梔子有效部位或有效成分在制備治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或保健食品中的應用的制作方法

文檔序號：11090774閱讀：1835來源：國知局

梔子有效部位或有效成分在制備治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或保健食品中的應用的制造方法與工藝

本發明涉及梔子果實有效部位或有效成分在制備治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中的應用，屬于中醫藥制備技術領域。

背景技術：

阿爾茨海默病(Alzheimer's Disease，AD)是一種神經系統退行性疾病，老年人發病率較高，臨床主要表現為記憶力減退、定向障礙和判斷推理能力受損等。現在比較公認AD(即老年期癡呆)的分類包括老年性癡呆、血管性癡呆和混合性癡呆。老年斑是AD的主要病理標志，其中Aβ聚集是中心環節，也是AD發病的關鍵性因素和關鍵性治療靶點，干擾Aβ的產生和阻止其聚集是防治AD的有效途徑，開發抑制Aβ纖絲形成和聚集的新藥對預防和對癥治療AD具有良好的學術與臨床應用價值。

本發明從動物因素誘發性與AD臨床病因病機相結合的異質性及多因性出發，將腦衰老及血管危險因子(高血壓、動脈粥樣硬化和短暫性腦缺血等)導致的腦低灌注和AD腦病理病變相結合，利用腹腔注射半乳糖促老化與反復結扎雙側頸總動脈致腦低灌注及鼠腦室一次性注射β淀粉樣蛋白制作異質性及多因性阿爾茨海默病(Heterogeneitys/Multi‐factors'Alzheimer Disease，H/MAD)模型或記憶力減退模型。研究證實梔子果實總提物上大孔吸附樹脂的30％或60％乙醇洗脫部位為治療異質性及多因性阿爾茨海默病的有效部位或輔助改善記憶功效，從其梔子果實30％或60％乙醇洗脫有效部位中分離鑒定100多個化合物，應用Aβ_25-35損傷的PC12細胞模型對分離得到的梔子有效部位中的單體化合物進行活性篩選，其中梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中的單萜苷類單體化合物具有抑制Aβ纖絲形成和阻止其聚集的生物活性，另外梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的單萜類苷元、二萜苷類、環烯醚萜苯丙素苷類和黃酮類成分單體化合物具有抑制Aβ纖絲形成和阻止其聚集的生物活性。上述有效部位或有效成分因擁有共同的環烯醚萜類苷元、單環單萜類苷元、黃酮類苷元等相同或相似母核結構單元，而具有類似的治療阿爾茨海默病或輔助改善記憶的功效。上述研究還沒有報道，我們通過系統的體內外實驗研究，首先發現梔子果實有效部位或有效成分對由衰老、睡眠障礙、心腦血管疾病(心臟病、高血壓、動脈粥樣硬化和短暫性腦缺血發作等)、神經系統疾病等導致的淀粉樣蛋白Aβ沉積或Aβ纖絲聚集形成的阿爾茨海默病疾病或記憶障礙或記憶力減退具有良好的治療作用或輔助治療功效。

技術實現要素：

梔子果實有效部位或有效成分在制備治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中的應用。

本發明采用了下述技術方案。

梔子果實有效部位或有效成分的制備方法：將梔子干燥果實粉碎成粗粉，用70％乙醇浸泡1‐2小時，4‐10倍量溶劑加熱回流提取2‐4次，每次1‐3小時，過濾，合并濾液。上述濾液與45‐80℃減壓濃縮至0.8‐1.2g生藥材/ml，0‐4℃冷藏過夜，析膠，過濾，濾液直接上大孔吸附樹脂AB‐8型或D‐101型或HPD‐400或各種型號大孔吸附樹脂富集，依次用水、30％乙醇、60％乙醇、95％乙醇洗脫，得到各洗脫部位，主要收集30％和60％乙醇水洗脫部位，再將30％乙醇水洗脫物經聚酰胺柱色譜純化得總單萜類化合物(總含量大于90％)，并將該部位繼續分離得到單體京尼平苷(含量98％)。各洗脫部位在45‐65℃減壓回收溶劑至乙醇適量濃度，用冷凍干燥法或噴霧干燥進行干燥，收集凍干粉或噴霧干燥粉，即得。

梔子果實30％乙醇水洗脫有效部位中單萜苷類有效成分京尼平苷、去乙酰車葉草苷酸甲酯、gardaloside、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯、梔子苷、ajugol、genipin-1-β-gentiobiside、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside、gardoside methyl ester、shanzhiside、Lamalbidicacid、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid、4-carboxyl-catapol acid、Mussaenosidic acid、geniposidic acid、6-hydroxymethy-jasminoside D、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranoside、jasminoside A、epijasminoside A、jasminoside B、jasminoside E、jasminoside G、jasminoside I的制備方法：將權利要求1-10所得梔子果實30％乙醇水洗脫有效部位上硅膠柱，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇或二氯甲烷：甲醇或三氯甲烷：甲醇：水或二氯甲烷：甲醇：水梯度洗脫，以上述梔子果實30％乙醇水洗脫有效部位中單萜苷類的相應化合物單體作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于45‐65℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水或適當溶劑混懸或溶解，上反相硅膠ODS‐C18柱色譜或SephadexLH‐20柱色譜或制備高效液相色譜技術分離純化，流動相為甲醇水5-100％或乙腈水5-100％的等度或梯度洗脫，洗脫液用冷凍干燥法或噴霧干燥進行干燥，收集凍干粉或噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。

梔子60％乙醇洗脫有效部位中單萜類苷元成分jasminoside C aglycone、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dime-thyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclo-hex-3-enone、iridoids 2a、iridoids 2b、jasminodiol、crocusatin-C、7-Epi-crocusatin-C、(10S,11S)-Gardendiol、(10R,11R)-Gardendiol)、(5S,9S)-Gardenate A、(5R,9R)-Gardenate A、5,6-dihydroxymethyl-1,1-dimethylcyclohex-4-enone)、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyrancyclopenta-4-carbaldehyde或環烯醚萜苯丙素苷類成分5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A、6′-O-sinapoyljasminoside B、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E、6″-O-trans-sina-poylgenipin gentiobioside、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosyl-genipin、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin、4″-O-[(E)-p-coumar-oyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-cinnam-oyl]-gentiobiosylgenipin或黃酮類成分5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone或二萜類成分crocin-I、crocin-II的制備方法：將權利要求1-10所得梔子果實60％乙醇水洗脫有效部位上硅膠柱，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇或二氯甲烷：甲醇或三氯甲烷：甲醇：水或二氯甲烷：甲醇：水梯度洗脫，以上述梔子果實60％乙醇水洗脫有效部位中單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分的相應化合物單體作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于45‐65℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水或適當溶劑混懸或溶解，上反相硅膠ODS‐C18柱色譜或SephadexLH‐20柱色譜或制備高效液相色譜技術分離純化，流動相為甲醇水5-100％或乙腈水5-100％的等度或梯度洗脫，洗脫液用冷凍干燥法或噴霧干燥進行干燥，收集凍干粉或噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。

前述方法制備的梔子果實有效部位中有效成分為京尼平苷、去乙酰車葉草苷酸甲酯、gardaloside、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯、梔子苷、ajugol、genipin-1-β-gentiobiside、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyrano-side、gardoside methyl ester、shanzhiside、Lamalbidicacid、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid、4-carboxyl-catapol acid、Mussaenosidic acid、geniposidic acid、6-hydroxymethy-jasminoside D、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyrano- side、jasminoside A、epijasminoside A、jasminoside B、jasminoside E、jasminoside G、jasminoside I、jasminoside C aglycone、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclo-hexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-formaldehyde、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone、iridoids 2a、iridoids 2b、jasminodiol、crocusatin-C、7-Epi-crocusatin-C、(10S,11S)-Gardendiol、(10R,11R)-Gardendiol)、(5S,9S)-Gardenate A、(5R,9R)-Gardenate A、5,6-dihydroxy-methyl-1,1-dimethylcyclohex-4-enone)、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyrancyclopenta-4-carbaldehyde、5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A、6′-O-sinapoyljasminoside B、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E、6″-O-trans-sina-poylgenipin gentiobioside、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosyl-genipin、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-ferul-oyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin、5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone、crocin-I、crocin-II中的一種或多種可用于制備治療阿爾茨海默病的藥物或輔助改善記憶功能保健食品，所述藥物包括口服液、膠囊、片劑、泡騰片、注射劑或各種已知劑型制劑或可接受劑型制劑，所述藥物還包括各種單方和復方制劑，各種已知或各種可接受輔助改善記憶功能類型保健食品。所涉及的阿爾茨海默病或記憶力減退是由衰老、睡眠障礙、心腦血管疾病(心臟病、高血壓、動脈粥樣硬化和短暫性腦缺血發作等)、精神系統疾病導致的淀粉樣蛋白Aβ沉積或Aβ纖絲聚集形成的阿爾茨海默病疾病或記憶障礙或記憶力減退中的任意一種。

本發明的優點是：提供了梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中有效部位或有效成分的提取與制備方法，所得有效部位或有效成分可用于制備治療異質性及多因性阿爾茨海默病或輔助改善記憶功能保健食品及其在制備各類應用藥物的口服液、膠囊、片劑、泡騰片、粉針劑、水針劑、注射劑或各種已知劑型制劑或各種可接受劑型制劑的原料藥。

梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中的有效部位或有效成分在體內外對由衰老、睡眠障礙、心腦血管疾病(心臟病、高血壓、動脈粥樣硬化和短暫性腦缺血發作等)、精神系統疾病導致的淀粉樣蛋白Aβ沉積或Aβ纖絲聚集形成的阿爾茨海默病或記憶障礙或記憶力減退具有良好的治療作用和較強的生物活性或輔助治療功效。

梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中的有效部位或有效成分的制備方法主要通過從天然藥物中提取，為純天然組分與單體，具有良好的生物相容性。其中，有效成分6-hydroxymethy-jasminoside D、jasminoside C aglycone(1，1-dimethyl-5-hydroxy-methyl-6-vinyl-cyclohex-3-enone)、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxy-ethyl-cyclohex-3-enone、5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A、6′-O-sinapoyljasm-inoside B、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E為新化合物。

附圖說明

圖1為不同濃度的單萜苷類單體化合物Z1～Z8對受損的PC12細胞的保護作用。

圖2為不同濃度的單萜苷類單體化合物Z9～Z16對受損的PC12細胞的保護作用。

圖3為不同濃度的單萜苷類單體化合物Z17～Z24對受損的PC12細胞的保護作用。

圖4為不同濃度的單萜類苷元單體化合物Z25～Z30對受損的PC12細胞的保護作用。

圖5為不同濃度的單萜類苷元單體化合物Z31～Z38對受損的PC12細胞的保護作用。

圖6為不同濃度的環烯醚萜類苯丙素苷單體化合物Z39～Z48對受損的PC12細胞的保護作用。

圖7為不同濃度的黃酮類單體化合物Z49～Z57對受損的PC12細胞的保護作用。

圖8為不同濃度的藏紅花素二萜類單體化合物Z58～Z59對受損的PC12細胞的保護作用。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步描述：

實施例1

梔子果實藥材提取物及30％或60％乙醇洗脫部位的制備方法：梔子果實藥材粉碎成粗粉，用70％乙醇浸泡1小時，10倍量溶劑加熱回流提取3次，每次2小時，過濾，合并濾液。上述濾液于50℃減壓濃縮至1.0g生藥材/ml，0-4℃冷藏過夜，析膠，過濾，濾液上AB-8型號大孔吸附樹脂富集，依次用水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇洗脫，得到各洗脫部位，主要收集30％和60％乙醇水洗脫部位，再將30％乙醇水洗脫物經聚酰胺柱色譜純化得總單萜類化合物(總含量大于90％)，并將該部位繼續分離得到單體京尼平苷(含量98％)，用冷凍干燥法進行干燥，收集凍干粉，即得。其中梔子果實30％的洗脫部位以單萜苷類成分為主，單萜苷類總含量大于90％。另外，梔子果實60％乙醇洗脫部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％。即得梔子果實藥材提取物或30％乙醇洗脫部位或60％乙醇洗脫部位。

