本發明涉及天山雪蓮提取物技術領域，是一種天山雪蓮提取物磷脂復合物、口腔崩解片及其制備方法。
背景技術：
1、磷脂復合物研究進展及背景介紹磷脂復合物是由意大利學者Bombardelli在研究脂質體時發現的，早期磷脂復合物研究涉及的藥物大多是含有酚羥基的黃酮或多酚類成分，后期更多的研究證實，除酚羥基外，一些醇羥基、酰胺基或羰基等極性基團均有可能與磷脂或其他脂質材料（如膽固醇、膽酸鈉等）的親水端通過分子間氫鍵或范德華力等相互作用形成復合物球狀體。不論是親水性藥物還是親脂性藥物，只要含有能復合的極性基團，都可形成脂質復合物。磷脂復合物多為無定型且在水中能形成膠束，故能增加母體藥物的水溶性，而對母體藥物脂溶性的增加則是母體藥物與磷脂的極性基團部分較強的相互作用，抑制分子中單鍵的自由轉動，而磷脂的兩個長脂肪鏈不參與復合反應，可自由移動，包裹了磷脂的極性部分形成一個親脂性的表面，使磷脂復合物表現出較強的脂溶性。同時，磷脂復合物是類細胞結構，因此對細胞膜有一定的親和性，增強了藥物的膜通透性。因此，磷脂復合物有著良好的開發研究前景，對于提高天然藥物及中藥新藥的開發和利用、加速傳統中藥制劑的現代化進程，提高中藥制劑技術水平及臨床用藥質量，均具有重要的理論和實際意義。2、天山雪蓮制劑研究背景及現有技術的缺陷天山雪蓮是我國西部高山地區的重要藥用植物，是藏醫蒙醫維吾爾醫常用的一種民族藥，其“性溫、微苦、祛風勝濕的功能”始見于藏藥文獻《月王藥珍》，在清代《本草綱目拾遺》及《新疆中草藥》也有記載。主要分布于我國新疆天山和昆侖山一帶，生長在雪線以上。民間以全草入藥，性溫，味微苦，入肝、脾、腎三經，具有溫腎助陽、祛風勝濕、通經活血等功能，用于治療風寒濕痹痛、類風濕性關節炎，小腹冷痛，月經不調等癥。由于其重要的藥用價值，多年來一直成為人們關注和研究的對象。國內外對雪蓮進行了深入的研究，雪蓮中主要含有苯丙素、黃酮、生物堿、萜類、內酯、多糖、揮發油類化學成分，現代藥理實驗表明，雪蓮中黃酮、苯丙素是主要抗炎鎮痛的活性成分。標準號為WS3-B-3334-98的雪蓮注射液中記載了其制備方法：通過14天乙醇浸漬進行提取，在通過1個月至3個月的靜置，分離一些大分子的雜質。該方法在一定程度上能夠提取分離雪蓮中的有效成分，但所需要的生產周期太長，對生產者來說，這種操作帶來了很大麻煩，因此，研究發明新的、短時間的提取分離方法是醫藥工作者需要面對的課題。公開號為CN1634508A、名稱為“雪蓮滴丸及其制備方法”的專利文獻公開了僅以中藥成方雪蓮口服液提取工藝為基礎，結合滴丸制備工藝制備而成。雖然采用了乙醇回流提取，縮短了提取時間，但沒有對提取物進行進一步純化，且沒有明確的高效液相控制指標。公開號為CN1500500A、名稱為“一種用于靜脈注射的雪蓮凍干粉針劑及其制備方法”的專利文獻公開了如下方法：“用適宜的溶劑進行提取，再用不同的吸附柱分離”，該方法只是簡要的介紹，沒有指出所用的溶劑為何溶劑，所用的吸附柱是如何操作的，因此，在實際生產過程中無法復制，并且該專利只對有效成分總黃酮進行限定，限定范圍為5mg至20mg，最高與最低差4倍，范圍較廣，并且沒有對雪蓮另一有效成分苯丙素類進行含量限定。公開號為CN1686357A、名稱為“一種雪蓮粉針劑及其制備方法”的專利文獻公開了如下方法：“從中藥雪蓮提取純化得到有效部位，控制總黃酮（以蘆丁、紫丁香苷計），控制總生物堿（以秋水仙計）”，這種控制方法不太合理：①從化合物結構上看蘆丁屬于黃酮類，而紫丁香苷屬于苯丙素類，且雪蓮中還有另一含量較高的苯丙素類活性成分綠原酸未被控制。②查閱國內外有關天山雪蓮的文獻，未見有從天山雪蓮中分離得到秋水仙堿結構鑒定的報道，用HPLC多方法測定也未檢測出秋水仙堿，該專利以秋水仙堿為對照測定總堿不合理。③文獻報道雪蓮中總堿的含量甚微，采用熒光分光光法測定系統本身誤差就較大。公開號為CN101209274B公開了“一種雪蓮提取物及其生產方法”，但該專利未針對雪蓮提取物中活性成分的溶解性質，提供一種增加雪蓮提取物中活性成分溶解度的藥劑學方法，同時，也沒有針對雪蓮提取物中活性成分藥效作用，提供一種滿足雪蓮提取物透皮給藥的劑型。公開號為CN101890067A公開了“一種抗炎鎮痛雪蓮凝膠劑及其制備方法”，是將雪蓮提取物與適宜的水性凝膠劑基質混勻，供皮膚貼敷的一種外用劑型。