在36.5-37.5℃、0.1摩爾鹽酸溶液中反應3小時，含二丙二醇二苯甲酸酯和阿拉伯膠的制劑，其反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為1.56-2.41％；對照制劑反應液中MSH2B1a峰面積占H2B1a峰面積的百分比為4.82-5.32％。當前第1頁1 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