一種白芨裸種消毒方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及植物栽培技術領域，具體涉及到一種白芨裸種消毒方法。
【背景技術】
[0002]珍稀名貴藥材白發(Bletilla Striata (Thunb.) Reichb.f.)為白發屬多年生草本植物，是國家重點保護野生植物，具有極高的經濟價值。白芨以干燥塊莖入藥，具有收斂止血，消腫生肌的功效，廣泛用于治療肺結核及支氣管擴張咯血、胃潰瘍出血等癥。白芨除了用于醫藥方面之外，白芨塊莖富含白芨膠，白芨膠可代替西黃著膠粉、阿拉伯膠粉作為乳化劑、懸浮劑用于食品、美容及化工等領域，具有廣泛的用途。
[0003]白芨廣泛分布于我國長江流域各省，主產于貴州、四川、湖南、湖北、安徽、河南、浙江、陜西等地。多為野生，也有少量栽培，3?4年收獲。
[0004]白芨以地下根部的串根塊莖入藥。功能收斂止血、消腫生肌，治療咯血、吐血、外傷出血、便血、鼻出血，特別對肺出血、上消化道出血和外傷出血有特效。它還可作藥膳，具有美容消斑、減肥的功能。因白芨開花十分艷麗，又可盆栽觀賞，具有較高的觀賞價值。其原因是近年來受藥用需求和園藝需求強勁增長的影響，我國白芨市場需求量也明顯增多；過度采挖和生境破壞導致野生資源量急劇下降。與木本藥用植物套種，可提高土地的單位利用效率。
[0005]白芨喜陰涼、濕潤而溫暖的環境，既能無性繁殖，也可進行有性繁殖，因種子細小，自然條件下萌發比較困難，人工馴化苗一般采用組培快繁的方式大量擴繁。組培快繁白芨苗都采用新鮮未開裂的成熟蒴果，在進行表面消毒后切開蒴果將種子播撒于培養基上。該種方法要求蒴果完整無蟲蛀無開裂，若挑選不合理可能造成組培過程大面積污染。因此挑選過程中會舍棄大量的不合格蒴果，造成種質資源的浪費。而每年白芨結出蒴果并不太多，其中還有相當部分開裂或者被蟲蛀而無法用于組培育苗，常因合格蒴果數量不足而影響白芨組培育苗產業快速發展。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是提供一種白芨裸種消毒方法，使用本方法可以對出現破損、蟲蛀或者失水干裂的裸種進行處理，使處理后的裸種可以保證消毒徹底，相對處理前可以提高保證萌發率。
[0007]為達上述目的，本發明的一個實施例中提供了一種白芨裸種消毒方法，包括:
(1)收集種子:將白芨蒴果晾干后去除果莢取出種子，濾除果莢碎渣，得到種子；
(2)種子消毒:潔凈環境下在收集到的種子內加入75%的酒精和起泡劑輕微震蕩混勻完成預處理，然后使用無菌水清洗種子;清洗完畢后加入0.1%的氯化汞和起泡劑輕微震蕩混勻進行消毒處理;消毒處理完畢后使用無菌水清洗干凈，得到消毒種子；
(3)種子保存:將消毒種子分攤在潔凈環境內風干至種子成粉末狀。
[0008]本發明的優化實施例，在收集種子過程中，使用10目不銹鋼網篩除果莢碎渣。
[0009]本發明的優化實施例，起泡劑為吐溫-20。
[0010]本發明的優化實施例，種子消毒過程中，加入酒精后的震蕩時間為60秒;加入氯化萊后的消毒處理時間為3min?lOmin。
[0011]本發明的優化實施例，消毒處理后使用無菌水清洗5次?8次;預處理后使用無菌水清洗3次?5次;消毒種子在潔凈環境內使用潔凈風吹3h~5h至種子呈粉末狀且無結塊。
[0012]綜上所述，本發明具有以下優點:
本發明適用于出現破損、蟲蛀或者失水干裂的白芨裸種，白芨裸種進行處理后，可以避免組培過程中出現的大面積菌類污染，造成組培成活率嚴重降低的現象，進一步是的白芨組培育苗的蒴果選擇范圍更廣泛，限制條件降低，使得適用于組培育苗的蒴果量大大增加。
[0013]本發明通過預處理和消毒處理，可以保證即使出現破損、蟲蛀或者失水干裂等白芨裸種的萌芽率，可以應用于工業化育苗。
[0014]本發明可使用因長期保存而開裂的蒴果進行組培育苗，打破了白芨組培育苗只能在秋季播種的慣例；同時可以克服現階段白芨育苗都采用新鮮蒴果消毒播種，長期保存后的蒴果會自然開裂，造成蒴果消毒時內部種子卻不能徹底消毒，導致育苗時發生大面積污染的缺陷。
【具體實施方式】
[0015]實施例1
一種白芨裸種消毒方法，包括以下步驟:
(1)收集種子:選擇出現破損及蟲蛀，或因儲藏不當導致失水干裂的蒴果;將白芨蒴果晾干后去除果莢取出種子，將種子混合物使用10目的不銹鋼網篩過濾果莢碎渣，濾除果莢碎渣，得到種子；
(2)種子消毒:潔凈環境下在收集到的種子內加入75%的酒精和起泡劑吐溫-20輕微震蕩混勻完成預處理，然后使用無菌水清洗種子;清洗完畢后加入0.1%的氯化汞和起泡劑輕微震蕩混勻進行消毒處理;消毒處理完畢后使用無菌水清洗干凈，得到消毒種子。
[0016]具體的，可以將種子加入到100ml的注射器內，種子量不超過50ml。吸入75%酒精，滴入一滴吐溫-20，并輕輕震蕩60秒，拍打注射器使酒精和吐溫-20混合，使得種子浸沒在液體或者浸潤。然后放掉酒精，吸入無菌水洗滌3次。清洗后加入一滴吐溫-20起泡劑和40mL0.1%升汞溶液并輕輕震蕩消毒5min，而后同上方法去除升汞溶液并用無菌水清洗6次。以上過程均須在超凈工作臺中無菌操作
(3)種子保存:將消毒種子分攤在潔凈環境內風干至種子成粉末狀。
[0017]具體的操作為:將已消毒完畢的種子用勺掏出放置于墊有多層無菌濾紙的接種碟中，分攤開并用超凈工作臺風力吹3h~5h直至種子成粉末狀無伴結成塊，即可將種子均勻播撒于萌芽培養基中；以上過程均須在超凈工作臺中無菌操作。
[0018]實施例2
一種白芨裸種消毒方法，包括以下步驟:
(1)收集種子:選擇出現破損及蟲蛀，或因儲藏不當導致失水干裂的蒴果;將白芨蒴果晾干后去除果莢取出種子，將種子混合物使用10目的不銹鋼網篩過濾果莢碎渣，濾除果莢碎渣，得到種子； (2)種子消毒:潔凈環境下在收集到的種子內加入75%的酒精、起泡劑吐溫-20、硫酸鉀和硝酸鑭，其中硫酸鉀和硝酸鑭的終濃度分別為1%和0.05%;輕微震蕩混勻完成預處理，然后使用無菌水清洗種子;清洗完畢后加入0.1%的氯化汞和起泡劑輕微震蕩混勻進行消毒處理;消毒處理完畢后使用無菌水清洗干凈，得到消毒種子。本實施例在預處理過程中加入硫酸