一種植物干餾液、其制備方法及其在提高丹參毛狀根有效成分含量中的應用
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種從植物中提取出來的干餾液及其制備方法和應用，具體涉及一種 從山楂核、酸棗核和核桃殼中提起得到的干餾液及其制備方法和在提高丹參毛狀根有效成 分含量中的應用，屬于環境與植物有效成分提取技術領域。
【背景技術】
[0002] 隨著"回歸自然"潮流的涌起，從天然植物中提取、分離具有藥用價值的活性成分 已成為開發新藥的一個重要途徑。隨著市場需求的不斷增加，長期不當采集導致生態環境 破壞嚴重，野生藥用植物資源日益銳減。而人工引種栽培困難而且易受環境制約，生長緩 慢，其體內的藥用成分含量不穩定。這些都成為藥用植物擴大規模進軍國際市場的一大瓶 頸。通過藥用植物細胞與組織培養手段來規模化生產植物次生代謝物是一種比較有效的手 段，其中需要解決的一個關鍵問題就是篩選并添加誘導子來提高藥用植物細胞或組織中有 效次生代謝產物的產量，降低生產成本，實現工業化生產。丹參主要用于治療心、腦、血管疾 病、肥胖及高血脂癥，主要藥效成分為脂溶性成分(二氫丹參酮、隱丹參酮、丹參酮I、丹參 酮II A)和水溶性成分(丹酚酸B、迷迭香酸)。為了提高丹參有效成分的產量，目前較為常用 的方法是用發根農桿菌菌株rAiZogefled秀導丹參葉片獲得丹參毛狀根，通 過繼代丹參毛狀根獲得丹參有效成分。為提高有效成分的含量，多在培養基中添加誘導子， 如酵母銀離子、茉莉酸甲酯、水楊酸等，這些誘導子多為人工合成，存在成本高、效率低及污 染嚴重等問題，嚴重制約了藥用植物藥效成分大規模生產的進程。
[0003] 干餾液是指將植物材料放到干餾釜內加熱炭化過程中冒出的煙氣自然冷卻液化 得到的濃縮液體。近年來，干餾液的醫用和食用價值受到重視，廣泛用于殺菌、疾病預防、食 品防腐、調味、水果保鮮等領域。然而，將干餾液用于中藥材培育上鮮有報道。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種植物干餾液，該植物干餾液能作為丹參毛狀根培養中的 誘導子，顯著提高丹參毛狀根培養中有效成分的積累，對加速生產丹參組織培養中有效成 分具有重要意義。
[0005] 本發明的另一目的是提供上述植物干餾液的制備方法，該方法簡單、有效，能快速 獲得所需干餾液。 本發明的另一目的是提供上述植物干餾液在促進丹參毛狀根培養中有效成分的含量 (積累）的應用。
[0006] 目前，干餾液主要作為殺菌、抑菌成分用于藥物中，在促進中藥材有效成分積累中 未見報道，發明人在研宄中發現，將干餾液加入丹參毛狀根培養中作為誘導子能顯著提高 丹參毛狀根中有效成分的含量。并且從實驗結果看，不同植物來源的干餾液對提高丹參藥 效成分積累的影響是不同的，同一干餾液對丹參在植株水平和細胞、組織培養水平中藥效 物質積累的影響也是不同的，同一干餾液對不同藥材的有效成分的積累也是不同的。發明 人通過深入研宄，將多種干餾液用于丹參毛狀根組織培養中，經過大量的篩選實驗，最終得 到了適合丹參毛狀根培養中藥效成分積累的干餾液，并具體研宄了該干餾液的制備方法和 使用方法，從而為將干餾液用于提高丹參毛狀根培養中藥效成分積累提供了重要的技術支 持。
[0007] 本發明具體技術方案如下： 一種植物干餾液的制備方法，包括將山楂核、酸棗核和核桃殼進行干餾得干餾液的步 驟。
[0008] 上述方法中，進一步包括將山楂核、酸棗核和核桃殼分別在140~145°C、240~ 245°C、300~360°C下進行干餾，將這三段溫度下所得的干餾液合并的步驟。
[0009] 上述方法中，山楂核、酸棗核和核桃殼的質量比為1~13:1~2:1~3,優選為 11:2:2 或 13:1:1。
[0010] 上述方法中，在140~145°C保溫l_2h，在240~245°C保溫2-3小時，在300~ 360°C保溫1-2小時。
[0011] 上述方法中，進一步的，將合并后的干餾液除雜，得植物干餾液。優選的，合并后的 干餾液采用下述方法除雜：將合并后的干餾液攪拌均勻、靜置分層，取上清液；將上清液蒸 餾，所得蒸餾液用活性炭處理后過濾，所得濾液即為植物干餾液。
