一種食用菌的培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及食用菌的培養方法，具體涉及一種用含有高錳酸鉀的溶液浸泡食用菌后繼續培養的方法。
【背景技術】
[0002]食用菌菌種分離培養是十分重要的研宄領域，每年需要的食用菌菌種數以百萬噸計。野生菌種的分離、純化和栽培菌種的保存、三級擴繁、提純復壯都需要制備母種、原種、栽培種，傳統的制備母種的方法都是斜面試管種，200?500元/支，試管口為棉塞、化纖塞、硅膠塞等，很容易污染、松動、脫落，菌種量特別少，再接種時去棉塞、化纖塞、硅膠塞等不方便，很容易再污染，試管太長不方便取、接菌種，并且不能保證菌種的純度，有無雜菌(如細菌等無色雜菌)肉眼很難判斷。
[0003]在傳統培養工藝中，一般都添加防霉劑、抗生素等，并且有10%左右因培養失敗而報廢，菌種的菌株與植物的品種一樣是寶貴的資源，分離、純化、培養、復壯在很多科研課題中是關鍵性技術，如種子發芽菌、冬蟲夏草菌、內生菌、共生菌、腸道有益菌、土壤有益菌、病蟲害的致病菌、特殊天然產物菌等，只要能分離、純化、培養、復壯，進一步的研宄就有了可靠的基礎。
[0004]專利文獻CN104012576A公開了一種養殖食用菌用的消毒劑，所述消毒劑的組分包括:以體積份計，高錳酸鉀溶液2-5mL、過氧乙酸6-12mL、乙醇溶液23_28mL、二氯異氰尿酸鈉7-13mL、乙二胺四乙酸鈉0.5-1.2mL、去離子水40_50mL，將所述各組分在常溫常壓下攪拌一定時間，并分裝、塑封即得到所述消毒劑。通過上述方式，本發明的養殖食用菌用的消毒劑，可以對細菌、放線菌、酵母菌、霉菌等多種食用菌菌種制培過程中會出現的雜菌有消除和預防作用；但是，其發明僅為一種消毒劑，而且處方組份復雜，其發明沒有公開所述消毒劑在菌種培養過程中是如何使用的，沒有具體操作方案及使用效果，對已經生長雜菌的菌種進行局部消毒，不能對菌種本身和培養基消毒，與單用乙醇消毒沒有本質的區別，沒有處理菌種本身的能力，沒有事先預防、處理菌種的意義，沒有改變食用菌的培養方式和過程，沒有產生積極的影響。該發明中除了高錳酸鉀外還含有大量的其它化學物質，對于食用菌菌種而言，防霉劑、抗生素或多種化學物質的添加、使用會影響菌種本身的健康，不利于菌種的生長。
[0005]同時，雖然現有技術報道了高錳酸鉀可以用于食用菌培養過程中的消毒，但那是與甲醛溶液反應產生蒸汽用于環境、空氣、器皿熏蒸消毒，與本發明有本質的區別。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是克服現有技術的缺陷，提供一種簡便、高效培養食用菌的方法。
[0007]具體而言，本發明提供的方法包括以下步驟:在全開放條件下，用含有0.3?0.8%高錳酸鉀的溶液浸泡食用菌菌種60?120min，繼續培養食用菌菌種；在浸泡過程中，每30min更換一次高錳酸鉀溶液，可以避免有機物過多使高錳酸鉀溶液失效，從而使消毒盡可能徹底。
[0008]本發明所述食用菌菌種包括球孢蟲草菌菌種-子座、茯苓菌菌種、靈芝菌菌種、天麻發芽菌菌種、蜜環菌菌種、香菇菌菌種、平菇菌菌種等；本發明提供的方法對于野外采集的食用菌菌種、受污染的食用菌菌種、長雜菌的食用菌菌種的培養效果尤為顯著。
[0009]本發明使用的高錳酸鉀溶液為強氧化劑，在各行各業有著十分廣泛的用途，殺菌譜廣、殺菌力強而短暫，破壞力不強，易受有機物和還原劑的影響，見光、有機物、還原劑分解，因此，高錳酸鉀溶液不殘留、不持久，濃度適當時對菌種沒有傷害，不必用蒸餾水反復沖洗，可以添加進入培養基中，培養過程中可以添加高錳酸鉀溶液浸泡消毒，轉瓶培養時可以添加高錳酸鉀溶液浸泡消毒，有效期約為2小時，2小時以后自動失效。高錳酸鉀溶液對細菌、真菌、病毒、病蟲害等病原體都有很好的殺滅作用，比多菌靈、代森錳鋅好，而且可以作為鉀肥、錳肥，環保、安全、方便，用于食用菌菌種分離培養材料表面浸泡消毒非常合適，應用自如，環保、安全、方便、徹底。在本發明中，將高錳酸鉀用常水或蒸餾水、純凈水配制成0.3%?0.8%的高錳酸鉀溶液，臨用時配制，有條件的用蒸餾水、純凈水配制，沒有條件或大量使用時用常水配制即可。用于菌種分離培養材料表面浸泡消毒，材料可以不經過清洗，消毒后材料可以不經過漂洗，可以連同高錳酸鉀溶液一起加入培養基中。
