本發明屬于功能食品
技術領域：
，尤其涉及一種降低艾滋病患者病毒載量及提升T淋巴細胞CD4免疫力的復合制劑和應用。
背景技術：
：艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome，AIDS)，是在人免疫缺陷病毒直接或間接作用下，T細胞免疫缺陷，同時其他免疫細胞均不同程度受損，促使各種嚴重的機會性感染和腫瘤發生，導致死亡。艾滋病不僅已成為嚴重威脅人民健康的公共衛生問題，且已影響到經濟發展和社會穩定。現代醫學防治艾滋病采用的是抗病毒、提高機體免疫、控制和治療各種機會性感染癥，但藥物作用單一，往往需要多藥并用，藥價昂貴，毒副作用大。中國艾滋病治療用藥主要依靠進口，年人均藥品費用至少需人民幣3萬-5萬元。同時，國家在艾滋病控制方面的投入也急劇增加。實驗室檢測是診斷艾滋病的主要依據，外周血病毒載量(viralload，VL)和CD4+T淋巴細胞(簡稱CD4細胞)檢測已成為判定AIDS患者病情、預測臨床進展和評價抗病毒治療療效的重要指標。CD4+T細胞是HIV感染的主要靶細胞，而其本身又是免疫反應的中心細胞；正常人的CD4+T細胞約占總的T淋巴細胞的65％，CD8+T細胞約占35％。人體感染了HIV后，其病理過程是免疫系統受損，主要表現為CD4+T細胞丟失、絕對數量減少、功能減退，同時CD8+T細胞數量增加，使CD4+/CD8+的比例失調。因此CD4+T細胞計數作為直接測定免疫細胞功能的方法，是HIV感染患者免疫系統損害狀況最明確的指標。病毒載量檢測是通過一種叫聚合酶鏈鎖反應(PCR)的技術完成的，若病毒量在10,000copies/ml以下是“低”，100,000copies/ml以上是“高”。研究發現，CD4細胞數量相同的人，病毒量高者比低者病情惡化更快速。對于尚未服用抗HIV藥的感染者，將病毒載量、CD4數量以及癥狀結合起來，可以幫助預測未來癥狀的發展，以幫助感染者決定是否開始服藥。目前治療艾滋病尚無安全有效藥物。全球普及使用的核苷類和非核苷類的二十余種抗病毒化學藥或雞尾酒療法(HAART)，只對HIV復制酶(HIV：逆轉錄酶、蛋白酶)有一定抑制作用，但對被HIV感染細胞無作用，即使HIV載量下降，但極易反彈，且其毒性太大及其耐藥性，故療效不佳。由于毒性大，只限于晚期患者使用加上價格昂貴，患者難于接受。因此急需研究出一種天然無毒害、副作用小的藥物，即研究一種既能降低艾滋病患者病毒載量，又能提升T淋巴細胞CD4免疫力的純天然藥物。技術實現要素：本發明的目的是提供一種藥材來源豐富、能夠提高機體免疫功能、無毒副作用的純天然復合制劑，所述復合制劑能夠降低艾滋病患者病毒載量并提升T淋巴細胞CD4免疫力。本發明實現上述目的所采取的技術方案是，一種降低艾滋病患者病毒載量并提升T淋巴細胞CD4免疫力的復合制劑，由以下重量份的原料組成：當歸10-14份、枸杞子12-16份、杏仁6-10份、甘草8-12份、肉蓯蓉7-11份、巴戟天5-9份、洋藿葉13-17份、海參30-40份、鮑魚12-16份、母礪9-13份、海藻20-30份、人參皂甙6-10份、淫羊藿皂甙8-12份。上述復合制劑中，所述的海參為日本刺參、北海道刺參、關西參、大連刺參、俄羅斯紅參、烏棗參、白肛海地瓜、黑海參、白腹海參、紅海參或小梅花參。上述復合制劑中，所述海參包括15-20份母海參，15-20份雄海參，其中母海參提取卵子后主要成分包括酸性黏多糖30-40％、硫酸軟骨素25-35％、蝦青素25-35％、硒元素10-30％；雄海參提取雄性精華細胞后主要成分包括精氨酸25-35％、膠原蛋白65-75％。上述復合制劑中，所述當歸、枸杞子、杏仁、甘草、肉蓯蓉、巴戟天、洋藿葉作為中藥原料，經超臨界萃取得中藥原料粉。上述復合制劑中，所述鮑魚、牡蠣、海藻分別粉碎過篩制成鮑魚粉、牡蠣粉、海藻粉。上述復合制劑中，優選的，由以下重量份的原料組成：當歸12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉蓯蓉9份、巴戟天7份、洋藿葉15份、海參36份、鮑魚14份、牡蠣11份、海藻25份、人參皂甙8份、淫羊藿皂甙10份。