NRF2激活子化合物、藥物及白術內酯Ⅱ的新用途的制作方法

本發明屬于生物化學領域，涉及NRF2激活子。

背景技術：

核因子E2相關因子2(nuclear factor-E2-related factor 2，NRF2)通路是癌癥化學預防的關鍵信號通路之一。在癌癥發展的過程中，NRF2通路通過致癌物質、具有化學預防作用的化合物等的誘導而被激活，從而誘導NQO1、γ-GCS、GSTs、HO-1等II相解毒酶的合成，起到抗氧化、抗炎、解毒等作用，繼而保護細胞。大量研究表明，NRF2的激活對多種疾病的預防有重要作用，如癌癥、神經組織退化性疾病、心血管疾病、缺血、糖尿病、肺纖維化、以及炎癥等。

就癌癥而言，II相代謝酶可以催化結合或減少I相代謝反應產生的代謝物，從而減少致癌物質的產生。II相酶的基因表達是通過其DNA上順式反應元件(ARE)進行調控的。化學致癌物的致癌性可以通過一些親電子的化合物的親電作用而被抑制，通常這些親電化合物就被叫作“化學預防劑”。這些親電化合物可以誘導II相解毒酶，使細胞能夠解毒并除去這些化學致癌物從而保護細胞。而通過ARE來調控這些基因正是轉錄因子NRF2的職責。正常情況下，NRF2存在于細胞質內，并通過泛素-26S蛋白酶體通路迅速被降解，處于抑制狀態，Keap1在此過程中作為Cul3依賴的E3泛素連接酶的底物適配器，以NRF2上賴氨酸殘基的Neh2結構域作為靶點，從而完成與泛素的結合。當受到活性氧、親電子物質或者上游信號通路——促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、蛋白激酶C(PKC)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的刺激后，NRF2會脫離Keap1并進入細胞核內，繼而與肌腱纖維瘤蛋白肌腱纖維瘤蛋白(muscle aponeurotic fibrosarcoma protein,Maf)以異二聚體的形式結合，此二聚體再與下游基因的ARE結合，從而使II相解毒酶、氧化還原酶類、轉運蛋白等NRF2的下游基因增多，起到保護細胞的作用。因此，作為NRF2激活子的化合物，可以通過調控NRF2通路實現對細胞的保護，起到對癌癥的治療和預防作用。

另一方面，NRF2的激活還可以增強細胞的抗氧化應激能力，維持細胞內的氧化還原平衡，減少自由基或化學致癌原對細胞的損傷。從而NRF2激活子可預防或延緩氧化應激相關疾病的發生和發展。

現有技術中已知有若干可調節NRF2通路的化合物，在實現本發明過程中，發明人發現現有技術中至少存在如下問題：

1、美國雅培公司研發的bardoxolone被認為是細胞內的抗氧化劑及解毒酶的重要調節子，并能抑制主要的炎癥基因調節器NFkB，旨在激活NRF2通路，被開發用于 慢性腎病及糖尿病治療，但由于特異性過低并且能與多種蛋白質發生結合，在試驗過程中發生了過量的嚴重不良事件及死亡，最終止步于Ⅲ期臨床試驗。

2、現在許多研究也發現了一些NRF2化學誘導子，如brusatol,ascorbic acid(抗壞血酸),luteolin(木犀草素),ochratoxin A(赭曲霉素A),trigonellin(胡蘆巴堿),all-trans retinoic acid(全反式維甲酸)、Sulforaphane(蘿卜硫素)等，但是它們的有效性仍不令人滿意甚至產生毒性，并且它們的作用機理也并不完全清楚。

技術實現要素：

鑒于此，本發明目的在于提供一種有效的、低毒的、作用機理清楚的可調節NRF2通路的誘導劑或藥物。

發明人通過長期的探索和嘗試，以及多次的實驗和努力，不斷的改革創新，為解決以上技術問題，提供更有效的NRF2誘導劑，從而可制備用于治療和預防與NRF2通路調控有關的疾病的藥物或食品，包括保健品。