但雪蓮凝膠劑中雪蓮提取物是以混懸的形式分散在基質中，而不是通過增加藥物的溶解度使藥物溶解于水性凝膠劑基質中，因此，藥物的透皮非常有限，且需通過加入促透劑實現提取物的透皮。公開號為CN101209274A公開了“一種雪蓮巴布劑的生產方法”，是將雪蓮提取物分散在巴布劑基質中成型制備而成，為實現透皮，成型處方中也加入了透皮吸收促進劑。公開號為CN102349939A公開了“一種雪蓮提取物微乳劑組合物”，是將雪蓮提取物分散在水相和油相中，加入乳化劑和助乳化劑而制成，微乳作為透皮給藥載體，能增加藥物的溶解度。公開號為CN102349939A公開了“一種雪蓮提取物傳遞體的生產方法”，將雪蓮提取物、磷脂、表面活性劑溶乙醇中構成有機相；水相為磷酸鹽緩沖液，將有機相注入水相中攪拌形成透明體系，傳遞體是一種透皮效果較好的藥物經皮滲透載體。天山雪蓮單方制成的雪蓮注射液，雖然注射給藥起效快，療效顯著。但雪蓮注射劑有嚴重的肌肉刺激性，存在注射部位疼痛、紅腫、使用不便等缺點，患者依從性較差。為了使雪蓮更好地發揮臨床療效，臨床上迫切需要一種安全性高、使用方便和依從性好的新型制劑。綜上所述，現有的天山雪蓮提取物溶解性差，在胃腸道中不易被吸收從而導致生物利用度低，不能充分發揮其藥效作用；現有的天山雪蓮制劑大多為外用制劑和注射劑，患者服用順應性差；而既能提高天山雪蓮提取物溶解性，又能提高患者服用順應性的天山雪蓮提取物制劑有待于研究和開發。
技術實現要素：
本發明提供了一種天山雪蓮提取物磷脂復合物、口腔崩解片及其制備方法，克服了上述現有技術之不足，其能有效解決現有天山雪蓮提取物溶解性差，在胃腸道中不易被吸收從而導致生物利用度低，不能充分發揮其藥效作用和患者服用順應性差的問題。本發明的技術方案之一是通過以下措施來實現的：一種天山雪蓮提取物磷脂復合物，按下述方法得到：第一步，取適量天山雪蓮提取物和磷脂置于容器中，磷脂和天山雪蓮提取物的質量比為1:1至1:3，然后按1mg至30mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑A計，向容器中加入有機溶劑A混勻后得到第一混合液；第二步，將第一混合液放置在水浴中恒溫攪拌0.5小時至2小時，然后經水浴減壓旋蒸去除有機溶劑A后得到第二混合液；第三步，按1.5mg至3.75mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑B計，向第二混合液中加入有機溶劑B混勻并過濾后得到濾液；第四步，濾液經水浴減壓旋蒸濃縮至在溫度為20℃時的相對密度為1.31至1.34，然后經低溫真空干燥至質量百分含水量小于等于5%，得到天山雪蓮提取物磷脂復合物。下面是對上述發明技術方案之一的進一步優化或/和改進：上述磷脂為天然磷脂或合成磷脂；或/和，有機溶劑A為甲醇、乙醇、乙酸乙酯和正己烷中的一種以上；或/和，有機溶劑B為三氯甲烷、二氯甲烷、正己烷或乙醚中的一種以上；或/和，天山雪蓮提取物為專利號為ZL200710203380.9、名稱為“雪蓮提取物及其生產方法”中的雪蓮提取物。上述天然磷脂為大豆磷脂；或/和，第二步中，水浴溫度為30℃至40℃，攪拌速率為2000轉/分鐘至3000轉/分鐘；或/和，第二步和第四步中，水浴減壓旋蒸的溫度為30℃至40℃，水浴減壓旋蒸的壓力為-0.08MPa；或/和，第四步中，低溫真空干燥的溫度為30℃至60℃。本發明的技術方案之二是通過以下措施來實現的：一種天山雪蓮提取物磷脂復合物的制備方法，按下述方法進行：第一步，取適量天山雪蓮提取物和磷脂置于容器中，磷脂和天山雪蓮提取物的質量比為1:1至1:3，然后按1mg至30mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑A計，向容器中加入有機溶劑A混勻后得到第一混合液；第二步，將第一混合液放置在水浴中恒溫攪拌0.5小時至2小時，然后經水浴減壓旋蒸去除有機溶劑A后得到第二混合液；第三步，按1.5mg至3.75mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑B計，向第二混合液中加入有機溶劑B混勻并過濾后得到濾液；第四步，濾液經水浴減壓旋蒸濃縮至在溫度為20℃時的相對密度為1.31至1.34，然后經低溫真空干燥至質量百分含水量小于等于5%，得到天山雪蓮提取物磷脂復合物。