本發(fā)明屬于保健食品領域,具體涉及一種青錢柳番石榴葉降糖茶及其制備方法和用途。
背景技術:
:糖尿病已成為當前我國非傳染性慢性疾病中第3位主要疾病(心血管疾病、腫瘤、糖尿病),是嚴重威脅我國人民健康的常見病多發(fā)病,給國民經(jīng)濟帶來沉重負擔,嚴重影響社會經(jīng)濟的發(fā)展。其發(fā)病增長之速,涉及人群之廣,消耗衛(wèi)生資源之大,造成殘疾、死亡之多已達觸目驚心的地步。因此,預防和控制糖尿病是我國亟待解決的重大衛(wèi)生問題。糖尿病在中國傳統(tǒng)醫(yī)學里被稱為消渴癥,以多飲、多尿、多食及消瘦、疲乏、尿甜為主要特征,病變部位在肺、胃和腎?,F(xiàn)代學者多認為消渴癥的基本病機為陰津虧耗、燥熱偏盛。并認為,消渴癥日久,病情失控,則陰損及陽、熱灼虧血淤,而致氣陰兩傷,陰陽俱虛,絡脈淤阻,經(jīng)脈失養(yǎng),氣血逆亂,臟腑器官受損而出現(xiàn)癰、眩暈、胸痹、耳聾、目盲、肢體麻疼、下肢壞疽、腎衰水腫、中風昏迷等兼證。糖尿病病程緩慢,目前尚無治愈糖尿病的特效藥物,盡量用毒副作用小的天然植物控制血糖水平是治療糖尿病的關鍵。如中國專利申請cn102935186b公開了一種預防糖尿病的保健茶,由蒲公英15-25克,天冬10-20克,麥冬10-20克,玉米須5-15克,天花粉15-25克,敗醬草10-20克和荊芥3-6克共7種藥材組成。又如中國專利申請cn103157013b公開了一種治療糖尿病的藥茶,該藥茶由馬蘭5~10,車前5~10,建蘭15~20,盤龍參10~15,筆仔草20~25,瓜蔞10~15,番石榴干20~25共7種中藥組成。上述公開的保健茶均有較好治療糖尿病的療效,但均存在如下缺點:一是上述公開的保健茶均是采用開水沖泡的方式作為茶水飲用,無法更全面,更好地利用藥材中的功效成分,不能很好地被人體利用、吸收;二是上述保健茶組成成分復雜,質量控制困難,制備程序冗長,不利于產品質量及療效的穩(wěn)定性;三是上述保健茶均沒有涉及對藥效的深層次的科學詮釋。因此,有必要提供一種療效確切,組分簡單,成本低,降糖效果顯著的保健茶。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明旨在提供一種青錢柳番石榴葉降糖茶及其制備方法和用途。本發(fā)明采用超微粉技術制備得到一種降糖茶,其能夠更全面、更好地利用藥材中各種水溶性和非水溶性功效成份,使其更容易被人體利用、吸收,充分發(fā)揮其保健功效,且其成分簡單,制造工藝簡便,衛(wèi)生指標易于控制,便于廣泛地推廣和應用。為了達到上述目的,本發(fā)明采用以下技術方案:一種青錢柳番石榴葉降糖茶,由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(0.4~9)的重量比組成。進一步地,所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(1~9)的重量比組成。進一步地,所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按3:7的重量比組成。進一步地,所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:1的重量比組成。進一步地,所述青錢柳超微粉由以下步驟制得:取青錢柳嫩葉或葉芽,洗凈,萎凋,殺青,烘炒,揉捻,烘焙,經(jīng)超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末,即得。進一步地,所述番石榴葉超微粉由以下步驟制得:取番石榴葉,洗凈,萎凋,殺青,烘炒,揉捻,烘焙,經(jīng)超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末,即得。