具體的說，本發明提供的技術方案是，首先提供一種NRF2激活子化合物，該化合物為白術內酯Ⅱ。

本發明中所述的化合物結構式如下：

中文名稱：白術內酯Ⅱ，

英文名稱：2-Atractylenolide，

分子式：C₁₅H₂0O₂，

分子量：232.32，

CAS號：73069-14-4。

本發明還提供了一種藥物，該藥物是治療和預防與NRF2通路調控有關的疾病的藥物，包括組分白術內酯Ⅱ。

根據本發明所述藥物的一個實施方式，所述與NRF2通路調控有關的疾病為神經組織退化 性疾病、心血管疾病、缺血、糖尿病、肺纖維化、炎癥、癌癥中的任一種。

根據本發明所述藥物的一個實施方式，所述與NRF2通路調控有關的疾病為乳腺癌。

根據本發明所述藥物的一個優選實施方式，所述藥物為口服溶液，所述口服溶液包括白術內酯Ⅱ和用于溶解白術內酯Ⅱ的溶劑。作為本領域技術人員，能夠將本發明所述白術內酯Ⅱ還可以配制成其他適合的藥物制劑的形式，藥學上可被接受的載體和/或賦形劑均可以通過常規實驗進行合理選擇。

根據本發明所述藥物的一個實施方式，所述乳劑各組分及其質量百分比分別為：15％-25％聚氧乙烯蓖麻油、5％-15％乙醇、5％-15％吐溫80、50％-70％水。

本發明還提供了一種白術內酯Ⅱ的新用途，用于制備治療或防治與NRF2通路調控有關的疾病的藥物或食品。

根據本發明所述白術內酯Ⅱ的新用途的一個實施方式，所述與NRF2通路調控有關的疾病為癌癥。

根據本發明所述白術內酯Ⅱ的新用途的一個實施方式，所述與NRF2通路調控有關的疾病為乳腺癌。

根據本發明所述白術內酯Ⅱ的新用途的一個實施方式，所述與NRF2通路調控有關的疾病是與氧化應激相關的疾病。

與現有技術相比，上述技術方案中的一個技術方案具有如下優點：

a)經過發明人大量探索研究，試驗和篩選了多種化合物，意外地發現：白術內酯Ⅱ可作為有效的NRF2誘導劑。

b)實驗證明，白術內酯Ⅱ能夠用于治療和預防與NRF2通路調控有關的疾病的藥物中。特別是通過細胞實驗和動物實驗證明了白術內酯Ⅱ對乳腺癌細胞生長的抑制作用。

c)與NFR2通路調控相關的疾病有：神經組織退化性疾病、心血管疾病、缺血、糖尿病、肺纖維化、以及炎癥、癌癥，更具體的，所述癌癥為乳腺癌。

d)正常情況下，Nrf2存在于細胞質內，并通過泛素-26S蛋白酶體通路迅速被降解，處于抑制狀態。Keap1在此過程中作為Cul3依賴的E3泛素連接酶的底物適配器，以Nrf2上賴氨酸殘基的Neh2結構域作為靶點，從而完成與泛素的結合。當受到活性氧、親電子物質或者上游信號通路——促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、蛋白激酶C(PKC)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的刺激后，Nrf2會脫離Keap1并進入細胞核內，繼而與肌腱纖維瘤蛋白(muscle aponemuscle fibrosarcoma protein,Maf)以異二聚體的形式結合，此二聚體再與下游基因的ARE結合，從 而使II相解毒酶、氧化還原酶類、轉運蛋白等Nrf2的下游基因增多，這些酶的增加能夠減少對細胞有害的活性氧、毒素以及致癌劑等，從而起到保護作用。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施方式的技術方案，下面將對實施方式中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖僅示出了本發明的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1是白術內酯Ⅱ對MCF 10A乳腺癌細胞的生長抑制作用趨勢分析圖。。

圖2-1-1是不同濃度的白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和陽性對照藥物(姜黃素，CUR)作用于MCF 10A細胞48h后，對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的mRNA水平影響的電泳圖。

圖2-1-2是不同濃度的白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和陽性對照藥物(姜黃素，CUR)作用于MCF 10A細胞48h后，對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的mRNA水平影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，**P<0.01，n＝3。

圖2-2-1是50μM白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和20μM陽性對照藥物(姜黃素，CUR)處理24h、48h和72h后，對MCF-10A細胞Keap1、NRF2、HO-1和NQO1mRNA水平影響的電泳圖。