下面是對上述發明技術方案之二的進一步優化或/和改進：上述磷脂為天然磷脂或合成磷脂；或/和，有機溶劑A為甲醇、乙醇、乙酸乙酯和正己烷中的一種以上；或/和，有機溶劑B為三氯甲烷、二氯甲烷、正己烷或乙醚中的一種以上；或/和，天山雪蓮提取物為專利號為ZL200710203380.9、名稱為“雪蓮提取物及其生產方法”中的雪蓮提取物。上述天然磷脂為大豆磷脂；或/和，第二步中，水浴溫度為30℃至40℃，攪拌速率為2000轉/分鐘至3000轉/分鐘；或/和，第二步和第四步中，水浴減壓旋蒸的溫度為30℃至40℃，水浴減壓旋蒸的壓力為-0.08MPa；或/和，第四步中，低溫真空干燥的溫度為30℃至60℃。本發明的技術方案之三是通過以下措施來實現的：一種口腔崩解片，原料按重量份數包括天山雪蓮提取物磷脂復合物20份至30份、崩解劑6份至16份、填充劑35份至60份、粘合劑1份至5份、潤滑劑0.5份至1份和矯味劑1份至3份；該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片按下述方法得到：將所需量的天山雪蓮提取物磷脂復合物、填充劑和崩解劑總重量的1/2混勻后得到混合物，在混合物中加入所需量的粘合劑混勻后進行制粒，制粒后經干燥后整粒，整粒后再加入所需量的潤滑劑、矯味劑和崩解劑總重量的1/2并混合均勻，壓片后得到天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片。下面是對上述發明技術方案之三的進一步優化或/和改進：上述崩解劑為低取代羥丙基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、超級羧甲基淀粉鈉中的一種以上；或/和，填充劑為微晶纖維素、乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種以上；或/和，潤滑劑為硬脂酸鎂、微粉硅膠、滑石粉和硬質富馬酸鈉中的一種以上；矯味劑為阿斯巴甜、甜蜜素和甜菊糖中的一種以上；粘合劑為體積百分比為90%至95%的乙醇水溶液和聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液中的一種以上，其中：聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液按下述方法得到：按重量份數計，將1份至5份的聚乙烯吡咯烷酮與97份至99份體積百分比為95%的乙醇水溶液混合在一起后得到聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液；或/和，制粒后的粒徑為0.5毫米至1毫米；或/和，干燥溫度為45℃至55℃，干燥時間為0.5h至2h。本發明的技術方案之四是通過以下措施來實現的：一種口腔崩解片的制備方法，原料按重量份數包括天山雪蓮提取物磷脂復合物20份至30份、崩解劑6份至16份、填充劑35份至60份、粘合劑1份至5份、潤滑劑0.5份至1份和矯味劑1份至3份；該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片的制備方法按下述方法進行：將所需量的天山雪蓮提取物磷脂復合物、填充劑和崩解劑總重量的1/2混勻后得到混合物，在混合物中加入所需量的粘合劑混勻后進行制粒，制粒后經干燥后整粒，整粒后再加入所需量的潤滑劑、矯味劑和崩解劑總重量的1/2并混合均勻，壓片后得到天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片。