尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種魚類遠緣雜交育種方法，尤其涉及尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧不同屬間魚類的雜交育種方法，屬于水產動物雜交育種技術領域。
【背景技術】
[0002]尖頭塘體(Eleotrisoxycephala)隸屬于解形目(Perciformes)、鰕虎魚亞目(Gob1idei )、塘體科(Eleotridae)、塘體屬(Eleotris)的魚類，俗名黑輿殼、什拋、竹殼、黑淋哥，是一種較為名貴的淡水小型經濟魚類。在我國大陸，其主要分布于上海、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西、海南等，屬于暖水性魚類。尖頭塘鱧個體較小，I齡體重一般15-50克/尾，體重250克以上極為少見，但肉質好，市場價格高，規格150g/尾以上達140元/kg，深受消費者的青睞。但由于生長速度慢，產量低，人工養殖性能差，難以開展規模化養殖生產。因此，如何通過基因改良，提高其生長速度及養殖性能是其產業化、規模化發展的關鍵所在。
[0003]云斑尖塘體(OxyeleotrismarmoratusBleeker),俗名泰國輿殼魚(Marblegoby)，屬塘體科(Eleotridae)、尖塘體屬(Oxyeleotris)，我國自上1986年從東南亞引種以來，現已成為我國珠三角地區的重要淡水養殖對象。其體型大、生長速度快，適宜條件下I齡體重可達500g/尾，是熱帶、亞熱帶地區的優質暖水性魚類。目前未見有關于尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種的方法。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法。
[0005]為達到上述目的，本發明采用以下技術方案:
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法，包括以下步驟:
O親魚的選擇
選擇I齡以上、體重50~150g、并處于性腺發育成熟期的尖頭塘鱧和2~3齡、體重500g以上、并處于性腺發育成熟期的云斑尖塘鱧作為雜交繁育親本；
2)親魚的強化培育
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧親魚分池培育，每萬尾親魚一次性投放活飼料魚3000?4000kg，之后每15d每萬尾親魚補充1500?2000kg活飼料魚；或者投喂冰鮮魚漿和人工飼料，同時添加維生素與礦物質，每日投喂兩次，日投飼量為親魚重量的8?12%，投喂量上午占1/3，下午占2/3 ；
3)親魚的雌雄鑒別與性比
進入繁殖季節，鑒別親魚的性別，雌魚腹部膨大，卵巢輪廓明顯，生殖突末端圓鈍呈扇形、淡紅色，生殖孔兩側隆起、無黑色素點；雄魚體色深，腹部膨大不明顯，生殖突末端尖細呈三角形、白色，泄殖孔周邊有黑色素點，擠壓腹部有乳白色精液流出；挑選尖頭塘鱧為母本，云斑尖塘鱧為父本，兩者雌雄配對為2~3:1 ; 4)人工催產與受精
人工催產采用一針注射法，尖頭塘鱧雌魚注射促黃體素釋放激素類似物2號和馬來酸地歐酮，云斑尖塘鱧雄魚注射人絨毛膜促性腺性激素，在水溫28?30°C時48?54h達效應時間；
人工催產達到效應時間后，擠壓卵巢，取出批量卵子，放于盛有生理鹽水的魚碟上，然后通過擠壓精巢，加入精液，并用雞毛攪拌或抖動魚碟，使受精均勻，之后均勻倒于盛有淡水的20cm*30cm的40目網片上，每張網片10000~15000粒受精卵，受精過程5min內完成；
5)受精卵的孵化
受精卵附著網片后，用孵化用水清洗2~3遍，將網片浸泡于高錳酸鉀溶液中消毒2~3min,消毒后將其懸掛在孵化池中，孵化過程保持充氣，孵化池水溫25~30°C，溶解氧大于5mg/L，pH值7.5-8.5 ;經過35~40h孵化出膜，再經45~50h卵黃囊消失，開始平游，進入魚苗培育期；
6)1.2cm魚苗培育