圖2-2-2是50μM白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和20μM陽性對照藥物(姜黃素，CUR)處理24h、48h和72h后，對MCF-10A細胞Keap1、NRF2、HO-1和NQO1mRNA水平影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，**P<0.01，n＝3。

圖3-1-1是不同濃度的白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和陽性對照20μM CUR(姜黃素，CUR)作用于MCF 10A細胞48h后，對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的蛋白表達的電泳圖。

圖3-1-2是不同濃度的白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)和陽性對照20μM CUR(姜黃素，CUR)作用于MCF 10A細胞48h后，對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的蛋白表達影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，**P<0.01，n＝3。

圖3-2-1是50μM白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)在不同處理時間對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的蛋白表達影響的電泳圖。

圖3-2-2是50μM白術內酯Ⅱ(At-Ⅱ)在不同處理時間對MCF 10A細胞中KEAP1、NRF2、HO-1、NQO1的蛋白表達影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean± S.D.)表示，*P<0.05，**P<0.01，n＝3。

圖3-3-1是不同濃度白術內酯II(At-II)處理不同時間后在MCF-7細胞中對NRF2和NQO1蛋白表達影響的電泳圖。

圖3-3-2是不同濃度白術內酯II(At-II)處理不同時間后在MCF-7細胞中對NRF2和NQO1蛋白表達影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，n＝3。

圖3-4-1是不同濃度白術內酯II(At-II)處理不同時間在MDA-MB-231細胞中對NRF2和NQO1蛋白表達影響的電泳圖。

圖3-4-2是不同濃度白術內酯II(At-II)處理不同時間在MDA-MB-231細胞中對NRF2和NQO1蛋白表達影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，n＝3。

圖3-5是不同濃度白術內酯II(A)處理不同時間后在MCF-7細胞內對NQO1活性影響的實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，n＝3。

圖3-6是不同濃度白術內酯II(A)處理不同時間后在MDA-MB-231細胞內對NQO1活性影響實驗數據分析結果圖。實驗數據均以平均值±標準差(Mean±S.D.)表示，*P<0.05，n＝3。

圖4-1-1是NC-shRNA轉染的MCF MCF-10A細胞在At-II和陽性對照CUR預處理或不預處理的情況下，于含雌二醇的空白軟瓊脂或含藥物和雌二醇的軟瓊脂中生長21天對MCF-10A細胞E2-誘導惡變影響的照片。

圖4-1-2是NC-shRNA轉染的MCF MCF-10A細胞在At-II和陽性對照CUR預處理或不預處理的情況下，于含雌二醇的空白軟瓊脂或含藥物和雌二醇的軟瓊脂中生長21天對MCF-10A細胞E2-誘導惡變影響的實驗數據分析結果圖。±SD，n＝3；##，與對照組相比P<0.01；*，與E2-處理組相比P<0.05；**，與E2-處理組相比P<0.01。

圖4-2-1是NRF2-shRNA轉染的MCF 10A細胞在At-II和陽性對照CUR預處理或不預處理的情況下，于含雌二醇的空白軟瓊脂或含藥物和雌二醇的軟瓊脂中生長21天對MCF-10A細胞E2-誘導惡變影響的照片。

圖4-2-2是NRF2-shRNA轉染的MCF 10A細胞在At-II和陽性對照CUR預處理或不預處理的情況下，于含雌二醇的空白軟瓊脂或含藥物和雌二醇的軟瓊脂中生長21天對MCF-10A細胞E2-誘導惡變影響的實驗數據分析結果圖。±SD，n＝3；##，與對照組相比P<0.01；*，與E2-處理組相比P<0.05；**，與E2-處理組相比P<0.01。

