本發(fā)明屬于食品
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及薏米提取物在抑制α-葡萄糖苷酶活性中的應(yīng)用及含有其的降血糖飲品和制備方法。
背景技術(shù)：
：薏苡仁，常用利水滲濕藥，別名薏米、米仁、苡仁，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。為禾本科植物薏苡的干燥成熟種仁。薏苡仁呈寬卵形或長橢圓形，長4～8毫米，寬3～6毫米，表面乳白色，光滑，偶有殘存的黃褐色種皮。一端鈍圓，另端較寬而微凹，有一淡棕色點狀種臍。背面圓凸，腹面有一條較寬而深的縱溝。質(zhì)堅實，斷面白色粉性。氣微，味微甜。薏苡仁味甘、淡，性微寒。歸脾、胃、肺經(jīng)。功用利水滲濕、祛濕除痹、健脾止瀉、清熱排膿。主治小便不利、水腫、腳氣、濕痹拘攣、濕溫初起以及脾虛泄瀉、肺癰、腸癰等癥。薏苡仁含薏苡仁油、薏苡仁酯、氨基酸、脂肪油等。薏苡仁油及薏苡素有抑制肌肉收縮的作用，薏苡素還對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有鎮(zhèn)靜、解熱、降溫和鎮(zhèn)痛作用。實驗發(fā)現(xiàn)薏苡仁浸出物能加強體液免疫，增強NK細(xì)胞活性或細(xì)胞毒性而表現(xiàn)出抗病毒抗癌作用，并可降低血糖。從軟殼的薏苡種子麩皮中還發(fā)現(xiàn)一種熱穩(wěn)定的蛋白酶抑制劑。α-葡萄糖苷酶抑制劑(AGI)是口服降糖藥的一個類型，用于治療糖尿病。阿卡波糖是α-葡萄糖苷酶抑制劑類新型口服降血糖藥，已經(jīng)用于臨床。降糖機理為：食物中淀粉、糊精和雙糖(如蔗糖)的吸收需要小腸黏膜刷狀緣的α-葡萄糖苷酶，AGI在小腸上皮刷狀緣與碳水化合物競爭水解碳水化合物的糖苷水解酶，從而減慢碳水化合物水解及產(chǎn)生葡萄糖的速度并延緩葡萄糖的吸收。但是長期服用該藥物可能會存在不良反應(yīng)，常見不良反應(yīng)為胃腸反應(yīng)，如腹脹了排氣增多或腹瀉，單用本藥不引起低血糖，但如與磺酰脲類或胰島素合用，仍可發(fā)生低血糖，且一旦發(fā)生，應(yīng)直接給予葡萄糖口服或靜脈注射，進(jìn)食雙糖或淀粉類食物無效。腸道吸收甚微，通常無全身毒性反應(yīng)，但對肝、腎功能不全者仍應(yīng)慎用。本研究發(fā)現(xiàn)薏米含有的活性物質(zhì)能夠顯著抑制α-葡萄糖苷酶活性，目前，市場上輔助降血糖的藥物或保健食品較多，但是，使用薏米提取物制作的輔助降血糖的藥物或保健食品并沒有發(fā)現(xiàn)。技術(shù)實現(xiàn)要素：鑒以此，本發(fā)明的目的在于提出薏米提取物在制備抑制α-葡萄糖苷酶活性的藥物或保健品中的應(yīng)用，特別提出含有其的一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品及其制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：薏米提取物的應(yīng)用，在抑制α-葡萄糖苷酶活性中的應(yīng)用。優(yōu)選的，應(yīng)用于一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的藥物或保健飲品。一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米50～70份、高良姜10～20份、青錢柳葉1～10份以及羅漢果果皮1-5份。優(yōu)選的，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米60份、高良姜12份、青錢柳葉5份以及羅漢果果皮3份。所述抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品的制備方法，包括以下步驟：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮粉碎成粗粉，置于密閉容器中，加入質(zhì)量濃度為50～90％的乙醇密封浸提2～3天，收集浸提液；所得藥渣置于煎鍋內(nèi)，加4-8倍藥渣量的清水文火煎煮兩次，每次各煎煮20-30分鐘，合并兩次煎液，過濾；將浸提液與濾液混合，在攪拌條件下煮沸濃縮至固含量為0.5～1g/ml；均質(zhì)、脫氣，真空裝罐。所述抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品的制備方法，包括以下步驟：(1)預(yù)處理：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮置于50～100℃溫度下預(yù)處理10～30min，真空干燥；(2)過篩：將預(yù)處理后的原料粉碎后過100～500目篩；(3)采用亞臨界水萃?。簩⑦^篩后的原料加水進(jìn)行提取，料液質(zhì)量比為1:5～1:20，提取溫度101～125℃，提取時間10min～1h，過濾，冷卻；(4)超聲處理：將濾液加入1～4倍體積的乙醇水溶液中，超聲處理10min～1h；(5)采用亞臨界水二次萃?。