本發明屬于醫藥
技術領域：
，具體涉及臭氧化油用于自身免疫疾病和腸易激綜合征治療和與治療自身免疫疾病和和腸易激綜合征藥物的聯合用藥。
背景技術：
：VelioBocci在《臭氧治療學》一書中概述了使用低劑量的臭氧氣體能夠發揮許多有益功能，且無副作用，即臭氧療法（見VelioBocci撰寫的《Oxygen-OzoneTherapy》，北京大學醫學出版社，2004）。臭氧療法可以通過多種給藥途徑來實現，并針對不同疾病產生不同的功效。臭氧化油外用作為抗菌劑、除臭劑用于褥瘡和潰瘍等皮膚病的治療藥物。因此，現已知臭氧具有氧化和抗菌作用。將臭氧化油直接灌胃用于幽門螺旋桿菌引起的胃炎的治療。肌肉或皮下注射臭氧氣體來治療慢性病毒肝炎和血管性疾病。陰道直接通入臭氧氣體能夠治愈炎癥和細菌感染。將臭氧氣體直接與一定體積的血液在體外混合，再回輸給患者被稱為自體血療法，能夠調理人體內環境，降低機體的敏感性和增強機體免疫力。直腸直接吹臭氧氣體能夠改善帕金森病的癥狀（見LambertoRe,MohamedN.Mawsouf,SilviaMenendez,OlgaS.Leon,GregorioM.Sanchez,andFrankHernandez撰寫的《OzoneTherapy:ClinicalandBasicEvidenceofItsTherapeuticPotential》，ArchivesofMedicalResearch，2008,39:17-26）。腹腔給臭氧氣體能夠保護心臟免受急性心肌梗塞的損傷（ClaraDiFilippo,MargheritaLuongo,RaffaeleMarfella,FrancaFerraraccio,BiagioLettieri,AnnalisaCapuano,FrancescoRossi,MicheleD'Amico撰寫的《Oxygen/ozoneprotectstheheartfromacutemyocardialinfarctionthroughlocalincreaseofeNOSactivityandendothelialprogenitorcellsrecruitment》，Naunyn-SchmiedArchPharmacol，2010,382:287–291）。從結構上看，盡管臭氧化油和臭氧氣體（:O-O-O）并不是同一物質，但臭氧化油是通過對油的加成臭氧得到，故在其分子中具有臭氧化物結構，與臭氧氣體的功能相似。以上各種給藥途徑均表明臭氧能夠以氣體的方式直接被機體吸收并發揮功能。臭氧氣體的功能可能通過以下三個途徑來實現：（1）、臭氧在體內通過生物化學反應，生成類似活性氧的物質（羥基自由基OH-、超氧陰離子O2-等），廣泛影響著機體氧化還原系統；（2）、臭氧能夠引起內皮祖細胞聚集和促進一氧化氮（NO）的生成，起到舒張血管的作用；（3）、臭氧能夠誘導骨髓干細胞到血管損傷部位，促進損傷血管修復重建，但具體機制尚不明確。上述給藥途徑存在諸多缺陷：沿途與太多物質接觸，難以保證氣體進入機體的有效濃度。若給予過量極易誘發機體產生不適反應，且操作過程繁瑣，再加上療程較長，患者難以接受。尤其是自體血療法，每周2～3次，連續10周為一療程。本發明以油與臭氧加成的方式，得到臭氧化油，再將此油以腸溶膠囊包裹，能夠克服直接使用臭氧氣體的諸多缺點。既保證臭氧化油不與外界任何物質接觸，在常態下亦可長期穩定保存；還能定量控制臭氧化油進入機體，從而避免通過其它給藥方式給藥，人為造成藥量不當。臭氧化油腸溶膠囊的給藥途徑為直接口服，對機體傷害最小，操作簡單易行，方便攜帶，為其推廣奠定了良好的基礎。在臭氧化油產品中，臭氧化橄欖油、葵花油、大豆油作為抗菌劑、除臭劑用于褥瘡和潰瘍等皮膚病的治療的外用藥品已經上市。但將臭氧化油制成腸溶膠囊的形式通過直接口服的方式進入機體而產生功效，目前尚無報道。在本發明中，通過直接口服臭氧化油腸溶膠囊，腹腔注射、灌腸、灌胃、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射和栓劑的方式，能夠產生藥物作用。技術實現要素：本發明的目的是利用臭氧化油制劑和給藥途徑來預防和治療各種自身免疫疾病，制備簡便、成本低廉。經臨床應用驗證，本發明具有療效顯著，口服劑量低，無毒副作用，有效率高等優點。在本發明中，之所以選擇權利要求1、2所述的各種油中的一種、兩種和兩種以上，是因為這些油不飽和脂肪酸含量較高，其中核桃油的不飽和脂肪酸高達92%以上，在不飽和脂肪酸結構中至少有一個烯烴類雙鍵。