圖5是白術內酯II對裸鼠的MDA-MB-231異位移植瘤的生長抑制結果的實驗數據分析結果圖。n＝3。

圖6是對照組和白術內酯II組裸鼠皮下接種MDA-MB-231腫瘤細胞后的體重情況的實驗數據分析結果圖。n＝3。

圖7-1是灌胃白術內酯II對裸鼠MDA-MB-231移植物的腫瘤大小對比照片。

圖7-2是灌胃白術內酯II對裸鼠MDA-MB-231移植物的腫瘤腫瘤數據處理結果圖。

圖8是經蘇木紅-伊紅(H&E)染色后在光學顯微鏡下觀察組織的形態學變化及NRF2和NQO1蛋白量變化結果對比照片。

具體實施方式

下面結合附圖與具體實施例進行說明。

為使本發明實施方式的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合本發明實施方式中的附圖，對本發明實施方式中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施方式是本發明一部分實施方式，而不是全部的實施方式。基于本發明中的實施方式，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施方式，都屬于本發明保護的范圍。因此，以下對在附圖中提供的本發明的實施方式的詳細描述并非旨在限制要求保護的本發明的范圍，而是僅僅表示本發明的選定實施方式。

制備實施例

化合物白術內酯Ⅱ(來自市售，純度>98％)。用乳劑(配方：20％聚氧乙烯蓖麻油、10％乙醇、10％吐溫80、60％水)溶解制成口服溶液。

生物活性實施例

化合物白術內酯Ⅱ對NRF2通路的調控作用

發明人將pARE-TI-熒光素酶結構轉染至HepG2細胞，得到轉染后的HepG2-ARE-C8細胞，建立起穩定的細胞系，用以進行ARE(antioxidant responsive element,抗氧化反應元件)熒光素酶報告基因試驗，發現本發明中的化合物白術內酯Ⅱ能夠明顯激活熒光素酶基因的表達。當具有誘導NRF2功能的藥物刺激細胞時，細胞質中的NRF2將與Keap1解偶聯，之后進入細胞核，與Maf蛋白結合成異二聚體后識別并結合上述下游基因的ARE繼而啟動ARE調控的下游基因，提高Ⅱ相解毒酶的表達。所以，ARE熒光素酶報告基因檢測方法能快速簡便的確定被測物質是否具有調控Keap1-NRF2-ARE通路的活性。因此本發明中的化合物白術內酯Ⅱ能夠明顯激活熒光素酶基因的表達，這一結果說明此化合物是NRF2的激活子。

具體實驗過程如下：

將pARE-TI-熒光素酶結構轉染至HepG2細胞(購自美國模式菌種收集中心ATCC)，得到轉染后的HepG2-ARE-C8細胞用以進行ARE熒光素酶報告基因試驗。將HepG2-C8細胞根據實驗需要接種于不同細胞培養皿，按照常規條件培養細胞。通過處理后，利用熒光素酶實驗 試劑盒(Promega，Madison)測定HepG2-C8細胞中的ARE熒光素酶活性，并以BCA試劑盒測定的蛋白濃度對熒光素酶活性進行校準。經48h處理后，100μM白術內酯Ⅱ使HepG2-C8細胞中的ARE熒光素酶活性升至空白對照組的3倍。可見，白術內酯Ⅱ能夠明顯誘導HepG2-C8細胞中的ARE熒光素酶的活性。因此，白術內酯Ⅱ具有調控NRF2通路的作用，是有效的NRF2通路激活劑，從而有希望作為癌癥的治療劑和化學預防劑。

(1)細胞實驗

發明人從細胞水平上證明了此化合物是NRF2的激活子，以人乳腺癌MCF-10A細胞為例，白術內酯Ⅱ對上述癌細胞具有明顯生長抑制作用。并進一步證明了該化合物可升高MCF-10A細胞中的NRF2mRNA水平、可誘導細胞中的NRF2與NQO1蛋白水平。發明人還通過軟瓊脂克隆形成實驗來考察化合物對17β-雌二醇(E2)對MCF-10A細胞致癌作用的影響。軟瓊脂克隆形成實驗(Soft agar assay)是利用細菌瓊脂粉將細胞培養基轉變為半固體的“果凍”狀態用以培養細胞，在軟瓊脂培養基中，正常細胞仍停留在接種時的狀態，幾乎不進行增殖，但已轉化(癌變)的細胞則以半浮游狀態增殖，而形成菌落。在長時間的致癌劑E2誘導后，癌變的MCF-10A細胞可以在軟瓊脂中具有形成集落的能力，而正常的MCF-10A細胞則不具備此能力。通過癌癥化學預防藥物的處理，癌變的MCF-10A的集落形成能力會下降，相應的集落個數也會下降。因此，MCF-10A的軟瓊脂克隆形成實驗是考察藥物化學預防能力的經典理想體外模型。結果顯示化合物白術內酯Ⅱ能明顯抑制E2誘導的MCF-10A細胞成簇能力，表明該化合物對E2誘導的MCF-10A細胞癌變具有明顯抑制作用。

