一種吸血類水蛭飼養餌料及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001 ]本發明設及一種吸血類水賠飼養巧料及其制備方法和應用，具體屬于水賠養殖技 術領域。
【背景技術】
[0002] 水賠養殖一般采用種賠水旱相間大田壟溝式養殖，自然產卵解化后集中育苗分池 養殖或親本與幼苗同池混合養殖方式，使用此兩種方式養殖為仿生養殖法，操作步驟簡單 易于管理，但是受自然災害影響較大，野外環境水賠天敵多，病害防治難度較大，育苗周期 長且密度小。現有吸血類水賠養殖巧料，通常W動物血為主，尤其現有的研究成果顯示W新 鮮牛血清為巧料，水賠單體增重率高，但抗凝血酶含量不高。廣東、廣西一帶農民養殖戶在 生產上W牛血塊為主、豬血塊為輔，但是受牛血清飼喂操作復雜、鮮牛血市場供應量不足等 因素約束。水賠作為一味名貴中藥材，水賠養殖中個體增重率固然重要，提高水賠單位質量 的抗凝血酶含量對提高藥用價值和增加生產產值方面意義更大。因此研發一種能同時提高 水賠單位質量的抗凝血酶含量和個體增重率的飼養巧料顯得尤為必要。
【發明內容】
[0003] 為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種吸血類水賠飼養巧料及其制 備方法和應用，該巧料能夠有效提高水賠單位質量的抗凝血酶含量和個體重量。
[0004] 為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：
[000引一種吸血類水賠飼養巧料，按照體積比，由蔬菜汁:動物血清=1~5:6~10混合而 成。
[0006] 前述吸血類水賠飼養巧料中，動物血清為牛血清或豬血清。
[0007] 前述吸血類水賠飼養巧料中，蔬菜汁為芹菜汁、渡菜汁或野芹菜汁。
[0008] 前述吸血類水賠飼養巧料優選為由芹菜汁:牛血清=2:8(體積比）混合而成。
[0009] 本發明吸血類水賠飼養巧料的制備方法，包括W下步驟：
[0010] (1)取動物血塊攬碎，40目篩網過濾，所得濾液即動物血清，備用；
[0011] (2)將蔬菜洗凈漸干，切成3~5cm的段，搗碎后，40目篩網過濾，去掉纖維，所得濾 液即蔬菜汁，備用；
[001引（3)將動物血清和蔬菜汁按比例混合即得。
[0013] 本發明吸血類水賠飼養巧料在提高水賠抗凝血酶活性飼養方法中的應用。
[0014] 前述應用方式之一為，用所述巧料替代現用水賠巧料按常規方法飼養水賠，投喂 巧料的時間間隔為4~6天。
[0015] 前述應用方式之二為，用所述巧料替代現用水賠巧料按常規方法飼養水賠2個月， 然后改變飼養溫度至30°C，停食1個月。
[0016] 為了體現本發明巧料的應用效果，發明人對其進行了試驗研究和考察。
[0017] 采用本發明的巧料飼養水賠，具體包括W下步驟：（1)幼苗采集:收集解化后的的 水賠幼苗，集中育苗20天后進行分苗處理；（2)養殖:a.養殖密度:75尾/L;b.清洗換水:每天 用相同溫度的潔凈水清洗更換一次，同時挑出死亡水賠；C.每4天W仿生膜為介質投喂一 次，投喂之前將水賠清洗干凈濾干水后進行喂食，時間選擇在上午12:00之前，進食時間控 制在30minW內，30min后將水賠和投喂容器分離，將水賠清洗干凈放回瓶中存放，清洗投喂 容器，曬干備下次投喂時重復使用，水賠進食過程中隨時挑出過大的個體，W控制其單次進 食量，防止脹死;（3)收獲:養殖2個月后收獲。
[0018] -、巧料對水賠生長的影響試驗
[0019] ( - )試驗目的；
[0020] 通過采用不同種類的巧料養殖水賠，記錄統計水賠采食不同巧料種類后體重及抗 凝血酶活性變化情況，分析確定最適于水賠生長的飼養巧料種類。
[00引](二)試驗內容：
[0022] 1、試驗設計
[0023] (1)設置牛原血、牛血清、豬原血、豬血清、芹菜汁+牛血清(2:8 )、野芹菜汁+牛血清 (1:9)、渡菜汁+豬血清(3:7)、芹菜汁+豬血清(4:8)、小球藻、塘角魚十個種類，每種巧料3個 重復，每個重復對應50尾Ig左右健康水賠苗。
[0024] (2)基質:水
[0025] (3)濕度：自然環境濕度
[0026] (4)密度:62.5 尾/L
[0027] (5)試驗周期:60天
[002引 2、試驗材料
[0029] (1)試驗容器:2000mL大燒杯
[0030] (2)基質用量:800mL
[0031 ] (3)防逃網：40目尼龍網
[0032] (4)巧料:新鮮牛原血、牛血清、豬原血、豬血清、芹菜汁+牛血清（2:8)、野芹菜汁+ 牛血清（1:9)、渡菜汁+豬血清(3:7)、芹菜汁+豬血清(4:8)、小球藻、塘角魚
