一種誘發鑒定、篩選水稻抗稻瘟病育種材料的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及水稻的育種技術領域，尤其涉及一種誘發鑒定、篩選水稻抗稻瘟病育 種材料的方法。
【背景技術】
[0002] 水稻稻瘟病是危害水稻最嚴重的病害之一，由稻瘟病引起的糧食損失占全世界 糧食損失的11 %~30%，嚴重的影響我國水稻的優質高產，而品種抗病性的利用研究則被 公認為是病害綜合防治的根本策略。很多育種工作者通過各種方法想要選育高抗稻瘟病品 種，但都收效甚微，其主要原因在于抗稻瘟病鑒定篩選難度大、工作效率低。在目前的抗稻 瘟病材料的大規模誘發、鑒定、篩選過程中，存在不能充分滿足水稻稻瘟病菌對高濕度條件 的要求，而導致稻瘟病菌萌發困難，人工接種誘發規模小、工作量大等缺陷。
[0003] 需要一種新的技術方案解決以上問題。
【發明內容】
[0004] 發明目的：為了克服現有技術中存在的不能充分滿足水稻稻瘟病菌對高濕度條件 的要求，而導致稻瘟病菌萌發困難，人工接種誘發規模小、工作量大的問題，本發明提出了 一種勞動強度低，抗瘟篩選效率高的誘發鑒定、篩選水稻抗稻瘟病育種材料的方法。
[0005] 技術方案：為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案為：一種誘發鑒定、 篩選水稻抗稻瘟病育種材料的方法，包括以下步驟：
[0006] (1)水稻稻瘟病菌分生孢子的采集：上年度在全省范圍內采集當地具有代表性的 水稻稻痕病菌株；
[0007] (2)棚架噴淋設施建設：搭建鋼架連棟大棚，棚頂高2. 5米，水平高度2米，每1. 8 米牽一條粗鋼絲，鋼絲上每1. 8米懸掛噴淋半徑為1米的噴淋頭；棚頂覆蓋70目的遮陽網， 能收放自如，平時收起備用；
[0008] (3)適期播種：5月下旬，將水稻育種材料按選種要求在步驟（2)設置的大棚設施 內進行播種，誘發水稻品種參照選種材料每間隔20個材料播種1份，整個生育期內不防治 病害；蟲害防治和肥水使用參照大田生產；
[0009] (4)稻瘟病混合菌液的配制：將步驟（1)采集的水稻稻瘟病菌株移植在RCA培養 基上，在25°C下培養7天，用黑光燈照射72小時后，待稻瘟病菌產生孢子后，再用無菌水清 洗，配成10X10倍顯微鏡下每視野30-40個孢子的懸浮液，冷藏備用；
[0010] (5)孕穗期采用噴霧法接種步驟（4)配制的稻瘟病混合菌液，擴大稻瘟病小種基 數；
[0011] (6)在水稻葉枕平時，傍晚噴霧稻瘟病混合菌液進行接種，第2天放下遮陽網，每1 小時噴淋10分鐘，連續15天；
[0012](7)觀察、記載與統計、決選：觀察整個生育期內水稻稻瘟病病害的發生，尤其是 水稻葉葉枕至成熟期，按國家統一標準調查水稻穗頸瘟的發病情況；同時調查稻曲病病果 粒；當選稻瘟病病穗率小于10. 0%的材料，或葉瘟小于2級、病穗率小于15. 0%的材料；
[0013] (8)第二年將上年度選育的好的抗稻瘟病的材料再在大棚設施內重復以上步驟， 確認選育穩定整齊的抗稻瘟病的中間材料。
[0014] 更進一步的，所述步驟⑴中具有代表性的水稻稻瘟病菌株在江蘇 省為 014-290-1 (ZB27)、2014-30-1 (ZC15)、2014-56-2 (ZD7)、2010-55-1 (ZE3)、 2014-284-2 (ZF1)、2014-303-1 (ZG1)，共計 6 個小種的菌。
[0015] 更進一步的，所述步驟（3)中選種要求為一般低世代材料播種量為60克，面積為 4平方米；高世代材料播種量為200粒，規格為1. 5米條播，行距30厘米。