實施例2

梔子果實30％乙醇洗脫有效部位以單萜苷類成分為主，其總含量大于90％，該梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中有效成分京尼平苷、去乙酰車葉草苷酸甲酯、gardaloside、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯、梔子苷、ajugol、genipin-1-β-gentiobiside、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside、gardoside methyl ester、shanzhiside、Lamalbidicacid、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid、4-carboxyl-catapol acid、Mussaenosidic acid、geniposidic acid、6-hydroxymethy-jasminoside D、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyran-oside、jasminoside A、epijasminoside A、jasminoside B、jasminoside E、jasminoside G、jasminoside I中的一種或多種單萜類單體化合物的制備方法：將上述實例1中得到的30％乙醇洗脫部位的浸膏加入等量的100-200目硅膠拌勻，50℃減壓揮干溶劑，研勻，干法上樣，上常壓硅膠柱(200-300目，硅膠量為浸膏的30倍)，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫，主要收集三氯甲烷：甲醇為6：1至2：1的洗脫流份，以上述梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中的單萜苷類單體化合物作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于50℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水混懸，上SephadexLH‐20柱色譜或用制備高效液相色譜技術分離純化，依次用乙醇水由0‐50％洗脫，再用乙醇水50‐95％洗脫，洗脫液用噴霧干燥進行干燥，收集噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。采用上述方法制備梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中的單萜苷類單體化合物為0.5-25g/kg，經HPLC檢測純度為98-99.1％；色譜條件UItimate○RXB-C18色譜柱(4.6mm×150mm，3μm)，流動相為乙腈-水(10％-100％梯度洗脫)，檢測波長為238或240nm，流速為1.0ml/min，柱溫30℃，進樣量20μl。

實施例3

梔子果實60％乙醇洗脫有效部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％，該梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中有效成分jasminoside C aglycone、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexe-ne-furan lactone、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-for-maldehyde、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formalde-hyde、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyeth-yl-cyclohex-3-enone、iridoids 2a、iridoids2b、jasminodiol、crocusatin-C、7-Epi-crocusatin-C、(10S,11S)-Gardendiol、(10R,11R)-Gardendiol、(5S,9S)-Garde-nate A、(5R,9R)-Gardenate A、5,6-dihydroxy-methyl-1,1-dimethylcyclohex-4-enone、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetra-hydro-pyrancyclopenta-4-carbaldehyde中的一種或多種單萜類苷元單體化合物的制備方法：將上述實例1中得到的60％乙醇洗脫部位的浸膏加入等量的100-200目硅膠拌勻，50℃減壓揮干溶劑，研勻，干法上樣，上常壓硅膠柱(200-300目，硅膠量為浸膏的40倍)，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫，主要收集三氯甲烷：甲醇為12：1至8：1的洗脫流份，以上述梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的單萜類苷元單體化合物作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于50℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水混懸，上SephadexLH‐20柱色譜或用制備高效液相色譜技術分離純化，依次用乙醇水由0‐30％洗脫，再用乙醇水30‐95％洗脫，洗脫液用噴霧干燥進行干燥，收集噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。采用上述方法制備梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的單萜類苷元單體化合物為0.5-6.8g/kg，經HPLC檢測純度為97-98.6％；色譜條件UItimate○RXB-C18色譜柱(4.6mm×150mm，3μm)，流動相為乙腈-水(10％-100％梯度洗脫)，檢測波長為238或245nm，流速為1.0ml/min，柱溫30℃，進樣量20μl。

實施例4

梔子果實60％乙醇洗脫有效部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％，該梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中有效成分5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A、6′-O-sinapoyljasmin-oside B、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E、6″-O-trans-sinapoylgenipin gentiobioside、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin中的一種或多種環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物的制備方法：將上述實例1中得到的60％乙醇洗脫部位的浸膏加入等量的100-200目硅膠拌勻，50℃減壓揮干溶劑，研勻，干法上樣，上常壓硅膠柱(200-300目，硅膠量為浸膏的40倍)，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫，主要收集三氯甲烷：甲醇為7：1至3：1的洗脫流份，以上述梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于50℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水混懸，上SephadexLH‐20柱色譜或用制備高效液相色譜技術分離純化，依次用乙醇水由0‐20％洗脫，再用乙醇水20‐95％洗脫，洗脫液用噴霧干燥進行干燥，收集噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。采用上述方法制備梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物為0.8-5.5g/kg，經HPLC檢測純度為97.3-98.8％；色譜條件UItimate○RXB-C18色譜柱(4.6mm×150mm，3μm)，流動相為乙腈-水(10％-100％梯度洗脫)，檢測波長為238或254nm，流速為1.0ml/min，柱溫30℃，進樣量20μl。

實施例5

梔子果實60％乙醇洗脫有效部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％，該梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中有效成分5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone中的一種或多種黃酮類單體化合物的制備方法：將上述實例1中得到的60％乙醇洗脫部位的浸膏加入等量的100-200目硅膠拌勻，50℃減壓揮干溶劑，研勻，干法上樣，上常壓硅膠柱(200-300目，用鹽酸處理硅膠，硅膠量為浸膏的50倍)，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫，主要收集三氯甲烷：甲醇為20：1至9：1的洗脫流份，以上述梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的黃酮類單體化合物作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于50℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水混懸，上SephadexLH‐20柱色譜或用制備高效液相色譜技術分離純化，依次用乙醇水由0‐50％洗脫，再用乙醇水50‐95％洗脫，洗脫液用噴霧干燥進行干燥，收集噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。采用上述方法制備梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的黃酮類單體化合物為0.5-7.9g/kg，經HPLC檢測純度為98.1-98.9％；色譜條件UItimate○RXB-C18色譜柱(4.6mm×150mm，3μm)，流動相為乙腈-水(10％-100％梯度洗脫)，檢測波長為254或325nm，流速為1.0ml/min，柱溫30℃，進樣量20μl。

實施例6

梔子果實60％乙醇洗脫有效部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％，該梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中有效成分crocin-I、crocin-II中的一種或多種藏紅花素類單體化合物的制備方法：將上述實例1中得到的60％乙醇洗脫部位的浸膏加入等量的100-200目硅膠拌勻，50℃減壓揮干溶劑，研勻，干法上樣，上常壓硅膠柱(200-300目，用鹽酸處理硅膠，硅膠量為浸膏的50倍)，上樣后依次用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫，主要收集三氯甲烷：甲醇為12：1至5：1的洗脫流份，以上述梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的藏紅花素類單體化合物作為對照品TLC或HPLC檢測，合并相應流份。上述流份于50℃減壓濃縮蒸干，用適量蒸餾水混懸，上SephadexLH‐20柱色譜或用制備高效液相色譜技術分離純化，依次用乙醇水由0‐50％洗脫，再用乙醇水50‐95％洗脫，洗脫液用噴霧干燥進行干燥，收集噴霧干燥粉，用95％乙醇結晶并重結晶，即得。采用上述方法制備梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中的藏紅花素類單體化合物為0.22-1.5g/kg，經HPLC檢測純度為98.1-98.9％；色譜條件UItimate○RXB-C18色譜柱(4.6mm×150mm，3μm)，流動相為乙腈-水(10％-100％梯度洗脫)，檢測波長為440nm，流速為1.0ml/min，柱溫30℃，進樣量20μl。

實施例7

本發明從動物因素誘發性與AD臨床病因病機相結合的異質性及多因性出發，將腦衰老及血管危險因子(高血壓、動脈粥樣硬化和短暫性腦缺血等)導致的腦低灌注和AD腦病理病變相結合，利用腹腔注射半乳糖促老化與反復結扎雙側頸總動脈致腦低灌注及鼠腦室一次性注射β淀粉樣蛋白制作異質性及多因性阿爾茨海默病(Heterogeneitys/Multi‐factors'Alzheimer Disease，H/MAD)模型或記憶力減退或記憶障礙模型。應用異質性及多因性阿爾茨海默病模型大鼠對實施例1中水洗脫部位、30％乙醇水洗脫部位、60％乙醇水洗脫部位和京尼平苷單體進行藥理活性篩選，通過行為學(Morris水迷宮)測定和應用免疫組化對模型大鼠腦內海馬區(神經元)相應指標的測定與檢測，篩選確定30％乙醇洗脫部位和60％乙醇洗脫部位為梔子果實藥材治療異質性及多因性阿爾茨海默病的有效部位，京尼平苷單體為梔子果實藥材治療異質性及多因性阿爾茨海默病的有效成分。梔子各有效部位和有效成分能使H/MAD模型大鼠縮短潛伏期、增加過臺次數，延長在第四象限逗留時間，能使血清中總抗氧化能力T-AOC的活力恢復，降低TchE含量，增強清除自由基的能力，拮抗氧化反應，同時防止神經遞質的減少，從而起到防治阿爾茨海默病(AD)或輔助改善記憶功效的藥理作用。

1材料

1.1動物 SPF級健康SD雄性大鼠，體質量350-400g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，許可證號：SCXK(湘)2009-0004。飼養條件：溫度20-22℃，喂以大鼠標準飼料，自由飲水。

1.2藥品與試劑實驗室自行制備梔子果實水洗脫部位、30％乙醇水洗脫部位、60％乙醇水洗脫部位、95％乙醇水洗脫部位及京尼平苷(含量98％)。鹽酸多奈哌齊(衛材藥業有限公司，國藥準字H20050978，批號131027A)；D-半乳糖(Sigma公司，批號Lot#SLBD5369V)；Aβ_1-40(Sigma公司，批號052M4801V)；T-AOC、SOD、MDA、GSH-Px和TChE檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20141024)。

1.3儀器 ZS-B型腦立體定位儀、Morris水迷宮視頻分析系統(北京眾實迪創科技發展有限責任公司)，Forma-86C ULT超低溫冰箱(美國賽默飛)，Allegra64R高速冷凍離心機(美國貝克曼庫爾特)，UV-1800型紫外-可見分光光度計(日本島津公司)。

2方法

2.1藥物的制備將梔子果實150.0kg，粉碎成粗粉，用6倍量70％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，減壓濃縮提取液得浸膏19462.0g。取15731.0g浸膏水混懸，通過AB-8型大孔吸附樹脂富集，依次用水、30％乙醇水、60％乙醇水、95％乙醇水洗脫，得到各洗脫部位，水洗部位為5300.3g干膏、30％乙醇水洗脫部位為3291.5g干膏、60％乙醇水洗脫部位為2163.2g干膏、95％乙醇水洗脫部位為262.5g干膏。再將30％乙醇水洗脫物經聚酰胺柱色譜純化得總單萜類化合物(單萜類總含量大于90％)。將該部位繼續分離得到單體京尼平苷(含量98％)。將上述各洗脫部位及京尼平苷用2％聚山梨酯的水溶液制備供試液。

2.2動物分組和動物模型的建立將144只健康SD雄性大鼠隨機分為空白組、假損傷組、模型組、水洗脫部位高劑量組、水洗脫部位中劑量組、30％乙醇水洗脫部位高劑量組、30％乙醇水洗脫部位中劑量組、60％乙醇水洗脫部位高劑量組、60％乙醇水洗脫部位中劑量組、京尼平苷高劑量組、京尼平苷中劑量組、鹽酸多奈哌齊組，共12組，每組12只大鼠。

異質性及多因性阿爾茨海默病(AD)動物模型或記憶力減退或記憶障礙模型：各組實驗大鼠每天腹腔注射D-半乳糖(50mg·kg^-1)，造成亞急性衰老，4W后先進行雙側頸總動脈反復結扎間段性的阻斷血流，造成腦缺血性病灶(水合氯醛腹腔注射麻醉，頸正中部切口，分離雙側頸總動脈，套“4”號絲線扣。拉緊絲扣，阻斷血流10min，松開絲扣使血液灌注10min后，再次阻斷血流10min，第2次再灌注后觀察5min，縫合皮膚。)手術完成后，將大鼠喂養3天，取未死亡的狀態良好的大鼠再腦內注射凝聚態Aβ_1-40(水合氯醛麻醉，固定在腦立體定位儀上，頭部備皮，在無菌下操作，沿顱中線做長2～3cm的切口，分離骨膜，暴露出“人”字縫和“十”字縫。在前囟后3.0mm，中線右側旁開2.0mm，用7號針頭鉆開顱骨，暴露硬腦膜，微量注射器自腦表面垂直進針4.0mm，然后向腦組織內緩慢注射5μ1Aβ_1-40，注射5min，留針5min，注射后用牙科泥封堵顱骨。消炎后縫合皮膚。

空白組不予處理；模型組與給藥組分別按上述造模方法予以處理；假損傷組腹腔注射生理鹽水4W，4W后先進行雙側頸總動脈反復結扎(分離頸總動脈，只穿線但不結扎)再腦內注射等量的生理鹽水。假損傷組與模型組于腦內注射手術后第3天開始灌胃2％吐溫-80水溶液6天，每天1次。各給藥組手術后第3天開始連續灌胃給藥6天，每天1次。

