海洋魚蛋白與淡水魚蛋白制備組合降血壓肽的方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及食品加工領域，一種食品功能性成分的制作方法，具體設及海洋魚蛋 白與淡水魚蛋白制備組合降血壓膚的方法。
【背景技術】
[0002] 高血壓是危害身體健康的疾病，對屯、、腦、血管都有嚴重危害，并常引發腦卒中、中 風、巧死等重大疾病或死亡。一些食源性活性膚具備預防、緩解和治療高血壓的功能。
[0003] 海洋魚與淡水魚蛋白資源比較豐富，利用復合酶解的方法制備特定的海洋魚蛋白 膚和淡水魚蛋白膚，再將二者組合，可生產出具有降血壓功能的活性膚。
【發明內容】
[0004] 本發明提供了海洋魚蛋白與淡水魚蛋白制備組合降血壓膚的方法。
[0005] 本發明的目的通過W下技術方案實現： 海洋魚蛋白與淡水魚蛋白制備組合降血壓膚的方法，按W下步驟進行： 1) 前處理：海洋魚和淡水魚都經過去皮、骨、刺、雜質等，打成勻漿； 2) 膠原蛋白提取：在海洋魚肉勻漿中加入與魚肉質量比為1:8或1:12的純凈水，再 加入3000U/g魚肉-5000U/g魚肉的堿性蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條件是：抑為 7. 5-8. 5、溫度為35°C-40°C、酶解時間為化-4h;在淡水魚肉勻漿中加入與魚肉質量比為 1:6或1:8的純凈水，再加入4000U/g魚肉-5000U/g魚肉的胃蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋 白，酶解條件是：抑為2. 0-2. 5、溫度為35°C-40°C、酶解時間為lh-3h; 3) 離屯、分離：酶解后的魚肉糜混合液通過離屯、分離，取上清液備用，上清液即膠原蛋白 液；離屯、轉速為3000轉/min-4000轉/min,離屯、時間為15min-20min; 4) 海洋魚蛋白膚制備：在離屯、分離得到的海洋魚膠原蛋白液中加入膜蛋白酶、中性蛋 白酶與木瓜蛋白酶，相對于海洋魚膠原蛋白液體積所加入的酶用量分別是1500U/mL-2000 U/血、3000U/血-4000U/mL與1500U/血-2000U/mU酶解條件是：抑為7. 0-7. 5、溫度為 35°C-45°C、酶解時間為化-8h; 5) 淡水魚蛋白膚制備：在離屯、分離得到的淡水魚膠原蛋白液中加入堿性蛋白酶、中 性蛋白酶與渡蘿蛋白酶，相對于膠原蛋白液體積所加入的酶用量分別是1500U/mL-2000 U/mL、3000U/mk4000U/mL與 1500U/mk2000U/mU酶解條件是：抑為 7. 0-8. 0、溫度為 35°C-45°C、酶解時間為 4h-6h; 6) 純化酶：將酶解后的蛋白膚液經過熱處理，純化蛋白酶，使蛋白酶失去活性，熱處理 條件是 90°C-95°C，3min-5min; 7) 超濾：將純化酶后的蛋白膚液進行超濾分離，海洋魚蛋白膚液收集分子量在 lOOODa-2000化范圍內的膚組分；淡水魚蛋白膚液收集分子量在2000化-3000化范圍內的 膚組分；超濾壓力在0. 5MPa-1.OMPa，室溫操作； 8) 干燥：將收集到的海洋魚和淡水魚蛋白膚組分分別通過真空冷凍干燥獲得膚粉末產 品；真空冷凍干燥時間為25h-35h，溫度為30°C-35°C，真空度為100Pa-300Pa; 9) 組合：海洋魚蛋白膚粉末與淡水魚膚粉末W質量比4:1或3:1比例混合； 10) 壓片：海洋魚與淡水魚混合膚粉末采用壓片機制成片狀。
