本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的涉及赪桐根正丁醇提取物的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
炎癥是機(jī)體最基本的抗損傷反應(yīng)，任何能夠引起組織損傷的因素都可成為炎癥的原因。其臨床特征為紅、腫、熱、痛，是致炎因子刺激具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)局部損傷的反應(yīng)。炎癥有三個(gè)不同時(shí)相：第一時(shí)相為急性或炎癥早期，該時(shí)期血管受到刺激，血管內(nèi)皮間隙擴(kuò)大，血管壁通透性增強(qiáng)，白細(xì)胞和蛋白質(zhì)等滲出到組織間隙，造成組織腫脹，因此，腫脹是炎癥早期的重要指標(biāo)；第二時(shí)相為炎癥中期，以血小板黏附及白細(xì)胞游走為特點(diǎn)，與免疫反應(yīng)緊密相關(guān)；第三時(shí)相為慢性炎癥或炎癥的后期，該時(shí)期內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞和實(shí)質(zhì)細(xì)胞等增生，形成肉芽組織增生，以纖維組織增生、肉芽腫形成為特點(diǎn)。目前普遍使用的抗炎藥大多為西藥，而西藥使用后有一定的副作用，對(duì)身體造成慢性傷害。
赪桐為馬鞭草科大青屬植物赪桐 Clerodendrum japonicum（Thunb.）Sweet.，又名紅龍船、荷苞花、抽須紅、木通蓮、珍珠梧桐、“個(gè)朋被”（廣西壯族語(yǔ)），為廣西常用壯藥，藥用部位為根，《中華本草》、《民間常用草藥匯編》記載其味甘，性涼，全株均可入藥，其花可安神、止血，主治心悸失眠、痔瘡出血；葉具有祛風(fēng)散瘀、解毒消腫等功效，主治偏頭痛、跌打瘀腫、癰腫瘡毒；根、莖可清肺熱、利小便、涼血止血，臨床用于肺熱咳嗽、熱淋、小便不利、咳血、尿血、痔瘡出血、風(fēng)濕骨痛的治療，具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。
赪桐根作為廣西的民間壯藥材，雖然在壯族民間有一定的應(yīng)用，但至今仍沒(méi)有進(jìn)行很好地開(kāi)發(fā)利用，目前對(duì)赪桐研究的公開(kāi)報(bào)道較少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題，提供赪桐根正丁醇提取物的制備方法及應(yīng)用。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
赪桐根正丁醇提取物的制備方法，包括如下步驟：（1）將赪桐根粉碎，8倍量的80%乙醇溶液回流提取3次，每次2h，溫度70℃，過(guò)濾，合并濾液，濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收乙醇，濃縮液置水浴上揮盡乙醇溶液，干燥得赪桐根乙醇總提取物；
（2）將赪桐根乙醇總提取物浸膏，加水溶解后，用等體積的正丁醇萃取5次，合并各次萃取液，回收溶劑后，得到赪桐根正丁醇提取物。
上述赪桐根正丁醇提取物在制備抗炎癥藥物中的應(yīng)用。
上述赪桐根正丁醇提取物在制備抗急性炎癥藥物的應(yīng)用。
上述赪桐根正丁醇提取物在制備抗慢性炎癥藥物中的應(yīng)用
有益效果：本發(fā)明提取的赪桐根正丁醇提取物能對(duì)急性炎癥和慢性炎癥的組織腫脹有顯著的抑制作用。本發(fā)明的實(shí)施能為深入抗炎藥物的開(kāi)發(fā)提供原材料。將赪桐根正丁醇提取物用于制備抗炎癥藥物，可以為炎癥病人提供了新的治療藥物，能降低目前使用抗炎藥物出現(xiàn)的各種副作用。
具體實(shí)施方式
在本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程中，使用到而未提及的技術(shù)均為現(xiàn)有技術(shù)。
實(shí)施例
（1）受試藥物的制備
赪桐根正丁醇提取物的制備，步驟如下：
赪桐根乙醇總提取物的制備：赪桐根5880g，粉碎，8倍量的80%乙醇溶液回流提取3次，每次2h，溫度70℃，過(guò)濾，合并濾液，濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收乙醇，濃縮液置水浴上揮盡乙醇溶液，干燥得赪桐根乙醇總提取物838.7g。
赪桐根正丁醇提取物的制備：將上述赪桐根乙醇總提取物浸膏，加水溶解后，用等體積的正丁醇萃取5次，分別合并各次萃取液，回收溶劑后，得赪桐根正丁醇提取物115.5g。
分別稱取注射用青霉素鈉0.48g和注射用硫酸鏈霉素0.8g混勻用蒸餾水溶解至80ml即得雙抗供試液，搖勻，-20℃保存。
（2）小鼠棉球肉芽腫
取健康昆明種小鼠96只，雄性，稱重，隨機(jī)分為8組，每組12只，分別為空白對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組（地塞米松，0.006g/ kg），赪桐根正丁醇提取物高、中、低劑量組（80、40、20g/ kg）。動(dòng)物麻醉后，將2個(gè)已高壓滅菌且滴加0.1ml雙抗供試液的10mg棉球分別植入小鼠兩側(cè)腋下，縫合切口后外涂碘酒抗感染。次日各組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)的藥物，空白組給相應(yīng)體積的蒸餾水。1次/d，連續(xù)7d，末次給藥12h后處死小鼠，剝離肉芽組織的棉球，精密稱取棉球濕重，60℃烘烤至恒重，精密稱重，計(jì)算肉芽質(zhì)量。