禾崛囟?26～150℃，提取時間10min～1h，過濾，冷卻；(6)在攪拌條件下煮沸濃縮；(7)均質(zhì)、脫氣，真空裝罐。優(yōu)選的，所述步驟(3)中，采用亞臨界水萃?。杭铀M(jìn)行提取，料液質(zhì)量比為1:10，提取溫度110℃，提取時間30min，過濾，冷卻。優(yōu)選的，所述步驟(5)中，采用亞臨界水二次萃?。禾崛囟?40℃，提取時間30min，過濾，冷卻。優(yōu)選的，所述步驟(6)中，濃縮后的濃縮液固含量為0.5～1g/ml。優(yōu)選的，所述步驟(7)中，將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15～20Mpa的壓力以及溫度為60-70℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80-90kPa，保持10～20min脫氣處理。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提出薏米提取物在抑制α-葡萄糖苷酶活性方面的應(yīng)用，且其具有明顯的α-葡萄糖苷酶活性抑制率。此外，本發(fā)明以薏米為主，配以高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮的多功能綠色保健飲品，分別從α-葡萄糖苷酶活性抑制、抗氧化、改善血液微循環(huán)等多方面發(fā)揮作用，各組分之間相互協(xié)同增效，獲得的組合物飲品具有輔助降血糖和降血脂作用，對正常小鼠血糖無明顯影響，可降低糖尿病小鼠空腹血糖，具有預(yù)防與輔助治療、控制疾病進(jìn)展的作用，添加適當(dāng)輔料，用于制備預(yù)防與治療糖尿病、高脂血癥、糖尿病合并血脂異常的藥物和保健食品。此外，本發(fā)明抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品可以采用醇浸提與文火煎煮結(jié)合的方法制得，也可以采用亞臨界水二次萃取結(jié)合醇超聲處理的方法制得，其中亞臨界水二次萃取結(jié)合醇超聲處理的方法可獲得高活性的組合物飲品，穩(wěn)定性較好。具體實施方式為對本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，發(fā)明人結(jié)合實施例進(jìn)行說明，但以下實施例所描述的僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明提出一種薏米提取物在抑制α-葡萄糖苷酶活性中的應(yīng)用，應(yīng)用于一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的藥物或保健飲品。實施例1應(yīng)用于藥物時，將薏米提取物加入制備不同劑型時所需的各種輔料或藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體后，以常規(guī)的藥物制劑方法可制備成任何一種適宜的臨床制劑，例如可以是片劑、口服液、顆粒劑、膠囊劑等。其中，所述的輔料可以是抗氧絡(luò)合劑、填充劑、骨架材料等；所述的藥學(xué)上可接受的載體是木糖醇、甘露醇、乳糖、果糖、葡聚糖、葡萄糖、聚乙烯吡咯烷酮、低分子右旋糖酐、氯化鈉、葡萄糖酸鈣或磷酸鈣中的一種或幾種，優(yōu)選為甘露醇或乳糖。其中，應(yīng)用于藥物時，薏米提取物的質(zhì)量含量優(yōu)選為0.2～0.8％，該含量范圍易于吸收，且制成的藥物組合物性狀穩(wěn)定。實施例2一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米60份、高良姜12份、青錢柳葉5份以及羅漢果果皮3份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：(1)預(yù)處理：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮置于100℃溫度下預(yù)處理20min，真空干燥；(2)過篩：將預(yù)處理后的原料粉碎后過500目篩；(3)采用亞臨界水萃?。杭铀M(jìn)行提取，料液質(zhì)量比為1:10，提取溫度110℃，提取時間30min，過濾，冷卻；(4)超聲處理：將濾液加入2倍體積的乙醇水溶液中，乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為1％，超聲處理30min；(5)采用亞臨界水二次萃?。禾崛囟?40℃，提取時間30min，過濾，冷卻；(6)在攪拌條件下煮沸濃縮，濃縮后的濃縮液固含量為0.8g/ml；(7)均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15Mpa的壓力以及溫度為60℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80kPa，保持10min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.23％，穩(wěn)定性較好。