[0006] 進一步地，該方法按W下步驟進行： 海洋魚和淡水魚都經過去皮、骨、刺、雜質等，打成勻漿；在海洋魚肉勻漿中加入與魚肉 質量比為1:8的純凈水，再加入5000U/g魚肉的堿性蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條 件是：抑為7. 5、溫度為40°C、酶解時間為化；在淡水魚肉勻漿中加入與魚肉質量比為1:6 的純凈水，再加入4000U/g魚肉的胃蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條件是：抑為2. 0、 溫度為35°C、酶解時間為化；酶解后的魚肉糜混合液通過離屯、分離，取上清液備用，上清液 即膠原蛋白液；離屯、轉速為4000轉/min,離屯、時間為15min;在離屯、分離得到的海洋魚膠 原蛋白液中加入膜蛋白酶、中性蛋白酶與木瓜蛋白酶，相對于海洋魚膠原蛋白液體積所加 入的酶用量分別是1500U/mL、4000U/mL與2000U/mU酶解條件是：pH為7. 0、溫度為37°C、 酶解時間為化；在離屯、分離得到的淡水魚膠原蛋白液中加入堿性蛋白酶、中性蛋白酶與渡 蘿蛋白酶，相對于膠原蛋白液體積所加入的酶用量分別是2000U/mL、3000U/mL與1500U/ mU酶解條件是：抑為8. 0、溫度為45°C、酶解時間為地；將酶解后的蛋白膚液經過熱處理， 純化蛋白酶，使蛋白酶失去活性，熱處理條件是95°C，3min;將純化酶后的蛋白膚液進行超 濾分離，海洋魚蛋白膚液收集分子量在1000化-2000化范圍內的膚組分；淡水魚蛋白膚液 收集分子量在2000化-3000化范圍內的膚組分；超濾壓力在1.OMPa，室溫操作；將收集到 的海洋魚和淡水魚蛋白膚組分分別通過真空冷凍干燥獲得膚粉末產品；真空冷凍干燥時間 25h，溫度35°C，真空度100Pa;海洋魚蛋白膚粉末與淡水魚膚粉末W質量比4:1比例混合； 海洋魚與淡水魚混合膚粉末采用壓片機制成片狀。
[0007] 進一步優化地，本方法按W下步驟進行： 海洋魚和淡水魚都經過去皮、骨、刺、雜質等，打成勻漿；在海洋魚肉勻漿中加入與魚 肉質量比為1:12的純凈水，再加入3000U/g魚肉的堿性蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶 解條件是：抑為8. 5、溫度為37°C、酶解時間為4h;在淡水魚肉勻漿中加入與魚肉質量比 為1:8的純凈水，再加入5000U/g魚肉的胃蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條件是：pH 為2. 5、溫度為40°C、酶解時間化；酶解后的魚肉糜混合液通過離屯、分離，取上清液備用， 上清液即膠原蛋白液；離屯、轉速為3000轉/min,離屯、時間為20min;在離屯、分離得到的海 洋魚膠原蛋白液中加入膜蛋白酶、中性蛋白酶與木瓜蛋白酶，相對于海洋魚膠原蛋白液體 積所加入的酶用量分別是2000U/mL、3000U/mL與1500U/mU酶解條件是：抑為7. 5、溫度 為40°C、酶解時間為化；在離屯、分離得到的淡水魚膠原蛋白液中加入堿性蛋白酶、中性蛋 白酶與渡蘿蛋白酶，相對于膠原蛋白液體積所加入的酶用量分別是1500U/mL、4000U/mL與 2000U/mU酶解條件是：抑為7. 0、溫度為42°C、酶解時間為化；將酶解后的蛋白膚液經過 熱處理，純化蛋白酶，使蛋白酶失去活性，熱處理條件是90°C，5min;將純化酶后的蛋白膚 液進行超濾分離，海洋魚蛋白膚液收集分子量在1000化-2000化范圍內的膚組分；淡水魚 蛋白膚液收集分子量在2000化-3000化范圍內的膚組分；超濾壓力在0. 5MPa,室溫操作； 將收集到的海洋魚和淡水魚蛋白膚組分分別通過真空冷凍干燥獲得膚粉末產品；真空冷凍 干燥時間為35h，溫度為30°C，真空度為200Pa;海洋魚蛋白膚粉末與淡水魚膚粉末W質量 比3:1比例混合；海洋魚與淡水魚混合膚粉末采用壓片機制成片狀。
