一種山藥蟲草及其培養方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于蟲草技術領域，具體涉及一種山藥蟲草及其培養方法。
【背景技術】
[0002] 蛹蟲草為子囊菌亞門、麥角菌科、蟲草屬的模式種，學名為Cordyceps militaris， 又名北冬蟲夏草、北蟲草、蟲草等，世界性分布天然資源數量很少，其藥用價值與滋補功能 與冬蟲夏草相似，是我國極具開發價值的藥用滋補真菌，可作為冬蟲夏草的替代品。中醫認 為，蟲草入肺腎二經，既能補肺陰，又能補腎陽，主治腎虛，陽瘺遺精，腰膝酸痛，病后久虛， 久咳虛弱，自汗盜汗等，是唯一一種能同時平衡、調節陰陽的珍稀中藥。
[0003]目前，國內外人工培養蟲草的方法有以下幾種：（1)采用大米、小麥等谷類農作物 與生化試劑組成的混合培養基生產蟲草子實體；（2)采用桑蠶蛹、柞蠶蛹作培養載體生產 蛹蟲草；（3)采用純生化試劑組成的液體培養基生產蟲草菌絲體；（4)采用農作物下腳料與 生化試劑組成的混合培養基生產蟲草菌絲體。上述方法培養生產的蟲草或蟲草菌絲體，所 含有效成分較天然蟲草缺少，藥用價值與滋補作用較低。
【發明內容】
[0004] 為解決上述問題，本發明的目的在于提供一種山藥蟲草。
[0005] 本發明的另一目的在于提供一種山藥蟲草的培養方法。
[0006] 為實現上述目的，本發明采用如下技術方案： 一種山藥蟲草，以蛹蟲草菌株（Cordyceps militaris)%蟲1號感染山藥，經人工培育 轉化而成的山藥與草的復合體；蛹蟲草菌株泌蟲1號保藏編號為CGMCC NO. 6808。
[0007] -種山藥蟲草的培養方法，包括以下步驟： (1) 山藥蟲草母種的制備： a. 分別取山藥干粉15~23 g、瓊脂15~23 g、葡萄糖15~23 g、硫酸鎂0. 8~1. 2 g放入1000 ml蒸餾水中，加熱沸騰，保持10~15 min停火，趁熱裝管，封口，滅菌，趁熱取 出擺斜面，冷卻凝固形成山藥母種斜面培養基； b. 在無菌條件下，將上述的蛹蟲草菌株沁蟲1號(保藏編號為CGMCC NO. 6808)接種于 上述斜面培養基上，溫度18~20 °C、完全黑暗的環境中培養8~10天，當菌絲發滿斜面培 養基表面，即成山藥蟲草母種； (2) 山藥蟲草液體菌種制備： c. 分別取葡萄糖18~22 g、山藥干粉3~5 g、蛋白胨3~5 g、磷酸二氫鉀3~5 g、 硫酸鎂3~5 g、維生素BI 0.01~0.03 g放入1000 ml蒸餾水中，加熱沸騰，保持2~3 min停火，然后裝入燒瓶中，封口，滅菌，冷卻至室溫，制成菌種培養液； d. 在無菌條件下在上述菌種培養液中接入步驟（1)制備的山藥蟲草母種，溫度18~ 22 °C、自然光照環境中靜止培養70~75 h，再無菌空氣培養70~75 h，當小米粒狀菌球 充滿培養液時停止通空氣，經檢驗無雜菌感染后即成山藥蟲草液體菌種； (3) 寄生載體山藥的制備：將山藥表面處理干凈，切段扎孔，放入水與蠶蛹粉重量比為 15~25 :1的混合液中，煮沸，保持10~15 min，撈出，控去水分，裝袋，封口，滅菌，即得寄 生載體山藥； (4) 接種：在無菌條件下，將步驟（2)制備的山藥蟲草液體菌種接種到步驟（3)制備的 山藥上面，接種量為山藥：液體菌種=800~1000 g :200~250 ml ; (5) 染菌期培養：接種后在溫度18~25 °C、空氣濕度50%~55%、黑暗環境中培養10~ 12天，白色菌絲發滿山藥表面及內部，發菌培養結束； (6) 轉色期培養：在溫度20~23 °C、空氣濕度60%~65%、光照180~200 Iux條件 下培養7~8天，白色菌絲轉為橘黃色，轉色結束； (7) 出草期培養：①從原基形成前后到草長到2 cm時，為前期培養階段，培養條件為： 溫度20~22 °C、空氣濕度70%~75%、自然光照，培養時間為15~17天； ②從草長到2 cm以上直到山藥蟲草最后成熟為后期培養階段，培養條件為：溫度23~ 25 °C、空氣濕度80%~85%、自然光照，培養時間為25~27天，當子座頂端膨大，子座色澤 變暗，并出現粉末狀物時采收，即為山藥蟲草。
[0008] 根據上述的山藥蟲草的培養方法，步驟（1)所述的山藥干粉的粒度為60~70目。
[0009] 根據上述的山藥蟲草的培養方法，步驟（3)所述的蠶蛹粉的粒度為20~50目。
[0010] 根據上述的山藥蟲草的培養方法，步驟（3)所述的山藥切段扎孔的方法為：將山 藥切成25~30 cm的段，之后用直徑2 mm的鐵纖扎孔，縱向并排扎行，行距為0.4~0.6 cm，孔距為2. 5~3 cm，孔深為山藥直徑的1/3~2/3。
[0011] 本發明具有積極有益的效果 1.本發明以蛹蟲草菌株沁蟲1號感染寄主山藥，人工培育出了一種新式的蟲草品種， 所培養出的山藥蟲草色澤金黃，與天然蛹蟲草完全相同，且其菌核形態保持山藥原狀，具有 良好的觀賞價值，其所食醫用成分及營養成分含量高，產量品質一致性好。