若將權利要求1、2中的一種、兩種和兩種以上含不飽和脂肪酸高的油與權利要求3～7中的一種、兩種和兩種以上的表面活性劑混合，亦能與臭氧發生加成反應。可見只要加成物的結構中存在烯烴不飽和鍵即可與臭氧發生加成反應，不飽和鍵數目越多，反應越容易發生，且與臭氧加成的量越多，加成物能夠攜帶臭氧分子的數目也越多。為達到上述目的，本發明采用的技術方案將結合下面的制作流程和實施方式進行簡單的說明。1、制備臭氧氣體。2、制備臭氧化油。3、制備臭氧化橄欖油腸溶膠囊。4、制備含表面活性劑的臭氧化油。5、制備含表面活性劑的臭氧化油腸溶膠囊。6、臭氧化橄欖油膠囊對紅斑狼瘡的治療實驗。7、臭氧化橄欖油膠囊對類風濕關節炎的治療實驗。8、臭氧化橄欖油對多發性硬化癥的治療實驗9、臭氧化橄欖油對炎性腸病的治療實驗10、臭氧化橄欖油對腸易激綜合征的治療實驗。具體實施方式以下結合實施例對本發明的具體實施方式作詳細說明。實施例1臭氧化橄欖油腸溶膠囊制備1、制備臭氧氣體。本發明采用醫用氧氣通過臭氧發生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術有限責任公司設計生產的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油和臭氧化油腸溶膠囊整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發生熱解反應。3、橄欖油3kg置入反應釜中；臭氧以150m3/h流速加入，總反應時間為20小時。反應結束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩定保存十個月。5、制備臭氧化橄欖油腸溶膠囊。（1）、囊材的制備:按重量比3：3：1：1的比例稱取水、明膠、甘油和糯米粉或淀粉倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成75℃，在溫度到達60℃的時候開始加水，加水10分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為2小時，攪拌后溫度設定為60℃，靜置脫氣泡8小時。（2）、采用壓制法制備臭氧化橄欖油腸溶膠囊，容量0.25mL。室溫22℃制膠囊，膠皮厚度為0.7mm，容量為0.25mL，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻8小時，出籠，干燥即得臭氧化橄欖油腸溶膠囊，于4℃避光冷藏備用。實施例2臭氧化橄欖油、大豆油和花生油混合油的腸溶膠囊制備1、制備臭氧氣體。本發明采用醫用氧氣通過臭氧發生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術有限責任公司設計生產的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油和臭氧化油腸溶膠囊整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發生熱解反應。3、橄欖油1kg，大豆油1kg和花生油1kg置入反應釜中；臭氧以150m3/h流速加入，總反應時間為20小時。反應結束后，余氣滅活。4、得到臭氧化混合油濃度為40mg/L，25℃可穩定保存十個月。5、制備臭氧化混合油腸溶膠囊。（1）、囊材的制備:按重量比3：3：1：1的比例稱取水、明膠、甘油和糯米粉或淀粉倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成75℃，在溫度到達60℃的時候開始加水，加水10分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為2小時，攪拌后溫度設定為60℃，靜置脫氣泡8小時。（2）、采用壓制法制備臭氧化混合油腸溶膠囊，容量0.25mL。室溫22℃制膠囊，膠皮厚度為0.7mm，容量為0.25mL，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻8小時，出籠，干燥即得臭氧化混合油腸溶膠囊，于4℃避光冷藏備用。實施例3含表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊制備1、制備臭氧氣體。