肉芽重量=帶肉芽組織的棉球重量-棉球原始重量
（3）角叉菜膠致小鼠足腫脹
昆明小鼠96只，稱重，分組及給藥劑量同(2)，每組按給藥體積20ml/kg灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7d。末次給藥后，在每只小鼠后足同高處用標(biāo)記筆標(biāo)標(biāo)記后，用足趾腫脹容積測(cè)量?jī)x測(cè)量足趾正常容積，并記錄。在小鼠足趾皮下注射1%角叉菜膠0.02ml，于致炎后0.5、1.5、3.5、4.5、5.5h測(cè)量足趾腫脹容積，計(jì)算腫脹率。
抑制率%=（致炎后V2-致炎前V1）/致炎前V1×100%
（4）對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹及腫脹抑制率的影響
選體重18～22g 的健康昆明種小鼠，雄性，隨機(jī)分組，每組10 只，分為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松)、赪桐正丁醇提取物高、中、低劑量組，灌胃(ig) 給藥，每天1 次，連續(xù)6 d。末次給藥后，將二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩面致腫，左耳作對(duì)照。脫頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用打孔器分別在兩耳同一部位打下圓耳片，稱重，以同一小鼠兩耳片重量之差表示腫脹度，并計(jì)算腫脹抑制率。
抑制率=(模型對(duì)照組腫脹度—實(shí)驗(yàn)組腫脹度)/模型對(duì)照組腫脹度×100%
（5）醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)
小鼠60 只，隨機(jī)分為模型組、地塞米松組（0.0045 g/kg）、赪桐根正丁醇提取物高、中、低劑量組（40，20，10 g/kg），每組12 只。灌胃給藥，給藥容積20 ml/kg，模型組灌胃等體積蒸餾水。每日給藥1 次，連續(xù)7 d。末次給藥45 min 后，各鼠尾靜脈注射0.25%伊文思藍(lán)溶液0.1 ml/10 g，同時(shí)腹腔注射0.6%冰醋酸溶液，每只0.2 ml。15 min 后脫頸椎處死動(dòng)物，腹腔注射生理鹽水6 ml 沖洗腹腔，輕揉腹部1 min，剪開(kāi)腹腔收集腹腔液，離心（1 000 rpm/min）10 min，取上清液于723 分光光度計(jì)590 nm 處測(cè)定吸光度。
（6）結(jié)果
a 對(duì)小鼠棉球肉芽腫的影響
赪桐根正丁醇提取物各劑量組小鼠的棉球肉芽腫重量較模型組均明顯降低，差異有顯著性（P＜0.001），赪桐根正丁醇提取物高劑量組對(duì)小鼠棉球肉芽腫干重抑制率最顯著，達(dá)33.13%，見(jiàn)表1。
表1 赪桐根正丁醇提取物對(duì)小鼠棉球肉芽腫的影響。
注：與模型組比較，***P＜0.001。
b對(duì)角叉菜膠致小鼠足腫脹的影響
赪桐根正丁醇提取物中、高劑量組（20，40g/kg）小鼠足腫脹的腫脹度較模型組明顯降低，差異有顯著性（P＜0.01），其中赪桐根正丁醇提取物高劑量組對(duì)小鼠足腫脹抑制率最顯著，高達(dá)39.19%。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 赪桐根正丁醇提取物對(duì)角叉菜膠致小鼠腳腫脹的影響。
注：與模型組比較，***P＜0.001，**P＜0.01。
c 對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響
赪桐根正丁醇提取物各劑量組與模型組比較，小鼠耳腫脹腫脹度均顯著降低，差異有顯著性（P＜0.01或P＜0.05）。其中赪桐根正丁醇提取物低劑量組對(duì)小鼠耳腫脹抑制率最顯著，高達(dá)57.14%。結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 赪桐正丁醇提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響。
注：與模型組比較，***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05。
d對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響
赪桐根正丁醇提取物中、高劑量組（20，40g/kg）與模型組比較，顯著降低醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性，差異有顯著性（P＜0.01或P＜0.05）。提示赪桐根正丁醇提取物對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管透通性增加有顯著抑制作用，結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 赪桐正丁醇提取物對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響。
注：與模型組比較，***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05。
結(jié)果表明，實(shí)施例中所制備的赪桐根正丁醇提取物均能對(duì)炎癥早期的組織腫脹有顯著的抑制作用，具有抗炎作用，赪桐根正丁醇提取物可用于制備抗炎癥藥物。