云芝多糖在制備具有改善腸道內菌群功效的保健食品中的用途的制作方法

本發明涉及生物
技術領域：
，特別涉及云芝多糖在制備具有改善腸道內菌群功效的保健食品中的用途。
背景技術：
：人們的飲食習慣多偏好于高脂高糖高熱量飲食，隨著物質生活水平的提高，人們對于高脂飲食的需求也在增加。而高脂飲食也是肥胖、糖尿病等疾病的重要誘因之一。近年來的研究發現，一些富含多糖的食品藥品在降糖、降脂方面有較好地效果。研究顯示腸道菌群可以控制脂肪代謝、引發全身性的慢性低度炎癥，誘發肥胖和胰島素抵抗。飲食結構是決定腸道菌群組成的重要因素。保持腸道微生態平衡是維持人體健康所必需的。現有的微生態調節劑多是雙歧桿菌、乳桿菌等活菌制劑，但是活菌制劑存在活菌數量難以保證、穩定性差等問題。近年來研究發現，一些中草藥具有扶植正常菌群生長的作用，起到益生元的效果，是理想的微生態調節劑。而中藥微生態調節劑與益生菌相比有許多優越性，如不存在保存活菌的技術難題，其穩定性強、有效期長和價格較低等。尤其是中藥不僅扶植正常菌群生長，而且還可以提高機體的免疫功能，從而達到調整陰陽、扶正祛邪的目的。云芝(manyzonedpolypore)是最具藥用價值的真菌之一，具有清熱、解毒、消炎、抗癌、保肝等功效，但未有對腸道菌群中能夠調節具體哪些有益有害菌的宏基因組學研究報道。技術實現要素：有鑒于此，本發明提供了云芝多糖在制備具有改善腸道內菌群功效的保健食品中的用途。本發明所述云芝能夠調節由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內失衡的腸道菌群趨于正常，進而調節由飲 食引起的腸道菌群紊亂所導致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：本發明提供了云芝多糖在制備調節腸道菌群紊亂的藥物和/或食品中的應用。在本發明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發明中的食品為可供人類食用或飲用的物質，包括加工食品，半成品和未加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質。本發明中所述食品包括但不限于保健食品。凡是本領域的技術人員能夠接受的食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調節人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領域的技術人員能夠接受的保健食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備調節腸道菌群紊亂的藥物和/或食品中的應用中所述調節腸道菌群紊亂包括提高有益菌豐度和/或降低有害菌豐度。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備調節腸道菌群紊亂的藥物和/或食品中的應用中所述有益菌包括Bifidobacteriumlongum，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Allobaculumstercoricanis，Streptococcusthermophilus。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備調節腸道菌群紊亂的藥物和/或食品中的應用中所述有害菌包括Clostridiumaceticum，Porphyromonasasaccharolytica，Clostridiumchauvoei，Porphyromonasbennonis,Porphyromonascangingivalis,Porphyromonasgingivalis。本發明還提供了云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用。在本發明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發明中的食品為可供人類食用或飲用的物質，包括加工食品，半成品和未 加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質。本發明中所述食品包括但不限于保健食品。凡是本領域的技術人員能夠接受的食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調節人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領域的技術人員能夠接受的保健食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述腸道菌群紊亂包括有益菌豐度降低和/或有害菌豐度提高。