本發(fā)明涉及水果中有效成分提取的技術(shù)，更加具體地，涉及一種梨成熟果總酚提取方法。
背景技術(shù)：
植物/水果多酚是廣泛存在于植物/水果體內(nèi)的重要次生代謝產(chǎn)物，具有抗氧化、抗腫瘤、保護肝臟等多種生理功能。植物/水果多酚在糧食、蔬菜中含量較少，但在水果及谷物皮層中含量較高。
梨是我國第三大水果，據(jù)古農(nóng)書和古藥典的記載，梨果具有幫助消化、潤肺清心、消痰止咳、退熱、解瘡毒的功能。幾千年來，中醫(yī)一直把梨作為生津、潤燥、清熱和化痰的良藥。梨果特有的這些醫(yī)藥保健功能及易褐變的特點和果實中的多酚等次生代謝物質(zhì)有關(guān)，因此，高效地提取梨果中總酚，是進一步研究其內(nèi)在成分的重要基礎(chǔ)。
為此，本發(fā)明提供了一種梨成熟果總酚提取方法。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在提供一種梨成熟果總酚提取方法，以便高效地提取梨成熟果總酚。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供了一種梨成熟果總酚提取方法，包括以下步驟：
(1)將梨成熟果去皮后切成薄條，用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機粉碎；
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比為1:10-30的比例加入第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣，其中，超聲溫度為30-60℃，超聲時間為5-40min，超聲功率為150W；
(3)用所得濾渣，按照料液比為1:10-30的比例加入第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為30-60℃，超聲時間為5-40min，超聲功率為150W；
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色30-120min后，在765nm波長下測定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述第一提取溶劑采用濃度為80-100％的甲醇，所述第二提取溶劑為乙酸乙酯。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，步驟(2)中，按照料液比為1:15的比例加入第一提取溶劑，其中，超聲溫度為50℃，超聲時間為5min。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，步驟(3)中，按照料液比為1:10的比例加入第二提取溶劑，其中，超聲溫度為40℃，超聲時間為10min。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，步驟(4)中，顯色時間為30min。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，根據(jù)本發(fā)明實施例的梨成熟果總酚提取方法，利用超聲方法，并使用兩種不同的提取溶液提取梨成熟果總酚，使得梨成熟果總酚的提取率顯著提升。
具體實施方式
為使本發(fā)明技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，通過以下幾個具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。顯然，所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
實施例1：
根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄條，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:15的比例加入濃度為100％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾后、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為50℃，超聲時間為5min，超聲功率為150W。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中的濾渣，按照料液比為1:10的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為40℃，超聲時間為10min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑(即，福林酚試劑)和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色30min后，在765nm波長下測定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率為20.7％。
實施例2：
根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄條，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:20的比例加入濃度為90％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為50℃，超聲時間為20min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中濾渣，按照料液比為1:15的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為40℃，超聲時間為30min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色60min后，在765nm波長下測定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率為17.5％。
實施例3：
根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄塊，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:30的比例加入濃度為80％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為60℃，超聲時間為35min，超聲功率為150W。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中的濾渣，按照料液比為1:20的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為50℃，超聲時間為40min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色90min后，在765nm波長下測定吸光度，此時，測量的梨成熟果總酚的提取率為15.8％。
需要說明的是，第一提取溶劑和第二提取溶劑的比例可以是相同的，例如，第一提取溶劑、第二提取溶劑與果肉的料液比均為1:15。
以上所述的具體實施方式，對本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進行了進一步詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的具體實施方式而已，并不用于限定本發(fā)明的保護范圍，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。