相應地,本發(fā)明還提供了一種制備上述的降糖茶的方法,包括以下步驟:a)取青錢柳嫩葉或葉芽,洗凈,萎凋,殺青,烘炒,揉捻,烘焙,經(jīng)超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末,備用;b)取番石榴葉,洗凈,萎凋,殺青,烘炒,揉捻,烘焙,經(jīng)超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末,備用;c)取上述青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(0.4~9)的重量比混合,包裝,即得。除此之外,本發(fā)明還提供了上述的降糖茶在制備輔助治療ⅱ型糖尿病及其并發(fā)癥保健食品中的用途。如上所述的用途,所述降糖茶可降低血糖以及降低血液中糖化血清蛋白的含量。本發(fā)明具有以下優(yōu)點:1)本發(fā)明降糖茶由青錢柳和番石榴葉按一定的比例制成,成分簡單,降糖效果顯著,且其組成成分簡單,質量易控制,制備工藝簡單,保證了產品質量的穩(wěn)定性,同時對人體無毒害作用,無抗藥性,可長期服用。2)本發(fā)明采用超微粉技術制備得到一種降糖茶,使傳統(tǒng)的“喝茶”變?yōu)椤俺圆琛?,能夠更全面、更好地利用藥材中各種水溶性和非水溶性功效成份,使其更容易被人體利用、吸收,充分發(fā)揮其保健功效。附圖說明圖1顯示了本發(fā)明不同比例青錢柳和番石榴葉組合對配方總皂苷總量的影響;圖2顯示了ⅰ型糖尿病小鼠給藥后血糖隨時間變化趨勢;圖3顯示了青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠肝細胞組織形態(tài)的影響;圖4顯示了青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠胰島細胞組織形態(tài)的影響;圖5顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠血糖的影響;圖6顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠脂代謝的影響;圖7顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影響。具體實施方式以下通過實施例形式的具體實施方式,對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。本發(fā)明實施例1~3以及對比例1所述降糖茶原料配方實施例4、本發(fā)明降糖茶制備方法a)青錢柳預處理:s1、原葉采摘,挑選:選取色澤嫩綠、質地肥厚、無病斑、無蟲害的葉芽或嫩葉,洗凈,除去葉表灰塵及微生物,瀝干水分,在通風干燥處均勻攤開;s2、萎凋:自然萎凋3h,中間可上下翻動1次,至葉片已萎軟、失水率為8%即可;s3、殺青:將萎凋的青錢柳葉片烘炒殺青,使水分繼續(xù)散發(fā),制止酶促反應;s4、烘炒:將殺青后的葉片放進炒鍋,炒鍋的斜度為35°,控溫在80℃連續(xù)翻炒4min,至葉片柔軟,握之成團,手松不散,聞之清味消失,略顯清香;s5、揉捻:將烘炒原料放于揉板上,每鍋分3次用力均勻揉捻,揉捻5min;s6、烘焙:待果膠分解物形成緊結的條索狀后,用篩將葉條與細末分開,葉條放入70℃的鍋中快速翻炒,烘焙至手捻葉條細碎成粉、含水率低于6%,進行超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末;b)番石榴葉預處理:s1、原葉采摘,挑選:選取色澤嫩綠、質地肥厚、無病斑、無蟲害的葉片,用水洗凈,除去葉表灰塵及微生物,瀝干水分;s2、燙青:置500ml水于電炒鍋,電炒鍋開至500w,水燒開后,將番石榴葉置于開水中,直到葉成黃綠色、臭青氣味消失、有淡淡的清香時出鍋,瀝干水分;s3、殺青:將燙青后的番石榴葉片再次置于電炒鍋進行烘炒殺青,使水分繼續(xù)散發(fā),制止酶促反應;s4、烘焙:將殺青后的番石榴葉置于90℃烘箱,烘焙至手捻葉條細碎成粉、含水率低于6%,進行超微粉碎,制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末;c)取上述青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉混合,包裝,即得。實施例5α-糖苷酶的抑制試驗1.