[0012] 2.本發明所述的山藥蟲草的培育方法簡單，節省勞動力成本、降低工作量，生產周 期短，平均為70~75天，山藥蟲草規模化生產成功率達100%，生產成本低，具有積極的經濟 效益和社會效益。
[0013] 本發明所述蛹蟲草（Cordyceps militaris)泌蟲1號，已于2012年11月13日 保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其簡稱為CGMCC，地址：北京市朝 陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研宄所，該蛹蟲草沁蟲1號保藏編號為CGMCC NO. 6808 〇
【附圖說明】
[0014] 圖1為實施例1山藥蟲草的外形圖； 圖2為實施例1山藥蟲草的外形圖； 圖3為實施例1山藥蟲草的外形圖。
【具體實施方式】
[0015] 下面結合一些具體實施例對本發明進一步說明。
[0016] 菌株的采集：2006年9月，發明人李國軍于吉林省長白山哈達嶺南延部野生蛹蟲 草產區采集到蟲草菌株，經在培養基培養出蛹蟲草，經生物學特性觀察、檢測鑒定，無毒、含 蟲草素高，確定為蛹蟲草擬青霉菌株，并經多代傳代培養馴化成為能感染干蠶蛹的蛹蟲草 菌株沁蟲1號，其保藏編號為CGMCC NO. 6808。
[0017] 實施例1 一種山藥蟲草，以蛹蟲草菌株沁蟲1號感染山藥，經人工培育轉化而成的山藥與草的 復合體；蛹蟲草菌株沁蟲1號保藏編號為CGMCC NO. 6808。
[0018] 一種山藥蟲草的培養方法，包括以下步驟： (1) 山藥蟲草母種的制備： a. 分別取山藥干粉（60目）15 g、瓊脂15 g、葡萄糖23 g、硫酸鎂0.8 g放入1000 ml 蒸餾水中，加熱沸騰，保持10 min停火，趁熱裝入試管，封口，滅菌，趁熱取出擺斜面，冷卻凝 固形成山藥母種斜面培養基； b. 山藥蟲草母種的制備：在無菌條件下，從蛹蟲草菌株沁蟲1號(保藏編號CGMCC NO. 6808)孕部上切取組織塊，接種于該斜面培養基上，之后用棉花封口并從無菌環境中取 出，置溫度20 °C、完全黑暗的環境中培養9天，當菌絲發滿斜面培養基表面即成山藥蟲草 母種； (2) 山藥蟲草液體菌種制備： c. 分別取葡萄糖18 g、山藥干粉4 g、蛋白胨3 g、磷酸二氫鉀5 g、硫酸鎂5 g、維生素 Bl 0.02 g放入1000 ml蒸餾水中，加熱沸騰，保持2 min停火，然后裝入1000 ml燒瓶中， 裝量為700 ml，封口，滅菌，冷卻至常溫，制成菌種培養液； d. 在無菌條件下在菌種培養液中接入步驟（2)制備的山藥蟲草母種，置溫度22 °C、 自然光照環境中靜止培養70 h，然后再無菌空氣培養75 h，當小米粒狀菌球充滿培養液時 停止通空氣，經檢驗無雜菌感染后即成山藥蟲草液體菌種； (3) 寄生載體山藥的制備：選擇藥用、滋補成分含量高、生長健壯、形體美觀的優質山 藥，將山藥表面處理干凈、整潔，切段扎孔，放入水與蠶蛹粉（20目）重量比為15 :1的混合液 中，煮沸保持12 min，撈出，控去水分，裝袋，封口，滅菌； 切段扎孔的方法為：將山藥切成28 cm的段，之后用直徑2 _的鐵纖扎孔，縱向并排扎 行，行距為〇? 4 cm，孔距為3 cm，孔深為山藥直徑的1/3 ; (4) 接種：在無菌條件下，將步驟（2)制備的山藥蟲草液體菌種接種到步驟（3)制備的 山藥上面，接種量為山藥：液體菌種=800 g :210 ml ; 上述接種方法為：在無菌環境中，用步驟（2)制備的山藥液體菌種浸泡步驟（3)制備的 山藥> 10 s，封口； (5) 染菌期培養：接種后在溫度18 °C、空氣濕度50%、黑暗環境中培養10天，白色菌絲 發滿山藥表面及內部，發菌培養結束； (6) 轉色期培養：在溫度20 °C、空氣濕度60%、光照200 Iux條件下培養7天，白色菌 絲轉為橘黃色，轉色結束； (7) 出草期培養：①從原基形成前后到草長到2 cm時，為前期培養階段，培養條件為： 溫度22 °C、空氣濕度72%、自然光照，培養時間為16天； ②從草長到2 cm以上直到山藥蟲草最后成熟為后期培養階段，培養條件為：溫度 24°C、空氣濕度82%、自然光照，培養時間為25天，子座頂端膨大，子座色澤變暗，并出現粉 末狀物時采收，即為山藥蟲草，外形圖見圖1，檢測結果見表1。
[0019] 實施例2 一種山藥蟲草，以蛹蟲草菌株沁蟲1號感染山藥，經人工培育轉化而成的山藥與草的 復合體；蛹蟲草菌株沁蟲1號保藏編號為CGMCC NO. 6808。
[0020] -種山藥蟲草的培養方法，包括以下步驟： (1) 山藥蟲草母種的制備： a. 分別取山藥干粉（70目）20 g、瓊脂20 g、葡萄糖20 g、硫酸鎂I g放入1000 ml蒸 餾水中，加熱沸騰，保持15 min停火，趁熱裝入試管，封口，滅菌，趁熱取出擺斜面，冷卻凝固 形