2.3Morris水迷宮實驗預先在水池里注入清水使水面高出平臺1-2cm，水溫控制在24士2℃左右。水池內壁涂有黑漆，每次測試前須向水池內加入適量黑色墨水，水池共分為4個象限。將平臺放在第四象限中間，在其他三個象限任選一點面向水池池壁將大鼠放入水中，試驗歷時5天，每天上午每個象限各測試一次，每次測試1min。若大鼠在1min之內尚未找到平臺，則將大鼠拿到平臺上并使它在上面站15s，若大鼠在l min之內找到平臺，也讓其在平臺上站15s，方結束一次訓練，如此訓練4天。在第5天，將平臺移走，每只大鼠游l min，記錄每只大鼠第一次經過原平臺的時間(潛伏期)，每只大鼠在l min內經過平臺的次數、游過的總距離以及在原平臺所在象限及其它三個象限內逗留的時間，計算出在第四象限游泳的時間(t₄)占整個游泳時間(t_總)的百分比。

2.4分光光度法測定T-AOC、SOD、MDA、GSH-Px和TChE的含量在2.3大鼠行為學檢測后，每組大鼠用水合氯醛(300mg/kg)麻醉后，快速開胸，行心臟采血，3500r/min離心10min取血清，置于-70℃低溫保存。按試劑盒說明書，紫外分光光度法檢測T-AOC、SOD、MDA、GSH-Px和TChE的含量。

2.5統計方法采用SAS軟件分析，實驗數據用表示，單因素方差分析實驗的數據。P＜0.05為有統計學意義。

3結果

3.1梔子果實不同洗脫部位及京尼平苷對H/MAD模型大鼠Morris水迷宮實驗的影響

與空白組和假損傷組比較，模型組大鼠潛伏期延長、過臺次減少，在第四象限逗留時間短，差異顯著(P＜0.01)；與模型組比較，給藥鹽酸多奈哌齊組、30％乙醇水洗脫部位組、60％乙醇水洗脫部位組、京尼平苷組能縮短潛伏期、增加過臺次數，在第四象限逗留時間延長(P＜0.05或P＜0.01)，結果提示30％乙醇水洗脫部位組和60％乙醇水洗脫部位組及京尼平苷(尤其是60％乙醇水洗脫部位組)效果明顯，起到防治阿爾茨海默病(AD)的藥理作用或輔助改善記憶功效。結果見表1。

表1梔子果實不同洗脫部位及京尼平苷對H/MAD大鼠空間記憶能力的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

3.2梔子果實不同洗脫部位及京尼平苷對H/MAD模型大鼠血清中各項指標含量的影響

與空白組和假損傷組比較，模型組大鼠血清中T-AOC、SOD、GSH-P_X含量明顯降低(P＜0.01)，TChE活力增強(P＜0.01)，MDA水平顯著升高(P＜0.01)；給藥各組能提高T-AOC的含量，使SOD、GSH-P_X明顯上升(P＜0.05或P＜0.01)，降低TChE活力，MDA水平明顯下降(P＜0.05或P＜0.01)，與模型組相比具有顯著差異(P＜0.05或P＜0.01)，說明梔子果實30％和60％乙醇水洗脫部位組及京尼平苷(尤其是60％乙醇水洗脫部位組)效果明顯。能使H/MAD模型大鼠腦內T-AOC、SOD、GSH-P_X的活力恢復，降低TChE、MDA含量，增強清除自由基的能力，拮抗氧化反應，同時防止神經遞質的減少，起到防治阿爾茨海默病(AD)的藥理作用或輔助改善記憶功效。結果見表2、表3。

表2梔子果實不同洗脫部位及京尼平苷對H/MAD模型大鼠血清中T-AOC和TChE含量的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

表3梔子果實不同洗脫部位及京尼平苷對H/MAD模型大鼠血清中SOD、MDA、GSH-P_X含量影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

實施例8

梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中30％乙醇洗脫有效部位以單萜苷類成分為主，其單萜苷類成分總含量大于90％，單萜苷類成分主要為京尼平苷、去乙酰車葉草苷酸甲酯、gardaloside、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯、梔子苷、ajugol、genipin-1-β-gentiobiside、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside、gardoside methyl ester、shanzhiside、Lamalbidicacid、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid、4-carboxyl- catapol acid、Mussaenosidic acid、geniposidic acid、6-hydroxymethy-jasminoside D、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranoside、jasminoside A、epijasminoside A、jasminoside B、jasminoside E、jasminoside G、jasminoside I等單體化合物的結構確證與波譜數據信息。

8.1梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中30％乙醇洗脫有效部位中環烯醚萜苷類波譜數據信息：

化合物Z1為京尼平苷(geniposide)：白色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：4.53(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)，7.47(1H，d，J＝0.8Hz，H-3)，5.68(1H，brs，H-7)，4.13(1H，d，J＝15.0Hz，H-10a)，3.97(1H，d，J＝15.0Hz，H-10b)，3.64(3H，s，11-OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：95.7(C-1)，151.5(C-3)，110.9(C-4)，34.4(C-5)，37.9(C-6)，125.4(C-7)，144.1(C-8)，45.8(C-9)，59.3(C-10)，166.9(C-11)，51.0(C-12)，98.5(C-1′)，77.2(C-3′)，76.6(C-5′)，73.3(C-2′)，69.92(C-4′)，60.9(C-6′)。

化合物Z2為去乙酰車葉草苷酸甲酯(deacetylasperulosidic acid methyl ester)：淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.29(1H，d，J＝4.8Hz，H-1)，7.36(1H，d，J＝0.9Hz，H-3)，2.96(1H，m，H-5)，4.35(1H，brs，H-6)，5.65(1H，d，J＝3.2Hz，H-7)，2.88(1H，dd，J＝8.0，3.2Hz，H-9)，4.13(1H，d，J＝15.2Hz，H-10a)，3.97(1H，d，J＝15.2Hz，H-10b)，3.66(3H，s，11-OCH₃)，4.46(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，3.10～3.44(4H，m，H-2′，3′，4′，5′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：98.4(C-1)，151.5(C-3)，109.3(C-4)，42.7(C-5)，76.6(C-6)，128.8(C-7)，145.7(C-8)，48.6(C-9)，58.8(C-10)，167.3(C＝O)，51.1(-OCH₃)，94.7(C-1′)，73.1(C-2′)，77.2(C-3′)，69.9(C-4′)，77.2(C-5′)，60.9(C-6′)。

化合物Z3為gardaloside：淡黃色固體(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.38(1H，brs，H-3)，5.65(1H，brs，H-1)，5.19(2H，brs，H-10)，4.08(1H，m，H-7)，3.16(1H，m，H-5)，3.03(1H，m，H-9)，2.64(1H，dd，J＝16.8,6.8Hz，H-6a)，2.36(1H，dd，J＝16.8,6.8Hz，H-6b)，4.74(1H，d，J＝7.6Hz，H-1′)，3.00～3.15(4H，m，糖上其它質子)。

化合物Z4為6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯(6-O-Methyl scandoside Methyl Ester)：黃色透明固體(甲醇)，FAB-MS m/z：419[M+H]⁺。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.38(1H，d，J＝0.9Hz，H-3)，5.66(1H，brs，H-7)，5.28(1H，d，J＝4.8Hz，H-1)，4.75(1H，brs，H-6)，4.12(1H，d，J＝15.3Hz，H-10a)，4.00(1H，d，J＝15.3Hz，H-10b)，2.97(1H，m，H-5)，2.87(1H，dd，J＝8.0,2.4Hz，H-9)，3.66(3H，s，11-COOCH₃)，3.17(3H，s，6-OCH₃)，4.47(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，3.00～3.15 (4H，m，糖上其它質子)。

化合物Z5為6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯(6-O-Methyldeacetylas-perulosidic Acid Methyl Ester)：黃色透明固體(甲醇)，FAB-MS m/z：419[M+H]⁺。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.47(1H，d，J＝0.92Hz，H-3)，5.68(1H，brs，H-7)，5.28(1H，d，J＝6.9Hz，H-1),4.49(1H，brt，J＝5.4Hz，H-6)，4.13(1H，d，J＝14.5Hz，H-10a)，3.97(1H，d，J＝14.5Hz，H-10b)，3.41(1H，m，H-5)，2.62(1H，dd，J＝10.8,7.3Hz，H-9)，3.64(3H，s，11-COOCH₃)，3.34(3H，s，6-OCH₃)，4.52(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，3.04～3.18(4H，m，糖上其它質子)。

化合物Z6為梔子苷(gardenoside)：無色針狀結晶。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ：7.45(1H，s，H-3)，5.62(1H，brs，H-6)，4.54(1H，d，J＝7.8Hz，Glc-H-1′)，3.62(3H，s，11-OCH₃)。

化合物Z7為ajugol:淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.10(1H，d，J＝8.0Hz，H-3)，6.60(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，4.75(1H，d，J＝8.8Hz，H-1)，4.46(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，1.10(1H，s，CH₃-10)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：92.3(C-1)，135.2(C-3)，103.8(C-4)，40.0(C-5)，76.9(C-6)，49.9(C-7)，77.1(C-8)，50.9(C-9)，24.5(C-10)，97.6(C-1′)，73.3(C-2′)，76.4(C-3′)，69.9(C-4′)，76.7(C-5′)，61.0(C-6′)。

化合物Z8為京尼平-1-β-龍膽苷(genipin-1-β-gentiobiside)：白色粉末(甲醇)，

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.08(1H，d，J＝7.0Hz，H-1)，7.57(1H，d，J＝1.2Hz，H-3)，5.88(1H，brs，H-7)，4.26(1H，d，J＝14.8Hz，H-10a)，4.14(1H，d，J＝14.8Hz，H-10b)，4.94(1H，d，J＝8.8Hz，H-1′)，4.12(1H，dd，J＝1.5，12.0Hz，H-6′)，3.97(1H，dd，J＝1.5，12.0Hz，H-6′)，4.42(1H，d，J＝8.0Hz，H-1″)，3.97(1H，brs，H-6″)，3.67(1H，brs，H-6″)，3.65(3H，s,11-OCH₃)。

化合物Z9為genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside：白色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.07(1H，d，J＝7.0Hz，H-1)，7.57(1H，d，J＝1.2Hz，H-3)，5.86(1H，brs，H-7)，4.73(1H，brd，J＝12.8Hz，H-10a)，4.38(1H，brd，J＝12.8Hz，H-10b)，4.94(1H，d，J＝8.8Hz，H-1′)，3.97(1H，brd，J＝1.5，11.2Hz，H-6′)，3.65(1H，dd，J＝1.5，11.2Hz，H-6′)，4.54(1H，d，J＝9.6Hz，H-1″)，3.97(1H，brd，J＝1.5，11.2Hz，H-6″)，3.65(1H，dd，J＝1.5，11.2Hz，H-6″)，3.65(3H，s,11-OCH₃)。

化合物Z10為梔子新苷甲酯(gardoside methyl ester)：白色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.11(1H，d，J＝6.8Hz，H-1)，7.40(1H，s，H-3)，5.67(brs，2H，H-10)，4.37(1H，m，H-7)，3.65(s，3H，-OCH₃)，4.42(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz，δppm)：δ：95.7(C-1)，153.0 (C-3)，111.7(C-4)，29.1(C-5)，41.0(C-6)，73.5(C-7)，150.8(C-8)，44.1(C-9)，107.3(C-10)，166.8(C-11)，51.0(C-12)，98.8(C-1′)，73.4(C-2′)，77.2(C-3′)，69.9(C-4′)，77.1(C-5′)，61.0(C-6′)。

化合物Z11為山梔子苷(shanzhiside)：無色針晶(甲醇)，¹H-NMR和¹³C-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.31(1H，s，H-3)，5.12(1H，d，J＝6.8Hz，H-1)，4.73(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，2.37(1H，m，H-9)，3.67(1H，m，H-6)，1.76(1H，d，J＝6.5，H-7)，1.64(1H，m，H-5)，1.36(3H，s，H-10)。

化合物Z12為Lamalbidicacid：淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.29(1H，s，H-3)，4.85(1H，d，J＝8.4Hz，H-1)，4.55(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，1.23(3H，s，CH₃-10)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：96.7(C-1)，148.8(C-3)，128.7(C-4)，41.6(C-5)，75.0(C-6)，76.7(C-7)，92.1(C-8)，45.3(C-9)，22.0(C-10)，173.4(C＝O)，98.5(C-1′)，73.4(C-2′)，74.6(C-3′)，69.9(C-4′)，76.5(C-5′)，60.9(C-6′)。