實驗方法:1.1提取濃縮以對比例1所述降糖茶為陽性對照組,取青錢柳和番石榴葉按10:0、7:3、5:5、3:7和0:10比例混合,取對比例1降糖茶和各比例樣品10g分別加入500ml蒸餾水,90℃水浴30min,抽濾,濾液旋蒸濃縮至10ml,保存待用。1.2稀釋將各比例濃縮液用pbs緩沖液稀釋如下表濃度,得各供試品。1.3酶活性的測定往各供試品中加入分別加入100μl酶液,37℃恒溫15min,加入預熱底物(pnpg/pnpb)50μl,37℃恒溫15min,加入終止劑0.2mol/lna2co380μl,酶標儀測吸光度值。1.4總苷含量的測定1.4.1柱層析:d101大孔樹脂,中性氧化鋁裝柱,依次用70%乙醇、水洗柱;精密加入0.5ml供試品溶液,25ml水洗柱,棄洗脫液;再用25ml70%乙醇洗脫皂苷,收集洗脫液于蒸發(fā)皿中,水浴揮干。1.4.2顯色測定:向上述已揮干的蒸發(fā)皿中精密加入0.2ml5%的香草醛冰乙酸溶液,溶解殘渣;再加0.8ml高氯酸,混勻;移入5ml帶塞刻度離心管中,60℃水浴10min;冰浴冷卻后,精密加入5.0ml冰乙酸,搖勻后,用酶標儀在560nm波長處測定吸光度值;以外標法定量。結果見圖1。圖1顯示,當青錢柳:番石榴葉為3:7時,配方中的總皂苷含量最高。1.5計算各配方組以濃度對抑制率作圖,得到回歸方程,計算各配方組抑制率為50%時所對應的濃度,結果見表1。表1對α-糖苷酶具有50%抑制率時各青錢柳-番石榴葉配方濃度注:對α-糖苷酶抑制作用越強,即抑制率為50%(半數(shù)抑制率)時所需的濃度越低,降糖效果越好。由表1可知,番石榴葉對α-糖苷酶抑制作用比青錢柳要強,但單純番石榴葉口感差。另從表1可以明顯看出,青錢柳和番石榴葉組合使用具有顯著抑制α-糖苷酶的作用,其中以1:(1~9)的比例組合抑制效果較好,尤其是當青錢柳和番石榴葉比例為3:7時抑制效果最佳,并且,與兩者單獨使用相比,聯(lián)合使用用量更少,抑制作用更顯著。需要指出的是,對比例1為中國專利申請cn105211434a所述降糖茶,與本發(fā)明相比,配方增加了鮮雪蓮果、玉米須、貢菊花、馬齒莧、陳皮、低聚果糖,控制對比例1的總量與本發(fā)明實施例一致,結果顯示,對比例1的降糖效果與本發(fā)明相比,有較明顯的下降。這一點是發(fā)明人意想不到的。實施例6青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠的作用研究一、青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠血糖的影響1實驗方法:1.1造模取15只雄性小鼠作為正常對照組不造模,其他已適應性喂養(yǎng)的雄性小鼠禁食12h后,腹腔注射stz130mg/kg,正常對照組腹腔注射檸檬酸緩沖液。注射stz后正常喂食,并適當補充10%葡萄糖水。兩周后,小鼠禁食12h,剪尾取血,血糖儀測空腹血糖,選擇空腹血糖≥11.1mmol/l的小鼠為ⅰ型糖尿病小鼠。1.2動物分組給藥將已成模小鼠分成3組:模型組,陽性藥組(二甲雙胍馬來酸羅格列酮片,葛蘭素史克),青錢柳組,每組15只,各組動物灌胃給藥,每天灌胃一次,連續(xù)給藥21天。另正常對照組不給藥,正常喂養(yǎng)。各組每7天末測一次空腹血糖,觀察各組血糖變化。1.3注射胰島素給藥實驗從模型組中取6只ⅰ型糖尿病小鼠,禁食12h后測定空腹血糖。測完空腹血糖后,每只小鼠分別皮下注射0.2ml門冬胰島素30注射液(諾和諾德),注射胰島素5min后喂食,5h后測量小鼠血糖值。1.4組織的he染色乙醚麻醉小鼠,剖腹,鈍性摘除胰腺,剪取小部分肝臟,用15%中性甲醛溶液固定胰腺和肝臟,每組分別隨機選5例胰腺和肝臟標本,石蠟包埋切片,作he染色,光鏡下觀察并攝片。2.實驗結果試驗結果如圖2所示,灌胃青錢柳小鼠空腹血糖在給藥7天后明顯低于模型組;而在給藥14天后各組小鼠的空腹血糖值又反彈到原有水平,并一直持續(xù)到給藥結束血糖都沒有再降下來,與模型組血糖比較有差異但無統(tǒng)計學意義;而陽性藥組從一開始給藥之后血糖值就沒有明顯下降跡象,陽性藥組和模型組血糖比較有差異但無統(tǒng)計學意義,由此看來陽性藥對ⅰ型糖尿病小鼠并無降糖作用,試驗結果如圖1所示。