下面是對上述發明技術方案之四的進一步優化或/和改進：上述崩解劑為低取代羥丙基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、超級羧甲基淀粉鈉中的一種以上；或/和，填充劑為微晶纖維素、乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種以上；或/和，潤滑劑為硬脂酸鎂、微粉硅膠、滑石粉和硬質富馬酸鈉中的一種以上；矯味劑為阿斯巴甜、甜蜜素和甜菊糖中的一種以上；粘合劑為體積百分比為90%至95%的乙醇水溶液和聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液中的一種以上，其中：聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液按下述方法得到：按重量份數計，將1份至5份的聚乙烯吡咯烷酮與97份至99份體積百分比為95%的乙醇水溶液混合在一起后得到聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液；或/和，制粒后的粒徑為0.5毫米至1毫米；或/和，干燥溫度為45℃至55℃，干燥時間為0.5h至2h。天山雪蓮提取物磷脂復合物中無有機溶劑殘留，生物利用度高、物理性質和化學性質均較穩定；通過天山雪蓮提取物磷脂復合物得到的本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片服用方便、起效迅速，同時提高了患者的順應性，本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片具有良好的抗炎、鎮痛作用，為其用于治療風濕及類風濕性關節炎提供了藥理學依據。具體實施方式本發明不受下述實施例的限制，可根據本發明的技術方案與實際情況來確定具體的實施方式。實施例1，該天山雪蓮提取物磷脂復合物，按下述制備方法得到：第一步，取適量天山雪蓮提取物和磷脂置于容器中，磷脂和天山雪蓮提取物的質量比為1:1至1:3，然后按1mg至30mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑A計，向容器中加入有機溶劑A混勻后得到第一混合液；第二步，將第一混合液放置在水浴中恒溫攪拌0.5小時至2小時，然后經水浴減壓旋蒸去除有機溶劑A后得到第二混合液；第三步，按1.5mg至3.75mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑B計，向第二混合液中加入有機溶劑B混勻并過濾后得到濾液；第四步，濾液經水浴減壓旋蒸濃縮至在溫度為20℃時的相對密度為1.31至1.34，然后經低溫真空干燥至質量百分含水量小于等于5%，得到天山雪蓮提取物磷脂復合物。容器可為磨口圓底燒瓶。實施例2，該天山雪蓮提取物磷脂復合物，按下述制備方法得到：第一步，取適量天山雪蓮提取物和磷脂置于容器中，磷脂和天山雪蓮提取物的質量比為1:1或1:3，然后按1mg或30mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑A計，向容器中加入有機溶劑A混勻后得到第一混合液；第二步，將第一混合液放置在水浴中恒溫攪拌0.5小時或2小時，然后經水浴減壓旋蒸去除有機溶劑A后得到第二混合液；第三步，按1.5mg或3.75mg天山雪蓮提取物中加入1ml有機溶劑B計，向第二混合液中加入有機溶劑B混勻并過濾后得到濾液；第四步，濾液經水浴減壓旋蒸濃縮至在溫度為20℃時的相對密度為1.31或1.34，然后經低溫真空干燥至質量百分含水量小于等于5%，得到天山雪蓮提取物磷脂復合物。容器可為磨口圓底燒瓶。實施例3，作為上述實施例的優化，實施例3中磷脂為天然磷脂或合成磷脂；或/和，有機溶劑A為甲醇、乙醇、乙酸乙酯和正己烷中的一種以上；或/和，有機溶劑B為三氯甲烷、二氯甲烷、正己烷或乙醚中的一種以上；或/和，天山雪蓮提取物為專利號為ZL200710203380.9、名稱為“雪蓮提取物及其生產方法”中的雪蓮提取物。實施例4，作為上述實施例的優化，實施例4中天然磷脂為大豆磷脂；或/和，第二步中，水浴溫度為30℃至40℃，攪拌速率為2000轉/分鐘至3000轉/分鐘；或/和，第二步和第四步中，水浴減壓旋蒸的溫度為30℃至40℃，水浴減壓旋蒸的壓力為-0.08MPa；或/和，第四步中，低溫真空干燥的溫度為30℃至60℃。