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述疾病為肥胖、胰島素抵抗、結腸功能紊亂、腸炎或代謝綜合征。本發明中所述代謝綜合征是指人體的蛋白質、脂肪、碳水化合物等物質發生代謝紊亂的病理狀態，是一組復雜的代謝紊亂癥候群，是導致糖尿病心腦血管疾病的危險因素。其具有以下特點：①多種代謝紊亂集于一身，包括肥胖、高血糖、高血壓、血脂異常、高血黏、高尿酸、高脂肪肝發生率和高胰島素血癥，這些代謝紊亂是心、腦血管病變以及糖尿病的病理基礎。可見糖尿病不是一個孤立的病，而是代謝綜合征的組成部分之一。②有共同的病理基礎，目前多認為它們的共同原因就是肥胖尤其是中心性肥胖所造成的胰島素抵抗和高胰島素血癥。③可造成多種疾病增加，如高血壓、冠心病、腦卒中、甚至某些癌癥，包括與性激素有關的乳腺癌、子宮內膜癌、前列腺癌，以及消化系統的胰腺癌、肝膽癌、結腸癌等。④有共同的預防及治療措施，防治住一種代謝紊亂，也就有利于其他代謝紊亂的防治。臨床表現為：1.腹部肥胖或超重；2.脂代謝異常；3.高血壓；4.糖尿病、胰島素抵抗及/或葡萄糖耐量異常。在本發明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發明中的食品為可供人類食用或飲用的物質，包括加工食品，半成品和未加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質。本發明中所 述食品包括但不限于保健食品。凡是本領域的技術人員能夠接受的食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調節人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領域的技術人員能夠接受的保健食品形式，均在本發明的保護范圍之內，本發明在此不做限定。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述食品為固體制品、乳制品、溶液制品、粉末制品或懸浮液制品中的一種或多種。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述食品的劑型為軟膠囊、硬膠囊、片劑、蜜膏、露劑、散劑、鮮汁、茶飲、酒劑、口服液、顆粒劑中的一種或多種。在本發明的一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述藥物的劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑、口服液、糖漿劑、沖劑、滴丸劑或湯劑。在本發明的另一些具體實施方案中，云芝多糖在制備預防和/或治療腸道菌群紊亂導致的疾病的藥物或食品中的應用中所述藥物的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液或散劑中的一種或多種。在本發明的一些具體實施方案中，所述云芝多糖的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)，優選為100mg/(kg·d)。本發明提供了一種云芝多糖在制備調節腸道有益菌與有害菌的保健食品及食品中的用途。本發明申請人通過高脂飼料誘導小鼠肥胖二型糖尿病模型，觀察中藥通過腸道菌群對小鼠脂代謝的影響，本發明所述云芝能夠調節由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內失衡的腸道菌群趨于正常，進而調節由飲食引起的腸道菌群紊亂所導致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。蛋白質芯片技術測小鼠炎癥因子結果表明，云芝多糖組能夠顯著的降低炎性反應，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導腸道菌群結構失 調，增加了病菌的數量，減少了保護腸屏障細菌的數量，影響腸上皮細胞基因表達，導致腸道通透性增加，使得進入血液的內毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而云芝多糖調節菌群比例，降低炎癥因子水平，從而改善結腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。