具體實驗過程如下：

①對乳腺癌細胞生長的抑制作用：

采用SRB(Sulforhodamine B)比色法進行細胞計數，SRB是一種粉紅色陰離子染料，在酸性條件下可特異性地與細胞內組成蛋白質的堿性氨基酸結合，在560nm波長下產生吸收峰，吸光值與細胞量成線性正相關，故可用作細胞數的定量檢測。結果如圖1所示，白術內酯II對MCF 10A乳腺癌細胞具有一定的生長抑制作用，且該抑制作用具有時間、濃度依賴性，通過計算可得其處理24h、48h和72h的IC50值分別為903μM、512μM和437μM。

②對乳腺癌細胞中NRF2相關基因mRNA的表達的作用：

采用RT-PCR法進行mRNA的表達的定量，反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)是一種分子生物學技術，可將提得的RNA鏈逆轉錄為互補的DNA，再以此為模板放大擴增DNA，進行生物體外的特殊DNA復制，從而利用瓊脂糖凝膠起到半定量的作用。最后使用ImageJ軟件對得到的DNA條帶進行定量分析。實驗結果如圖2-1-1和2-1-2所示，50μM、100μM白術內酯 Ⅱ和陽性對照藥物20μM CUR(姜黃素)均能顯著上調NRF2、HO-1、NQO1的mRNA水平(P<0.05)；并且如圖2-2-1和圖2-2-2所示，50μM白術內酯II(At-II)處理48h和72h均能顯著上調NRF2、HO-1、NQO1的mRNA水平(P<0.05)，其中At-II處理72h對NRF2的mRNA水平的上調作用大于48h。

③對乳腺癌細胞中KEAP1-NRF2-ARE信號通路蛋白表達的影響：

利用Western Blot方法研究五種化合物對乳腺癌細胞中NRF2與NQO1蛋白水平的影響。NQO1是NRF2眾多下游基因中的一種，NRF2可通過與其啟動子上ARE序列的結合從而調控其表達。NQO1的調控是通過ARE介導的，能夠結合ARE序列的物質便能夠調控NQO1的表達，而比起其他的ARE調控劑(例如Nrf1、Maf等)hNQO1的ARE序列更加接近NRF2。因此，NQO1是NRF2非常重要的一種下游基因，藥物對其蛋白水平的影響可以提示藥物對NQO1還原酶的激活能力，并從側面顯示出藥物對NRF2結合下游靶基因的ARE的功能的影響。Western Blot即蛋白免疫印跡法，是分子生物學中常用的實驗方法。通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞樣品進行著色，再分析著色的位置和著色深度，來定性、定量的獲得蛋白質在細胞中的表達情況。NQO1酶活性實驗利用細胞質中DCPIP的雙香豆素抑制基團的減少來表示NQO1的活性。結果如圖3-1-1和3-1-2所示，與空白組相比，50μM、100μM At-II和陽性對照20μM CUR均能顯著上調MCF-10A乳腺癌細胞中NRF2、HO-1、NQO1的蛋白表達(P<0.05)，其中50μM At-II對NRF2蛋白表達的上調作用大于100μM At-II。結果如圖3-2-1和3-2-2所示，50μM At-II處理24h、48h和72h均能顯著上調MCF-10A乳腺癌細胞中NRF2、HO-1的蛋白表達(P<0.05)，處理48h和72h能顯著上調NQO1的蛋白表達(P<0.05)，其中At-II處理48h和72h對NRF2蛋白表達的上調作用大于24h，48h和72h的作用相當。并且如圖3-3-1、3-3-2和圖3-4-1、3-4-2所示，適宜的濃度及處理時間均能顯著上調MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌細胞中NRF2、NQO1的蛋白表達(P<0.05)。進一步實驗結果表明，適宜的濃度及處理時間均能顯著增加MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌細胞中NQO1的活性(P<0.05)，結果如圖3-5和圖3-6所示。