實施例5，該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片，原料按重量份數包括天山雪蓮提取物磷脂復合物20份至30份、崩解劑6份至16份、填充劑35份至60份、粘合劑1份至5份、潤滑劑0.5份至1份和矯味劑1份至3份；該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片按下述制備方法得到：將所需量的天山雪蓮提取物磷脂復合物、填充劑和崩解劑總重量的1/2混勻后得到混合物，在混合物中加入所需量的粘合劑混勻后進行制粒，制粒后經干燥后整粒，整粒后再加入所需量的潤滑劑、矯味劑和崩解劑總重量的1/2并混合均勻，壓片后得到天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片。本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片在40s內完全崩解，2min溶出度可達85%以上，10min溶出可達90%；本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中藥物含量可為50mg/片至75mg/片。實施例6，該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片，原料按重量份數包括天山雪蓮提取物磷脂復合物20份或30份、崩解劑6份或16份、填充劑35份或60份、粘合劑1份或5份、潤滑劑0.5份或1份、矯味劑1份或3份；該天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片按下述制備方法得到：將所需量的天山雪蓮提取物磷脂復合物、填充劑和崩解劑總重量的1/2混勻后得到混合物，在混合物中加入所需量的粘合劑混勻后進行制粒，制粒后經干燥后整粒，整粒后再加入所需量的潤滑劑、矯味劑和崩解劑總重量的1/2并混合均勻，壓片后得到天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片。本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片在40s內完全崩解，2min溶出度可達85%以上，10min溶出可達90%；本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中藥物含量可為50mg/片至75mg/片。實施例7，作為上述實施例的優化，實施例7中崩解劑為低取代羥丙基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、超級羧甲基淀粉鈉中的一種以上；或/和，填充劑為微晶纖維素、乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種以上；或/和，潤滑劑為硬脂酸鎂、微粉硅膠、滑石粉和硬質富馬酸鈉中的一種以上；矯味劑為阿斯巴甜、甜蜜素和甜菊糖中的一種以上；粘合劑為體積百分比為90%至95%的乙醇水溶液和聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液中的一種以上，其中：聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液按下述方法得到：按重量份數計，將1份至5份的聚乙烯吡咯烷酮與97份至99份體積百分比為95%的乙醇水溶液混合在一起后得到聚乙烯吡咯烷酮乙醇混合液；或/和，制粒后的粒徑為0.5毫米至1毫米；或/和，干燥溫度為45℃至55℃，干燥時間為0.5h至2h。本發明上述實施例中有機溶劑對藥物的前期探索性研究1.1有機溶劑對藥物化學性質的影響考察在前期研究工作中，對雪蓮提取物在非極性的低沸點有機溶劑的溶解度進行了系統考察，按照藥典凡例中近似溶解度的方法：取雪蓮提取物細粉適量，置于25℃±2℃一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內的溶解情況，如看不見溶質顆粒或液滴時，即視為完全溶解；結果顯示雪蓮提取物易溶解于甲醇、75%乙醇、丙酮、正辛醇、1、4—二氧六環、乙酸乙酯中，不溶于正己烷和三氯甲烷中。