一種快速培育藍莓早期定型組培商品苗的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于組培快繁及栽培技術領域，具體涉及藍莓組培快繁和組培苗的早期定 型方法。
【背景技術】
[0002]藍莓（VacciniumSpp)是杜醒花科（Ericaceae)、越橘屬（Vaccinium)多年生灌木 小漿果，具有防止腦神經老化、強心、抗癌、軟化血管、增強免疫力和緩解視疲勞等功效，被 譽為'超級水果'。
[0003] 我國對藍莓的研宄始于上世紀80年代，主要以我國野生藍莓資源開發利用為重 點，開展資源調查、繁殖、加工及功效等的研宄。90年代后，遼寧、山東等地開始引進國外商 業品種進行示范種植，并進行組培和扦插繁殖技術研宄與應用。近幾年藍莓規模化種植迅 速發展，全國從北到南的種植區域和數量快速增加，對種苗的需求量也迅猛增加。但采用扦 插繁殖中需要大量插條，對母株及產量影響大，而且繁殖效率低、根系發育不良、植株退化 快，在規模化生產中應用越來越少。
[0004]目前主要采用組織培養方法進行藍莓種苗的標準化和規模化生產，但仍存在因組 培材料污染和腋芽死亡嚴重而導致的進種效率低、無菌體系難建立，瓶內生根和育苗周期 長，生產成本高，從苗期到結果期較長等缺陷。
【發明內容】
[0005] 本發明要解決的技術問題是克服現有組培技術存在的進種時因組培材料污染和 腋芽死亡嚴重導致的進種效率低，瓶內誘導生根時間長，生根率低，育苗周期長，以及組培 苗出圃后還需進行整形和定型、出圃種苗質量不均勻，種苗生產成本高等缺陷。
[0006] 本發明的技術方案如下：
[0007] -種快速培育藍莓早期定型組培商品苗的方法，其特征在于：
[0008] (1)組培材料田間預處理
[0009] 母株新梢長到10~15cm時，抹去頂芽，待頂芽下部1~2個腋芽膨大，形成紡錘 形的飽滿腋芽時，切取帶有該紡錘形飽滿腋芽的節段為組培材料；
[0010] ⑵分離腋芽的兩步消毒
[0011] 第一步消毒：將（1)所切取的組培材料清洗后，在質量分數為〇. 2%的氯化汞溶液 中消毒20~25分鐘；
[0012] 第二步消毒：將經第一步消毒的組培材料上的紡錘形腋芽切下作為分離腋芽，并 在質量分數為0. 1 %的氯化汞溶液消毒5~8分鐘，再用無菌水漂洗后用于接種；
[0013] (3)分離腋芽的誘導培養
[0014] 將步驟（2)經消毒的分離腋芽接種在裝有誘導培養基的培養瓶中誘導培養，培養 條件為：溫度23~26°C，光照強度2000~3000LX，光照時間8小時；所述誘導培養基為 改良 WPM+TDZ 2. 0 ~2. 5mg/L+IBA 0? 3 ~0? 5mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 白糖 20g/L，pH 值為 5. 0;
[0015] (4)繼代增殖培養
[0016] 將經步驟（3)誘導培養獲得的不定芽切成1. 5~2.Ocm節段或切成具1~3個 不定芽的小塊，接種在繼代增殖培養基中繼代增殖培養，繼代增殖培養條件為：溫度23~ 26°C，光照強度2000~3000LX，光照時間8小時，繼代周期為35~45天/次，所述繼代 增殖培養基配方為：改良 WPM+TDZ L 0 ~2. 0mg/L+KT0. 2 ~0? 5mg/L+IAA 0? 2 ~0? 3mg/L+ 瓊脂7g/L+白糖20g/L，pH值為5. 0 ;
[0017] (5)瓶苗第一次移栽