本發明采用醫用氧氣通過臭氧發生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術有限責任公司設計生產的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油和臭氧化油腸溶膠囊整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發生熱解反應。3、橄欖油3kg置入反應釜中，緩慢加入失水山梨醇單油酸酯聚氧乙烯醚（吐溫80）20mL，混勻，臭氧以150m3/h流速加入，總反應時間為20小時。反應結束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩定保存十個月。5、制備含表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊。（1）、囊材的制備:按重量比3：3：1：1的比例稱取水、明膠、甘油和糯米粉或淀粉倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成75℃，在溫度到達60℃的時候開始加水，加水10分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為2小時，攪拌后溫度設定為60℃，靜置脫氣泡8小時。（2）、采用壓制法制備臭氧化橄欖油腸溶膠囊，容量0.25mL。室溫22℃制膠囊，膠皮厚度為0.7mm，容量為0.25mL，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻8小時，出籠，干燥即得含表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊，于4℃避光冷藏備用。實施例4含表面活性劑和助表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊制備1、制備臭氧氣體。本發明采用醫用氧氣通過臭氧發生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術有限責任公司設計生產的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油和臭氧化油腸溶膠囊整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發生熱解反應。3、橄欖油3kg置入反應釜中，緩慢加入失水山梨醇單油酸酯聚氧乙烯醚（吐溫80）20mL和純乙醇20mL，混勻，臭氧以150m3/h流速加入，總反應時間為20小時。反應結束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩定保存十個月。5、制備含表面活性劑和助表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊。（1）、囊材的制備:按重量比3：3：1：1的比例稱取水、明膠、甘油和糯米粉或淀粉倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成75℃，在溫度到達60℃的時候開始加水，加水10分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為2小時，攪拌后溫度設定為60℃，靜置脫氣泡8小時。（2）、采用壓制法制備臭氧化橄欖油腸溶膠囊，容量0.25mL。室溫22℃制膠囊，膠皮厚度為0.7mm，容量為0.25mL，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻8小時，出籠，干燥即得含表面活性劑和助表面活性劑的臭氧化橄欖油腸溶膠囊，于4℃避光冷藏備用。實施例5臭氧化橄欖油膠囊對紅斑狼瘡的治療實驗臨床資料一、患者一般資料患者均來自醫院2011年1月一2015年12月收治紅斑狼瘡患者，共100例。均符合紅斑狼瘡診斷標準。隨機將患者分成2組:對照組和治療組，治療組55例，對照組45例。二、診斷標準:1、蝶形紅斑：顴部或隆或平的固定紅斑可及鼻梁眉毛，狀如蝴蝶，鼻唇溝部無皮損；2、盤狀紅斑：紅色隆起斑片，表面附有鱗屑，病程久者可見癱痕；3、有光敏史或檢查發現對光異常反應所致皮疹；4、口腔或鼻咽部有潰瘍，常無痛感；5、可累及兩個或更多的周圍關節觸痛、腫脹或積液；6、免疫學檢查：紅斑狼瘡細胞陽性，或抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)滴度異常，或有抗Sm抗體，或梅毒血清學反應假陽性。