一種黃芪微生態制劑及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于飼料添加劑和生物發酵中藥技術領域，具體涉及一種微生態制劑和制 備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 隨著抗生素、激素等作為飼料添加劑的濫用，其危害性已逐漸被人們認識，因此， 禁止以添加劑形式添加抗生素和激素類物質已經成為現代飼料行業的發展趨勢，安全高效 的微生態制劑作為飼料添加劑在畜牧業生產中將會有越來越重要的應用。微生態制劑是益 生菌、益生元，以及益生菌和益生元組合物，其中益生菌和益生元的重要來源分別使乳酸菌 和植物多糖，但是傳統的微生態制劑是將乳酸菌和植物多糖簡單組合，并沒有發揮微生物 發酵的巨大潛力，研宄表明微生物發酵中藥具有提高中藥活性成分含量，提高藥效和降低 毒副作用等突出優點。
[0003] 乳酸菌是一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌的統稱，是動物腸道內的常在菌，具有 調節畜禽硝化到菌群平衡，提高動物免疫性能的作用，目前市場上常用的乳酸菌微生態制 劑多以普通培養基培養乳酸菌，然后以液體或粉劑形式存在；黃芪是一種常用中藥，主要活 性物質為多糖、皂苷和總黃酮，具有提高動物機體免疫力和生產性能的作用。朱新術在《發 酵黃芪的乳酸菌選育與發酵參數優化研宄》中公開了乳桿菌發酵黃芪水提取物提高黃芪多 糖的得率和菌體數量，并優化出發酵培養的培養基為玉米粉42. 10g/L，氮源7. 45g/L，胡蘿 卜粉0? 80g/L，KH2PO4-K2HPO4 2. 18g/L，肉膏6. 25g/L，發酵培養基的初始PH為6. 7、發酵時 間為68h、發酵溫度為38°C，發酵后微生態制劑的粗多糖增率最高達到83. 43%，采用該公 開的發酵培養基利用乳酸菌發酵黃芪，雖然增加了粗多糖的得率，但是粗多糖增率有待進 一步的提高，而且該發酵培養基成本高，并且添加使用無機磷，存在增加畜禽糞便無機磷污 染的問題。
【發明內容】
[0004] 為了克服現有技術的缺陷，本發明的目的之一在于提供一種粗多糖增率高的黃芪 微生態制劑。
[0005] 本發明的目的之二在于提供一種黃芪微生態制劑的制備方法。
[0006] 同時，本發明還在于提供一種黃芪微生態制劑的應用。
[0007] 為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：
[0008] 一種黃芪微生態制劑，主要由黃芪、乳酸菌種子液和固體培養基發酵而成；其中所 述乳酸菌種子液由屎腸球菌和植物乳桿菌按2~8 :8~2的比例混合培養制得；每25~ 75克黃芪對應接種的乳酸菌種子液的活菌個數為25X IO9個。
[0009] 所述固體培養基為乳酸菌發酵過程中提供必要的氮源和碳源。
[0010] 所述固體培養基由玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣按質量比為玉米粉：麩皮：蘋果 澄：木瓜澄=(1~4) : (1~4) : (1~4) : (1~4)組成。
[0011] 為了進一步提高乳酸菌發酵黃芪的效果，提高微生態制劑中乳酸菌和粗多糖的含 量，優選的，所述固體培養基由玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣等質量比組成。
[0012] 所述黃芪與固體培養基的質量比為（2~1) :1。
[0013] 為了進一步提高乳酸菌發酵黃芪的效果，提高微生態制劑中乳酸菌和粗多糖的含 量，優選的，所述黃芪與固體培養基的質量比為2 :1。
[0014] 為了進一步提高乳酸菌發酵黃芪的效果，提高微生態制劑中乳酸菌和粗多糖的含 量，優選的，該黃芪微生態制劑由黃芪、乳酸菌種子液、膨潤土和固體培養基發酵而成；其中 膨潤土與固體培養基的質量比為1:1。
[0015] 為了進一步提高微生態制劑中乳酸菌種子液和黃芪的互作作用效果，提高乳酸菌 和粗多糖的含量，優選乳酸菌種子液由以下方法混合培養制得：將屎腸球菌和植物乳桿菌 按2~8 :8~2的比例接入MRS培養基，37°C~39°C厭氧培養24h~36h，即得。
[0016] 所述的MRS培養基由酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏8g、葡萄糖5g、乙酸鈉5g、 朽1檬酸氫二按2g、Tween-80 lg、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0. 2g、硫酸猛0. 05g、碳酸1? 10g、水 1000mL，調pH為6. 8,高壓滅菌制得。
[0017] 上述黃芪微生態制劑的制備方法，包括將黃芪、玉米粉、麩皮、蘋果渣、木瓜渣、和/ 或膨潤土混合后，接入乳酸菌種子液，混合均勻，密封，37°C~39°C發酵培養18~30天，即 得。
[0018] 上述黃芪微生態制劑的制備方法，還包括將屎腸球菌和植物乳桿菌按比例計入 MRS培養基，337°C~39°C厭氧培養24h~36h制得乳酸菌種子液。
[0019] 上述黃芪微生態制劑的制備方法，還包括取酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏8g、 葡萄糖5g、乙酸鈉5g、檸檬酸氫二銨2g、TWeen-80 lg、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0. 2g、硫酸錳 〇.〇5g、碳酸鈣10g、水lOOOmL，調pH為6. 8,高壓滅菌制得MRS培養基。
[0020] 上述黃芪微生態制劑的制備方法，還包括將黃芪、玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣 粉碎過40目篩。使乳酸菌種子液接種基體需要具有合適的孔隙率，確保乳酸菌種子液的活 性，提高乳酸菌種子液的發酵效果。
