一種免疫細胞保存液及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種免疫細胞保存液及其應用。
【背景技術】
[0002] 免疫治療，指的是刺激人體自身免疫系統來抵抗癌癥的治療方法，其中免疫系統 是人體抵抗疾病的自身的防衛系統。關于免疫治療，一個是免疫細胞的治療，還有一個是藥 物的治療。免疫細胞的治療是指把病人的細胞從血里面分離出來，在體外用一些細胞因子， 使它變成一種殺傷細胞，再回輸到血液中去，這種殺傷細胞可以識別腫瘤細胞進行殺傷。還 有一種是給病人直接用一些免疫制劑，像干擾素還有白介素 II等等進行治療，以上這些都 可稱為免疫治療。隨著免疫細胞生物學及免疫分子生物學的高速發展，免疫細胞治療已被 公認為繼常規的手術療法、放射療法和化學療法后第四種癌癥的治療方法。免疫治療療效 顯著，彌補了傳統治療方法產生痛苦和副作用的弊端。如今，免疫細胞治療也常作為腫瘤患 者放、化療后輔助治療的重要手段之一，其對于促進患者免疫系統的重建、消除殘留病灶及 骨髓凈化都具有良好效果。
[0003] 免疫細胞是指參與免疫應答或與免疫應答相關的細胞，可以分為多種，包括淋巴 細胞、樹突狀細胞、單核/巨噬細胞、粒細胞、肥大細胞等。在人體中，各種免疫細胞擔任著 重要的角色。如今，在臨床中使用的免疫細胞主要有DC細胞、CIK細胞、DC-CIK細胞、NKT 細胞、NK細胞等。免疫細胞的治療效果以及應用前景得到了世界的認可，然而，細胞制品與 普通的生物制品和藥品不同，細胞活性對治療效果具有很重大的影響作用，因此，如何在運 輸過程中保持免疫細胞的最大活性，成為了免疫治療的關鍵。
[0004] 目前免疫細胞治療大多采用生理鹽水作為常用的輸注介質，將體外培養擴增好的 免疫細胞注射到氯化鈉注射液中，加入或者不加入適量的人血白蛋白，置于0~10°c中保 存、運輸至目的地。雖然現有技術的保存方法簡單，在臨床上應用安全、方便，但是保存溫度 范圍較窄，只能作為短暫保存，低溫保存，不能常溫保存，若常溫保存，細胞活力下降很快。
【發明內容】
[0005] 有鑒于此，本發明的目的在于提供一種免疫細胞保存液及其應用，本發明提供的 免疫細胞保存液使得免疫細胞能夠在較寬溫度下保存，且能夠保持較高的細胞活性。
[0006] 本發明提供了一種免疫細胞保存液，每IOOmL免疫細胞保存液中包括水和以下組 分：
[0007] 血白蛋白0· 1~0· 3g ;
[0008] 維生素 C 0· 5 ~2. 5g ;
[0009] 葡萄糖 0· 1 ~0· 3g ;
[0010] 氯化鈉 0· 476 ~0· 513g ;
[0011] 醋酸鈉 0· 333 ~0· 358g ;
[0012] 葡萄糖酸鈉0· 454~0· 489g ;
[0013] 氯化鉀 0.033 ~0.036g;
[0014] 和氯化鎂 0· 027 ~0· 029g。
[0015] 優選地，每IOOmL免疫細胞保存液中包括血白蛋白0. 15~0. 25g。
[0016] 優選地，每IOOmL免疫細胞保存液中包括維生素 C I. 0~2. 0g。
[0017] 優選地，每IOOmL免疫細胞保存液中包括葡萄糖0. 15~0. 25g。
[0018] 優選地，每IOOmL免疫細胞保存液中包括水和以下組分：
[0019] 血白蛋白0.2g;
[0020] 維生素 C I. 5g ;
[0021] 葡萄糖 0.2g;
[0022] 氯化鈉 0· 494g ;
[0023] 醋酸鈉 0· 346g ;
[0024] 葡萄糖酸鈉0· 472g ;
[0025] 氯化鉀 0· O35g ;
[0026] 和氯化鎂 0· 〇28g。
[0027] 本發明提供了一種上述技術方案所述的免疫細胞保存液在免疫細胞保存中的應 用。
[0028] 優選地，所述免疫細胞保存的溫度為0°C~30 °C。
[0029] 優選地，所述免疫細胞保存的時間為Oh~72h。
[0030] 優選地，所述免疫細胞包括CIK細胞、DC細胞和NKT細胞中的一種或多種。
[0031] 優選地，所述免疫細胞的密度為0. 8 X IO7個/mL~I. 2 X 10 7個/mL。
