一種發酵蟲草源性β-葡聚糖提取物及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于真菌資源應用領域，涉及發酵蟲草源性(6-葡聚糖提取物的制備方 法。
【背景技術】
[0002] (6-葡聚糖是一種具有多種功能活性的多糖，主要化學結構(6-1,3葡聚糖和 3 -1，6葡聚糖，其中前者具有抗腫瘤性質，而且能夠極大地提高人體自然免疫力。
[0003] 日本科學家研究成果表明，P_葡聚糖具有調節血糖水平，激活胰島素活性的作 用，為高血糖患者帶來了福音。由于國內對蟲草多糖的研究還處于比較低的水平，甚至一些 生產商片面追求總多糖含量，添加麥芽糖糊精，3 _環糊精和黃糊精，導致國外內外對真菌 多糖的興趣喪失。
[0004] 為了進一步開發利用發酵蟲草資源，充分促進真菌多糖在食品中的應用，發明人 提供一種發酵蟲草源性3-葡聚糖提取物，推動了發酵蟲草的廣泛應用。
【發明內容】
[0005] 本發明為了克服上述不足之處，一種發酵蟲草源性(6-葡聚糖提取物及其提取方 法，該提取物具有高含量的總多糖和1，3-1，6 0葡聚糖，以及低含量的a葡聚糖，為生產高 檔次的保健產品和化妝品提供了原料，推動發酵蟲草的廣泛應用。
[0006] 本發明的目的是通過以下方式實現的：
[0007] -種發酵蟲草源性P_葡聚糖提取物，該提取物含有總多糖50%以上，1，3-1，6 3 葡聚糖40%以上，a葡聚糖含量在10%以下。
[0008] 上述發酵蟲草源性3 _葡聚糖提取物，該發酵蟲草源性3 _葡聚糖提取物是通過 以下方法制備得到的：
[0009] a)向發酵的濕蟲草菌絲體中，加入質量濃度為70-95 %的乙醇，加熱至20_50°C， 保持2h_5h后，離心，棄去濾液，得到濕菌絲體；
[0010] b)向a)中濕菌絲體加入純化水進行洗滌，得到洗滌后的菌絲體；
[0011] c)將b)中洗滌后的菌絲體，加入純化水，菌絲體與純化水重量比例為1:2-5,煮沸 后，保溫3h-10h，每隔1-1. 5h，在10-20r/min轉速條件下攪拌5min-20min，離心，棄去菌絲 體，保留濾液；
[0012] d)將c)中所得濾液，濃縮至比重為0.8-1.3,加入乙醇進行醇沉，離心，得到濕 葡聚糖提取物，回收乙醇；
[0013] e)將d)中得到的濕P-葡聚糖提取物在真空度0. 02MPa-0.IOMPa條件下真空干 燥，濕料厚度不高于5cm，干燥溫度60-90°C，干燥40h-80h。
[0014] 步驟a)中該濃度范圍的乙醇的使用，除去了低分子多糖及醇溶性多糖，提高產品 中有效成分P葡聚糖含量，優選采用的乙醇濃度為80%。
[0015] 步驟b)中具體的洗滌步驟為：濕菌絲體加入純化水，濕菌絲體與純化水的重量比 例為1:2-5,轉速為10r/min-100r/min條件下攪拌5-30min，然后離心，棄濾液，得到洗漆后 的菌絲體。
[0016] 步驟d)中具體的醇沉步驟為：向濃縮后的濾液中邊攪拌邊加入濃縮液體積1-5倍 量乙醇使乙醇濃度為50-80%，靜置8h以上，進行醇沉。
[0017] 上述發酵蟲草源性(6-葡聚糖提取物中，還可以將步驟e)中得到的干燥品用純化 水溶解，干燥品與純化水的重量比例為1:2-5 ;然后在真空度0. 02MPa-0.IOMPa,干燥溫度 60-90°C條件下減壓真空干燥40h-80h，粉碎，過80目篩，總混60-90min，得到成品。該過程 使得提取的0葡聚糖粗品再次溶解，干燥，進一步有效除去產品中乙醇的殘留。
[0018] 步驟a)中離心可采用臥螺離心機，離心條件為轉速1000r/min-5000r/min。步驟 b)中提到的離心可采用臥螺離心機，離心條件為轉速1000r/min-3000r/min，離心時間為 0. 5-1. 5h〇
[0019] 本發明所述的蟲草為蝙蝠蛾擬青霉（PaecilomycesHepialiChenetDai, sp.Nov)〇
[0020] 發酵的濕蟲草菌絲體可按照如下工藝進行：
