本發明涉及一種中藥提取物相關的藥物組合物，具體地說，是一種抗白念珠菌耐藥菌株的人參莖葉皂苷和氟康唑的組合物及其應用。
背景技術：
念珠菌是一種臨床上重要的致病真菌，念珠菌致病病譜很廣，可引起皮膚、粘膜及內臟系統的感染。近年來，由于腫瘤、AIDS患者的增多，念珠菌感染的發病率呈上升趨勢。在美國的一項調查中，發現念珠菌引起的院內感染居第四位。白念珠菌是引起臨床上深部真菌感染常見的病原菌，約占80％以上。傳統的抗真菌藥物臨床治愈率較低、容易出現耐藥、部分藥物不良反應明顯。具國家統計局數字顯示，全國藥品消費每年約3000億元，醫保每年支出費用在800億元左右，其中藥品占500億元。因此如何開發高效低毒的抗真菌藥物是近年來研究熱點問題。而我國中醫中藥對真菌感染的治療歷史悠久，積累了豐富經驗，大量中草藥抗真菌作用的研究表明，從傳統藥物中開發新藥有廣闊的前景。因此如何發揮中醫特色優勢，充分挖掘寶貴的中草藥資源，部分替代西藥，從而減少西藥用量，降低西藥毒副作用和耐藥性產生是抗真菌病治療的一個發展方向。
氟康唑是一種干擾真菌細胞膜脂質合成的抗真菌藥物，但容易產生耐藥性而使得療效大為降低，且由于真菌細胞與人類宿主細胞的細胞膜成分相似或具有很多共同的代謝特征，在使用氟康唑抗真菌的同時，對人類機體細胞有一定程度的毒副作用。而目前關于氟康唑與中藥聯用抗真菌，尤其是氟康唑聯合人參莖葉皂苷以降低其毒副作用和耐藥性產生的相關研究還未見報道。
技術實現要素：
本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種抗白念珠菌耐藥菌株的人參莖葉皂苷和氟康唑的組合物。
本發明的再一的目的是，提供所述的組合物的用途。
本發明的另一的目的是，提供一種藥物組合物。
為實現上述第一個目的，本發明采取的技術方案是：
一種抗白念珠菌耐藥菌株的人參莖葉皂苷和氟康唑的組合物，所述的組合物由氟康唑和人參莖葉皂苷組成，所述的氟康唑和人參莖葉皂苷的重量比為1:(0.25-8)。
優選地，所述的氟康唑和人參莖葉皂苷的重量比為1:1。
為實現上述第二個目的，本發明采取的技術方案是：
如上任一所述的組合物在制備抗真菌的藥物中的應用。
如上任一所述的組合物在制備抗白念珠菌的藥物中的應用。
如上任一所述的組合物在制備抗白念珠菌耐藥菌株的藥物中的應用。
為實現上述第三個目的，本發明采取的技術方案是：
一種藥物組合物，它含有如上任一所述的組合物，以及常規藥用載體。
本發明優點在于：
本申請發明人從眾多已知的中藥提取物中選擇人參莖葉皂苷，從眾多已知的抗真菌西藥中選擇氟康唑，通過國際上公認的CLSIM27-A3方案用人參莖葉皂苷聯合氟康唑對臨床分離的19株氟康唑耐藥的白念珠菌進行體外藥敏實驗，意外的發現二者聯合用藥對耐藥的白念珠菌具有顯著的協同抗菌作用，尤其當二者濃度比例為1:1時的協同抗菌作用最為顯著。如此不僅可使用人參莖葉皂苷部分替代氟康唑以減少氟康唑用量和降低氟康唑毒副作用及耐藥性產生，還顯著增強了抗真菌效果，在臨床上具備廣闊的應用前景。
具體實施方式
下面對本發明提供的具體實施方式作詳細說明。
實施例1
1實驗材料
1.1菌株來源
19株念珠菌臨床分離株來自于上海市同濟醫院皮膚科真菌室，分別為痰液(7株)、陰道分泌物(5株)、糞便(4株)、尿液(3株)。藥物敏感質控菌株為CLSI(the Clinical and Laboratory Standards Institute)規定的近平滑念珠菌ATCC22019和克柔念珠菌ATCC6258。
1.2主要試劑和儀器