化合物Z13為4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid:淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.23(1H，s，H-3)，5.70(1H，s，H-7)，4.93(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，4.53(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：96.7(C-1)，145.3(C-3)，128.8(C-4)，44.5(C-5)，80.6(C-6)，128.8(C-7)，149.1(C-8)，45.7(C-9)，59.4(C-10)，169.0(C＝O)，98.2(C-1′)，73.3(C-2′)，77.1(C-3′)，69.8(C-4′)，76.5(C-5′)，60.8(C-6′)。

化合物Z14為4-carboxyl-catapol acid:淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.37(1H，s，H-3)，4.83(1H，d，J＝8.4Hz，H-1)，4.56(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：96.9(C-1)，149.2(C-3)，128.6(C-4)，41.8(C-5)，76.5(C-6)，59.9(C-7)，63.8(C-8)，45.2(C-9)，60.7(C-10)，172.8(C＝O)，98.5(C-1′)，73.4(C-2′)，77.0(C-3′)，69.6(C-4′)，76.7(C-5′)，61.1(C-6′)。

化合物Z15為Mussaenosidic acid:淡黃色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.31(1H，s，H-3)，4.84(1H，d，J＝8.4Hz，H-1)，4.55(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，1.23(1H，s，CH₃-10)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：98.5(C-1)，148.9(C-3)，128.6(C-4)，41.7(C-5)，39.2(C-6)，45.2(C-7)，63.7(C-8)，59.7(C-9)，28.9(C-10)，168.4(C＝O)，98.7(C-1′)，73.4(C-2′)，76.9(C-3′)，69.6(C-4′)，76.5(C-5′)，60.7(C-6′)。

化合物Z16為京尼平苷酸(geniposidic acid)：無色針晶(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.34(1H，d，J＝8.4Hz，H-1)，7.57(1H，d，J＝1.2Hz，H-3)，3.38(1H，m，H-5)，2.37(1H，m，H-6a)，2.86(1H，m，H-6b)，5.89(1H，s，H-7)，2.95(1H，m，H-9)，4.30(1H，d，J＝12.8Hz，H-10a)，4.20(1H，d，J＝12.8Hz，H-10b)，4.94(1H，d，J＝8.4Hz，H-1′)，2.97～3.56(4H，m，H-2′，3′，4′，5′)。

8.2梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中30％乙醇洗脫有效部位中單萜苷類波譜數據信息：

化合物Z17(新化合物)為6-hydroxymethy-jasminoside D：淡黃色油狀。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：1.58(1H，t，J＝12.4Hz，H-2a)，1.30(1H，dd，J＝2.0,12.4Hz，H-2b)，3.58(1H，m，H-3)，3.78(1H，d，J＝3.0Hz，H-4)，3.90(1H，d，J＝4.0Hz，H-7)，1.82(3H，s，CH₃-8)，1.00(6H，s，CH₃-9，10)，4.27(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)，3.03(1H，m，H-2′)，3.18(1H，m，H-3′)，3.08(1H，m，H-4′)，3.16(1H，m，H-5′)，3.66和3.42(2H，m，H-6′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：36.5(C-1)，42.4(C-2)，65.2(C-3)，83.2(C-4)，141.0(C-5)，129.6(C-6)，56.4(C-7)，17.4(C-8)，26.8(C-9)，28.9(C-10)，104.6(C-1′)，73.4(C-2′)，76.8(C-3′)，69.8(C-4′)，76.9(C-5′)，60.8(C-6′)。

化合物Z18為bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranoside：無色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：4.57(1H，d，J＝7.8Hz，H-1″)，4.38(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，4.27(1H，brs，H-2)，3.89(1H，dd，J＝12.0,2.0Hz，H-6′a)，3.80(1H，dd，J＝11.6,5.6Hz，H-5″b)，3.64(1H，ddd，J＝10.6,9.2,5.5Hz，H-4″)，3.48(1H，ddd，J＝9.5,5.5,2.0Hz，H-5′)，3.43(1H，t，J＝9.2Hz，H-3″)，3.40(1H，dd，J＝9.2,9.2Hz，H-3′)，3.36(1H，dd，J＝9.5,9.2Hz，H-4′)，3.20(1H，dd，J＝11.6,10.6Hz，H-5″a)，3.18(1H，dd，J＝9.2,7.6Hz，H-2″)，3.13(1H，dd，J＝9.2,8.1Hz，H-2′)，3.05(1H，m，H-6a)，2.96(1H，m，H-3b)，1.65(1H，m，H-5b)，1.63(3H，s，H-10)，1.56(1H，m，H-4)，1.28(1H，m，H-6b)，1.25(1H，m，H-5a)，1.17(1H，m，H-3a)，1.14(3H，s，H-8)，0.98(3H，s，H-9)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：48.6(C-1)，76.5(C-2)，38.5(C-3)，40.1(C-4)，39.3(C-5)，39.1(C-6)，34.8(C-7)，28.1(C-8)，29.8(C-9)，19.2(C-10)，100.3(C-1′)，74.1(C-2′)，76.8(C-3′)，70.0(C-4′)，76.5(C-5′)，67.0(C-6′)，104.2(C-1″)，74.0(C-2″)，76.5(C-3″)，69.9(C-4″)，63.0(C-5″)。

化合物Z19為jasminoside A：淡黃色透明固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.80(1H，brs，H-4)，4.50(1H，dd，J＝10.4,3.2Hz，H-7a)，4.09(1H，dd，J＝10.4,3.2Hz，H-7b)，2.68(1H，d，J＝16.7Hz，H-2a)，1.85(1H，d，J＝16.7Hz，H-2b)，2.13(1H，brt，J＝3.6Hz，H-6)，2.00(3H，d，J＝0.96Hz，H-10)，1.05(3H，s，H-9)，0.96(3H，s，H-8)，4.12(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，2.89(1H，m，H-2′)，3.12(1H，m，H-3′)，3.08(1H，m，H-4′)，3.00(1H，m，H-5′)，3.65和3.42 (2H，m，H-6′)。

化合物Z20為epijasminoside A：淡黃色透明固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.79(1H，brs，H-4)，4.47(1H，dd，J＝10.5,4.8Hz，H-7a)，3.93(1H，dd，J＝10.5,4.8Hz，H-7b)，2.48(1H，d，J＝16.5Hz，H-2a)，1.91(1H，d，J＝16.5Hz，H-2b)，2.19(1H，brt，J＝4.4Hz，H-6)，2.02(3H，d，J＝0.92Hz，H-10)，1.03(3H，s，H-9)，0.97(3H，s，H-8)，4.13(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)，2.92(1H，m，H-2′)，3.12(1H，m，H-3′)，3.10(1H，m，H-4′)，3.05(1H，m，H-5′)，3.74和3.44(2H，m，H-6′)。

化合物Z21為jasminoside B：淡黃色油狀。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：6.17(1H，s，H-4)，4.59(1H，dd，J＝17.0,1.50Hz，H-10a)，4.16(1H，dd，J＝17.0,1.50Hz，H-10b)，3.70(2H，m，H-7)，2.62(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，1.91(1H，d，J＝16.8Hz，H-2b)，2.00(1H，t，J＝4.0Hz，H-6)，1.06(3H，s，H-8)，0.95(3H，s，H-9)，4.20(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)，3.03(1H，m，H-2′)，3.41(1H，m，H-3′)，3.09(1H，m，H-4′)，3.45(1H，m，H-5′)，3.64和4.14(2H，m，H-6′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：35.0(C-1)，48.7(C-2)，198.6(C-3)，122.9(C-4)，161.7(C-5)，48.8(C-6)，60.5(C-7)，26.7(C-8)，28.7(C-9)，69.3(C-10)，102.7(C-1′)，73.5(C-2′)，76.6(C-3′)，70.0(C-4′)，77.0(C-5′)，61.0(C-6′)。

化合物Z22為jasminoside E：淡黃色凍狀固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：4.48(1H，d，J＝11.2，H-7a)，4.00(1H，d，J＝11.2，H-7b)，2.40(1H，dd，J＝17.2,5.6Hz，H-3a)，1.92(1H，dd，J＝17.2,9.2Hz，H-3b)，1.78(1H，dd，J＝12.4,5.6Hz，H-2a)，1.36(1H，t，J＝12.4Hz，H-2b)，1.65(3H，s，H-10)，1.15(3H，s，H-8)，1.02(3H，s，H-9)，4.28(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，2.92(1H，m，H-2′)，3.15(1H，m，H-3′)，3.10(1H，m，H-4′)，3.02(1H，m，H-5′)，3.67和3.45(2H，m，H-6′)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：35.0(C-1)，44.9(C-2)，37.2(C-3)，171.1(C-4)，129.0(C-5)，135.4(C-6)，70.0(C-7)，28.4(C-8)，29.0(C-9)，20.8(C-10)，100.8(C-1′)，73.5(C-2′)，76.7(C-3′)，70.0(C-4′)，76.8(C-5′)，61.0(C-6′)。

化合物Z23為jasminoside G：淡黃色油狀。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：6.15(1H，s，H-4)，4.37(1H，dd，J＝17.6,1.40Hz，H-10a)，4.12(1H，dd，J＝17.6,1.40Hz，H-10b)，4.05(1H，dd，J＝16.0,6.4Hz，H-7a)，3.88(1H，dd，J＝16.0,6.4Hz，H-7b)，2.62(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，1.89(1H，d，J＝16.8Hz，H-2b)，2.19(1H，t，J＝4.3Hz，H-6)，1.06(3H，s，H-8)，0.93(3H，s，H-9)，4.20(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，3.09(1H，m，H-2′)，3.42(1H，m，H-3′)，3.13(1H，m，H-4′)，3.44 (1H，m，H-5′)，3.65和4.13(2H，m，H-6′)。

化合物Z24為jasminoside I：黃色透明固體(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：4.96(1H，d，J＝10.4Hz，H-7a)，4.82(1H，d，J＝10.4Hz，H-7b)，1.96(2H，brt，J＝6.2Hz，H-3a,3b)，1.60(2H，m，H-2a,2b)，1.63(3H，s，H-10)，1.07(3H，s，H-8)，1.05(3H，s，H-9)，5.53(1H，d，J＝8.2Hz，H-1″)，4.20(1H，d，J＝7.5Hz，H-1′)，3.57～3.68(2H，m，H-6′,6″)，2.92～3.44(m，糖上其它質子)。

實施例9

梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位以單萜類苷元、環烯醚萜苯丙素苷類、黃酮類、二萜類成分為主，其上述成分總含量大于90％。其中，單萜類苷元成分主要為jasminoside C aglycone、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydro-xyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone、iridoids 2a、iridoids 2b、jasminodiol、crocusatin-C、7-Epi-crocusatin-C、(10S,11S)-Gardendiol、(10R,11R)-Gardendiol、(5S,9S)-Gardenate A、(5R,9R)-Gardenate A、5,6-dihydroxymethyl-1,1-dimethylcyclo-hex-4-enone、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyrancyclopenta-4-carbaldehyde或環烯醚萜苯丙素苷類成分主要為5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasmino-side A、6′-O-sinapoyljasminoside B、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E、6″-O-trans-sina-poylgenipin gentiobioside、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin或黃酮類成分主要為5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone或二萜類成分主要為crocin-I、crocin-II等單體化合物的結構確證與波譜數據信息。

9.1梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位中單萜類苷元波譜數據信息：

化合物Z25(新化合物)為jasminoside C aglycone(1，1-dimethyl-5-hydroxymethyl-6-vinyl-cyclohex-3-enone):淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(MeOD，400MHz)δ：6.20(1H，d，J＝1.2Hz，H-4)，5.43(1H，dd，J＝1.2,14.4Hz，H-7)，4.43(1H，d，J＝1.2Hz，H-10)，2.38(1H，brs，H-2)，1.20(6H，brs，CH₃-8,9)；¹³C-NMR(MeOD，100MHz)δ：39.9(C-1)，53.0(C-2)，201.9(C-3)，123.8(C-4)，158.8(C-5)，150.2(C-6)，113.9(C-7)，28.5(C-8)，28.5(C-9)，61.9(C-10)。

化合物Z26(新化合物)為5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：5.59(1H，d，J＝1.2Hz，H-2)，4.37(1H，dd，J＝5.2,10.8Hz，H-9a)，4.03(1H，t，J＝10.8Hz，H-9b)，3.93(1H，d，J＝2.8Hz，H-11)，3.62(1H，t，J＝4.8Hz，H-10)，3.00(1H，m，H-6)，2.67(1H，m，H-3a)，2.62(1H，m，H-4)，2.25(1H，m，H-3b)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：142.2(C-1)，126.1(C-2)，38.5(C-3)，46.2(C-4)，35.4(C-5)，45.3(C-6)，173.6(C-7)，67.7(C-9)，59.2(C-10)，58.7(C-11)。