以上結果從蛋白水平上得到更加直觀的NRF2通路誘導結果，更加進一步確證了ARE熒光素酶與RT-PCR實驗的結果。

④對E2誘導的MCF-10A細胞癌變的抑制作用

通過軟瓊脂克隆形成實驗考察白術內酯II對MCF-10A細胞的3D生長的影響，結果如圖4-1-1、4-1-2和圖4-2-1、4-2-2所示，At-II的預處理或長期給藥能抑制MCF 10A細胞的癌變，并且其抑制作用是NRF2依賴性的。

此實驗結果再次驗證了此化合物對癌癥的發生具有化學預防作用。

(2)動物實驗

發明人在動物水平上，再次證明了化合物白術內酯Ⅱ可激活NRF2依賴的抗氧化防衛通路，從而抑制腫瘤的生長。

發明人將MDA-MB-231乳腺癌細胞接種于裸鼠，并同時灌胃給予化合物白術內酯Ⅱ，從體內考察它們的化學預防作用，結果顯示化合物白術內酯Ⅱ對MDA-MB-231異種移植瘤的生長具有明顯抑制作用。

具體實驗過程如下：

化合物白術內酯II對接種于BALB/c裸鼠的MDA-MB-231異位移植瘤的生長具有抑制作用。發明人將MDA-MB-231乳腺癌細胞接種于裸鼠，并同時灌胃給予白術內酯II，從體內考察白術內酯II的化學預防作用。腫瘤大小由游標卡尺測量移植瘤的最長徑和最短徑，按照公式V＝L×W 2/2計算腫瘤體積，電子天平稱量腫瘤重量，經蘇木紅-伊紅(H&E)染色后在光學顯微鏡下觀察組織的形態學變化。結果如圖5、圖6、圖7-1、圖7-2和圖8所示，4mg/g白術內酯II明顯抑制了MDA-MB-231異位移植瘤的生長。接種于裸鼠的MDA-MB-231細胞有非常高的NRF2蛋白表達，其NQO1蛋白的量也較高。在近一個月的灌胃給予白術內酯II后，乳腺組織中的NRF2與NQO1的蛋白量無明顯的變化。由此再次證實組合物在裸鼠上對此類腫瘤具有化學預防作用。

總之，根據上述實驗結果可知，白術內酯II在細胞水平上能明顯激活NRF2通路，有效地保護細胞免受氧化應激的損害，并且能預防E2誘導的MCF-10A細胞癌變，具有顯著的癌癥預防作用。在動物身上，白術內酯II能抑制裸鼠的MDA-MB-231異位移植瘤的生長；作為NRF2誘導子，白術內酯II也能預防和抑制與氧化應激相關疾病的發生和發展。

白術內酯Ⅱ屬于已知化合物，但發現其對NRF2通路的激活作用具有重大意義。白術內酯Ⅱ可以作為組分用于制備治療和預防與NRF2通路調控有關的疾病的藥物，或者保健品。特別是用于制備治療和預防癌癥的藥物中，例如乳腺癌。

本實施例中，治療和預防與NRF2通路調控有關的疾病的藥物制劑為口服溶液，所述口服溶液包括白術內酯Ⅱ和用于溶解白術內酯Ⅱ的溶劑。溶劑各組分及其質量百分比分別為：15％-25％聚氧乙烯蓖麻油、5％-15％乙醇、5％-15％吐溫80、50％-70％水。優選地，溶劑各組分及其質量百分比分別為20％聚氧乙烯蓖麻油、10％乙醇、10％吐溫80、60％水。作為本領域技術人員，能夠將本發明所述白術內酯Ⅱ還可以配制成其他適合的藥物制劑的形式，藥學上可被接受的載體和/或賦形劑均可以通過常規實驗進行合理選擇。

以上僅是本發明的優選實施方式，應當指出的是，上述優選實施方式不應視為對本發明的限制，本發明的保護范圍應當以權利要求所限定的范圍為準。對于本技術領域的普通技術 人員來說，在不脫離本發明的精神和范圍內，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。