實施例3一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米50份、高良姜10份、青錢柳葉1份以及羅漢果果皮1份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：(1)預(yù)處理：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮置于80℃溫度下預(yù)處理30min，真空干燥；(2)過篩：將預(yù)處理后的原料粉碎后過300目篩；(3)采用亞臨界水萃取：加水進(jìn)行提取，料液質(zhì)量比為1:5，提取溫度105℃，提取時間1h，過濾，冷卻；(4)超聲處理：將濾液加入1倍體積的乙醇水溶液中，乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1％，超聲處理10min；(5)采用亞臨界水二次萃?。禾崛囟?30℃，提取時間10min，過濾，冷卻；(6)在攪拌條件下煮沸濃縮，濃縮后的濃縮液固含量為0.5g/ml；(7)均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15Mpa的壓力以及溫度為60℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80kPa，保持10min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.51％，穩(wěn)定性良好。實施例4一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米70份、高良姜20份、青錢柳葉10份以及羅漢果果皮5份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：(1)預(yù)處理：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮置于50℃溫度下預(yù)處理10min，真空干燥；(2)過篩：將預(yù)處理后的原料粉碎后過100目篩；(3)采用亞臨界水萃取：加水進(jìn)行提取，料液質(zhì)量比為1:20，提取溫度125℃，提取時間10min，過濾，冷卻；(4)超聲處理：將濾液加入4倍體積的乙醇水溶液中，乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為5％，超聲處理1h；(5)采用亞臨界水二次萃取：提取溫度150℃，提取時間1h，過濾，冷卻；(6)在攪拌條件下煮沸濃縮，濃縮后的濃縮液固含量為1g/ml；(7)均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在20Mpa的壓力以及溫度為70℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為90kPa，保持20min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.63％，穩(wěn)定性良好。實施例5一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米60份、高良姜12份、青錢柳葉5份以及羅漢果果皮3份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮粉碎成粗粉，置于密閉容器中，加入質(zhì)量濃度為50％的乙醇密封浸提2天，收集浸提液；所得藥渣置于煎鍋內(nèi)，加4倍藥渣量的清水文火煎煮兩次，每次各煎煮20分鐘，合并兩次煎液，過濾；將浸提液與濾液混合，在攪拌條件下煮沸濃縮至固含量為0.5g/ml；均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15Mpa的壓力以及溫度為60℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80kPa，保持10min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.82％。實施例6一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米60份、高良姜12份、青錢柳葉5份以及羅漢果果皮3份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮粉碎成粗粉，置于密閉容器中，加入質(zhì)量濃度為70％的乙醇密封浸提2天，收集浸提液；所得藥渣置于煎鍋內(nèi)，加6倍藥渣量的清水文火煎煮兩次，每次各煎煮20分鐘，合并兩次煎液，過濾；將浸提液與濾液混合，在攪拌條件下煮沸濃縮至固含量為0.8g/ml；均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15Mpa的壓力以及溫度為60℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80kPa，保持10min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.85％。