同時，以綠原酸、蘆丁為指標，用HPLC測定雪蓮提取物在水、甲醇、75%乙醇、丙酮、正辛醇、1、4—二氧六環、乙酸乙酯的溶解度，具體方法如下：取過量雪蓮提取物分別加入裝有10mL的水、甲醇、75%乙醇、丙酮、1、4—二氧六環、正辛醇和乙酸乙酯的7個25mL錐形瓶中，并超聲至雪蓮提取物不再溶解為止，分別用封口膜封好后放入37（±2）℃恒溫水浴振蕩器中，振搖48h，在整個過程中保持錐形瓶有固體藥物存在，混懸液在6000r·min-1條件下離心15min，上清液過0.45μm微孔濾膜，續濾液用甲醇稀釋一定的倍數后用HPLC測定綠原酸、蘆丁含量，計算雪蓮提取物在各介質中的平衡溶解度。結果表明雪蓮提取物在水、甲醇、75%乙醇、丙酮、1、4—二氧六環、正辛醇、乙酸乙酯的溶解度依次降低。1.2以甲醇為復合溶劑的考察以甲醇為溶劑，設定藥物質量濃度為10mg/ml，大豆磷脂與雪蓮提取物的投料比分別為1:1、1:2、1:2.5、1:3（w/w）。將天山雪蓮提取物與大豆磷脂置于磨口圓底燒瓶中，加入甲醇混勻后得到混合液，水浴恒溫攪拌，減壓蒸餾除去有機溶劑，得到天山雪蓮提取物磷脂復合物半成品，再加入正己烷，使天山雪蓮提取物磷脂復合物半成品充分溶解，微孔濾膜過濾，濾液減壓蒸餾回收正己烷，低溫真空干燥，即得本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物。以綠原酸和蘆丁復合率作為Ⅰ磷脂復合物制備工藝的評價指標。本發明的目的，是選擇合適的復合溶劑系統，提高天山雪蓮提取物與磷脂的復合效率和質量穩定性。所選擇的溶劑系統可同時滿足以下條件：1）磷脂和天山雪蓮提取物都能夠溶解形成澄清透明的溶液；2）系統中不含水分，極性小，有利于磷脂和天山雪蓮提取物分子間的復合；3）溶劑系統蒸發效率高，易揮除，無有機溶劑殘留；4）制備過程中天山雪蓮提取物性質穩定。照如下方法測定復合率復合率（包封率）：利用本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物在正己烷中易溶，而游離天山雪蓮提取物不溶于正己烷的特征，進行復合率測定。稱取一定量天山雪蓮提取物與大豆磷脂，按一定比例置于100mL磨口圓底燒瓶中，加入甲醇適量，置40℃水浴鍋中充分溶解，在恒溫條件下攪拌2h后，減壓蒸餾除去反應溶劑。殘留物真空干燥后加入適量反溶劑正己烷完全溶解，用0.45μm微孔濾膜濾過，收集沉淀。（沉淀為正己烷不溶物即未反應的天山雪蓮提取物和雜質）。濾液減壓蒸餾，溫度40℃，在恒溫條件下，真空干燥，稱重即得磷脂復合物。天山雪蓮提取物的初始投藥量（M1）與沉淀量（M2）的差值即為天山雪蓮提取物磷脂復合物的量，從而計算出綠原酸復合率和蘆丁復合率，計算公式如下：復合率按下式計算：復合率%=(M1-M2)/M1×100%綠原酸、蘆丁含量測定方法對照品溶液的制備：取綠原酸與蘆丁對照品適量，精密稱定，置10ml棕色量瓶中，加甲醇配置成質量濃度為綠原酸454.5μg·mL-1、蘆丁629.9μg·mL-1的混合儲備液，精密吸取儲備液5mL置50mL棕色量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得綠原酸45.45μg·mL-1、蘆丁62.99μg·mL-1混合對照品溶液，搖勻，經0.45μm濾膜濾過，備用。供試品溶液的制備：精密稱取天山雪蓮提取物10mg，置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，經0.45μm濾膜濾過，即得。色譜條件：按照《中國藥典》2010年版及參考文獻中綠原酸和蘆丁的含量測定方法，試驗篩選并確定色譜條件：色譜柱為KromasilC18柱（250mm×4.6mm，0.5μm），流動相為乙腈(A)-0.4%磷酸溶液(B)[0-13min12%(A)，13-16min12%(A)-15%(A)，16-50min15%(A)]梯度洗脫，檢測波長為353nm，柱溫為35℃，流速為1mL·min-1，進樣量為10μL；按上述色譜條件進行測定，綠原酸的保留時間為9.1min，蘆丁的保留時間為26.1min。