化合物Z27(新化合物)為6-hydroxyl-3-hydroxymethyl-4，4-dimethyl-1-cyclohex-ene-1-formaldehyde:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：6.52(1H，d，J＝2.8Hz，H-2)，4.47(1H，d，J＝8.8Hz，H-8a)，4.27(1H，brs，H-6)，3.94(1H，d，J＝8.8Hz，H-8b)，2.95(1H，m，H-3)，1.74(1H，dd，J＝5.6,12.8Hz，H-5a)，1.34(1H，dd，J＝10.0,12.8Hz，H-5a)，0.98(3H，s，CH₃-10)，0.78(3H，s，CH₃-9)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：128.8(C-1)，136.0(C-2)，45.5(C-3)，34.6(C-4)，46.2(C-5)，64.9(C-6)，169.5(C-7)，67.9(C-8)，19.4(C-9)，29.0(C-10)。

化合物Z28(新化合物)為4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohex-ene-1-formaldehyde:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：4.85(1H，t，J＝2.4Hz，H-8a)，4.83(1H，dd，J＝2.9,16.0Hz，H-8b)，3.91(1H，d，J＝9.2Hz，H-4)，2.38(1H，m，H-3a)，1.84(1H，m，H-3b)，1.72(1H，m，H-5a)，1.46(1H，m，H-5b)，1.15(3H，s，CH₃-9)，1.13(3H，s，CH₃-10)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：168.6(C-1)，121.5(C-2)，29.6(C-3)，63.4(C-4)，46.4(C-5)，33.7(C-6)，173.4(C-7)，69.2(C-8)，27.8(C-9)，27.8(C-10)。

化合物Z29(新化合物)為4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：5.88(1H，t，J＝1.6Hz，H-2)，3.85(1H，d，J＝7.2Hz，H-7a)，3.75(1H，d，J＝1.6Hz，H-4)，3.45(1H，d，J＝7.2Hz，H-7b)，2.00(1H，s，H-8)，1.08(3H，s，CH₃-10)，0.85(3H，s，CH₃-9)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：169.6(C-1)，123.5(C-2)，195.2(C-3)，90.4(C-4)，49.7(C-5)，82.4(C-6)，72.7(C-7)，19.0(C-8)，15.9(C-9)，21.1(C-10)。

化合物Z30為iridoids 2a:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：5.72(1H，m，H-6)，4.37(1H，m，H-3)，4.08(1H，m，H-9a)，4.04(1H，m，H-9b)，3.66(1H，m，H-7a)，3.65(3H，s，CH₃-10)，3.07(1H，m，H-4a)，2.86(1H，m，H-4)，2.67(1H，m，H-5a)，2.21(1H，m，H-5b)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：171.7(C-1)，66.4(C-3)，44.7(C-4)，37.2(C-4a)，37.6(C-5)，126.6(C-6)，141.5(C-7)，48.2(C-7a)，170.9(C-8)，59.1(C-9)，52.0(C-10)。

化合物Z30為iridoids 2b:淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：5.73(1H，m，H-6)，4.32(1H，m，H-3)，3.97(2H，m，H-9)，3.66(3H，s，CH₃-10)，3.64(1H，m，H-7a)，3.36(1H，m，H-4)，3.17(1H，m，H-4a)，2.46(1H，m，H-5a)，2.16(1H，m，H-5b)；¹³C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：170.8(C-1)，64.3(C-3)，41.2(C-4)，35.7(C-4a)，33.4(C-5)，127.1(C-6)，141.0(C-7)，51.8(C-7a)，169.3(C-8)，58.5(C-9)，50.1(C-10)。

化合物Z31為jasminodiol：淡黃色油狀，EI-MS m/z:184[M]⁺。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.97(1H，s，H-4)，4.27(1H，dd，J＝17.0,1.60Hz，H-10a)，4.02(1H，dd，J＝17.0,1.60Hz，H-10b)，3.66(2H，m，H-7)，2.61(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，1.88(1H，d，J＝16.8Hz，H-2b)，1.94(1H，t，J＝4.0Hz，H-6)，1.06(3H，s，H-8)，0.93(3H，s，H-9)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：35.0(C-1)，48.7(C-2)，198.5(C-3)，121.7(C-4)，166.5(C-5)，48.8(C-6)，60.7(C-7)，26.8(C-8)，28.6(C-9)，63.0(C-10)。

化合物Z32為crocusatin-C：淡黃色固體，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.79(1H，s，H-4)，3.61和3.50(2H，m，H-7)，2.82(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，2.01(1H，d，J＝16.8H_z，H-2b)，2.49(1H，m，H-6)，1.92(3H，d，J＝1.60Hz，H-10)，1.01(3H，s，H-8)，0.90(3H，s，H-9)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：38.9(C-1)，49.7(C-2)，197.8(C-3)，126.6(C-4)，164.4(C-5)，45.5(C-6)，64.5(C-7)，23.5(C-8)，24.9(C-9)，19.5(C-10)。

化合物Z33為7-Epi-crocusatin-C即(7S)-6-羥甲基-1,1,5-三甲基環己-3-烯酮((7S)-6-(hydroxymethyl)-1,1,5-trimethylcyclohex-3-enone)：淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.80(1H，s，H-4)，3.70(2H，d，J＝4.0Hz，H-7a,7b)，2.56(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，1.84(1H，d，J＝16.8Hz，H-2b)，1.98(3H，d，J＝0.8Hz，H-10)，1.93(1H，t，J＝4.0Hz，H-6)，1.06(3H，s，H-8)，0.94(3H，s，H-9)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：34.9(C-1)，48.3(C-2)，198.5(C-3)，126.0(C-4)，162.5(C-5)，52.8(C-6)，59.9(C-7)，26.7(C-8)，28.8(C-9)，23.6(C-10)。

化合物Z34為(10S,11S)-梔子二醇(10S,11S)-Gardendiol:淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.71(1H，m，H-7)，4.42(1H，dd，J＝10.8,5.2Hz，H-1a)，4.02(1H，t，J＝10.8Hz，H-1b)，3.57(2H，m，H-10a,10b)，3.38(2H，m，H-11a,11b)，3.32(1H，m，H-9)，2.32(1H，dd，J＝16.8,9.0Hz，H-6a)，2.07(1H，d，J＝16.8Hz，H-6b)，1.57(1H，m，H-4)，1.40(1H，_m，H-5)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：66.5(C-1)，172.9(C-3)，34.5(C-4)，34.2(C-5)，37.0(C-6)，127.4(C-7)，143.6(C-8)，39.0(C-9)，59.5(C-10)，59.1(C-11)。

化合物Z35為(10R,11R)-梔子二醇(10R,11R)-Gardendiol)：淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.72(1H，m，H-7)，4.22(2H，m，H-1a,1b)，4.03(2H，m，H-10a,10b)，3.56(2H，m，H-11a,11b)，2.84(1H，m，H-9)，2.62(1H，dd，J＝16.8,9.0Hz，H-6a)，2.08(1H，d，J＝16.8Hz，H-6b)，2.02(1H，m，H-4)，1.52(1H，m，H-5)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：66.5(C-1)，171.4(C-3)，29.3(C-4)，29.2(C-5)，38.2(C-6)，126.7(C-7)，141.6(C-8)，34.5(C-9)，59.2(C-10)，49.5(C-11)。

化合物Z36為(5S,9S)-Gardenate A或(5R,9R)-Gardenate A：淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.73(1H，d，J＝1.6Hz，H-7)，4.05(2H，d，J＝16.4Hz，H-10)，3.98(1H，dd，J＝14.8,3.6Hz，H-3b)，3.88(1H，dd，J＝14.8,7.2Hz，H-3a)，3.64(3H，_s，11位-COOCH₃質子)，3.51(3H，_s，1位-COOCH₃質子)，3.50(1H，m，H-9)，2.87(1H，m，H-5)，2.66(1H，ddd，J＝14.8,7.2,3.6Hz，H-4)，2.48(1H，m，H-6a)，2.38(1H，m，H-6b)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：170.8(C-1)，64.3(C-3)，49.4(C-4)，41.4(C-5)，37.2(C-6)，127.1(C-7)，141.5(C-8)，51.1(C-9)，59.1(C-10)，172.6(C-11)，51.9/51.1(COOCH₃)；(5R,9R)-Gardenate A：淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.73(1H，d，J＝1.6Hz，H-7)，4.81(2H，brs，H-10)，4.36(1H，dd，J＝11.2,3.8Hz，H-3b)，4.30(1H，dd，J＝11.2,7.0Hz，H-3a)，3.67(3H，s，11位-COOCH₃質子)，3.57(3H，s，1位-COOCH₃質子)，3.68(1H，m，H-9)，3.17(1H，m，H-5)，3.05(1H，ddd，J＝11.2,7.0,3.8Hz，H-4)，2.65(1H，m，H-6a)，2.56(1H，m，H-6b)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：172.6(C-1)，66.4(C-3)，58.5(C-4)，48.2(C-5)，37.6(C-6)，127.1(C-7)，143.7(C-8)，59.1(C-9)，61.9(C-10)，173.9(C-11)，52.0/51.8(COOCH₃)。

化合物Z37為5,6-二羥甲基-1,1-二甲基環己-4-烯酮(5,6-dihydroxymethyl-1,1-di-methylcyclohex-4-enone)：淡黃色固體。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：4.90(1H，d，J＝10.8Hz，H-7a)，4.83(1H，d，J＝10.8Hz，H-7b)，4.86(1H，d，J＝10.4Hz，H-8a)，3.90(1H，d，J＝10.4Hz，H-8b)，2.39(1H，dd，J＝15.6，4.0Hz，H-3a)，1.83(1H，dd，J＝15.6,4.0Hz，H-3b)，1.73(1H，dd，J＝10.8,8.8Hz，H-2a)，1.46(1H，dd，J＝10.8,4.0Hz，H-2b)，1.15(3H，s，H-9)，1.13(3H，s，H-10)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：33.7(C-1)，46.4(C-2)，29.6(C-3)，173.4(C-4)，121.5(C-5)，168.4(C-6)，69.2(C-7)，63.4(C-8)，27.8(C-9)，27.8(C-10)。

化合物Z38為1-羥基-7-羥甲基-1,4a,5,7a-四氫化環戊二烯駢吡喃-4-醛(1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-p_yrancyclopenta-4-carbaldeh_yde)：白色粉末(甲醇)，¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：9.84(1H，d，J＝4.4Hz，H-11)，7.35(1H，d，J＝5.2H_z，H-3)，5.71(1H，s，H-7)，4.79(1H，brs，H-1)，4.31(1H，d，J＝15.0，H-10a)，4.14(1H，d，J＝15.0，H-10b)。

9.2梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位中環烯醚萜苯丙素苷類波譜數據信息：

化合物Z39(新化合物)為5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：2.60(1H，d，J＝16.0Hz，H-2a)，1.87(1H，d，J＝16.0Hz，H-2b)，6.16(1H，brs，H-4)，1.93(1H，t，J＝4.0Hz，H-5)，4.51(1H，dd，J＝1.2，16.8Hz，H-7a)，4.18(1H，d，J＝16.8Hz，H-7b)，8.99(1H，brs，HOC-4)，0.92(3H，s，CH₃-9)，1.00(3H，s，CH₃-10)，4.27(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1′)，3.07(1H，m，H-2′)，3.19(1H，m，H-3′)，3.17(1H，m，H-4′)，3.41(1H，m，H-5′)，4.37和4.17(2H，m，H-6′)6.56(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″)，7.56(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″)，7.05(2H，s，H-5″,9″)，3.81(6H，s，6″,8″-2×OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：34.9(C-1)，48.8(C-2)，198.6(C-3)，123.1(C-4)，167.0(C-5)，48.5(C-6)，69.6(C-7)，161.6(C-8)，28.3(C-9)，26.6(C-10)，56.0(6″,8″-OCH₃)，102.8(C-1′)，73.5(C-2′)，76.3(C-3′)，69.9(C-4′)，73.8(C-5′)，63.4(C-6′)，166.6(C-1″)，114.7(C-2″)，145.5(C-3″)，124.3(C-4″)，106.2(C-5″)，148.0(C-6″)，138.3(C-7″)，148.0(C-8″)，106.2(C-9″)，56.0(6″,8″-OCH₃)。