二甲基亞砜(美國Amerseo公司)，RPMI 1640粉末(美國Gibco公司)，沙氏培養基原料(國藥集團化學試劑有限公司上海分公司)，電子分析天平(瑞士MettlerT01edo公司)，電熱恒溫培養箱(上海精宏實驗設備有限公司)，生物安全柜(力康生物科技有限公司)。
1.3受試藥物
氟康唑(FLC)粉(含量99.9％)購自上海三維制藥有限公司，人參莖葉皂甙購自中國藥品生物制品檢定所，說明書編號1553。
2方法
按照CLSI推薦的微量液基稀釋法(M27-A3)方案實施。
2.1藥物儲存液的制備
水溶性的氟康唑溶于滅菌雙蒸水，人參莖葉皂甙溶于二甲基亞砜，制備成藥物儲存液。
2.2藥敏反應板的制備
將藥物母液用RPMI 1640液體培養基進行10級倍比稀釋，氟康唑的藥物終濃度范圍為64-0.125μg/ml，人參莖葉皂苷的終濃度范圍為：256-0.5μg/ml。藥敏板于每排1～10孔分別加倍比濃度藥液100μ1(聯用藥敏板則分別加兩種藥物各50μl)，第11孔加100μl液體培養基為生長對照，第12孔加200μl液體培養基為空白對照。每次配制藥敏板時均制備塊質控菌藥敏板。
2.3菌懸液的配制
將受試菌株接種于SDA上，35℃培養24h或48h后用3ml生理鹽水制成菌懸液，用麥氏比濁管調整為0.5個麥氏單位，將懸液于血細胞計數板上計數調整為1×106～5×106CFU/ml，然后用RPMI 1640培養基將菌懸液濃度稀釋為1×103～5×l03CFU/ml(稀釋1000倍)(2倍工作濃度)。
2.4菌懸液的接種
將冷凍的藥敏板按4℃、室溫各1h的融化程序融化后置超凈工作臺上，用移液器加菌懸液后放置35℃恒溫箱培養。
2.5溫育和終點判定
接種后的藥物敏感測試板置于35℃恒溫培養箱中培養24h和48h，采用視覺法判定終點。藥物敏感終點判讀參照國際上M27-A3方案中對微量液體培養基稀釋法的標準，唑類藥物以80％抑制作為觀察終點，判斷最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)。人參莖葉皂苷的結果判斷參照唑類藥物進行。
2.6聯合用藥的效果評價
部分抑菌濃度指數(fractional inhibitory concentration index，FICI)是評價聯合用藥的兩藥相互作用方式的主要參數。抑菌濃度分數(FIC)為每一種藥物聯合抑菌時所需MIC與單用時MIC的比值，而FIC指數(FICI)則等于兩種藥物FIC之和。當MIC值高于檢測最高限時以最高限濃度的兩倍值用以計算FICI。當FICI≤0.5時，兩藥的相互作用確定為協同作用；0.5<FICI≤4時為無關作用；當FICI>4時兩藥產生拮抗作用。
2.7統計分析
采用SPSS 17.0分析處理數據。將各藥單用和聯用時的兩組MIC值轉換為對數后進行t檢驗，P<0.05時方認為有統計學差異。
3結果與分析
表1的實驗結果顯示氟康唑和人參莖葉皂苷聯合用藥時的MIC值明顯低于二者單獨用藥的MIC值。通過FICI值的計算可以看出，這19株白念珠菌氟康唑耐藥菌株通過氟康唑和人參莖葉皂苷聯合用藥后FICI均<0.5，表明二者聯用對實驗的耐藥菌株具有顯著的協同抗菌作用。且從表1中數據可以看出，當氟康唑和人參莖葉皂苷濃度比例為1:1時，協同抗菌作用最為顯著。
表1氟康唑和人參莖葉皂苷單獨和聯合使用的MIC值及二者的相互作用
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員，在不脫離本發明方法的前提下，還可以做出若干改進和補充，這些改進和補充也應視為本發明的保護范圍。