上述復合制劑中，優選的，由以下重量份的原料組成：當歸10份、枸杞子12份、杏仁6份、甘草12份、肉蓯蓉11份、巴戟天5份、洋藿葉13份、海參30份、鮑魚16份、牡蠣13份、海藻20份、人參皂甙6份、淫羊藿皂甙12份。上述復合制劑中，優選的，由以下重量份的原料組成：當歸13份、枸杞子16份、杏仁6份、甘草10份、肉蓯蓉10份、巴戟天6份、洋藿葉14份、海參40份、鮑魚12份、牡蠣11份、海藻25份、人參皂甙8份、淫羊藿皂甙10份。上述復合制劑中，所述的制劑為散劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑、軟膠囊、口服液或丸劑。本發明還提供了一種所述的復合制劑在制備抗艾滋病的飲品、藥品、保健品和或食品中的應用。本發明所述的鮑魚、海參、牡蠣、海藻、當歸、枸杞子、杏仁、甘草、肉蓯蓉、巴戟天、洋藿葉均為市售產品。其中牡蠣味甘、咸，性平，牡蠣多糖粗品能有效增加正常小鼠的脾淋巴細胞轉化率，對小鼠遲發型超敏反應(DTH)、自然殺傷細胞(NK)活性、抗體形成細胞活性溶血空斑形成細胞實驗(PEC)、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力、荷瘤小鼠脾細胞活性均起正向調節作用，并增強小鼠紅細胞超氧化歧化酶(SOD)活性。牡蠣醇提取物可使大黃煎劑導致免疫功能低下，小鼠的外周血T細胞總數(ANAE)顯著升高，而水提取物可使外周血淋巴細胞受絲裂原(PHA)刺激后的轉化率顯著升高。海參：甘咸，溫，入心、腎二經，補腎益精，養血潤燥，壯陽療痿。治精血虧損，虛弱勞怯，陽痿，夢遺，小便頻數，腸燥便艱。海參的藥理活性十分廣泛，幾乎涵蓋了當前對人類健康構成威脅的主要病癥，被稱為“百病之克星”。海參含海參粘多糖(酸性粘多糖)、海參皂苷(海參素)、海參多肽、18種氨基酸、海參膠原蛋白、牛磺酸等，還有大量人體所需的硒、鋅、鈣、錳、磷、鐵等微量和常量有益元素。藥理實驗證明，海參能增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能。海藻：性苦、咸，寒。歸肝、胃、腎經。軟堅散結，消痰，利水。天然海藻粉富含海藻多糖、甘露醇、氨基酸、蛋白質、維生素和鉀、鐵、鈣、磷、碘、硒、鈷等微量元素。海藻粉多糖可以與HIV(人獲得性免疫缺陷病毒)結合，使其失活，從而抑制病毒的復制，防治艾滋病。鮑魚：味甘、咸，性平，肉質有彈性。用于肝腎陰虛，骨蒸勞熱，咳嗽；能滋陰清熱，補肝明目等。含有豐富的蛋白質，還有較多的鈣、鐵、碘和維生素A等營養元素。能養陰、平肝、固腎，可調整腎上腺分泌，具有雙向性調節血壓的作用。營養價值極高，富含豐富的球蛋白；鮑魚的肉中還含有一種被稱為“鮑素”的成分，能夠破壞癌細胞必需的代謝物質。本發明具有以下有益效果：(1)藥食同源，藥源豐富。本發明所用藥材為海參、鮑魚、牡蠣、海藻，是藥食兩用資源，藥用歷史悠久，在沿海地區多數可作為新鮮食用；藥材來源豐富，利于推廣。(2)與現有技術相比，本發明所述的復合制劑，提取母海參卵子及雄海參精華細胞，，并將中國傳統中藥——當歸、枸杞子、杏仁、甘草、肉蓯蓉、巴戟天、洋藿葉超臨界提取物加入產品，同時配以使鮑魚粉、牡蠣粉、海藻粉，實現了海洋生物技術與生命健康工程的有機結合。(3)本發明所述的復合制劑含有酸性粘多糖(酸性粘多糖具有修復胰島細胞，提高機體免疫力的功能)、人參皂苷、淫羊藿皂苷等高活性因子，人體可以直接吸收，減少了營養成分的浪費。(4)本發明所述的復合制劑改變了傳統食用鮑魚、海參營養浪費嚴重的問題。(5)本發明的原料來源廣泛，配方簡單，制備方法簡單，且產品質量穩定，利于生產應用。(6)配比合理：通過篩選組方中的種類和具體配比，得到活性成分最豐富、作用最強的復合制劑，各成分相互間起到相輔相成、協同增效的技術效果。(7)本發明經毒性試驗未發現毒副作用，在臨床治療艾滋病中初步試用，反映良好，無明顯毒副作用。