[0016] 更進一步的，所述步驟（3)中誘發水稻品種為感病品種蘇御糯。
[0017] 更進一步的，所述步驟（4)中RCA具體培養基配方為玉米粉40克、稻桿50克、瓊 脂20克。
[0018] 有益效果：本發明提供的一種誘發鑒定、篩選水稻抗稻瘟病育種材料的方法，借鑒 蔬菜大棚設施，建設棚架設施，增加噴淋和遮陽網，人工模擬最佳發病環境，確保稻瘟病的 發生，通過培養菌液、人工模擬高濕環境，誘發稻瘟病大發生，通過孕穗期噴霧法接種稻瘟 病混合菌液，擴大稻瘟病小種基數，確保菌源和多種生理小種，從而篩選、創造抗稻瘟病水 稻育種材料；本發明具有勞動強度低，抗瘟篩選效率高的優點，當選的育種材料均抗稻瘟 病，減少了育種的盲目性，提高了抗稻瘟的選擇效率，而且操作簡便，省工節本。
【附圖說明】
[0019] 圖1為本發明一種實施方式的抗稻瘟病材料的育種流程示意圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例對本發明作進一步的詳細說明：
[0021] 抗稻瘟資源雖具有較強的抗性，但由于綜合豐產性不高而很少在大面積生產上應 用，這就需要育種家利用抗稻瘟資源來改良當前主栽品種；首先大量配組，篩選強優勢組 合。
[0022] 請參照圖1，一種誘發鑒定、篩選水稻抗稻瘟病育種材料的方法，包括以下步驟：
[0023] (1)水稻稻瘟病菌分生孢子的采集：上年度在全省范圍內采集具有代表性的 水稻稻瘟病菌株；在江蘇省為 014-290-1 (ZB27)、2014-30-1 (ZC15)、2014-56-2 (ZD7)、 2010-55-1 (ZE3)、2014-284-2 (ZF1)、2014-303-1 (ZG1)，共計 6 個小種的菌；
[0024] (2)棚架噴淋設施建設：搭建鋼架連棟大棚，棚頂高2. 5米，水平高度2米，每1. 8 米牽一條粗鋼絲，鋼絲上每1. 8米懸掛噴淋半徑為1米的噴淋頭；棚頂覆蓋70目的遮陽網， 能收放自如，平時收起備用；
[0025] (3)適期播種：5月下旬，將水稻育種材料按選種要求在步驟（2)設置的大棚設施 內進行播種，選種要求具體為一般低世代材料播種量為60克，面積為4平方米；高世代材料 播種量為200粒，規格為1. 5米條播，行距30厘米；誘發水稻品種即感病品種蘇御糯參照選 種材料每間隔20個材料播種1份，整個生育期內不防治病害；蟲害防治和肥水使用參照大 田生產；
[0026]((4)稻瘟病混合菌液的配制：將步驟（1)采集的水稻稻瘟病菌株移植在RCA培養 基上，RCA具體培養基配方為玉米粉40克、稻桿50克、瓊脂20克；在25 °C下培養7天，用黑 光燈照射72小時后，待稻瘟病菌產生孢子后，再用無菌水清洗，配成10 X 10倍顯微鏡下每 視野30-40個孢子的懸浮液，冷藏備用；
[0027] (5)孕穗期采用噴霧法接種步驟（4)配制的稻瘟病混合菌液，擴大稻瘟病小種基 數；
[0028] (6)在水稻葉枕平時，傍晚噴霧稻瘟病混合菌液進行接種，第2天放下遮陽網，每1 小時噴淋10分鐘，連續15天；
[0029] (7)觀察、記載與統計、決選：觀察整個生育期內水稻稻瘟病病害的發生，尤其是 水稻葉葉枕至成熟期，按國家統一標準調查水稻穗頸瘟的發病情況；同時調查稻曲病病果 粒；當選稻瘟病病穗率小于10. 〇%的材料，或葉瘟小于2級、病穗率小于15. 0%的材料；
[0030] (8)第二年將上年度選育的好的抗稻瘟病的材料再在大棚設施內重復以上步驟， 確認選育穩定整齊的抗稻瘟病的中間材料。
[0031] 其中，國家統一水稻葉瘟分級標準如下：
[0032] 0級：無病。
[0033] 1級：僅有針尖大小