化合物Z40(新化合物)為6′-O-sinapoyljasminoside B：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：2.71(1H，d，J＝16.8Hz，H-2a)，1.98(1H，d，J＝16.8Hz，H-2b)，6.24(1H，brs，H-4)，2.09(1H，t，J＝4.0Hz，H-6)，4.57(1H，dd，J＝0.8，12.0Hz，H-7a)，4.36(1H，d，J＝12.0Hz，H-7b)，4.51(1H，dd，J＝2.0，12.0Hz，H-7a)，4.30(1H，d，J＝12.0Hz，H-7b)，0.99(3H，s，CH₃-9)，1.09(3H，s，CH₃-10)，4.37(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1′)，3.26(1H，m，H-2′)，3.51(1H，m，H-3′)，3.36(1H，m，H-4′)，3.38(1H，m，H-5′)，4.57和4.33(2H，m，H-6′)，6.42(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″)，7.61(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″)，6.94(2H，s，H-5″,9″)，3.86(6H，s，6″,8″-2×OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：36.3(C-1)，50.0(C-2)，202.8(C-3)，125.5(C-4)，164.0(C-5)，50.5(C-6)，72.0(C-7)，64.6(C-8)，29.3(C-9)，27.4(C-10)，56.9(6″,8″-OCH₃)，104.6(C-1′)，75.1(C-2′)，75.6(C-3′)，71.7(C-4′)，77.9(C-5′)，62.1(C-6′)，169.1(C-1″)，115.8(C-2″)，147.4(C-3″)，126.6(C-4″)，107.0(C-5″)，149.5 (C-6″)，139.7(C-7″)，149.5(C-8″)，107.0(C-9″)，56.9(6″,8″-OCH₃)。

化合物Z41(新化合物)為6′-O-trans-sinapoyljasminoside L：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：1.90(1H，dd，J＝2.0，12.0Hz，H-2a)，1.46(1H，t，J＝12.0Hz，H-2b)，4.05(1H，m，H-3)，2.42(1H，dd，J＝5.6，17.2Hz，H-4a)，2.05(1H，dd，J＝9.2，17.2Hz，H-4b)，1.69(3H，s，CH₃-8)，0.98(3H，s，CH₃-9)，1.18(3H，s，CH₃-10)，4.43(1H，d，J＝8.0Hz，Glc-H-1′)，3.21(1H，m，H-2′)，3.40(1H，m，H-3′)，3.34(1H，m，H-4′)，3.56(1H，m，H-5′)，4.49和4.32(2H，m，H-6′)，6.38(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″)，7.60(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″)，6.85(2H，s，H-5″,9″)，3.85(6H，s，6″,8″-2×OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：36.5(C-1)，46.6(C-2)，74.0(C-3)，38.6(C-4)，131.4(C-5)，137.0(C-6)，169.4(C-7)，21.4(C-8)，29.8(C-9)，29.3(C-10)，56.9(6″,8″-OCH₃)，103.4(C-1′)，75.1(C-2′)，78.0(C-3′)，72.1(C-4′)，75.4(C-5′)，65.0(C-6′)，168.9(C-1″)，115.8(C-2″)，147.3(C-3″)，126.5(C-4″)，106.9(C-5″)，149.4(C-6″)，139.6(C-7″)，149.4(C-8″)，106.9(C-9″)，56.9(6″,8″-OCH₃)。

化合物Z42(新化合物)為6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：1.78(1H，d，J＝11.6Hz，H-2a)，1.33(1H，d，J＝11.6Hz，H-2b)，3.93(1H，m，H-3)，2.35(1H，d，J＝6.8Hz，H-4a)，1.90(1H，d，J＝9.6Hz，H-4b)，4.36(1H，d，J＝10.4Hz，H-7a)，4.03(1H，d，J＝10.4Hz，H-7b)，1.61(3H，s，CH₃-8)，0.94(3H，s，CH₃-9)，1.11(3H，s，CH₃-10)，3.34(3H，s，CH₃O-3)，4.32(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1′)，3.08(1H，m，H-2′)，3.42(1H，m，H-3′)，3.18(1H，m，H-4′)，3.35(1H，m，H-5′)，4.23和3.93(2H，m，H-6′)，6.50(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″)，7.54(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″)，6.98(2H，s，H-5″,9″)，3.79(6H，s，6″,8″-2×OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：35.0(C-1)，38.0(C-2)，67.3(C-3)，45.1(C-4)，128.6(C-5)，131.5(C-6)，73.3(C-7)，20.7(C-8)，28.3(C-9)，28.9(C-10)，55.7(C-11)，55.9(6″,8″-OCH₃)，104.0(C-1′)，73.5(C-2′)，76.5(C-3′)，70.2(C-4′)，73.5(C-5′)，63.6(C-6′)，166.4(C-1″)，114.6(C-2″)，145.3(C-3″)，124.2(C-4″)，106.0(C-5″)，147.9(C-6″)，138.2(C-7″)，147.9(C-8″)，106.0(C-9″)，55.9(6″,8″-OCH₃)。

化合物Z43為6″-O-反式-芥子酰基-京尼平龍膽二糖苷(6″-O-trans-sinapoylgenipin gentiobioside)：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.09(1H，d，J＝4.8Hz，H-1)，7.47(1H，brs，H-3)，3.03(1H，m，H-5)，2.67(1H，m，H-6a)，2.13(1H，m，H-6b)，5.72(1H，brs，H-7)，2.60(1H，m，H-9)，3.92(1H，d，J＝11.2Hz，H-10a)，3.57(1H，d，J＝11.2Hz，H-10b)，3.64(3H，s，11-OCH₃)，4.54(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1′)，4.14(1H，d，J＝12.4Hz，Glc-H-6′a)，4.00(1H，d，J＝12.4Hz，Glc-H-6′b)，4.28(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.36(1H，d，J＝10.6Hz，Glc-H-6″a)，4.16(1H，d，J＝10.6Hz，Glc-H-6″b)，6.57(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.57(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.05(2H，s，H-5″′,9″′)，3.81(6H，s，6″′,8″′-2×OCH₃)；¹³C-NMR(DMSO-d₆，100MHz)δ：96.6(C-1)，151.6(C-3)，110.6(C-4)，34.8(C-5)，38.0(C-6)，125.9(C-7)，144.0(C-8)，45.5(C-9)，68.2(C-10)，166.9(C-11)，51.0(11-OCH₃)，99.0(C-1′)，70.2(C-2′)，76.5(C-3′)，73.5(C-4′)，76.2(C-5′)，59.4(C-6′)，103.3(C-1″)，69.8(C-2″)，76.5(C-3″)，73.4(C-4″)，73.1(C-5″)，63.5(C-6″)，166.7(C-1″′)，114.7(C-2″′)，145.6(C-3″′)，124.3(C-4″′)，106.2(C-5″′,9″′)，148.0(C-6″′,8″′)，138.2(C-7″′)，56.1(6″′,8″′-OCH₃)。

化合物Z44為6″-O-[(E)-p-香豆酰基]京尼平龍膽二糖苷(6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin)：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(MeOD，400MHz)δ：5.12(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.46(1H，brs，H-3)，3.12(1H，m，H-5)，2.77(1H，m，H-6a)，2.11(1H，m，H-6b)，5.82(1H，brs，H-7)，2.68(1H，m，H-9)，3.68(3H，s，11-OCH₃)，4.70(1H，d，J＝8.0Hz，Glc-H-1′)，4.30(1H，d，J＝14.4Hz，Glc-H-6′a)，4.18(1H，d，J＝14.4Hz，Glc-H-6′b)，4.39(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.50(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″a)，4.27(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″b)，6.35(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.62(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.45(2H，d，J＝8.4Hz，H-5″′,9″′)，6.80(2H，d，J＝8.4Hz，H-6″′,8″′)；¹³C-NMR(MeOD，100MHz)δ：98.9(C-1)，153.5(C-3)，112.3(C-4)，36.7(C-5)，39.8(C-6)，127.2(C-7)，144.8(C-8)，46.9(C-9)，61.6(C-10)，169.6(C-11)，51.9(11-OCH₃)，100.6(C-1′)，74.8(C-2′)，77.8(C-3′)，71.7(C-4′)，77.6(C-5′)，70.1(C-6′)，105.0(C-1″)，75.1(C-2″)，77.8(C-3″)，71.6(C-4″)，75.4(C-5″)，64.7(C-6″)，169.3(C-1″′)，115.0(C-2″′)，147.0(C-3″′)，129.1(C-4″′)，116.9(C-5″′,9″′)，131.4(C-6″′,8″′)，161.3(C-7″′)。

化合物Z45為6″-O-[3″′-甲氧基-(E)-咖啡酰氧基]京尼平龍膽二糖苷(6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin)：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(MeOD，400MHz)δ：5.13(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，7.46(1H，brs，H-3)，3.15(1H，m，H-5)，2.80(1H，m，H-6a)，2.15(1H，m，H-6b)，5.81(1H，brs，H-7)，2.70(1H，m，H-9)，3.70(3H，s，11-OCH₃)，4.70(1H，d，J＝8.0Hz，Glc-H-1′)，4.29(1H，d，J＝14.4Hz，Glc-H-6′a)，4.18(1H，d，J＝14.4Hz，Glc-H-6′b)，4.39(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.50(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″a)，4.27(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″b)，6.31(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.60(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.48(1H，dd，J＝1.2，8.8Hz，H-5″′)，7.43(1H，d，J＝1.2Hz，9″′)，6.79(1H，d，J＝8.8Hz，H-8″′)；¹³C-NMR(MeOD，100MHz)δ：98.8(C-1)，153.4(C-3)，112.4(C-4)，36.8(C-5)，39.8(C-6)，127.1(C-7)，144.8(C-8)，47.0(C-9)，61.5(C-10)，169.6(C-11)，51.8(11-OCH₃)，100.6(C-1′)，74.8(C-2′)，78.0(C-3′)，71.7(C-4′)，77.9(C-5′)，69.8(C-6′)，104.8(C-1″)，75.2(C-2″)，77.8(C-3″)，71.6(C-4″)，75.4(C-5″)，62.8(C-6″)，169.6(C-1″′)，116.9(C-2″′)，146.9(C-3″′)，131.2(C-4″′)，114.9(C-5″′)，146.6(C-6″′)，161.4(C-7″′)，116.0(C-8″′)，129.0(C-9″′)。

化合物Z46為4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(MeOD，400MHz)δ：5.14(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.46(1H，brs，H-3)，3.16(1H，m，H-5)，2.80(1H，m，H-6a)，2.15(1H，m，H-6b)，5.81(1H，brs，H-7)，2.69(1H，m，H-9)，3.69(3H，s，11-OCH₃)，4.70(1H，d，J＝8.0Hz，Glc-H-1′)，4.35(1H，dd，J＝3.2，16.0Hz，Glc-H-6′a)，4.28(1H，d，J＝16.0Hz，Glc-H-6′b)，4.38(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.48(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″a)，4.25(1H，dd，J＝12.0,1.6Hz，Glc-H-6″b)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.47(2H，d，J＝8.4Hz，H-5″′，9″′)，6.79(2H，d，J＝8.4Hz，H-6″′，8″′)；¹³C-NMR(MeOD，100MHz)δ：98.8(C-1)，153.4(C-3)，112.3(C-4)，36.8(C-5)，39.7(C-6)，127.1(C-7)，144.8(C-8)，46.9(C-9)，61.5(C-10)，169.6(C-11)，51.7(11-OCH₃)，100.6(C-1′)，78.0(C-2′)，74.8(C-3′)，77.9(C-4′)，71.6(C-5′)，64.7(C-6′)，105.0(C-1″)，75.4(C-2″)，77.6(C-3″)，71.9(C-4″)，77.8(C-5″)，62.8(C-6″)，169.2(C-1″′)，114.9(C-2″′)，146.9(C-3″′)，129.0(C-4″′)，131.3(C-5″′)，116.8(C-6″′)，161.2(C-7″′)，116.8(C-8″′)，131.3(C-9″′)。