與模型組比較，云芝多糖組的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α分別表現為降低55％、30％、18％、9％、72％、20％、27％。通過宏基因組學的研究，發現在腸道內菌群中哪些是有益菌，哪些是有害菌，其中富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集在病人里面的就是有害菌，而云芝多糖能夠提高富集在健康人腸道內菌群中有益菌的豐度，并能降低富集在肥胖和胰島素抵抗的病人中有害菌的豐度。附圖說明為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。圖1示本發明實施例3中所述云芝多糖的藥理實驗第12周不同組別小鼠糞便樣品中菌群的基于effectsize的宏基因組學的熱圖；圖2示本發明實施例2中正常組、模型組、小檗堿、云芝多糖組的肝臟的病理切片圖；圖3示本發明實施例2中正常組、模型組、小檗堿、云芝多糖組的小腸的病理切片圖。具體實施方式本發明公開了云芝多糖在制備具有改善腸道內菌群功效的保健食品中的用途，本領域技術人員可以借鑒本文內容，適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發明。本發明的方法及應用已經通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本
發明內容、精神和范圍內對本文所述的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現和應用本發明技術。本發明的第一方面提供了一種云芝多糖在制備調節腸道有益菌與有害菌 豐度的保健食品中的用途，所述云芝多糖的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)，優選為100mg/(kg·d)。特別地，所述腸道中的有益菌為Bifidobacteriumlongum(長雙歧桿菌)，Lactobacillusplantarum(植物乳桿菌)，Lactobacillusacidophilus(嗜酸乳桿菌)，Allobaculumstercoricanis，Streptococcusthermophilus(嗜熱鏈球菌)，所述有害菌為Clostridiumaceticum(醋酸梭菌)，Porphyromonasasaccharolytica(不解糖卟啉單胞菌)，Clostridiumchauvoei(肖氏梭菌)，Porphyromonasbennonis,Porphyromonascangingivalis(犬齒齦液卟啉單胞菌),Porphyromonasgingivalis(牙齦卟啉單胞菌)。本發明還提供了一種調節腸道有益菌與有害菌的食品組合物，所述食品組合物包含云芝多糖。優選地，所述食品組合物的劑型為固體、乳品、溶液制品、粉末制品和懸浮液制品中的一種。本發明還提供了一種調節腸道有益菌與有害菌的保健食品組合物，所述保健食品組合物包含云芝多糖。優選地，所述保健食品組合物的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液和散劑中的一種。本發明的另一方面提供了一種云芝多糖在制備治療或預防由腸道內菌群有益有害菌比例失調導致的疾病的保健食品中的用途。特別的，所述疾病為由飲食引起的腸道菌群紊亂所導致的肥胖、胰島素抵抗、腸炎或代謝紊亂癥。本發明提供了一種云芝多糖在制備調節腸道有益菌與有害菌的保健食品及食品中的用途。本發明申請人通過高脂飼料誘導小鼠肥胖二型糖尿病模型，觀察中藥通過腸道菌群對小鼠脂代謝的影響，本發明所述云芝多糖能夠調節由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內失衡的腸道菌群趨于正常，進而調節由飲食引起的腸道菌群紊亂所導致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。通過宏基因組學的研究，發現在腸道內菌群中哪些是有益菌，哪些是有害菌，其中富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集 在病人里面的就是有害菌，而云芝多糖能夠提高富集在健康人腸道內菌群中有益菌的豐度，并能降低富集在肥胖和胰島素抵抗的病人中有害菌的豐度。本發明提供的多糖的應用中所用原料及試劑均可由市場購得。下面結合實施例，進一步闡述本發明：實施例1本發明實施例中所述的云芝多糖可以在市場上購得。