具體實施方式下面結合實施例，更具體地說明本發明的內容。應當理解，本發明的實施并不局限于下面的實施例，對本發明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發明保護范圍。在本發明中，若非特指，所有的份、百分比均為重量單位，所有的設備和原料等均可從市場購得或是本行業常用的。下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領域的常規方法。實施例1根據復合制劑配方，稱取當歸12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉蓯蓉9份、巴戟天7份、洋藿葉15份、海參36份、鮑魚14份、牡蠣11份、海藻25份、人參皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，其中母海參18份、雄海參18份，分別提取母海參卵子及雄海參雄性精華細胞，母海參卵子提取物中主要成分包括酸性黏多糖33％、硫酸軟骨素27％、蝦青素26％、硒元素14％；雄海參提取雄性精華細胞后主要成分包括精氨酸29％、膠原蛋白71％；所述當歸、枸杞子、杏仁、甘草、肉蓯蓉、巴戟天、洋藿葉作為中藥原料，經超臨界萃取得中藥原料粉；所述鮑魚、牡蠣、海藻分別粉碎過篩制成鮑魚粉、牡蠣粉、海藻粉。將各原料混合，進一步制備成復合液體制劑。實施例2根據復合制劑配方，稱取當歸10份、枸杞子12份、杏仁6份、甘草12份、肉蓯蓉11份、巴戟天5份、洋藿葉13份、海參30份、鮑魚16份、牡蠣13份、海藻20份、人參皂甙6份、淫羊藿皂甙12份，其中母海參15份、雄海參15份。實施例3根據復合制劑配方，稱取當歸13份、枸杞子16份、杏仁6份、甘草10份、肉蓯蓉10份、巴戟天6份、洋藿葉14份、海參40份、鮑魚12份、牡蠣11份、海藻25份、人參皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，其中母海參20份、雄海參20份。對比例1根據復合制劑配方，稱取海參56份、鮑魚24份、牡蠣21份、海藻35份、人參皂甙18份、淫羊藿皂甙20份，其中母海參28份、雄海參28份，分別提取母海參卵子及雄海參雄性精華細胞，母海參卵子提取物中主要成分包括酸性黏多糖33％、硫酸軟骨素27％、蝦青素26％、硒元素14％；雄海參提取雄性精華細胞后主要成分包括精氨酸29％、膠原蛋白71％；所述鮑魚、牡蠣、海藻分別粉碎過篩制成鮑魚粉、牡蠣粉、海藻粉。將各原料混合，進一步制備成復合液體制劑。對比例2根據復合制劑配方，稱取當歸12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉蓯蓉9份、巴戟天7份、洋藿葉15份、鮑魚34份、牡蠣21份、海藻35份、人參皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，所述當歸、枸杞子、杏仁、甘草、肉蓯蓉、巴戟天、洋藿葉作為中藥原料，經超臨界萃取得中藥原料粉；所述鮑魚、牡蠣、海藻分別粉碎過篩制成鮑魚粉、牡蠣粉、海藻粉。將各原料混合，進一步制備成復合液體制劑。試驗例1急性經口毒性試驗將實施例1中復合制劑以20000mg/kgBW劑量的樣品給予動物灌胃后，未見動物有中毒癥狀，無動物死亡，試驗結束解剖動物，大體觀察未見異常；對小鼠的急性經口毒性劑量大于20000mg/kgBW，急性經口毒性屬無毒。遺傳毒性試驗：三項遺傳毒性試驗(Ames試驗、小鼠骨髓細胞微核試驗、小鼠精子畸形試驗)結果均為陰性。90天喂養試驗：以6000、3000、1500mg/kgBW(分別相當于人體推薦用量200、100、50倍)3個劑量的樣品連續給大鼠灌胃90天，實驗期間動物的生長發育良好，各劑量組的動物體重、增重量、進食量、食物利用率、血常規指標、血生化指標、臟器重量及臟器/體重比值與對照組比較，均無顯著性差異(P>0.05)；大體解剖觀察和組織病理學檢查未見與樣品有關的異常改變。