線性關系考察：用配置好的混合對照品溶液，精密吸取0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10mL至10mL棕色量瓶，用甲醇稀釋定容，搖勻制得綠原酸濃度為2.273～45.45μg·mL-1、蘆丁濃度為3.15～62.99μg·mL-1的系列溶液，吸取10μL進樣。以對照品濃度X(μg·mL-1)為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，繪制綠原酸及蘆丁的標準曲線，進行線性回歸，得綠原酸的回歸方程為Y＝16942x+5077.5，r＝0.9996；蘆丁的回歸方程為Y＝25029x+7246.6，r＝0.9998。結果表明，綠原酸在2.273～45.45μg·mL-1范圍內呈良好線性關系，蘆丁在3.15～62.99μg·mL-1范圍內呈良好線性關系。按上述方法測定樣品中綠原酸和蘆丁的峰面積，代入線性方程，計算復合物中綠原酸和蘆丁的含量。復合物中與磷脂結合的藥物含量測定：精密稱取本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物10mg，用甲醇充分溶解后定容至50ml，得到供試品溶液，按上述方法測定綠原酸和蘆丁的峰面積，代入線性方程，計算復合物中綠原酸及蘆丁的含量。將上述實施列所得的本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片進行藥效學實驗，其結果和過程如下：試驗列1：本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對醋酸致小鼠扭體反應的影響取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重20±2g，隨機分為模型組、風濕安泰片組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片低劑量組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中劑量組和本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片高劑量組；各給藥組按設定劑量ig給藥，模型組ig等量蒸餾水,每天1次，連續3天。于末次給藥后2h，每鼠ip0.6%乙酸NS溶液0.2ml/只。觀察記錄小鼠15min內扭體次數,進行組間均數t檢驗，并計算抑制率。統計結果表明，風濕安泰片和本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片低劑量組、中劑量組和高劑量均可明顯降低醋酸致小鼠扭體反應次數；本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對醋酸致小鼠扭體反應的影響見表1。試驗列2：本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響取Wistar大鼠50只，雌雄各半，體重120g至150g，依體重性別隨機分為模型組、風濕安泰片組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片低劑量組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中劑量組和本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片高劑量組；各給藥組按設定劑量ig給藥，模型組給予等量DW，每天1次，連續5天。未次給藥1h后，給大鼠左后足跖腱膜下注射1%角叉菜膠無菌溶液50ul致炎。分別測定致炎前及致炎后1h、2h、4h、6h、8h左后足跖厚度，以致炎前后足跖厚度之差作為腫脹度。計算各組大鼠足跖腫脹度均值及抑制率，進行組間均數t檢驗，統計結果表明，天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片能不同程度地抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫脹；本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響見表2，本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的抑制率表3。