研究二、注射胰島素對ⅰ型糖尿病小鼠血糖的影響從表2中可以看到,注射胰島素5h后小鼠血糖全部降下來,而對比上圖,灌胃陽性藥小鼠血糖并無明顯變化,提示小鼠是絕對胰島素依賴型的糖尿病小鼠,只能通過注射胰島素來降血糖。表2注射胰島素后ⅰ型糖尿病小鼠血糖的變化(mmol/l)編號空腹血糖注射胰島素5h后血糖128.22.7220.61.2320.81.8428.01.2516.61.2630.73.1研究三、青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠肝臟組織形態(tài)的影響腹腔注射stz誘導ⅰ型糖尿病小鼠動物模型,注射胰島素驗證模型,分別灌胃模型小鼠陽性藥(二甲雙胍馬來酸羅格列酮)和青錢柳水提液,觀察正常小鼠和各給藥組小鼠肝臟、胰腺組織結構,結果如圖3~4所示。圖3顯示:正常對照組(a):肝臟、胰腺組織結構形態(tài):小鼠肝臟結構完整、清晰;肝細胞排列規(guī)則,在中央靜脈周圍呈放射狀分布;肝血竇無異常變化,結構清晰;胞漿均勻,形態(tài)正常。模型組(b):小鼠肝細胞排列紊亂,肝細胞明顯脂肪變性,胞核和胞漿分離;陽性藥組(c):小鼠肝小葉界限相對清晰,肝細胞脂肪變性減少,肝細胞排列較規(guī)則;青錢柳水提液組(d):小鼠肝小葉結構清晰,肝細胞脂肪變性明顯減少,肝細胞排列規(guī)則,在中央靜脈周圍呈放射狀分布,胞漿較均勻,形態(tài)正常。圖4顯示:正常對照組(a):視野中胰島和外分泌腺之間界限清楚,胰島形態(tài)完整規(guī)則,胰島內細胞排列緊密且分布均勻,數(shù)目較多。模型組(b):視野中胰島和外分泌腺之間界限相對模糊,胰島萎縮,形態(tài)不規(guī)則,部分胰島細胞胞漿和胞核分離,有空泡變性。陽性藥組(c):視野中胰島和外分泌腺之間界限較清楚,胰島形態(tài)完整規(guī)則,胰島內細胞排列緊密,空泡變性明顯減少。青錢柳水提液組(d):視野中胰島和外分泌腺之間界限清楚,胰島形態(tài)完整規(guī)則,胰島內細胞分布均勻,數(shù)目較多。由此可看出,陽性藥組和青錢柳水提液能改善絕對胰島素依賴型ⅰ型糖尿病小鼠肝臟組織形態(tài)和胰島細胞形態(tài),說明青錢柳水提液對肝臟和胰臟組織有一定保護作用。實施例7、青錢柳對ⅱ型糖尿病大鼠的作用1.實驗方法:1.1造模取12只雄性大鼠作為正常對照組不造模,其他大鼠喂高脂飼料(含基礎飼料74.5%,膽固醇1%,蛋黃粉5%,蔗糖10%,豬油9%,膽酸鈉0.5%;廣東省醫(yī)學實驗動物中心)一個月后,禁食12h,腹腔注射stz40mg/kg,正常對照組腹腔注射檸檬酸緩沖液。注射stz后適當補充10%葡萄糖水。兩周后,大鼠禁食12h,剪尾取血,血糖儀測空腹血糖,選擇空腹血糖≥11.1mmol/l的大鼠為ⅱ型糖尿病大鼠。2.動物分組給藥將已成模大鼠分成3組:模型組,陽性藥組(二甲雙胍馬來酸羅格列酮片,葛蘭素史克),青錢柳組,每組15只。各組動物灌胃給藥,每天一次,喂食普通飼料。連續(xù)給藥3個月。正常對照組不給藥,正常喂養(yǎng)。各組每7天末測一次空腹血糖及體重。各組每月月末眼眶采血,血糖儀測定血糖,酮胺氧化酶法測定各組大鼠的糖化血清蛋白(gsp)值,并將全血離心取血清,將血清送值醫(yī)院測量血脂相關指標。3.統(tǒng)計方法各項指標以均數(shù)±標準差(x±s)表示,兩組均數(shù)間差異的顯著性檢驗采用t檢驗法。以高脂飼料與腹腔注射stz誘導ⅱ型糖尿病大鼠動物模型,分別灌胃模型小鼠陽性藥(二甲雙胍馬來酸羅格列酮)和不同劑量青錢柳水提液,統(tǒng)計正常大鼠和各給藥組大鼠空腹血糖變化、脂代謝指標和糖化血清蛋白,結果如圖5~7所示,圖7中△模型組與空白組比較,△△p<0.01;▲與模型組比較,▲p<0.05,▲▲p<0.01。結果顯示,青錢柳水提液能降低ⅱ型糖尿病大鼠空腹血糖,使動脈粥樣硬化(as)的危險因子(總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白)和糖化血清蛋白含量降低,提示青錢柳水提液對糖脂代謝具有一定調節(jié)作用,降糖效果顯著。當前第1頁12