[0021] 上述黃芪微生態制劑作為畜禽飼料添加劑的應用，畜禽飼料中黃芪微生態制劑的 質量百分含量為0. 4%~0. 6%。
[0022] 本發明黃芪微生態制劑，由黃芪、乳酸菌種子液、固體培養基和/或膨潤土發酵制 成，通過選擇乳酸菌種子液為屎腸球菌和植物乳桿菌按2~8 :8~2的比例培養的菌種，并 選擇合適的乳酸菌接種量和黃芪的加入量，使黃芪和乳酸菌之間產生互作作用，相比傳統 的直接將乳酸菌和黃芪混合的添加劑，本發明黃芪微生態制劑提高了粗多糖的得率和乳酸 菌的數量，粗多糖增率達到184%，高于現有的單純的采用乳酸桿菌發酵黃芪的微生態制劑 的粗多糖增率。
[0023] 優選的，本發明黃芪微生態制劑所用的固體培養基為玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜 渣按比例組成的培養基，使用農業廢渣為原料，如蘋果渣和木瓜渣，變廢為寶，降低成本，并 且不使用無機磷，使該微生態制劑作為飼料添加劑時，降低畜禽糞便中無機磷的含量，降低 無機磷對環境的污染。
[0024] 本發明黃芪微生態制劑的制備方法，通過選擇合適的發酵溫度和發酵時間，提高 制備的微生態制劑中粗多糖和乳酸菌含量，提高黃芪和乳酸菌的互作作用效果，操作簡便， 易于控制，適于工業化推廣應用。
[0025] 本發明黃芪微生態制劑作為畜禽飼料添加劑，利用屎腸球菌和植物乳桿菌復配的 乳酸菌在合適的固體發酵培養基中發酵黃芪，使黃芪和乳酸菌產生協同增效作用，增加黃 芪粗多糖含量和乳酸菌活菌量，使該微生態制劑添加于畜禽飼料中，提高動物生產性能、消 化率和機體免疫力。
【具體實施方式】
[0026] 下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明，但不構成對本發明的任何限 制。
[0027] 下述實施例中植物乳桿菌和屎腸球菌均購自中國普通微生物菌種保藏中心；植物 乳桿菌的CGMCC編號為1. 557 ;屎腸球菌的CGMCC編號為1. 130。
[0028] 實施例1
[0029] 本實施例黃芪微生態制劑，由以下方法制備而得，具體操作步驟為：
[0030] 1)原料預處理：
[0031] A :將黃芪、玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣，粉碎過40目篩；
[0032] B :制備乳酸菌種子液：取酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏8g、葡萄糖5g、乙酸鈉 5g、梓檬酸氫二按2g、Tween-80 lg、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0? 2g、硫酸猛0? 05g、碳酸1? 10g、 水lOOOmL，調pH為6. 8,高壓滅菌制得MRS培養基，將屎腸球菌與植物乳桿菌按5 :5比例接 入MRS培養基，37°C厭氧培養24h，即得；
[0033] C :取玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣按等質量比混合制成固體培養基；
[0034] 2)發酵黃芪：將步驟A粉碎過篩后的黃芪25g、固體培養基25g和膨潤土 50g混合 后，接入步驟B制備的乳酸菌種子液，接種的活菌個數為25 X IO9個，混合均勻后密封，37°C 發酵18天，即得。
[0035] 本實施例制備的黃芪微生態制劑可作為畜禽飼料添加劑，畜禽飼料中黃芪微生態 制劑的質量百分含量為〇. 4%~0. 6%。
[0036] 實施例2
[0037] 本實施例黃芪微生態制劑，由以下方法制備而得，具體操作步驟為：
[0038] 1)原料預處理：
[0039] A :將黃芪、玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣，粉碎過40目篩；
[0040] B :制備乳酸菌種子液：取酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏8g、葡萄糖5g、乙酸鈉 5g、梓檬酸氫二按2g、Tween-80 lg、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0? 2g、硫酸猛0? 05g、碳酸1? 10g、 水lOOOmL，調pH為6. 8,高壓滅菌制得MRS培養基，將屎腸球菌與植物乳桿菌按5 :5比例接 入MRS培養基，38°C厭氧培養30h，即得；
[0041] C :取玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣按等質量比混合制成固體培養基；
[0042] 2)發酵黃芪：將步驟A粉碎過篩后的黃芪50g、固體培養基25g和膨潤土 25g混合 后，接入步驟B制備的乳酸菌種子液，接種的活菌個數為25 X IO9個，混合均勻后密封，38°C 發酵25天，即得。
[0043] 本實施例制備的黃芪微生態制劑可作為畜禽飼料添加劑，畜禽飼料中黃芪微生態 制劑的質量百分含量為〇. 4%~0. 6%。
[0044] 實施例3
[0045] 本實施例黃芪微生態制劑，由以下方法制備而得，具體操作步驟為：
[0046] 1)原料預處理：
[0047] A:將黃芪、玉米粉、麩皮、蘋果渣和木瓜渣，粉碎過40目篩；
[0048] B :制備乳酸菌種子液：取酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏8g、葡萄糖5g、乙酸鈉 5g、梓檬酸氫二按2g、Tween-80 lg、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0? 2g、硫酸猛0? 05g、碳酸1? 10g、 水lOOOmL，調pH為6. 8,高壓滅菌制得MRS培養基，將屎腸球菌與植物乳桿菌按5 :5比例接 入MRS培養基，39°C厭氧培養36h，即得；
[0049] C:取玉米粉、麩皮、蘋果渣和木