抑制率=×100%試驗列3：本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對2,4-二硝基氯苯致小鼠耳廓皮膚遲發型超敏反應的影響取NIH小鼠50只，雌雄各半，體重25±1g，隨機分為模型組、風濕安泰片組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片低劑量組、本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中劑量組和本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片高劑量組；各給藥組按設定劑量ig給藥，模型組ig等量蒸餾水，每天1次，連續9天。于給藥后第10天各組小鼠左耳涂抹0.25%的2,4-二硝基氯苯丙酮液0.02ml/只，對側耳廓涂抹相同容積的丙酮液做對照，24h后處死小鼠，從耳根處剪下鼠耳,以打孔器于左、右耳切下相同面積耳片，分別稱重,計算左右耳片重量的差值作為腫脹度,進行組間均數t檢驗,并計算抑制率,統計結果表明，風濕安泰片和天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片中、大劑量均可明顯抑制2，4－二硝基氯苯至小鼠耳廓遲發型超敏反應；本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片對2,4-二硝基氯苯至小鼠耳廓皮膚腫脹度的影響見表4。從表1至表4可以看出，本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片較風濕安泰片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹以及大鼠棉球肉芽腫有較好的抑制作用，可減少醋酸致小鼠扭體反應次數；說明本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片具有良好的抗炎、鎮痛作用，為其用于治療風濕及類風濕性關節炎提供了藥理學依據。本發明的優點：（1）本發明選擇的有機溶劑可保證天山雪蓮提取物與磷脂的復合溶液澄清，其極性可確保天山雪蓮提取物與脂質材料的復合穩定性，且不影響天山雪蓮提取物的質量穩定，且低沸點的非極性有機溶劑容易被蒸除，制得的復合物中無有機溶劑殘留，復合率在95％以上，制備及貯存過程中藥物含量無明顯變化。2）藥物/磷脂用量合理：基于復合溶劑的突破，天山雪蓮提取物與磷脂的質量比為1:1～1:3，即可獲得復合完全的復合物，磷脂用量與理論推測值相吻合。3）天山雪蓮提取物磷脂復合物顯著改善了天山雪蓮提取物的溶解性，能夠較好的提高藥物的溶出速率，提高了天山雪蓮提取物在胃腸道中的溶解性，從而提高了其生物利用度，進而更好的發揮藥效作用，且穩定性好，物理性質和化學性質均較穩定。4）本發明的天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片是一種具有良好口感和崩解迅速的新劑型，具有服用方便、起效迅速等特點，不僅能夠滿足吞咽困難的患者的用藥問題，同時對于無水服藥的患者也能夠滿足其用藥的需求，也克服了其它片劑不矯味帶來的難以忍受的苦味問題，提高了患者的順應性。綜上所述，天山雪蓮提取物磷脂復合物中無有機溶劑殘留，生物利用度高、物理性質和化學性質均較穩定；通過天山雪蓮提取物磷脂復合物得到的本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片服用方便、起效迅速，同時提高了患者的順應性，本發明天山雪蓮提取物磷脂復合物口腔崩解片具有良好的抗炎、鎮痛作用，為其用于治療風濕及類風濕性關節炎提供了藥理學依據。以上技術特征構成了本發明的實施例，其具有較強的適應性和實施效果，可根據實際需要增減非必要的技術特征，來滿足不同情況的需求。