以下實施例制備獲得的云芝多糖可以單獨或與其他中草藥或食品添加劑及保健食品或藥品上可接受的輔料制成用于調節腸道有益菌與有害菌的保健食品或食品組合物；其中，保健食品組合物的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液和散劑等，食品組合物的劑型為固體、乳品、溶液制品、粉末制品和懸浮液制品等。本發明所述云芝多糖通過以下制備方法制備獲得：將云芝粉碎后，按照云芝∶水＝1g∶5mL的比例加水，在75℃下加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時間繼續提取兩次，合并三次提取液，經過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮液∶95％乙醇＝1∶9的體積比將9倍體積95％乙醇加入到澄清濃縮液中，混勻后于4℃下過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經過真空冷凍干燥即獲得云芝多糖。本發明所述云芝多糖也可以在市場上購得。實施例2本發明申請人使用上述實施例1所制得的云芝多糖進行了藥理學實驗，實驗結果如下：1、實驗材料1.1、實驗儀器Thermo全波長酶標儀：賽默飛世爾科技中國，1510；JA1203N型分析天平：上海精密儀器有限公司產品；電子天平：常熟市雙杰測試儀器廠，T1000。1.2、實驗試劑葡萄糖測定試劑盒：上海榮盛生物藥業有限公司，20131207147；總膽固醇測定試劑盒：上海榮盛生物藥業有限公司，20131105146；甘油三酯測定試劑盒：上海榮盛生物藥業有限公司，20131105121；低密度脂蛋白測定試劑盒：上海榮盛生物藥業有限公司，20140302124；游離脂肪酸定量檢測試劑盒：和光純藥工業株式會社，AME6194。1.3、實驗動物與飼料C57BL/6小鼠40只，SPF級，18～22g，50～60天，雄性：廣東省醫學實驗動物中心SCXK(粵)2013-0002；大小鼠維持飼料：廣東省醫學實驗動物中心SCXK(粵)2013-0002；高脂純化飼料MD45％：江蘇美迪森生物醫藥有限公司。表1不同脂肪含量的飼料主要成分及能量構成1.4、實驗藥物表2動物實驗原料清單2、實驗方法受試動物進入廣州中醫藥大學大學城實驗動物中心后，3～4只/盒，20～25℃，RH40～70％，12h：12h晝夜間斷照明；自由進食飲水，飲用水為實驗動物中心制備的蒸餾水。2.1、小鼠空腹血液生化指標測定每日觀察小鼠毛色，體重，精神狀態，記錄進食量，每周記錄一次小鼠體重，每4weeks采集一次小鼠新鮮糞便(0weeks，4weeks，9weeks，14weeks 共4批糞便)。給藥9周后，取非空腹血樣，測定膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。給藥11周后，禁食12h，進行口服糖耐量實驗驗(OGTT)。給藥14周后，禁食12h，取空腹血樣測量血漿TG，TC，LDL-C，HDL-C。給藥15周后，小鼠采血后，脫頸椎處死，分離取組織臟器(肝、小腸等)根據需要放置于中性甲醛固定或速凍于液氮后轉移保存于-80℃冰箱。2.2、肝臟與小腸病理切片結果圖2的肝臟的病理切片結果顯示，與正常組比較，模型組的肝臟組織出現明顯的脂肪肝，肝細胞腫大，胞漿淡染，細胞中的小脂滴將細胞核擠壓至一邊，肝細胞間隙有較為明顯的炎性浸潤。云芝多糖組與模型組的肝臟比較，脂肪肝有明顯改善，細胞中的脂滴明顯較少。圖3的小腸的病理切片結果顯示，模型組小鼠的小腸絨毛多斷裂，可能是由于長度較長，絨毛間隙增加；正常組和云芝多糖組小腸絨毛形態較完整，后面將結合腸道菌群的結果進行分析。2.3、蛋白質芯片技術測小鼠炎癥因子蛋白質芯片的檢測原理主要是基于抗原抗體特異性非共價結合。本實驗采用雙抗體夾心法。夾心法抗體芯片是將捕獲抗體預先固定在固相載體上，生物樣品加入到芯片上一起孵育反應后，其特異性的抗原與捕獲抗體結合，然后加入生物素標記的檢測抗體一起孵育，最后通過HRP-鏈霉親和素與化學發光底物、或者熒光染色劑-鏈霉親和素結合作為信號檢測。膠片顯影、定影后用quantityone軟件分析膜上斑點的灰度值。一張膜上附有39種細胞因子的抗體，一組樣本在一張膜上檢測。以模型組的灰度值為單位1作為對照，其余各組與模型組比較分析。表3蛋白芯片測炎癥因子結果表3結果顯示，與模型組比較，云芝多糖組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α分別表現為降低55％、30％、18％、9％、72％、20％、27％。云芝多糖組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α分別表現為降低52％、21％、11％、3％、66％、13％、21％。