實施例7一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品，按重量份計算，制得所述飲品的各成分及用量為：薏米60份、高良姜12份、青錢柳葉5份以及羅漢果果皮3份。本實施例的抑制α-葡萄糖苷酶活性的降血糖飲品采用以下方法制備：將薏米、高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮粉碎成粗粉，置于密閉容器中，加入質(zhì)量濃度為90％的乙醇密封浸提3天，收集浸提液；所得藥渣置于煎鍋內(nèi)，加8倍藥渣量的清水文火煎煮兩次，每次各煎煮30分鐘，合并兩次煎液，過濾；將浸提液與濾液混合，在攪拌條件下煮沸濃縮至固含量為1g/ml；均質(zhì)、脫氣，真空裝罐：將濃縮液經(jīng)均質(zhì)機在15Mpa的壓力以及溫度為60℃下均質(zhì)，制得均勻穩(wěn)定的混合液；真空脫氣，真空度為80kPa，保持10min脫氣處理，即得產(chǎn)品，最后真空裝罐。穩(wěn)定性考察：(1)取以上飲品在常溫下放置12個月，觀察其并無分層、絮凝、沉淀現(xiàn)象，說明其穩(wěn)定性好；(2)取以上飲品10ml放入離心管中，于3000r/min離心10min，棄除所有溶液，準(zhǔn)確稱量沉淀物(濕態(tài))的質(zhì)量，計算沉淀率(沉淀率＝沉淀物質(zhì)量/離心飲料質(zhì)量×100％)，作為穩(wěn)定性評價指標(biāo)。沉淀率為0.86％。實施例1至7獲得的制品降低血糖的功能試驗：(1)對正常小鼠空腹血糖的影響如表1所示：表1表1的試驗結(jié)果表明，實施例1至實施例7獲得的制品對正常小鼠血糖幾乎無影響。(2)對糖尿病小鼠空腹血糖的影響如表2所示：表2表2的試驗結(jié)果表明，薏米提取物對患糖尿病小鼠具有明顯的降低血糖作用，實施例1至實施例7獲得的制品都具有不同程度降低糖尿病小鼠空腹血糖的作用。實施例1至7獲得的制品對α-葡萄糖苷酶的抑制作用試驗以4-硝基酚-α-D-呋喃葡萄糖苷(PNP-G)為底物測定α-葡萄糖苷酶的活性。將本發(fā)明提供的飲品(終濃度為0.8，0.5，1g/ml)40μl與α-葡萄糖苷酶(0.35mg/ml)30μl共同加500μlKH2PO4緩沖液(67mmol/L，pH：6.8)中，在37℃水浴中孵育10min后，加入底物PNP-G(0.01mol/L)30μl以啟動反應(yīng)。37℃反應(yīng)10min后，加入0.1mol/LNa2CO31ml終止反應(yīng)。于405nm波長下測定在酶作用下從PNP-G中釋放的對硝基苯(PNP)的OD值。酶活力單位定義為：在37℃，pH：6.8的條件下，1min內(nèi)水解PNP-G釋放1μmolPNP所需的酶量，計算抑制率。酶抑制試驗重復(fù)3次，每次3個復(fù)管。對α-葡萄糖苷酶的抑制率用以下公式計算：抑制率＝(對照組OD值-藥物組OD值)/對照組OD值×100％，結(jié)果如表3所示：表3實施例濃度OD405抑制率實施例10.5wt％0.9819.0％實施例20.8g/ml0.4066.9％實施例30.5g/ml0.5554.5％實施例41g/ml0.6248.7％實施例50.5g/ml0.9124.8％實施例60.8g/ml0.8529.7％實施例71g/ml0.8728.1％對照組——1.21——表3的試驗結(jié)果表明，薏米提取物具有明顯的α-葡萄糖苷酶抑制作用，實施例1至實施例7獲得的制品均對α-葡萄糖苷酶有不同程度的抑制作用，尤其采用亞臨界水二次萃取結(jié)合醇超聲處理的方法制得的飲品具有更高的活性，其α-葡萄糖苷酶抑制作用更佳顯著。本發(fā)明以薏米為主，配以高良姜、青錢柳葉以及羅漢果果皮的多功能綠色保健飲品，分別從α-葡萄糖苷酶活性抑制、抗氧化、改善血液微循環(huán)等多方面發(fā)揮作用，各組分之間相互協(xié)同增效，獲得的組合物飲品具有輔助降血糖和降血脂作用，對正常小鼠血糖無明顯影響，可降低糖尿病小鼠空腹血糖，具有預(yù)防與輔助治療、控制疾病進(jìn)展的作用，添加適當(dāng)輔料，可用于制備預(yù)防與治療糖尿病、高脂血癥、糖尿病合并血脂異常的藥物和保健食品。此外，本發(fā)明制備方法可獲得高活性的組合物飲品，穩(wěn)定性較好。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 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