[0018] 步驟（4)所述繼代增殖培養30~35天后，將瓶蓋密封的培養瓶搬到用遮光率為 60%的遮陽網覆蓋的育苗大棚內馴化10~15天后，取出培養瓶內的苗并剪成2. 5~3. 5cm 的小段，所述小段基部蘸生根液后，扦插到裝有混合基質的穴盤孔內進行生根培養，生根培 養條件為：扦插后的前10天，在穴盤上方搭蓋兩層遮光率為50 %的遮陽網，并保持空氣相 對濕度在85~95%，10天后，穴盤上方改為一層遮光率為50%的遮陽網，并保持空氣相對 濕度在70~80 %，扦插苗發根后去除遮陽網、空氣相對濕度保持在50~60 %，整個生根培 養期間，育苗大棚內的溫度控制在20~30°C;所述生根液配方為：IAA 0. 4g/L+NAA0. 2g/L ; 所述混合基質由草炭與珍珠巖按9:1的體積比混合而成，且混合基質的pH為5. 0~5. 5 ;
[0019] (6)生根苗第二次移栽
[0020] 當穴盤內扦插根系長滿穴盤孔后，在大棚內進行第二次移栽，移栽時將穴盤內的 生根苗帶基質移栽到裝有育苗基質的育苗杯，一育苗杯移栽一苗，第二次移栽苗的管理為： 10天后去除遮陽網，移栽后澆透水，之后每天澆水1~2次，每10~15天噴施一次營養液； 移栽后的前7~10天，在育苗杯上方搭蓋一層遮光率為50%的遮陽網，10天后去除遮陽 網；整個培養期白天控制大棚內溫度在20~30°C，夜間溫度不能低于12°C ;所述育苗杯內 的育苗基質按如下方法配制而成：將河沙、鋸末、草炭、紅土和有機肥按河沙：鋸末：草炭： 紅土 ：有機肥的體積比為1 :2 :4 :2 :1的比例混合而成基礎基質，并在基礎基質內按每立方 米基礎基質加入2000克硫磺粉的比例加入硫磺粉混合而成育苗基質。所述有機肥為市售 商品有機肥，其中有機質多45%質量分數；所述營養液為：在每100公斤水中加入尿素30 克，KN0 350克，KH2P0440克，Ca(N03)220克，MgS0 45克和硼砂2克混配而成；
[0021] (7)組培苗早期定型
[0022] 待步驟（6)所述育苗杯內的小苗萌發新葉并且苗的高度達到5~6cm時進行早期 定型修剪，所述早期定型修剪為：只保留植株基部的2. 0~2. 5cm，將植株其余部分全部剪 除，修剪后，每天澆水1~2次，每10~15天噴施一次營養液，所述營養液與步驟（6)所述 營養液相同，早期定型組培苗培育期間，白天控制大棚內溫度在20~30°C，夜間溫度不能 低于12°C。通過50天培養后，組培苗形成具有3~5個分枝、且苗高達到15cm以上時即為 早期定型組培商品苗；
[0023] 步驟（3)所述誘導培養基和步驟（4)所述繼代增殖培養基中的改良WPM的成 分及其含量為：K2S041980mg/L，NH4N03400mg/L，MgSO4?7H20 370mg/L，CaCl2?2H20 96mg/ L，KH2P04170mg/L，Na2-EDTA 37. 3mg/L，FeSO4 ? 7H20 27. 8mg/L，CuSO4 ? 5H20 0? 25mg/L， ZnSO4 *7H20 8. 6mg/L,MnS04 *H20 22. 4mg/L,Ca(NO3)2 *4H20 278mg/L,Na2MoO4 *2H20 0. 25mg/ L，肌醇100mg/L，維生素B6O. 5mg/L，煙酸0? 5mg/L，維生素B1O. 5mg/L，甘氨酸2mg/L。
[0024] 與現有技術相比，本發明的創新點及其有益效果是：
[0025] 1、組培材料的田間抹頂芽處理，培育壯芽，減少了外植體消毒時腋芽死亡率，提高 了進種后萌芽率和有效進種率。
[0026] 本發明針對藍莓腋芽多為隱芽，不易萌發的生物學特性，在田間采取外植體前進 行了組培材料田間預處理措施，使組培材料上的腋芽肥壯，從而腋芽對消毒藥劑的耐受力 增強、死亡率低、且能快速萌芽，進而為進行外植體消毒時腋芽死亡率降低，提高進種后萌 芽率和有效進種率奠定了生物基礎，與直接采取組培材料而不進行田間預處理相比，外植 體材料的有效進種率提尚了 68.4%。
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