云芝多糖組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α分別表現為降低51％、25％、11％、5％、64％、15％、19％。表3的蛋白芯片測炎癥因子結果表明，云芝多糖組能夠顯著的降低炎性反應，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導腸道菌群結構失調，增加了病菌的數量，減少了保護腸屏障細菌的數量，影響腸上皮細胞基因表達，導致腸道通透性增加，使得進入血液的內毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而云芝多糖調節了菌群比例，降低炎癥因子水平，從而能夠改善結腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。與陽性對照組相比，實驗組無顯著差異(P＞0.05)。3、統計學分析：本實驗所有數據均采用均值±標準差表示，組間差異性分析采用statview軟件進行單因素方差分析和t檢驗，以P<0.05作為統計學差異參考標準。4、實驗結果給藥9周后，正常組非空腹血糖與模型組無明顯差異，模型組總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇比正常組顯著升高(P<0.01)，并出現胰島素抵抗和代謝紊亂癥；云芝多糖組甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇顯著降低(P<0.05)，同時高密度脂蛋白膽固醇顯著升高(P<0.05)，喂飼高脂飼料9周后，模型小鼠各項血脂指標進一步升高，云芝多糖體現出良好的降低低密度脂蛋白膽固醇的效果。表4第九周小鼠非空腹血液生化指標給藥14周后，與模型組比較，小檗堿組與云芝多糖組血漿甘油三酯、、游離脂肪酸、低密度脂蛋白膽固醇均顯著性降低(P<0.05)。對比第九周實驗數據，云芝多糖降低血漿中甘油三酯的效果穩定，可一定程度上降低血中游離脂肪酸的含量。表5第十四周小鼠空腹血液生化指標從表5的實驗結果可以看出，本發明所述云芝多糖能顯著改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預防由腸道菌群紊亂導致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。從圖2和圖3的病理切片結果顯示，云芝多糖能夠減少肝臟和小腸的脂肪，促進改善胰島素抵抗。而長期過量的高脂飲食可引起血脂的異常升高，過多的脂質也會在非脂肪組織中聚集，如肝臟和小腸。肝臟中的甘油三酯TG堆積，導致高脂血癥以及肝臟脂質代謝紊亂。取實施例1制得的或市場購買的云芝多糖的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/kg時，進行上述多項試驗，試驗結果與實施例1云芝多糖劑量為100mg/(kg·d)的功效無顯著差異(P＞0.05)，能夠達到實施例1云芝多糖劑量為100mg/(kg·d)的的功效至少90％。實施例3采集應用實施例1中小鼠實驗第12周的小鼠新鮮糞便，將不同組別之間的腸道菌落進行差異分析。下圖和下表中B、小檗堿組，C、正常組，D、云芝多糖組，E、云芝多糖組2，F、云芝多糖組3，M、模型組。本研究最關心的是M模型組和C正常組有差異的菌是否用藥后得到調節，做出了圖1。圖1中挑選的OTU是在C正常組和M模型組有差異的OTU(其effectsize>1.96)，然后這些OTU同樣在其他組和M模型組之之間檢驗，得出的effectsize畫出上面的熱圖。從圖1我們可以輕易看出，小檗堿效果很顯著，富集在M模型組上的菌的數量全部下降了。D云芝多糖能調控部分的OTU，使得它恢復正常。表6相比病患組對于有益菌與有害菌的調節作用結果表6展示了云芝多糖組對于腸道菌群中的各種有益菌與有害菌的調節作用，通過宏基因組學的手段分析比對各組第12周的小鼠新鮮糞便中的菌落，可知小鼠腸道中的有益菌為Bifidobacteriumlongum，Lactobacillusplantarum， Lactobacillusacidophilus，Allobaculumstercoricanis，Streptococcusthermophilus，所述有害菌為Clostridiumaceticum，Porphyromonasasaccharolytica，Clostridiumchauvoei，Porphyromonasbennonis,Porphyromonascangingivalis,Porphyromonasgingivalis。