化合物Z47為6″-O-[(E)-阿魏酸基]京尼平龍膽二糖苷(6″-O-[(E)-feruloyl]-gentio-biosylgenipin)：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(MeOD，400MHz)δ：5.14(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，7.44(1H，brs，H-3)，3.16(1H，m，H-5)，2.82(1H，m，H-6a)，2.15(1H，m，H-6b)，5.82(1H，brs，H-7)，2.69(1H，m，H-9)，3.69(3H，s，11-OCH₃)，4.70(1H，d，J＝8.0Hz，Glc-H-1′)，4.28(1H，d，J＝12.0Hz，Glc-H-6′a)，4.19(1H，d，J＝12.0Hz，Glc-H-6′b)，4.38(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.50(1H，dd，J＝2.0,12.0Hz，Glc-H-6″a)，4.11(1H，dd，J＝2.0,12.0Hz，Glc-H-6″b)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.64(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.50(1H，d，J＝1.2Hz，5″′)，7.47(1H，dd，J＝1.2，8.8Hz，H-5″′)，6.78(1H，d，J＝8.8Hz，H-8″′)；¹³C-NMR(MeOD，100MHz)δ：98.8(C-1)，153.4(C-3)，112.3(C-4)，36.8(C-5)，39.7(C-6)，127.1(C-7)，144.8(C-8)，46.9(C-9)，61.5(C-10)，169.6(C-11)，51.7(11-OCH₃)，100.6(C-1′)，74.8(C-2′)，78.0(C-3′)，71.6(C-4′)，77.9(C-5′)，69.7(C-6′)，105.0(C-1″)，75.1(C-2″)，77.8(C-3″)，71.8(C-4″)，75.4(C-5″)，64.8(C-6″)，169.2(C-1″′)，116.9(C-2″′)，146.9(C-3″′)，131.3(C-4″′)，114.9(C-5″′)，146.4(C-6″′)，146.6(C-7″′)，116.9(C-8″′)，129.0(C-9″′)。

化合物Z48為6″-O-[(E)-肉桂基]京尼平龍膽二糖苷(6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentio-biosylgenipin)：淡黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：5.19(1H，brs，H-1)，7.52(1H，brs，H-3)，3.03(1H，m，H-5)，2.65(1H，m，H-6a)，1.94(1H，m，H-6b)，5.62(1H，brs，H-7)，2.63(1H，m，H-9)，3.61(3H，s，11-OCH₃)，5.02(1H，d，J＝7.2Hz，Glc-H-1′)，4.57(1H，d，J＝7.6Hz，Glc-H-1″)，4.33(1H，dd，J＝2.0，12.0Hz，Glc-H-6′a)，4.13(1H，d，J＝2.0，12.0Hz，Glc-H-6′b)，4.28(1H，dd，J＝2.0,12.0Hz，Glc-H-6″a)，4.05(1H，dd，J＝2.0,12.0Hz，Glc-H-6″b)，6.36(1H，d，J＝16.0Hz，H-2″′)，7.65(1H，d，J＝16.0Hz，H-3″′)，7.49(1H，d，J＝4.8Hz，7″′)，7.46(2H，dd，J＝4.6，8.8Hz，H-5″′，9″′)，6.76(2H，dd，J＝1.2，8.8Hz，H-6″′，8″′)。

9.3梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位中黃酮類波譜數據信息：

化合物Z49為5，7-二羥基-3′，4′，5′-三甲氧基黃酮(5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone)：黃棕色粉末(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.86(1H，s，5-OH)，10.89(1H，s，7-OH)，7.35(2H，s，H-2′，6′)，7.09(1H，s，H-3)，6.59(1H，d，J＝2.4Hz，H-8)，6.23(1H，d，J＝2.4Hz，H-6)，3.91(6H，s，3′，5′-OCH₃)，3.75(3H，s，4′-OCH₃)。

化合物Z50為5，7，4′-三羥基-6-甲氧基黃酮(5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone)：黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.94(1H，s，5-OH)，10.84(1H，s，7-OH)，9.68(1H，brs，4′-OH)，8.08(2H，dd，J＝2.0,8.4Hz，H-2′，6′)，7.60(2H，dd，J＝2.0,8.4Hz，H-3′，5′)，6.99(1H，s，H-3)，6.65(1H，s，H-8)，3.76(3H，s，6-OCH₃)。

化合物Z51為5，7，4′-三羥基-8-甲氧基黃酮(5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxy-flavone)：黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.51(1H，s，5-OH)，8.08(2H，dd，J＝2.0,8.4Hz，H-2′，6′)，7.63(2H，dd，J＝2.0,8.4Hz，H-3′，5′)，6.98(1H，s，H-3)，6.29(1H，s，H-6)，3.85(3H，s，8-OCH₃)。

化合物Z52為5，7，3′-三羥基-8，4′，5′-三甲氧基黃酮(5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone)。黃色固體(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.93(1H，s，5-OH)，7.14(1H，s，H-2′)，7.13(1H，s，H-6′)6.84(1H，s，H-3)，6.45(1H，s，H-6)，3.88(3H，s，5′-OCH₃)，3.74(3H，s，8-OCH₃)，3.73(3H，s，4′-OCH₃)。

化合物Z53為5-羥基-6，7，3′，4′，5′-五甲氧基黃酮(5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone)：淡黃色結晶(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.85(1H，s，5-OH)，7.40(2H，s，H-2′，6′)，7.17(1H，s，H-3)，7.04(1H，s，H-8)，3.92(6H，s，3′，5′-OCH₃)，3.90(3H，s，7-OCH₃)，3.75(3H，s，4′-OCH₃)，3.74(3H，s，6-OCH₃)。

化合物Z54為5，3′-二羥基-7，4′，5′-三甲氧基黃酮(5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone)：淡黃色結晶(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.87(1H，s，5-OH)，7.21(1H，d，J＝2.0Hz，H-2′)，7.20(1H，d，J＝2.0，H-6′)，6.99(1H，s，H-3)，6.78(1H，d，J＝1.8Hz，H-8)，6.40(1H，d，J＝1.8Hz，H-6)，3.90(3H，s，5′-OCH₃)，3.89(3H，s，7-OCH₃)，3.76(3H，s，4′-OCH₃)。化合物Z55為5-羥基-7，3′，4′，5′-四甲氧基黃酮(5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone)：淡黃色結晶(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：12.86(1H，s，5-OH)，7.39(2H，s，H-2′，6′)，7.17(1H，s，H-3)，6.90(1H，d，J＝2.0Hz，H-8)，6.41(1H，d，J＝2.0Hz，H-6)，3.92(6H，s，3′，5′-OCH₃)，3.90(3H，s，7-OCH₃)，3.76(3H，s，4′-OCH₃)。

化合物Z56為3，5，6，4′-四羥基-3′，5′-二甲氧基黃酮(3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone)：黃色粉末(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：9.63(1H，s，3-OH)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz，H-7)，7.10(2H，s，H-2′，6′)，6.76(1H，d，J＝8.0Hz，H-8)，3.79(6H，s，3′，5′-OCH₃)。

化合物Z57為5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黃酮(5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone)：淡黃色結晶(甲醇)。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.39(2H，s，H-2′，6′)，7.17(1H，s，H-3)，6.89(1H，s，H-8)，6.41(1H，s，H-6)，3.92(6H，s，3′，5′-OCH₃)，3.89(3H，s，7-OCH₃)，3.88(3H，s，5-OCH₃)，3.76(3H，s，4′-OCH₃)。

9.4梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位中二萜類波譜數據信息：

化合物Z58為西紅花苷-I(crocin-I)：紅色粉末，FAB-MS m/z：978[M+H]⁺。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.37(2H，d，J＝10.7Hz，H-10,10′)，6.88(2H，dd，J＝8.0,2.6Hz，H-15,15′)，6.83(2H，d，J＝14.9Hz，H-12,12′)，6.66(2H，dd，J＝11.6,11.6Hz，H-11,11′)，6.53(2H，brd，J＝8.0，H-14,14′)，5.42(2H，d，J＝7.6Hz，H-1,1″)，4.16(2H，d，J＝7.8Hz，H-1′,1″′)，3.56～3.67(4H，m，H-6,6′,6″,6″′)，2.93～3.44(m，糖上其它質子)，2.00(6H，s，20,20′-Me)，1.97(6H，s，19,19′-Me)。

化合物Z59為西紅花苷-II(crocin-II)：紅色粉末，FAB-MS m/z：816[M+H]⁺。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：7.37(2H，d，J＝11.2Hz，H-10,10′)，6.88(2H，dd，J＝8.0,2.6Hz，H-15,15′)，6.82(2H，dd，J＝14.8,2.8Hz，H-12,12′)，6.66(2H，dd，J＝14.8,11.6Hz，H-11,11′)，6.53(2H，brd，J＝8.0Hz，H-14,14′)，5.42(2H，d，J＝7.6Hz，H-1,1″)，4.16(1H，d，J＝8.0Hz，H-1′)，3.56～3.67(3H，m，H-6,6′,6″)，2.93～3.48(m，糖上其它質子)，2.00(6H，s，20,20′-Me)，1.97(6H，s，19,19′-Me)。

實施例10

1.藥物制備

(1)1mg的Aβ25-35加超純水4.715ml配成200μmol/L，37℃孵育24小時后，置于2-8℃冰箱中貯存，備用。

(2)梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中各單體化合物京尼平苷(Z1)、去乙酰車葉草苷酸甲酯(Z2)、gardaloside(Z3)、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯(Z4)、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯(Z5)、梔子苷(Z6)、ajugol(Z7)、genipin-1-β-gentiobiside(Z8)、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside(Z9)、gardoside methyl ester(Z10)、shanzhiside(Z11)、Lamalbidicacid(Z12)、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid(Z13)、4-carboxyl-catapol acid(Z14)、Mussaenosidic acid(Z15)、geniposidic acid(Z16)、6-hydroxymethy-jasminoside D(Z17)、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranoside(Z18)、jasminoside A(Z19)、epijasminoside A(Z20)、jasminoside B(Z21)、jasminoside E(Z22)、jasminoside G(Z23)、jasminoside(Z24)的水溶液：將單萜苷類化合物單體Z1～Z24用蒸餾水配成5mmol/L的貯備液，實驗時用無血清的DMEM培養液依次稀釋成8μmol/L、20μmol/L、100μmol/L的工作液。

2.不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的測定，確定造模濃度和作用時間：取培養瓶中處于對數生長期的PC12細胞，經0.25％胰蛋白酶EDTA消化后。用含10％胎牛血清的DMEM高糖培養基將細胞稀釋為每毫升懸液含2×10⁵個細胞，接種于96孔培養板，每孔100μl(2×10⁴)，放入CO₂培養箱，37℃、5％CO₂條件下培養，待細胞長滿孔底后即可用于實驗。實驗共分4組，每組8孔，實驗時吸棄舊培養液。空白對照組(Control)：每孔只加入100μl無血清DMEM低糖培養基；Aβ(25-35)模型組：每孔分別加入用無血清DMEM低糖培養基配制的終濃度為5μM、10μM、20μM的Aβ(25-35)或10μM、20μM、40μM的Aβ(25-35)。37℃培養24h后或48h后，每孔加入終濃度為0.5mg/ml MTT(10μl)，繼續培養4h后吸去DMEM培養基，每孔加入DMSO100μl，振搖混勻10min，待孔內顆粒完全溶解后，在酶標儀492nm處測定吸光度(A_492nm)值。

3.梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中各單萜苷類單體化合物Z1～Z24對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用：細胞培養同2.不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的測定。實驗共分30組，每組10孔，實驗時吸棄舊培養液。空白對照組(Control)：每孔只加入100μl無血清DMEM低糖培養基；Aβ(25-35)模型組：每孔加入用無血清DMEM低糖培養基配制的終濃度為10μM的Aβ(25-35)；各給藥組每孔加入終濃度為10μM的Aβ(25-35)及溶液為1.藥物制備中的Z1～Z24中各給藥組的藥物。37℃培養24h后，每孔加入終濃度為0.5mg/ml MTT(10μl)，繼續培養4h后吸去DMEM培養基，每孔加入DMSO100μl，振搖混勻10min，待孔內顆粒完全溶解后，在酶標儀492nm處測定吸光度(A_492nm)值。

4.計算公式

所有數據以表示，組間比較用t檢驗。細胞存活率的計算公式為：實驗組A值/對照組A值×100％。

5實驗結果

5.1不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的影響和確定造模濃度和作用時間

5μM、10μM、20μM不同濃度的Aβ_25-35與PC12細胞共孵24h后，細胞活力顯著下降，表現為A_492nm值明顯下降；且隨著Aβ_25-35劑量的增加PC12細胞活力下降更加明顯。結果見表4。

表4 24h后不同濃度的Aβ25‐35對PC12細胞活力的影響(n＝8)

注：^**與空白對照組比較p<0.01

10μM、20μM、40μM不同濃度的Aβ_25-35與PC12細胞共孵24h后或48h后，細胞活力顯著下降，表現為A_492nm值明顯下降；且隨著Aβ_25-35劑量和時間的增加PC12細胞活力下降更加明顯。結果見表5和6。