[0010]當所述食用菌菌種為野外采集的食用菌菌種時，所述方法包括以下步驟:
[0011](I)在固體或半固體培養基中加入0.3?0.8%丙酸鈉，加水溶解完全后，分裝于組培瓶中，120?125°C下滅菌25?35分鐘，放涼后取出，蓋緊，冷卻至室溫后，即得培養基;
[0012](2)從野外采集食用菌菌種，在全開放條件下，在5?10倍于菌種體積的0.5?0.8%高錳酸鉀溶液中浸泡60?120min，每30min更換一次含有高錳酸鉀的溶液，浸泡結束后不使用清水漂洗；
[0013](3)在全開放條件下，將經步驟(2)處理后的菌種接入步驟(I)所得培養基中，在15?25°C下培養5?7天，即得擴增繁殖的食用菌菌種；所得菌種的污染率低。
[0014]當所述食用菌菌種為在長期儲存過程中受污染的食用菌菌種時，所述方法包括以下步驟:
[0015](I)在固體或半固體培養基中加入0.3?0.8%丙酸鈉，加水溶解完全后，分裝于組培瓶中，120?125°C下滅菌25?35分鐘，放涼后取出，蓋緊，冷卻至室溫后，即得培養基;
[0016](2)取受污染的食用菌菌種，在全開放條件下，在5?10倍于菌種體積的0.5?0.8%高錳酸鉀溶液中浸泡60?120min，每30min更換一次含有高錳酸鉀的溶液，浸泡結束后不使用清水漂洗；
[0017](3)在全開放條件下，將經步驟(2)處理后的菌種接入步驟(I)所得培養基中，在15?25°C下培養5?7天，即得；所得菌種的污染率顯著降低，且菌種可以健康生長。
[0018]本發明將培養容器限定為培養瓶。對于本發明提供的技術方案，培養容器要求使用方便，從高溫滅菌、通氣培養、購買、運輸、保存、再接種等各個環節避免雜菌的污染；要將培養材料表面的微生物殺死，對材料本身要無傷害或傷害很輕微，不殘留，安全、環保，本發明選擇組培瓶培養的效果優于斜面培養，量大，使用方便。
[0019]培養基中加入0.3%?0.8%的丙酸鈉。在食品工業領域，丙酸鈉用于面包、糕點防霉，安全無毒。在培養基中添加0.3?0.8%丙酸鈉，加水加熱溶解完全后，與其他半固體、固體培養基一起分裝于組培瓶中，120?125°C下滅菌25?35分鐘，放涼后取出，蓋緊，冷卻至室溫后，本發明可以采用全開放式接種，也可以于接種箱內無菌接種。
[0020]如果在培養過程中由于意外情況出現長雜菌現象，所述食用菌菌種為培養過程中長雜菌的食用菌菌種，所述方法包括以下步驟:
[0021]取長雜菌的食用菌菌種，在全開放條件下，在培養菌種的容器中加入含有0.3?0.4%高錳酸鉀和0.3?0.4%丙酸鈉的混合溶液，將菌種和培養基共同浸泡60?120min，每30min更換一次混合溶液，浸泡結束后，倒出混合溶液，繼續培養，所得食用菌的含雜菌率顯著降低，且菌種可以繼續健康地生長。
[0022]本發明所述高錳酸鉀和丙酸鈉的濃度單位％的含義均為g/100ml。
[0023]本發明提供的方法具有以下顯著優點:1、組培瓶代替試管斜面培養，優點很多，從高溫滅菌、通氣培養、購買、運輸、保存、取、接菌種等各個環節避免了雜菌的污染，使用方便；2、培養基加丙酸鈉，安全無毒，可以全開放式接種不長雜菌，操作方便；3、菌種不管有無雜菌用高錳酸鉀溶液浸泡消毒，野外菌種和長雜菌的菌種用高錳酸鉀溶液浸泡消毒，安全無毒，操作方便，材料不必反復清洗，不受消毒時間的限制，高錳酸鉀溶液消毒后也不必用蒸餾水反復沖洗，無菌濾紙吸干等復雜的操作步驟，對菌種沒有傷害，可以添加進入培養基中，培養過程中