[0012] 上述方法中，上清液在100~105 °C常壓蒸餾。
[0013] 上述方法中，上清液蒸餾時間為2h。
[0014] 上述方法中，蒸餾液加入其質量10%的活性炭。
[0015] 上述方法中，活性炭在95°C下處理45分鐘，進行除雜。
[0016] 按照上述方植物干餾液的制備方法制得的植物干餾液也在本發明的保護范圍之 內。
[0017] 本發明植物干餾液可以用于丹參組織培養中，用于促進丹參毛狀根有效成分的含 量，步驟包括：將上述植物干餾液作為誘導子，用于丹參毛狀根的組織培養中，促進丹參毛 狀根有效成分的積累。
[0018] 植物干餾液用于丹參毛狀根培養時，除了以植物干餾液作為誘導子外，其他方法 均可以參照現有技術。
[0019] 植物干餾液作為誘導子時，植物干餾液與液體培養基按照1:500-2000的體積比 混合，然后將所得混合液用于丹參毛狀根的培養中，優選按照1:1000的體積比混合。
[0020] 本發明將山楂核、核桃殼、酸棗核這三種植物的核、殼進行干餾得到干餾液有效成 分，通過他們之間的協同作用起到了很好的提高丹參毛狀根組織培養中藥效成分含量的作 用，經濟效益高。此外，本發明干餾液制備方法操作簡單，簡潔快速，易于實現，所用原料為 植物廢棄物，實現了廢物的充分利用，變廢為寶，成本低，便于工業化生產。
【具體實施方式】
[0021] 下面通過具體實施例對本發明進行進一步的闡述，應該明白的是，下述說明僅是 為了解釋本發明，并不對其內容進行限制。
[0022] 實施例1 分別取山楂核、酸棗核和核桃殼2kg，以質量比為1:1:1加入干餾釜，加熱至140~ 145°C，保溫1小時、繼續加熱至240~245°C，保溫2小時，然后溫度升至300~360°C維持 1小時。收集各時段的干餾液，混合攪拌30分鐘，轉入分液漏斗中靜置12小時，分出上清 液。將上清液加入蒸餾釜，于100~105°C蒸餾2小時，收集蒸餾液。蒸餾液加入10wt%的 活性炭，攪拌加熱至95°C，維持45分鐘，過濾，收集過濾液。濾液即為本發明的植物干餾液。
[0023] 實施例2 分別取山楂核、酸棗核和核桃殼I kg，以質量比為1:1:1加入干餾釜，加熱至140~ 145°C，保溫1小時、繼續加熱至240~245°C，保溫2小時，然后溫度升至300~360°C維持 1小時。收集各時段的干餾液，混合攪拌30分鐘，轉入分液漏斗中靜置12小時，分出上清 液。將上清液加入蒸餾釜，于100~105°C蒸餾2小時，收集蒸餾液。蒸餾液加入10wt%的 活性炭，攪拌加熱至95°C，維持45分鐘，過濾，收集過濾液。濾液即為本發明的植物干餾液。
[0024] 實施例3 分別取山楂核、酸棗核和核桃殼共計I. 5kg，以質量比為1:1:1加入干餾釜，加熱至 140~145°C，保溫1小時、繼續加熱至240~245°C，保溫2小時，然后溫度升至300~360°C 維持1小時。收集各時段的干餾液，混合攪拌30分鐘，轉入分液漏斗中靜置12小時，分出上 清液。將上清液加入蒸餾釜，于100~105°C蒸餾2小時，收集蒸餾液。蒸餾液加入10wt% 的活性炭，攪拌加熱至95°C，維持45分鐘，過濾，收集過濾液。濾液即為本發明的植物干餾 液。
[0025] 實施例4 取山楂核、酸棗核和核桃殼共計1.5 kg，質量比為3:1:1加入干餾釜，加熱至140~ 145°C，保溫1小時、繼續加熱至240~245°C，保溫2小時，然后溫度升至300~360°C維持 1小時。收集各時段的干餾液，混合攪拌30分鐘，轉入分液漏斗中靜置12小時，分出上清 液。將上清液加入蒸餾釜，于100~105°C蒸餾2小時，收集蒸餾液。蒸餾液加入10wt%的 活性炭，攪拌加熱至95°C，維持45分鐘，過濾，收集過濾液。濾液即為本發明的植物干餾液。
[0026] 實施例5 取山楂核、酸棗核和核桃殼共計1.5 kg，質量比為6:2:3加入干餾釜，加熱至140~ 145°C，保溫1小時、繼續加熱至240~245°C，保溫2小時，然后溫度升至300~360°C維持 1小時。收集各時段的干餾液，混合攪拌30分鐘，轉入分液漏斗中靜置12小時，分出上清 液。將上清液加入蒸餾釜，于100~105°C蒸餾2