本發明實施例中的云芝多糖對上述有益菌的豐度有提高作用，對上述有害菌的豐度有降低作用。根據宏基因組學研究的方法和原理(參見Lietal.InnateimmunityandintestinalmicrobiotainthedevelopmentofType1diabetesNature455,1109-1113，23rd，October2008)，將上述有益菌和有害菌在人腸道中的云芝多糖(100mg/(kg·d))調節作用進行測序鑒定，得到云芝多糖能夠提高腸道內菌群中有益菌Bifidobacteriumlongum，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Allobaculumstercoricanis，Streptococcusthermophilus的豐度，降低有害菌Clostridiumaceticum，Porphyromonasasaccharolytica，Clostridiumchauvoei，Porphyromonasbennonis,Porphyromonascangingivalis,Porphyromonasgingivalis的豐度。實驗表明，所述云芝多糖的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/kg時，試驗結果相比模型組均具有良好的調節作用，顯著差異(P<0.05)，在實驗組云芝多糖組1的100mg/(kg·d)的劑量時功效最優。可見云芝多糖能使有益菌的豐度增加，使有害菌的豐度明顯降低，呈現出明顯地改善腸道菌群紊亂的作用(通過宏基因組學的研究，富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集在病患者里面的就是有害菌)。與陽性對照組相比，本發明公開的實驗組云芝多糖與對照組的效果無顯著差異(P＞0.05)。取實施例1制得的或市場購買的云芝多糖的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/kg時，進行上述多項試驗，試驗結果與上述的功效無顯著差異(P＞0.05)，能夠達到上述的功效至少90％。實施例4保健食品的制備取本發明實施例1提供的云芝多糖或購自市場的云芝多糖，添加食品中允許的輔料，按照常規方法制得食品。制得的食品可以為固體制品、乳制品、溶液制品、粉末制品或懸浮液制品。其中，保健食品的劑型可以為軟膠囊、硬膠囊、片劑、蜜膏、露劑、散劑、鮮汁、茶飲、酒劑、口服液、顆粒劑。實施例5藥物的制備取本發明實施例1提供的云芝多糖或購自市場的云芝多糖，添加藥學上可接受的輔料，按照常規方法制得藥物。制得的藥物的劑型可以為片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑、口服液、糖漿劑、沖劑、滴丸劑或湯劑。實施例6制得保健食品的檢驗取本發明實施例4制得的保健食品，按照中華人民共和國國家標準GB16740-2014《食品安全國家標準保健食品》進行檢測，結果如下：3.1原料和輔料原料和輔料符合相應食品標準和有關規定。3.2感官要求感官要求符合表7的規定。表7感官要求3.3理化指標理化指標符合相應類屬食品的食品安全國家標準的規定。3.4污染物限量污染物限量符合GB2762中相應類屬食品的規定，無相應類屬食品的符合表8的規定。表8污染物限量項目指標檢驗方法鉛a(Pb)/(mg/kg)2.0GB5009.12總砷b(As)/(mg/kg)1.0GB/T5009.11總汞c(Hg)/(mg/kg)0.3GB/T5009.17a袋泡茶劑的鉛≤5.0mg/kg；液態產品的鉛≤0.5mg/kg；嬰幼兒固態或半固態保健食品的鉛≤0.3mg/kg；嬰幼兒液態保健食品的鉛≤0.02mg/kg。b液態產品的總砷≤0.3mg/kg；嬰幼兒保健食品的總砷≤0.3mg/kg。c液態產品(嬰幼兒保健食品除外)不測總汞；嬰幼兒保健食品的總汞≤0.02mg/kg。3.5真菌毒素限量真菌毒素限量符合GB2761中相應類屬食品的規定和(或)有關規定。3.6微生物限量微生物限量符合GB29921中相應類屬食品和相應類屬食品的食品安全國家標準的規定，無相應類屬食品規定的符合表9的規定。表9微生物限量3.7食品添加劑和營養強化劑3.7.1食品添加劑的使用符合GB2760的規定。3.7.2營養強化劑的使用符合GB14880和(或)有關規定。綜合上述檢測結果，本發明制得的保健食品符合中華人民共和國國家標準GB16740-2014《食品安全國家標準保健食品》的規定。以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。當前第1頁1 2 3