治療方法對照組：采用①抗瘧藥②沙利度胺③泛發病例可口服小劑量激素等紅斑狼瘡常規西醫治療作為對照組治療方案。治療組：本發明實施例1制備的臭氧化橄欖油膠囊，每日注射1次0.25mL，空腹服用，每個療程共90日。三、觀察指標每日觀察患者體溫，呼吸頻率，心率及其他癥狀和體征的變化;入院當天及第90天，檢查血常規、尿常規，電解質，肝、腎功能，心電圖，血漿CRP與PCT。CRP采用速率散射濁度法測定，正常值0-8mg/L；PCT采用免疫熒光分析法測定，正常值<0.5ng/ml。同時可根據病情變化的需要隨時增加復查以上理化檢查。四、療效標準:1、治愈:癥狀及體征消失，實驗室檢查恢復正常;2、好轉:癥狀及體征大部消失或減輕，實驗室指標有所恢復;3、未愈:癥狀及體征及實驗室檢查無改善。治療效果:該臨床觀察病例中，服藥1-4個療程，治療組治愈30例，好轉20例，未愈5例。對照組好轉35例，未愈10例。治療期間未發生毒副作用。五、典型病例:病例1：高某某，男，48歲。自述無明顯誘因出現面部紅斑，無瘙癢及疼痛，伴有全身多關節疼痛及活動受限，四肢皮膚散在紅色皮損，局部破潰。診斷為:紅斑狼瘡。給予地塞米松及吸氧治療后癥狀稍有緩解，但停藥后反復發作。服用本發明的臭氧化橄欖油膠囊藥劑2個療程后，自覺皮疹逐漸消退，關節疼痛感減輕，活動后好轉。繼續服用2個療程，皮疹癥狀消失，關節活動自如，治愈。病例2：裴某某，女，56歲。自述初起時面部出現紅斑，經日曬后加重，伴發熱、關節疼痛兩年。日曬后癥狀較前加重，直至面部紅斑呈現蝶狀、紅褐色，全身關節疼痛明顯加重，且乏力。診斷為:紅斑狼瘡。服用本發明的臭氧化橄欖油膠囊藥劑2個療程，疼痛感顯著減輕，精神、睡眠好，飲食及二便正常;續服1個療程后，各癥狀消失，治愈。從此處可以看出，本發明臭氧化橄欖油膠囊可有效地改善患者癥狀，提高治療紅斑狼瘡的有效率。實施例6臭氧化橄欖油膠囊對類風濕關節炎的治療實驗下面結合臨床實驗數據說明本發明的有益效果：1、一般資料發明人2013年1月-2015年12月間共收集類風濕關節炎患者100例，年齡33-55歲，男性40例，女性60例。病程6個月-5年。診斷標準:按照2009年美國風濕病學會（ACR）修訂的RA診斷標準:（1）晨僵時間≥60min/d;(2)≥3個關節腫;（3）腕、掌指關節、近端指間關節腫;（4）對稱性關節腫;以上4項至少6周;(5)類風濕結節;(6)手X線片改變;(7)類風濕因子(rheumatoidfactor,RF)陽性。具備上述7項中4項或4項以上，即可診斷。符合上述診斷標準，年齡大于18歲的患者。2、試驗方法所有患者口服本發明按照實施例1制得的臭氧化橄欖油膠囊，每日1次，空腹服用。療程12周。3、療效標準與治療結果3.1療效標準按照《類風濕關節炎病診斷及療效評定標準》進行判定。①顯效：臨床癥狀、體征及實驗室檢查指標顯著改善，DAS-28評分改善>50%;②有效：臨床癥狀、體征及實驗室檢查指標改善，DAS-28評分改善>30%，但≤50%;③無效：臨床癥狀、體征及實驗室檢查指標改善<30%，甚至增加。3.2治療結果100例患者顯效例68，有效28例，無效4例，總有效率96%。治療期間2例出現輕度腹瀉，未見其他明顯不良反應。可見本發明用于治療類風濕關節炎安全有效，具有推廣應用的價值。實施例7臭氧化橄欖油對多發性硬化癥的治療實驗本發明旨在提供一種用于治療多發性硬化癥的藥物，通過選擇合適的藥材及其配比，達到安全有效治愈多發性硬化癥的目的。為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：下面結合臨床實驗數據說明本發明的有益效果：1、一般資料發明人2013年1月-2015年12月間共收集多發性硬化癥患者80例，隨機分為治療組40例與對照組40例，治療組男10例，女30例，年齡27-59歲，病程12-25個月;對照組男9例，女31例，年齡24-56歲，病程6-22個月。2組性別、年齡及病程比較差異無統計學意義，具有可比性。診斷標準依據全國多發性硬化癥臨床專業會議的診斷標準：①臨床癥狀:肢體無力、視力障礙、二便障礙、感覺障礙、行走不穩、肢體疼痛、頭暈、抽搐、耳聾耳鳴等；②神經功能體征；③MS神經功能障礙評分采用Kurtzke的EDSS評分標準對不同治療組治療前后患者的錐體、小腦、腦干、感覺、膀肌及直腸、大腦6項神經功能進行EDSS評分；④誘發電位；⑤核磁共振((MRI)；⑥腦脊液免疫球蛋白G(IgG)和寡克隆區帶；⑦復發次數。