[0021] 將蝙蝠蛾擬青霉菌種接于新鮮斜面培養基上，培養基配方為：土豆8-9%，葡萄糖 2-4. 0%，磷酸二氫鉀 0? 2-0. 3%，硫酸鎂 0? 15-0. 17%，瓊脂L3-1. 5%，26-28°C培養 4 天； 在斜面培養好的菌種轉接到搖瓶中，搖瓶培養基為：葡萄糖2. 0-4. 0%，蛋白胨1. 0-2. 0%， 磷酸二氫鉀〇. 1-0. 3 %，硫酸鎂0. 05-0. 07 %，26-28 °C培養2天；搖瓶培養結束后，將菌種轉 接到種子罐中，種子罐培養基為：葡萄糖2. 0-3. 0%，蛋白胨1-2%，磷酸二氫鉀0. 1-0. 3%， 硫酸鎂0.05-0. 07%，消泡劑0. 1-0. 2%，發酵工藝條件為：接種量10%，溫度26°C±1°C， 通氣量I: 0. 5vvm，罐壓0. 03MPa;種子罐發酵3天后轉接到發酵罐發酵，發酵罐培養基 為：蛋白胨2-4%、葡萄糖1. 5-1. 7%、磷酸二氫鉀0. 05-0. 07%、硫酸鎂0. 07-0. 08%、消泡 劑0. 1-0. 3%。發酵工藝為：接種量10%，發酵溫度26°C±1°C，通氣量1 : 0. 5vvm，罐壓 0.03MPa。發酵罐體積為種子罐的10倍。發酵結束后，發酵液經臥式螺旋卸料沉降離心機 分離，得到菌絲體。
[0022] 步驟c)所述的保溫優選在80-10(TC條件下保溫。
[0023] 步驟d)所述的離心分離條件為采用臥螺離心機在500_2500r/min轉速條件下，分 離10-30min;所述的干燥條件是將離心分離得到的蟲草多糖在60-90°C下干燥40h-80h。
[0024] 上述發酵蟲草源性P_葡聚糖提取物的制備方法具體包括以下步驟：
[0025] a)向發酵的濕蟲草菌絲體中，加入質量濃度為70-95 %的乙醇，加熱至20_50°C， 保持2h_5h后，離心，棄去濾液，得到濕菌絲體；
[0026] b)向a)中濕菌絲體加入純化水進行洗滌，得到洗滌后的菌絲體；
[0027] c)將b)中洗滌后的菌絲體，加入純化水，菌絲體與純化水比例為1:2-5,煮沸后， 保溫3h-10h，每隔1-1. 5h，在10-20r/min轉速條件下攪拌5min-20min，離心，棄去菌絲體， 保留濾液；
[0028] d)將c)中所得濾液，濃縮至比重為0.8-1.3,加入乙醇進行醇沉，離心，得到濕 葡聚糖提取物，回收乙醇；
[0029]e)將d)中得到的濕P-葡聚糖提取物在真空度0. 02MPa_0.IOMPa條件下真空干 燥，濕料厚度不高于5cm，干燥溫度60-90°C，干燥40h-80h。
[0030] 該P-葡聚糖提取物可制備具有保健效果的食品或藥品，如咖啡。
[0031] 一種發酵蟲草源性(6-葡聚糖咖啡，包括(6-葡聚糖提取物，氯化鈉與咖啡粉，3 葡聚糖，氯化鈉與咖啡粉的比例為I:1 :(0.05-0. 30) :(10-30)。在總混中加入氯化鈉可以 使咖啡中的焦糖化的味道更為突出，咖啡味道柔和濃郁。
[0032] 上述P_葡聚糖咖啡的制備方法包括以下步驟：
[0033] a)向發酵的濕蟲草菌絲體中，加入質量濃度為70-95 %的乙醇，加熱至20_50°C， 保持2h_5h后，離心，棄去濾液，得到濕菌絲體；
[0034] b)向a)中濕菌絲體加入純化水進行洗滌，得到洗滌后的菌絲體；
[0035] c)將b)中洗滌后的菌絲體，加入純化水，菌絲體與純化水比例為1:2-5,煮沸后， 保溫3h-10h，每隔1-1. 5h，在10-20r/min轉速條件下攪拌5min-20min，離心，棄去菌絲體， 保留濾液；
[0036] d)將c)中所得濾液，濃縮至比重為0.8-1.3,加入乙醇進行醇沉，離心，得到濕 葡聚糖提取物，回收乙醇；
[0037] e)將d)中得到的濕P-葡聚糖提取物在真空度0. 02MPa_0.IOMPa條件下真空干 燥，濕料厚度不高于5cm，干燥溫度60-90°C，干燥40h-80h。
[0038] f)將e)中干燥品用純化水溶解,干燥品與純化水重量比例為1:2-5 ;然后在真空 度0. 02MPa-0.lOMPa，干燥溫度60-90°C條件下減壓真空干燥40h-80h，粉碎，過80目篩，總 混60-90min，得到成品；
[0039] g)P-葡聚糖，氯化鈉與咖啡粉的比例為1 :0. 05-0. 30 :10-30,用三維運動混合機 混勻60_90min。即葡聚糖咖啡。
[0040] 本發明加入氯化鈉可中和丹寧酸的苦味，使咖啡中的焦糖化的味道更為突出。
[0041] 所使用的氯化鈉為食品級氯化鈉，市售可得。
[0042] 與現有技術比較本發明的有益效果：
[0043] 1、市售的真菌多糖提取物中，具有活性的P葡聚糖含量較低，P葡聚糖的含量 僅在1-5%。而本發明顯著提高了真菌多糖提取物中P葡聚糖的含量，總多糖含量高達 56 %的同時，1，3-1，6 3葡聚糖含量高達43. 5 %，腺苷含量高達0. 33 %，甘露醇含量高達 12.0%，而a葡聚糖含量可在10%以下。
[0044] 2、多糖提取物粘度較大，傳統上會加入糊精等方式降低黏度，但是這種方法降低 了產品中P葡聚糖含量，在本發明中采用特定的減壓真空的干燥方式，在無淀粉