[0032] 本發明提供了一種免疫細胞保存液，每IOOmL細胞保存液中包括水和以下組分： 血白蛋白〇· 1~〇· 3g ;維生素 C 0· 5~2. 5g ;葡萄糖0· 1~0· 3g ;氯化鈉0· 476~0· 513g ; 醋酸鈉0. 333~0. 358g ;葡萄糖酸鈉0. 454~0. 489g ;氯化鉀0. 033~0. 036g和氯化鎂 0. 027~0. 029g。本發明提供的免疫細胞保存液在上述組分的配伍下能夠使得免疫細胞在 較寬溫度下保存，且保持較高的活性。實驗結果表明：在20°C下，本發明提供的細胞保存液 保存CIK細胞48h，細胞活力可高達91. 49 %;保存NKT細胞48h，細胞活力可高達87. 44%。
【具體實施方式】
[0033] 本發明提供了一種免疫細胞保存液，每IOOmL免疫細胞保存液中包括水和以下組 分：
[0034] 血白蛋白0· 1~0· 3g ;
[0035] 維生素 C 0· 5 ~2. 5g ;
[0036] 葡萄糖 〇· 1 ~〇· 3g ;
[0037] 氯化鈉 0· 476 ~0· 513g ;
[0038] 醋酸鈉 0· 333 ~0· 358g ;
[0039] 葡萄糖酸鈉0· 454~0· 489g ;
[0040] 氯化鉀 0· O33 ~0· 〇36g ;
[0041] 和氯化鎂 0· 027 ~0· 029g。
[0042] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括血白蛋白0. 1~0. 3g ;優選的，每 IOOmL免疫細胞保存液中包括血白蛋白0. 15~0. 25g。本發明對血白蛋白的來源沒有特殊 的限制，采用本領域技術人員熟知的血白蛋白即可，如可以采用其市售商品。在本發明的具 體實施例中，所述血白蛋白購自鄭州萊士血液制品有限公司，規格可為：IOg/瓶，50mL/瓶， 血白蛋白的質量濃度為20%。
[0043] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括維生素 C 0. 5~2. 5g ;優選地，每 IOOmL細胞保存液中包括維生素 C I. 0~2. 0g。本發明對維生素 C的來源沒有特殊的限制， 采用本領域技術人員熟知的維生素 C即可，如可以采用其市售商品。在本發明的具體實施 例中，所述維生素 C購自廣州白云山天心制藥股份有限公司，規格可為0. 5g/mL。在本發明 中，所述維生素 C對細胞起到很好的抗氧化保護作用。
[0044] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括葡萄糖0. 1~0. 3g ;優選地，每 IOOmL細胞保存液中包括葡萄糖0. 15~0. 25g。本發明對葡萄糖的來源沒有特殊的限制， 采用本領域技術人員熟知的葡萄糖即可，如可以采用其市售商品。在本發明的具體實施例 中，所述葡萄糖購自中國大冢制藥有限公司，規格可為l〇g/l〇〇mL。在本發明中，所述葡萄糖 在免疫細胞保存時是重要的能源物質，用來維持細胞的新陳代謝。
[0045] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括氯化鈉0. 476~0. 513g ;優選地， 每IOOmL細胞保存液中包括0. 48~0. 5g。
[0046] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括醋酸鈉0. 333~0. 358g ;優選地， 每IOOmL細胞保存液中包括0. 34~0. 35g。
[0047] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括葡萄糖酸鈉0. 454~0. 489g ;優選 地，每IOOmL細胞保存液中包括0. 465~0. 48g。
[0048] 本發明提供的免疫細胞保存液每IOOmL中包括氯化鉀0. 033~0. 036g ;優選地， 每IOOmL細胞保存液中包括0. 034~0. 035g。