一種益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種益生菌發(fā)酵枇杷葉組合物及其制備方法，屬于功能性保健品領 域。
【背景技術】
[0002] 枇杷葉(Eriobotrya japonica Thunb.)為薔薇科植物枇杷的葉子。有清肺止咳， 和胃利尿，止渴的功效。中國大部分地區(qū)均有栽培，分布于中南及陜西、甘肅、江蘇、安徽、浙 江、江西、福建、臺灣、四川、貴州、云南等地，全年均可采收。枇杷葉是我國長期收錄于藥典 的中藥，因其藥效對人體特別安全，無副作用，于2014年被批準為新資源食品（國衛(wèi)計委 【2014】20號）。
[0003] 目前，對于枇杷葉產(chǎn)品的開發(fā)，主要集中于將不同原料簡單的配比，做成具有不同 功效的保健飲品，如清熱潤肺飲料其制備方法(專利號：CN201310592032)、一種枇杷保健 飲料及其制備方法(專利號：CN201310605007)等，這些方法簡單粗放，雖具有一定功效，但 真正能被人體所吸收利用的有效成分微乎其微，浪費嚴重，故對枇杷葉應進行深開發(fā)，使產(chǎn) 品有效成分得以充分利用，科技含量更高，以滿足消費者的需求。
[0004] 人體腸道中寄居著大量的微生物種群，其中益生菌對人體健康起著至關重要的作 用。益生菌可以分解代謝上消化道系統(tǒng)不能分解代謝的食物成分，產(chǎn)生短鏈脂肪酸，為胃腸 粘膜細胞提供營養(yǎng)物質。同時對于口服藥物尤其是天然藥物的某些成分可以進行分解代 謝，將藥物的前體物質轉化成為活性藥物成分而發(fā)揮作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明是利用現(xiàn)代生物技術，將枇杷葉經(jīng)益生菌發(fā)酵，體外模擬人體腸道環(huán)境，提 前對枇杷葉中的各種有效成分，進行分解，使其進入人體后直接被吸收，減輕人體負擔，同 時添加益生元，調(diào)節(jié)人體腸道環(huán)境。
[0006] 本發(fā)明的一個目的在于提供一種益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物，所述的組合物為枇 杷葉經(jīng)干燥，粉碎成粉，經(jīng)水浸，添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉和甜味劑，添加無機 鹽，滅菌后經(jīng)益生菌發(fā)酵處理，添加聚葡萄糖、低聚果糖漿，得到益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合 物。
[0007] 所述的益生菌為雙歧桿菌和乳桿菌。
[0008] 該益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物具有有清肺止咳，和胃利尿，止渴，調(diào)節(jié)腸道菌群平 衡，改善胃腸功能等作用。
[0009] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物的制備方法，包括以 下步驟： (1)粉碎:將干燥枇杷葉粉碎，細度在100目以上(通常采用普通的粉碎技術制備枇杷葉 粉，經(jīng)粉碎后，原料的比表面積增加，從而更有利于原料有效成分的溶出，大大增加了原 料有效成分的提取率）。
[0010] (2)制備提取物:取枇杷葉粉，加入蒸餾水浸泡30分鐘，向浸泡液中添加葡萄糖、蛋 白胨、酵母膏、酵母粉，添加無機鹽，添加甜味劑，調(diào)節(jié)PH值6.5-7.0，115°C滅菌50分鐘，得 到無菌枇杷葉提取物。
[0011] (3)發(fā)酵：當無菌枇杷葉提取物溫度降至39°C時，接種預培養(yǎng)的體積百分比各為 0.5%的一種或兩種及以上雙歧桿菌菌液，常規(guī)培養(yǎng)約3~8小時后，再次接種預培養(yǎng)的體積百 分比各為0.5%的一種或兩種及以上乳桿菌菌液，繼續(xù)發(fā)酵20~22小時。當pH值降至4.2以下 時，降低發(fā)酵溫度至28°C，繼續(xù)發(fā)酵至pH值降至4.0，結束發(fā)酵，即得到益生菌發(fā)酵枇杷葉 液。
[0012] (4)調(diào)配、滅活:將(3)中益生菌發(fā)酵枇杷葉液過管式離心機過濾、離心，得離心液； 離心液中添加聚葡萄糖、低聚果糖漿(G 55L)，攪勻溶解；115°C左右滅菌15分鐘后，得益生 菌發(fā)酵枇杷葉的組合物。
[0013] 上述制備方法中，在步驟(2 )中所取枇杷葉粉在蒸餾水浸泡液中的重量g/體積ml 百分比為6-10%。
[0014] 上述制備方法中，在步驟(2 )中加入重量g/體積ml百分比為0.5~1.5%的葡萄糖、重 量g/體積ml百分比為0.1~1%的蛋白胨、重量g/體積ml百分比為0.05~0.2%的酵母霄、重量g/ 體積ml百分比為0.01~0.1%的酵母粉，所述的無機鹽為K 2HP〇4.3H20 0 . lg/100ml、KH2P〇4 0.1g/100ml、FeS〇4.7H2〇 5.0mg/100ml、ZnS〇4.7H2〇 4.4mg/100ml、MgS〇4.7H20 50mg/100ml。
[0015] 上述制備方法中，為了改善飲品的口感，在步驟(2)中調(diào)節(jié)pH值前添加一定量的甜 味劑，所述的甜味劑為重量g/體積ml百分比為3%的蔗糖、重量g/體積ml百分比為0.008%的 二氯鹿糖。
[0016] 在步驟(4)中加入重量g/體積ml百分比為1~5%的聚葡萄糖、重量g/體積ml百分比 為0.1~0.7%的低聚果糖漿(G 55L)。