2、試驗方法2.1治療方法治療組口服本發明按照具體實施例1制得的臭氧化橄欖油膠囊劑，每日1次空腹服用。療程3個月。對照組口服強的松10mg口服，3次/日;醋酸潑尼松片60mg/d，連服20d，然后遞減至停藥。療程3個月。3、療效標準與治療結果3.1療效標準采用記分法。臨床癥狀包括肢體無力、肢體麻木、視力障礙、二便障礙、肢體痙攣疼痛、頭暈、復視、Lhermitte征、肢冷等。根據各癥狀的輕、中、重程度分別記為1,2,3分。公式為[(治療前積分-治療后積分)-治療前積分]X100。臨床治愈:療效指數>85%。顯效:療效指數50%-85%。有效:療效指數20%-50%。無效:療效指數<20%。治療結果見表1表1兩組療效比較可見，本發明制得的藥物能夠安全有效治療多發性硬化癥，具有推廣價值。實施例8臭氧化橄欖油對炎性腸病的治療實驗下面結合臨床實驗數據說明本發明的有益效果：1、一般資料發明人2011年2月-2014年12月間共收集90例輕、中度潰瘍性結腸炎患者，年齡22-65歲。隨機分為：治療組50例，柳氮磺吡啶(SASP)對照組40例。兩組年齡、病情等資料無顯著性差異，具有可比性。2、試驗方法2.1治療組口服本發明按照具體實施例1制得的臭氧化橄欖油膠囊，早一次，1次1粒空腹服用。療程12周。對照組口服柳氮磺吡啶腸溶片，劑量為1克，每日4次。療程12周。3、療效標準與治療結果3.1療效評定:治愈:患者臨床癥狀完全消失，內鏡或組織學檢查正常；顯效：膿血便消失，潰瘍基本消失，炎癥明顯好轉；有效：膿血便消失，潰瘍雖未完全消失，但范圍縮小，充血水腫減輕；無效：用藥前后無明顯變化。3.2治療統計結果見表1表1兩組療效比較組別n治愈顯效有效無效總有效率嚴重不良反應例治療組50201512394%0對照組4091115587.5%3可見，本發明制得的藥物能夠安全有效治療炎性腸病。實施例9臭氧化橄欖油對腸易激綜合征的治療實驗以下將通過實驗例對本發明所述的藥物組合物對腸易激綜合征的療效進行說明。1、診斷標準腸易激綜合征(IBS)是一種以腹痛或者腹部不適伴排便為特征的功能性疾病，其診斷標準采用羅馬II標準，如下：過去12個月內至少累計12周(不必是連續的)腹痛或腹部不適，并伴有下列癥狀3項中的2項：①腹痛或腹部不適在排便后緩解；②腹痛或腹部不適發生伴隨次數改變;③腹痛或腹部不適發生伴隨糞便性狀改變。在排除可以引起上述癥狀的器質性病變后，可建立IBS的診斷。下列癥狀并非IBS所必須，但屬IBS的常見癥狀。癥狀越多IBS的診斷越可靠，對這些癥狀的詳細了解并有助于IBS的分型。這些癥狀包括：①排便頻率異常(每天排便>3次或每周<3次)；②糞便性狀異常(塊狀硬便或稀便水樣便)；③排便過程異常(費力、急迫感、排便不凈感)；液便:⑤胃腸脹氣或腹部膨脹感。2、臨床實驗資料本次實驗收入符合入組標準的病例100例，其中男性48例，女性52例，年齡在20-65歲之間，隨機分為對照組和治療組各50例。治療組使用本發明所述的臭氧化橄欖油膠囊來自于實施例1中的制備，空腹口服，每日1次1粒。對照組采用莫沙必利5mg，口服，每日3次。10天為一療程，連續服用2個療程。療效判定：痊愈：腹痛、腹脹癥狀消失，排便正常，排便間隔在48h內，大便性狀正常；顯效：腹痛、腹脹癥狀大部分消失，排便基本正常，排便間隔在72h內，大便性狀基本正常；有效：大便干結，腹痛、腹脹癥狀改善；無效：便秘及腹痛、腹脹癥狀均無改善；總有效率=(痊愈例數+顯效例數+有效例數)/總例數X100%。3、試驗結果上述病例使用本發明所述的臭氧化橄欖油膠囊后，未見復發病例，實驗結果如表1所示：表1兩組療效比較組別n治愈顯效有效無效總有效率治療組50201511492%對照組50511151962%由表1中的數據可以得到，使用本發明所述的臭氧化橄欖油膠囊來治療腸易激綜合征，總有效率能達到92%，其效果也遠遠高于使用莫沙必利來治療腸易激綜合征的效果。以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，并非是對本發明作其它形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。當前第1頁1 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