[0033] 3、試驗日常管理
[0034] (1)清洗換水:每天清水清洗一遍
[0035] (2)投喂方式:仿生膜晚吸式、直接投喂
[0036] (3)投喂頻率:4天一次
[0037] (4)投喂時長:30min/次
[0038] (5)死亡統計:每天統計一次死亡水賠數量與重量
[0039] (立)實驗結果：
[0040] 1、巧料對水賠抗凝血酶活性的影響
[0041 ]水賠抗凝血酶活性是通過水賠單位質量的抗凝血酶含量來體現的，本發明采用下 述方法測定水賠單位質量的抗凝血酶含量。
[0042] 1.1、溶液的配制
[0043] (1 )0.2mol/LS徑基甲基氨基甲燒溶液的配制
[0044] 取S徑基甲基氨基甲燒(分析純）2.4228g，加水至1 OOmL，即為0.2mo 1/LS徑基甲 基氨基甲燒溶液。
[004引（2)0.1mol/L鹽酸溶液的配制
[0046] 取濃鹽酸9mL，加水至1000 mL即為0.1mol/L鹽酸溶液。
[0047] (3)=徑基甲基氨基甲燒鹽酸緩沖液的制備
[0048] 取0.2mol/LS徑基甲基氨基甲燒溶液25mL與O.lmol/L鹽酸溶液40mL加水至 1 OOmL充分混勻，調節pH至7.4，即得。
[0049] (4)0.5%牛纖維蛋白原（W凝固物記)溶液的配制
[0050] 取牛纖維蛋白原(含凝固物59% )0.085g至IOmL容量瓶中，用預先加熱至37°C的S 徑基甲基氨基甲燒鹽酸緩沖液稀釋至刻度，37°C水浴輕搖緩慢使溶(放入水浴時間不宜超 過10分鐘）。
[0051] (5)凝血酶溶液的配制
[0052] 取含量為560U/支凝血酶1支，取其全部內容物至IOmL容量瓶中，用生理鹽水稀釋 至刻度，輕輕搖勻即為5抓/mL，盛于玻璃管中。
[0053] (6)供試品溶液的配制
[0054] 取水賠粉末(3號篩)約Ig，精密稱定，精密加入0.9 %氯化鋼溶液5mL，充分攬拌，浸 提30分鐘，并時時振搖，35(K)r/min離屯、，離屯、15分鐘，取上清液。
[00巧]1.2、含量測定操作步驟
[0056] (1)精密量取上清液10化L，置于（IOmm X 7 5mm)試管中；
[0057] (2)精密加入含0.5%牛纖維蛋白原的S徑基甲基氨基甲燒鹽酸緩沖液20化L，搖 勻；
[0058] (3)將試管置于水浴鍋(37±0.5°C)中（用溫度計置水浴中觀察測量溫度)緩緩滴 加每ImL含56單位U的凝血酶溶液(每分鐘化L，邊滴加邊輕輕搖勻），滴加凝血酶溶液時盡量 不取出試管，W使其保持在37±0.5°C溫度中。當接近凝固時，5化分次滴加，每次滴加1~化 L，邊滴加邊輕搖，密切觀察其是否凝固（可置試管于透光處），可用注射器針尖輕挑，看是否 有絲狀物產生，若有絲狀物或絮狀物產生可判為已凝固。每個樣品置水浴中檢測的時間不 得超過30分鐘。
[0059] (4)記錄消耗凝血酶溶液的體積，按照下式計算其含量。
[0061] 式中，U為每Ig含凝血酶活性單位，U/g;Ci為凝血酶溶液的濃度，U/mLC2為供試品 溶液的濃度，g/mM Vi為消耗凝血酶溶液的體積，V2為供試品溶液的加入量，中和一個 單位的凝血酶的量，為一個抗凝血酶活性單位。
[0062] 按照上述試驗內容，每4天W仿生膜為介質投喂一次十種不同的巧料，2個月后測 定水賠單位質量的抗凝血酶含量;實驗結果如表1所示。
[0063] 表1不同巧料飼養2個月后的水賠抗凝血酶含量測定結果
[0066] 由表1可知，采用本發明的巧料進行飼養，水賠單位質量的抗凝血酶含量顯著提 局。
[0067] 2、巧料對水賠增重率的影響
[0068] 按照上述試驗內容，每4天W仿生膜為介質投喂一次十種不同的巧料，2個月后測 定水賠的重量，并計算增重率;實驗結果如表2所示。
[0069] 表2不同巧料飼養水賠的增重率
[0071]
[0072] 由表2可知，采用本發明的巧料進行飼養，水賠的增重率相對于單用牛血清、豬血 清而言略有降低，但變化不大。
[0073] 二、投喂時間間隔對水賠抗凝血酶活性及水賠增重率的影響
[0074] 參照上述一、（二）中試驗內容，選用本發明的巧料，即W體積比芹菜汁：牛血清=2 :8作為巧料，投喂時間間隔分別為2(1、4(1、6(1、8(1、12(1和16(1，2個月后測定水賠單位質量的抗 凝血酶含量;實驗結果如表3所示。
[0075] 表3不同投喂時間間隔飼養2個月后的水賠抗凝血酶含量測定結果
[0077]
[0078] 由表3可知，投喂時間間隔為16d時飼