[0017]上述制備方法中，在步驟(3)中所述的雙歧桿菌選自兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、 青春雙歧桿菌或嬰兒雙歧桿菌;所述的乳桿菌選自嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、干酪乳桿菌、 鼠李糖乳桿菌或植物乳桿菌。
[0018] 本發(fā)明的再一個目的是提供本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物在制備改 善呼吸系統(tǒng)疾病、調(diào)節(jié)胃腸道功能的食品或保健食品中的應用。
[0019] 本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物，在制備具有清肺止咳，和胃利尿，止 渴，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，改善胃腸功能的保健品或飲品中的應用。例如，可將本發(fā)明的多株 益生菌發(fā)酵枇杷葉或其上清液，按照已知的常規(guī)方法，添加一種或多種具有相同、相似或不 同生物學活性，并對基本活性成分表現(xiàn)有輔助或協(xié)同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合 成的其他功能成份或其混合物，配制成適于口服的合劑、乳劑等。
[0020] 也可將本發(fā)明的多株益生菌發(fā)酵枇杷葉組合物通過適當?shù)母稍锓椒ǎ频霉腆w粉 末，添加一種或多種具有相同、相似或不同生物學活性，并對基本活性成分表現(xiàn)有輔助或協(xié) 同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他功能成份或混合物，配制成適于口服的膠 囊、片劑、顆粒劑等劑型。
[0021] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點： 1、本發(fā)明對枇杷葉進行粉碎處理，產(chǎn)品對人體呼吸道無刺激性，與傳統(tǒng)的去毛工藝相 比，簡單、高效，降低了勞動強度和生產(chǎn)成本。
[0022] 2、本發(fā)明對枇杷葉有效成分進行高壓、高溫提取，大大增加了原料有效成分的提 取率。
[0023] 3、本發(fā)明將枇杷葉粉直接加入到益生菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓、高溫提取其有效 成分，帶原料渣進行發(fā)酵，提高了枇杷葉的利用率，優(yōu)化了工藝流程。
[0024] 4、本發(fā)明模擬人體腸道環(huán)境，利用多株益生菌進行發(fā)酵，使枇杷葉的有效成分變 為易于被腸道吸收的活性物質，提高了利用率，減少了人體腸道負擔。
[0025] 5、利用枇杷葉為益生菌生長提供充足的營養(yǎng)，益生菌亦使枇杷葉的效用得到提 尚。
[0026] 6、本組合物中加入不被人體吸收的水溶性膳食纖維聚葡萄糖和低聚果糖，口感酸 甜適口，狀態(tài)穩(wěn)定，可極大地改善人體腸道環(huán)境。
[0027] 7、本組合物未添加任何防腐劑，經(jīng)高溫滅菌、無菌灌裝，保質期長，飲用方便、安 全。
【具體實施方式】
[0028] 以下通過【具體實施方式】的描述對本發(fā)明作進一步說明，但這并非是對本發(fā)明的限 制，本領域技術人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進，但是只要不脫離本 發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0029]實施例1:取枇杷葉粉在蒸餾水浸泡液中的重量g/體積ml百分比為6-10%。
[0030] -種益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物的制備，具體方法如下： 取干燥枇杷葉，粉碎過100目篩，按重量g/體積ml比6%取枇杷葉粉加蒸餾水浸泡30分 鐘； 向浸泡液中加入葡萄糖0.7%(重量g/體積ml )、蛋白胨0.4%(重量g/體積ml )、酵母膏 0 · 13%(重量g/體積ml)、酵母粉0 · 07%(重量g/體積ml)、無機鹽(K2HP〇4· 3H20 0 · lg/100ml、 KH2PO4 0.1g/100ml、FeS(V7H2〇 5.0mg/100ml、ZnS〇4'7H2〇 4.4mg/100ml、MgS(V7H2〇 50mg/ 100ml)、蔗糖3 · 0%(重量g/體積ml)和三氯蔗糖0 · 008%(重量g/體積ml)。調(diào)節(jié)pH 6 · 5-7 · 0， 115°C左右滅菌50分鐘，得到無菌枇杷葉提取物； 當提取物溫度降至39°C左右時，接入預培養(yǎng)好的兩歧雙歧桿菌(正常人體分離，經(jīng)中國 科學院微生物研究所鑒定)和短雙歧桿菌(AS 1.2213)菌液，接種量均為0.5%(體積/體積）。 發(fā)酵6小時后再接入預培養(yǎng)的植物乳桿菌(AS 1.19)菌液，接種量為0.5%(體積/體積）。37°〇 繼續(xù)發(fā)酵22小時，pH值降至4.2以下，降低發(fā)酵溫度至28°C，繼續(xù)發(fā)酵至pH降至4.0,結束發(fā) 酵，即得到益生菌發(fā)酵枇杷葉液。
[0031 ]將益生菌發(fā)酵枇杷葉液過管式離心機離心，得離心液。向離心液中加入聚葡萄糖 2%(重量g/體積ml)、低聚果糖漿(G 55L)0.7%(重量g/體積ml)，攪勻溶解，得半成品。將半成 品進行高壓滅菌，115°C左右滅菌15分鐘后，于無菌條件下灌裝，得益生菌發(fā)酵枇杷葉飲品 成品（規(guī)格為100mL/瓶）。
[0032] 實施例2: 一種益生菌發(fā)酵枇杷葉的組合物的制備，具體方法如下： 取干燥枇杷葉，粉碎過100目篩，按重量g/體積ml比8%取枇杷葉粉加蒸餾水浸泡