魚苗培育階段在孵化池或移到培育池中進行，培育池面積2m*4m，水深1.0-1.2m，每平方放入仔魚20~30萬尾；平游后仔魚12~24h內開口攝食，每日早晚各投喂S型臂尾輪蟲I次，投喂密度40~50個/mL ;開口后第5~7d，投喂L型臂尾輪蟲、枝角類和橈足類幼體；每天排污和換水I次，每次換水1/5 ;苗種出膜后，經培育10~15d，仔魚生長至1.0-1.5cm，分疏轉入3.0cm魚苗培育階段；
7)3cm規格魚苗培育
待魚苗長至1.0-1.5cm時，選擇室內16m2以上水泥池或室外土池進行培育，室內水泥池培育密度為1500~2000尾/m2，投喂水艇蚓或活飼料魚，每天排污和換水I次，每次換水1/4 ;室外土池培育密度600~800尾/m2，投喂水蚯蚓或活飼料魚，每日加、換水；經15~20d培育，魚苗生長至2.5-3.5cm，分篩分規格轉入魚種培育階段；
8)魚種培育
將魚苗收捕分規格轉入36m2以上水泥池或室外土池中進行魚種培育，室內水泥池培育密度為600~800尾/m2，室外土池培育密度為250~300尾/m2，投喂冰鮮魚漿、水蚯蚓或活飼料魚，每日加、換水，再經20~30d后培育成主體規格8cm以上魚種，過篩分級轉入成魚養殖池。
[0006]進一步地，所述活飼料魚是鯪魚。
[0007]進一步地，所述冰鮮魚漿是魷魚。
[0008]進一步地，所述人工催產與受精中，每千克尖頭塘鱧雌魚注射40~60 μ g促黃體素釋放激素類似物2號和15~20mg馬來酸地歐酮，每千克云斑尖塘鱧雄魚注射400~600IU人絨毛膜促性腺性激素。
[0009]進一步地，所述受精卵的孵化中，網片在孵化池的間距為20cm，行距為30cm。
[0010]進一步地，所述受精卵的孵化中，高錳酸鉀溶液的濃度是lppm。
[0011]進一步地，所述1.2cm魚苗培育中，魚苗移入培育池時，要求孵化池和培育池水體pH值相差0.3之內，溫度相差2°C之內。
[0012]進一步地，該方法還包括步驟9)商品魚養成:在土塘中養殖，餌料為小型魚蝦或冰鮮魚漿，經過6~12個月的養殖，體重達150g以上，即達商品魚規格。
[0013]本發明具有以下有益效果:
本發明采用人工調控手段，選擇尖頭塘鱧母本與云斑尖塘鱧父本進行遠緣雜交，以利用雜交優勢提高尖頭塘鱧雜交種的生長速度和養殖性能，使雜交子代具備體色好、生長速度快、適溫能力強的優點，培育出塘鱧科魚類新品種，為其規模化、產業化發展提供有效途徑與技術支持。
[0014]尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧為同科不同屬魚類，外表體形十分相似，兩者的雜交繁育所得到的雜交種生長速度明顯優于尖頭塘鱧，I齡體重可達150克/尾以上，體色明顯優于尖頭塘鱧，而且抗寒寒能力比云斑尖塘鱧提高2~3°C，養殖性能等以明顯提高。本發明為塘鱧科魚類遺傳、雜交選育研究提供了重要的途徑和方法，為推動及實現本土化的塘鱧科魚類人工繁殖、產業化發展提供了理論基礎及實踐經驗，具有重大的意義。
【具體實施方式】
[0015]下面結合具體實施例對本發明做進一步的說明:
實施例1
按照以下步驟進行尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種:
1)親魚的選擇
選擇I齡以上、體重50~150g、并處于性腺發育成熟期的尖頭塘鱧和2~3齡、體重500g以上、并處于性腺發育成熟期的云斑尖塘鱧作為雜交繁育親本；
2)親魚的強化培育
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧親魚分池培育，每萬尾親魚一次性投放活飼料魚3000?4000kg，之后每15d每萬尾親魚補充1500?2000kg ；
3)親魚的雌雄鑒別與性比
進入繁殖季節，鑒別親魚的性別，雌魚腹部膨大，卵巢輪廓明顯，生殖突末端圓鈍呈扇形、淡紅色，生殖孔兩側隆起、無黑色素點；雄魚體色較深，腹部膨大不明顯，生殖突末端尖細呈三角形、白色，泄殖孔周邊有黑色素點，輕輕擠壓腹部有乳白色精液流出；挑選尖頭塘鱧為母本，云斑尖塘鱧為父本，兩者雌雄配對為2~3:1 ;