[0008]與現有技術相比，本發明具有如下優點與技術效果： (1)根據海洋魚與淡水魚肌肉的不同性質，分別采用堿性蛋白酶和胃蛋白酶處理魚肉， 制備膠原蛋白。
[0009] (2)采用復合酶解的方法將魚膠原蛋白酶解成為生物活性膚，根據海洋魚膠原蛋 白與淡水魚膠原蛋白的不同性質，采用不同的復合酶解方案，W獲得兩種魚類的生物活性 膚。
[0010] (3)通過對酶解制得的魚蛋白膚進行降血壓功能體外實驗測定，來確定收集不同 分子量范圍的膚組分，海洋魚蛋白膚收集組分為1000化-2000Da，淡水魚蛋白膚收集組分為 2000Da-3000Da。
[0011] (4)收集特定分子量范圍的膚組分，W使得其降血壓運項功能的指標強。（5)通 過檢測降血壓功能來優化海洋魚蛋白膚與淡水魚蛋白膚的比例配方，兩種魚蛋白膚復配之 后，顯示出協同增效作用，比它們單獨使用時，降血壓效果更好。
【具體實施方式】
[0012] W下結合實例對本發明的實施作進一步說明，但本發明的實施和保護不限于此。
[001引 實施例一： 海洋魚和淡水魚都經過去皮、骨、刺、雜質等，打成勻漿；在海洋魚肉勻漿中加入與魚肉 質量比為1:8的純凈水，再加入5000U/g魚肉的堿性蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條 件是：抑為7. 5、溫度為40°C、酶解時間為化；在淡水魚肉勻漿中加入與魚肉質量比為1:6 的純凈水，再加入4000U/g魚肉的胃蛋白酶處理魚肉提取膠原蛋白，酶解條件是：抑為2. 0、 溫度為35°C、酶解時間為化；酶解后的魚肉糜混合液通過離屯、分離，取上清液備用，上清液 即膠原蛋白液；離屯、轉速為4000轉/min,離屯、時間為15min;在離屯、分離得到的海洋魚膠 原蛋白液中加入膜蛋白酶、中性蛋白酶與木瓜蛋白酶，相對于膠原蛋白液體積所加入的酶 用量分別是1500U/mL、4000U/mL與2000U/mU酶解條件是：抑為7. 0、溫度為37°C、酶解 時間為化；在離屯、分離得到的淡水魚膠原蛋白液中加入堿性蛋白酶、中性蛋白酶與渡蘿蛋 白酶，相對于膠原蛋白液體積所加入的酶用量分別是2000U/mL、3000U/mL與150011/111以酶 解條件是：抑為8. 0、溫度為45°C、酶解時間為4h;將酶解后的蛋白膚液經過熱處理，純化 蛋白酶，使蛋白酶失去活性，熱處理條件是95°C，3min;將純化酶后的蛋白膚液進行超濾分 離，海洋魚蛋白膚液收集分子量在1000化-2000化范圍內的膚組分；淡水魚蛋白膚液收集 分子量在2000化-3000Da范圍內的膚組分；超濾壓力在1.OMPa，室溫操作；將收集到的海洋 魚和淡水魚蛋白膚組分別通過真空冷凍干燥獲得膚粉末產品；真空冷凍干燥時間為25h， 溫度為35°C，真空度為100Pa;海洋魚蛋白膚粉末與淡水魚膚粉末W質量比4:1比例混合； 海洋魚與淡水魚混合膚粉末采用壓片機制成片狀。
[0014] 實施例二： 海洋魚和淡水魚都經過去皮、骨、刺、雜質等，打成勻漿；在海洋魚肉勻漿中加入與魚肉 質量比為1:12的純凈水，再