表5 24h后不同濃度的Aβ25‐35對PC12細胞活力的影響(n＝10)

注：^**與空白對照組比較p<0.01

表6 48h后不同濃度的Aβ25‐35對PC12細胞活力的影響(n＝10)

注：^**與空白對照組比較p<0.01

觀察結果：20μM的Aβ25-35處理PC12細胞24小時后，細胞形態發生了很大的改變：模型組PC12細胞可見細胞膜外圍的纖毛消失，細胞漿內出現空泡，細胞聚集成團，大多數細胞由多邊形變成不規則形狀和圓形，細胞的折光性變差。正常對照組的PC12細胞，細胞個體飽滿，凸出明顯，細胞呈現多邊形、菱形或梭形，細胞長勢很好，細胞的折光性正常。從而說明Aβ_25-35致PC12細胞損傷模型較好的復制了AD的病理變化，是研究AD較好的模型。確定造模濃度和作用時間為：20μM的Aβ25-35處理PC12細胞24小時。

5.2不同濃度的梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中各單萜苷類Z1～Z24單體化合物對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

不同濃度的梔子果實30％乙醇洗脫有效部位中各單體化合物京尼平苷(Z1)、去乙酰車葉草苷酸甲酯(Z2)、gardaloside(Z3)、6-甲氧基雞屎藤次苷甲酯(Z4)、6-甲氧基去乙酰車葉草苷酸甲酯(Z5)、梔子苷(Z6)、ajugol(Z7)、genipin-1-β-gentiobiside(Z8)、genipin-1,10-di-O-β-D-glucopyranoside(Z9)、gardoside methyl ester(Z10)、shanzhiside(Z11)、Lamalbidicacid(Z12)、4-carboxyl-7-hydroxy-catapol acid(Z13)、4-carboxyl-catapol acid(Z14)、Mussaenosidic acid(Z15)、geniposidic acid(Z16)、6-hydroxymethy-jasminoside D(Z17)、bornyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranoside(Z18)、jasminoside A(Z19)、epijasminoside A(Z20)、jasminoside B(Z21)、jasminoside E(Z22)、jasminoside G(Z23)、jasminoside(Z24)對Aβ_25-35所致PC12細胞損傷有保護作用，使其細胞活力增強，表現為A_492nm值上升。結果見表7、8、9和圖1、2、3。不同濃度的單萜苷類單體化合物Z1～Z24對受損的PC12細胞的保護作用如圖1、2、3所示。

表7不同濃度的單萜苷類單體化合物Z1～Z8對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

表8不同濃度的單萜苷類單體化合物Z9～Z16對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

表9不同濃度的單萜苷類單體化合物Z17～Z24對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

實施例11

阿爾茨海默病(AD)的病理特征為大腦皮質和海馬出現大量的老年斑(SP)、神經纖維纏結(NFT)、神經元大量丟失和癡呆表現，其中Aβ聚集是中心環節，也是AD發病的關鍵性因素和關鍵性治療靶點，干擾Aβ的產生和阻止其聚集是防治AD的有效途徑，開發抑制Aβ纖絲形成和聚集的新藥對預防和對癥治療AD具有良好的學術與臨床應用價值。本發明利用Aβ_25-35致PC12細胞損傷模型，采用MTT法檢測了各實驗組細胞的活力篩選并確證梔子果實治療異質性及多因性阿爾茨海默病藥物或輔助改善記憶功能保健食品中60％乙醇洗脫有效部位中各單體化合物單萜苷元類成分jasminoside C aglycone(Z25)、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone(Z26)、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z27)、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z28)、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone(Z29)、iridoids 2a(Z30)、iridoids 2b(Z30)、jasminodiol(Z31)、crocusatin-C(Z32)、7-Epi-crocusatin-C(Z33)、(10S,11S)-Gardendiol(Z34)、(10R,11R)-Gardendiol(Z35)、(5S,9S)-Gardenate A(Z36)、(5R,9R)-Gardenate A(Z36)、5,6-dihydroxymethyl-1,1-dimethylcyclohex-4-enone(Z37)、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyrancyclopenta-4-carbaldehyde(Z38)或環烯醚萜苯丙素苷類成分5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A(Z39)、6′-O-sinapoyljasminoside B(Z40)、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L(Z41)、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E(Z42)、6″-O-trans-sinapoylgeni-pin gentiobioside(Z43)、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin(Z44)、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin(Z45)、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin(Z46)、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin(Z47)、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin(Z48)或黃酮類成分5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone(Z49)、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone(Z50)、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone(Z51)、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone(Z52)、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone(Z53)、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone(Z54)、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone(Z55)、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone(Z56)、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone(Z57)或二萜類成分crocin-I(Z58)、crocin-II(Z59)單體化合物具有治療阿爾茨海默病(AD)或輔助改善記憶功效的有效成分(波譜數據祥見實施例9中所述化合物)，為梔子果實藥材治療阿爾茨海默病(AD)藥物或輔助改善記憶功能保健食品的研究奠定理論基礎。

1.藥物制備

(1)1mg的Aβ25-35加超純水4.715ml配成200μmol/L，37℃孵育24小時后，置于2-8℃冰箱中貯存，備用。

(2)梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中各單體化合物單萜類苷元成分jasmino-side C aglycone(Z25)、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone(Z26)、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z27)、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z28)、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone(Z29)、iridoids 2a(Z30)、iridoids 2b(Z30)、jasminodiol(Z31)、crocusatin-C(Z32)、7-Epi-crocusatin-C(Z33)、(10S,11S)-Gardendiol(Z34)、(10R,11R)-Gardendiol(Z35)、(5S,9S)-Gardenate A(Z36)、(5R,9R)-Gardenate A(Z36)、5,6-dihydroxymethyl-1,1-dimethyl-cyclohex-4-enone(Z37)、1-hydroxy-7-hydroxylmethyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyran-cyclopenta-4-carbaldehyde(Z38)或環烯醚萜苯丙素苷類成分5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A(Z39)、6′-O-sinapoyljasminoside B(Z40)、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L(Z41)、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasminoside E(Z42)、6″-O-trans-sinapoylgenipin gentiobioside(Z43)、6″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin(Z44)、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosylgenipin(Z45)、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin(Z46)、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin(Z47)、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin(Z48)或黃酮類成分5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone(Z49)、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone(Z50)、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone(Z51)、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone(Z52)、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone(Z53)、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone(Z54)、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone(Z55)、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone(Z56)、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone(Z57)或二萜類成分crocin-I(Z58)、crocin-II(Z59)的水溶液：將上述化合物單體Z25～Z59用蒸餾水配成5mmol/L的貯備液，實驗時用無血清的DMEM培養液依次稀釋成8μmol/L或10μmol/L、20μmol/L或25μmol/L、100μmol/L的工作液。

2.不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的測定，確定造模濃度和作用時間見實施例10。

3.梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中Z25～Z59單體化合物對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

細胞培養同實施例10中2.不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的測定。實驗共分37組，每組10孔，實驗時吸棄舊培養液。空白對照組(Control)：每孔只加入100μl無血清DMEM低糖培養基；Aβ(25-35)模型組：每孔加入用無血清DMEM低糖培養基配制的終濃度為10μM的Aβ(25-35)；各給藥組每孔加入終濃度為10μM的Aβ(25-35)及溶液為1.藥物制備中的Z25～Z59中各給藥組的藥物。37℃培養24h后，每孔加入終濃度為0.5mg/ml MTT(10μl)，繼續培養4h后吸去DMEM培養基，每孔加入DMSO100μl，振搖混勻10min，待孔內顆粒完全溶解后，在酶標儀492nm處測定吸光度(A_492nm)值。

4.計算公式

所有數據以表示，組間比較用t檢驗。細胞存活率的計算公式為：實驗組A值/對照組A值×100％。

5實驗結果

5.1不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞活力的影響和確定造模濃度和作用時間見實施例10。

5.2不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中單萜類苷元單體化合物Z25～Z38對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中單萜類苷元成分jasminoside C aglycone(Z25)、5，5-dihydroxymethyl-1-cyclohexene-furan lactone(Z26)、6-hydroxyl-3-hydroxy-methyl-4，4-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z27)、4-hydroxyl-2-hydroxymethyl-6，6-dimethyl-1-cyclohexene-1-formaldehyde(Z28)、4-hydroxyl-1,5,5-trimethyl-6-epoxyethyl-cyclohex-3-enone(Z29)、iridoids 2a(Z30)、iridoids 2b(Z30)、jasminodiol(Z31)、crocusatin-C(Z32)、7-Epi-crocusatin-C(Z33)、(10S,11S)-Gardendiol(Z34)、(10R,11R)-Gardendiol(Z35)、(5S,9S)-Gardenate A(Z36)、(5R,9R)-Gardenate A(Z36)、5,6-dihydroxymethyl-1,1-dimethyl-cyclohex-4-enone(Z37)、1-hydroxy-7-hydroxyl-methyl-1,4a,5,7a-tetrahydro-pyran-cyclopenta-4-carbaldehyde(Z38)單體化合物對Aβ_25-35所致PC12細胞損傷有保護作用，使其細胞活力增強，表現為A_492nm值上升。結果見表10、11和圖4、5。不同濃度的單萜類苷元單體化合物Z25～Z38對受損的PC12細胞的保護作用如圖4、5所示。

表10不同濃度的單萜類苷元單體化合物Z25～Z30對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

表11不同濃度的單萜類苷元單體化合物Z31～Z38對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

5.3不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物Z39～Z48對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中環烯醚萜苯丙素苷類成分5-aldehyde-6′-O-sinapoyljasminoside A(Z39)、6′-O-sinapoyljasminoside B(Z40)、6′-O-trans-sinapoyljasminoside L(Z41)、6′-O-sinapoyl-3-methoxy-4-deketone-jasmi-noside E(Z42)、6″-O-trans-sinapoylgenipin gentiobioside(Z43)、6″-O-[(E)-p-cou-maroyl]-gentiobiosylgenipin(Z44)、6″-O-[3″′-methoxy-(E)-caffeoyl]-gentiobiosyl-genipin(Z45)、4″-O-[(E)-p-coumaroyl]-gentiobiosylgenipin(Z46)、6″-O-[(E)-feruloyl]-gentiobiosylgenipin(Z47)、6″-O-[(E)-cinnamoyl]-gentiobiosylgenipin(Z48)單體化合物對Aβ_25-35所致PC12細胞損傷有保護作用，使其細胞活力增強，表現為A_492nm值上升。結果見表12和圖6。不同濃度的環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物Z39～Z48對受損的PC12細胞的保護作用如圖6所示。

表12不同濃度的環烯醚萜苯丙素苷類單體化合物Z39～Z48對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

5.4不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中黃酮類單體化合物Z49～Z57對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中黃酮類成分5，7-dihydroxyl-3′，4′，5′-trimethoxyflavone(Z49)、5，7，4′-trihydroxyl-6-methoxyflavone(Z50)、5，7，4′-trihydroxyl-8-methoxyflavone(Z51)、5，7，3′-trihydroxyl-8，4′，5′-trimethoxyflavone(Z52)、5-hydroxyl-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone(Z53)、5，3′-dihydroxyl-7，4′，5′-trimethoxyflavone(Z54)、5-hydroxyl-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone(Z55)、3，5，6，4′-tetrahydroxy-3′，5′-dimethoxyflavone(Z56)、5，7，3′，4′，5′-pentame-thoxyflavone(Z57)單體化合物對Aβ_25-35所致PC12細胞損傷有保護作用，使其細胞活力增強，表現為A_492nm值上升。結果見表13和圖7。不同濃度的黃酮類單體化合物Z49～Z57對受損的PC12細胞的保護作用如圖7所示。

表13不同濃度的黃酮類單體化合物Z49～Z57對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01

5.5不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中二萜類單體化合物Z58～Z59對Aβ25-35所致PC12細胞損傷的保護作用

不同濃度的梔子果實60％乙醇洗脫有效部位中二萜類成分單體化合物crocin-I(Z58)、crocin-II(Z59)對Aβ_25-35所致PC12細胞損傷有保護作用，使其細胞活力增強，表現為A_492nm值上升。結果見表14和圖8。不同濃度的藏紅花素二萜類單體化合物Z58～Z59對受損的PC12細胞的保護作用如圖8所示。

表14不同濃度的藏紅花素二萜類單體化合物Z58～Z59對受損的PC12細胞的保護作用(n＝10)

注：^*與Aβ模型組比較p<0.05；^**與Aβ模型組比較p<0.01 。

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