在受試劑量范圍內未見該樣品對大鼠各項觀察指標產生毒副作用。試驗例2臨床試驗資料研究對象：2002年1月-2006年1月確診并首次并發機會感染的60例HIV-1型AIDS患者進行CD4+T淋巴細胞檢測。其中，男39例(65％)，女21例(35％)；年齡21～57歲，平均(35.2±9.2)歲。所有患者經檢測確認為抗HIV-1陽性，且均未接受過抗病毒治療，HIV-1型AIDA患者診斷依據《艾滋病診斷標準》。標本采集：用EDTAK2抗凝血負壓真空采血管采集研究對象的外周靜脈血5～10ml，采血時間均為上午8∶00～10∶00，24h內完成檢測。檢測儀器及試劑儀器：采用FACSCOUNT流式細胞計數儀，Truecount計數管，FACS溶血進行CD4+T細胞計數。CD4+T淋巴細胞檢測方法：參照《全國艾滋病檢測技術規范》和《CD4+T淋巴細胞檢測質量保證指南》儀器操作規程的要求進行。Immuno-Trol質控血同檢測標本一同進行操作，在流式細胞檢測的試管中加20μlCD4熒光標記抗體，然后加入混勻的抗凝血50μl，室溫避光孵育15min。在標本中加入溶血素，室溫避光孵育15min后上機檢測，上機前應用CaliBRITETM磁珠及FACSCompTM軟件校準流式細胞儀，將制備好的樣本上機，使用MultiSETTM軟件獲取及自動分析檢測結果。外周血病毒載量測定方法：取EDTA-K2抗凝全血，2000r/min離心10min分離血漿，置入-76℃冰箱冷凍保存備用，待標本收集完全后，取1100μl血漿，采用Real-timePCR在OBASAmpliPrep/COBASTaqMan全自動病毒載量儀上定量檢測血漿中HIVRNA，擴增的靶核酸位置是HIVgag區，可擴增HIV-1M組的A-H亞型。病毒載量和CD4+T細胞水平測定結果：對60份標本中病毒載量進行檢測(分別采用實施例1、對比例1、對比例2中復合制劑分別施用于20例病例-對患者保密)，其結果見表1。表1楊屯鄉張宇村HIV感染者、AIDS病人CD4檢測結果(部分示例)性別前CD4后CD4張某女57289高某女256415齊某某女183670吳某某女169474李某某男58220王某某男37206劉某某男145251宋某某女2991078王某某女167579王某女150367張某男132596張某某男156488其中表1中為對HIV感染者、AIDS病人CD4檢測效果有改善的部分受試者數據，其服用的藥物為實施例1中的復合制劑；對比例1、對比例2復合制劑的治療效果沒有明顯改善，因此未在數據中列出。上述結果說明實施例1中的復合制劑具有明顯優于對比例1、對比例2復合制劑的效果。下面以幾個典型病例進行說明：齊某某，女，40歲，晚期病人，治療前乏力、消瘦、腹瀉、低熱，CD480-125cell/ul，HIV載量3200cp/ml，服藥2個月癥狀減輕，服藥1年后復查CD4600-680cells/ul，HIV載量100cp/ml，病毒載量明顯減低，CD4T淋巴細胞明顯提升，癥狀也有明顯改善。吳某某，女，46歲，中期病人，倦怠乏力、多汗、或皰疹、口腔黏膜潰瘍不易愈合、皮膚瘙癢、心神不寧，CD4150-210cell/ul，HIV載量2300cp/ml，服藥1個月癥狀減輕，服藥1年后復查CD4400-500cells/ul，HIV載量300cp/ml，病毒載量明顯減低，CD4T淋巴細胞明顯提升，癥狀也有明顯改善。臨床結論：使用本發明的復合制劑后，患者原本表現的倦怠乏力、多汗、或皰疹、口腔黏膜潰瘍不易愈合、皮膚瘙癢、消瘦、腹瀉、心神不寧、煩躁失眠等氣虛陰傷癥狀體征都有明顯的改善。盡管發明人已經對本發明的技術方案做了較為詳細的闡述和列舉，應當理解，對于本領域一個熟練的技術人員來說，對上述實施例做出修改或者采用等同的替代方案，這對本領域的技術人員而言是顯而易見，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。當前第1頁1 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