中透藝春蘭的組培方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于植物組培技術領域，涉及一種中透藝春蘭的組培方法。
【背景技術】
[0002] 中透藝是蘭花葉藝的一種，在蘭花葉藝品種里，它比一般蘭花更具觀賞價值。中 透，指葉片出現貫通葉中的白色寬線條，花葉面出現綠白或綠黃相間的縞藝，即在蘭花的葉 面上出現長短和寬狹不一致的白或黃顏色的"實體"線條。
[0003] -株藝蘭從花籽至最高藝向的境界，至少約需經過五年至十五年或更長的時間。 而常規情況下種子不完全，極難萌發，如果沿用傳統的分株繁殖法，繁殖系數又極低，致使 許多珍惜品種無法大量繁殖以滿足市場需求。春蘭根狀莖是中國蘭繼代增殖的有利階段， 也是快速繁殖提高增殖系數的關鍵。由于蘭花葉面上出現的那些美麗的縞藝性狀，不具有 較高的遺傳穩定性，通常情況下，組培苗在受到培養環境的影響下，藝向具有不穩定性。研 究雜交蘭和線藝蘭的組織培養已有報道，但對中透藝春蘭的組培及葉藝蘭的藝向培養仍未 見報道。
[0004] 中國專利文獻[【申請號】201010127788.4]公開了一種春蘭種苗繁殖方法，其種苗 獲得主要包括種子萌發、原球莖繼代增殖和生根培養過程，其特征在于該繁殖方法在種苗 獲得后還進行生根苗的煉苗及與菌根真菌的菌根化過程。上述采用春蘭種子無菌萌發與菌 根真菌共生的菌根化培育技術，既可繁殖優良品種，從種子實生苗中選擇優良蘭株，又能快 速提高春蘭繁育速度，克服純組培苗生長緩慢，周期長，甚至不開花的缺點，對春蘭的大面 積產業化擴繁具有重要的利用價值。但該方案并未公開藝向培養的相關技術方案。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種組培快繁及藝向穩定的中透藝春 蘭的組培方法。
[0006] 為達到上述目的，本發明采用了下列技術方案:一種中透藝春蘭的組培方法，包括 以下步驟：
[0007] A、選材，在實驗室培養中獲得的整條都為淡黃色的中透藝春蘭根狀莖作為組培材 料，
[0008] B、增殖培養，用含有MS、TDZ、6-BA和椰乳的培養基對中透藝春蘭根狀莖在培養室 進行增殖培養，
[0009] C、分化培養，用含有MS、6-BA、IBA和椰乳的培養基對中透藝春蘭根狀莖在培養室 進行分化培養，
[0010] D、生根培養，用含有1^、6-84、184、祖4^(：_^?的培養基對中透藝春蘭根狀莖在 培養室進行生根培養。
[0011]在上述的中透藝春蘭的組培方法中，在步驟B中，所述的培養基為3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-kSOniL · L-1 椰乳，在步驟C中，所述的培養基為3/4MS+6- BAl.Omg · L-i+IBA l.Omg · L-i+SOmL · L-1 椰乳，在步驟D中，所述的培養基為1/21^+6_ BA1 .Omg · L-hlBA 1 .Omg · L-kNAA 1 .Omg · L-k2g · L-IC+Sg · L-^VP。
[0012] 在上述的中透藝春蘭的組培方法中，所述的培養室溫度為25°C±2°C，相對濕度為 60%-80%，光照強度為1000-3000LX，光照時間為10-14h/d。
[0013] 在上述的中透藝春蘭的組培方法中，所述的培養室溫度為25°C，相對濕度為 70%，光照強度為2000Lx，光照時間為12h/d。
[0014] 與現有的技術相比，本發明的優點在于：本方法組培得到的中透藝春蘭，藝向穩 定，為中透藝春蘭的培育及工廠化提供了可靠的方法。
【具體實施方式】
[0015] 下述實施例中所用的試劑，如無特殊說明，可以從常規生化試劑商店購買得到。以 下實施例中的定量數據，均設置三次重復實驗，結果取平均值。
[0016] 實施例1
[0017]將以梅瓣芽變后產生的中透藝春蘭根狀莖為材料，選取整條都為淡黃色的中透藝 春蘭根狀莖作為組培材料，置于放有培養基的培養瓶中，并于培養室內進行增殖培養，培養 基為3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-bSOniL · L-1 椰乳，培養室溫度為25°C，相對濕 度為70%，光照強度為2000Lx，光照時間為12h/d，增殖培養結束后，將中透藝春蘭根狀莖放 入裝有培養基的培養瓶中，并于培養室內進行分化培養，培養基為3/4MS+6-BA1.0mg · L一b IBA 1 .Omg · L-^OmL · L-1椰乳，培養室溫度為25°C，相對濕度為70%，光照強度為2000Lx， 光照時間為12h/d，分化培養結束后，將中透藝春蘭根狀莖放入裝有培養基的培養瓶中進行 生根培養，培養基為l/2MS+6-BA1.0mg · L-klBA l.Omg · L-kNAA l.Omg · L-k2g · L-lC+ 5g · I^PVP，培養室溫度為25°C，相對濕度為70%，光照強度為2000Lx，光照時間為12h/d。生 根培養結束，即完成中透藝春蘭的組培。
[0018] 實施例2
[0019] 將以梅瓣芽變后產生的中透藝春蘭根狀莖為材料，選取整條都為淡黃色的中透藝 春蘭根狀莖作為組培材料，置于放有培養基的培養瓶中，并于培養室內進行增殖培養，培 養基為3/4MS+TDZ 0.5mg · L-be-BA l.Omg · L-i+SOmL · L-1 椰乳，培養室溫度為23°C，相對 濕度為60%，光照強度為lOOOLx，光照時間為10h/d，增殖培養結束后，將中透藝春蘭根狀莖 放入裝有培養基的培養瓶中，并于培養室內進行分化培養，培養基為3/4MS+6-BA1.0mg · L一1 + IBA l.Omg · L-i + SOmL · L-1椰乳，培養室溫度為23°C，相對濕度為60%，光照強度為 lOOOLx，光照時間為10h/d，分化培養結束后，將中透藝春蘭根狀莖放入裝有培養基的培養 瓶中進行生根培養，培養基為l/2MS+6-BA1.0mg · L-klBA l.Omg · L-kNAA l.Omg · L-工+ 2g · L-IC+Sg · L-^VP，培養室溫度為23°C，相對濕度為60%，光照強度為lOOOLx，光照時間 為1 Oh/d。生根培養結束，即完成中透藝春蘭的組培。
[0020] 實施例3
[0021] 將以梅瓣芽變后產生的中透藝春蘭根狀莖為材料，選取整條都為淡黃色的中透藝 春蘭根狀莖作為組培材料，置于放有培養基的培養瓶中，并于培養室內進行增殖培養，培養 基為3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-bSOniL · L-1 椰乳，培養室溫度為27°C，相對濕 度為80%，光照強度為3000Lx，光照時