蛹蟲草生產方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及蛹蟲草，具體涉及一種蛹蟲草生產方法。
【背景技術】
[0002]野生蟲草的分布有其獨特的氣候條件和地理環境，生長區域和產量受到極大限制。目前，隨著對蟲草保健品的深入研究與開發，野生蟲草遠遠不能滿足人們日益增長的要求。因此通過人工進行蟲草的繁殖和培育，迎合了市場的需要。現在，科研工作者已經在鱗翅目昆蟲中成功地繁殖和培育出蛹蟲草。人工培養的蛹蟲草不論是化學成分，還是藥理作用都與野生的蟲草區別甚微，完全可以作為替代品。因此，通過人工馴化，工廠化生產，為這一名貴中藥材的開發利用開辟了廣闊前景。
[0003]南陽，作為張仲景的故里，早有“三步一藥”之稱。近幾年，西峽山茱萸、南召辛夷、方城裕丹參、唐河桅子和半夏5個中藥材基地先后獲得國家原產地保護認證，但是作為藥用菌的開發還很有限，蛹蟲草的試驗研究還是空白，更不用說開發利用了。因此研究蛹蟲草的生產方法，對于素有“華藥之鄉”的南陽尤為重要，它不僅豐富了我市的藥材品種，也會為經濟發展做出積極的貢獻。
【發明內容】
[0004]本發明所要解決的技術問題是設計一種蛹蟲草生產方法，利用該方法通過人工進行蟲草的繁殖和培育，可為生產者帶來較高的經濟效益。
[0005]為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是:一種蛹蟲草生產方法，包括以下方法:
培養基配制一分裝一滅菌冷卻一接種一培養一檢查一成品，其中:
培養基配制，分固體母種培養基和液體生產種培養基；
固體母種培養基配方為:
(1).馬鈴薯200.0g,葡萄糖20.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，維生素B1 10.0mg,瓊脂 20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
⑵.葡萄糖100.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏1.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，瓊脂20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
液體生產種培養基配方為:
(1).馬鈴薯200.0g,蠶蛹粉10.0g,葡萄糖20.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，維生素 B1 50 mg,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
⑵.葡萄糖100.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏1.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，瓊脂20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
分裝，對于固體母種培養基，按配方稱好各種原料，將馬鈴薯洗凈去皮去芽眼，稱取200g,切成3?5mm薄片,加水1000ml,文火煮沸20?30分鐘,用4層紗布過濾,濾液放回鍋內，加入瓊脂充分溶化，再依次加入其它成分，攪拌溶解后，加開水補足至100ml，趁熱分裝試管，裝量為試管的1/4?1/5，塞入膠塞；
對于液體生產種培養基，按配方稱好各種原料，將馬鈴薯去皮去芽眼，稱取200g，切成3?5mm厚的薄片，與營養基質一起放入鍋中，文火煮沸20?30分鐘，用8層紗布過濾，濾液用開水補足至1000毫升，再依次加入其它成分，攪拌溶解，然后裝入玻璃輸液瓶中，液體裝量不宜超過容器總容積的2/5，瓶口用聚丙烯塑料薄膜和乳膠圈封口 ；
滅菌冷卻，對于固體母種培養基，高壓蒸汽滅菌0.1lMPa，保持30分鐘，當壓力降至“O”時，打開氣閥，取出滅菌物，擺成斜面；
對于液體生產種培養基，采用高壓蒸汽滅菌，高壓蒸汽滅菌0.1lMPa,保持30分鐘，當滅菌器的壓力降為零時，開啟滅菌器，取出菌種瓶，菌種瓶冷卻至室溫后方可接種；
接種，對于固體母種培養基，將待接種的培養基放入接種箱，同時放入接種工具并進行消毒，同時配合紫外線照射進行空間消毒40分鐘；將試管的棉塞齊管或瓶口剪去，用75%酒精棉擦洗外壁，將接種工具在酒精燈火焰上燒灼后，置于清潔的空試管內冷卻備用；將試管母種放在萬能夾上，旋轉式取下棉塞，右手端起酒精燈，讓火焰接觸管口，左手將試管慢慢旋轉3?4周，然后將試管固定牢；試管口要控制在離酒精火焰1cm范圍內進行操作；用殺菌后的備用接種鉤，除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊，隨后將接種鉤放回母種試管；左手持預接種的試管培養基，管口稍向下傾斜，用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤，從母種試管內鉤取直徑約2mm大小的種塊，放入預接種培養基斜面中央，抽出接種鉤，放回母種試管，輕燎右手所持棉塞，旋轉式塞入接過菌的試管，由右手放到適當位置，連續完成所有預接種試管；
對于液體生產種培養基，在無菌操作條件下，用接種鉤從母種斜面中切取lcm2菌面放入液體菌種培養瓶中，迅速用聚丙烯塑料薄膜和乳膠圈封扎瓶口，每支母種可接種10?15瓶液體生產種；
培養，種培養溫度18?23°C，種培養濕度60?65%，菌種培養光線為黑暗條件，菌種培養空氣為環境清新無異味；
對于固體母種培養基，固體母種7?10天長滿試管；
對于液體生產種培養基，液體生產種的生產,主要采用搖床振蕩培養,震蕩頻率依據搖床性能和菌種性質進行適當調節，要求培養的菌種菌球密度大、菌絲掛瓶壁少、培養周期短以及接種后定殖能力強、發菌快；往復式搖床60?70次/分鐘，旋轉式搖床100?120轉/分鐘，振蕩培養時間為4?6天；沒有設備條件的可采用靜止培養，靜止培養時間為7?10天；
檢查，培養期間定期檢查，一般每天檢查2次，及時淘汰染菌或劣勢菌種；
成品，最后出成品。
[0006]其中，所述營養基質為馬鈴薯、玉米粉、蠶蛹粉、大豆粉、豆柏粉、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏(粉)、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1為原料，經配制而成。
[0007]本發明采用上述技術方案所設計的蛹蟲草生產方法，通過人工進行蟲草的繁殖和培育，迎合了市場的需要，通過人工馴化，工廠化生產，為這一名貴中藥材的開發利用開辟了廣闊前景，對廣大生產者帶來較高的經濟效益。
【附圖說明】
[0008]圖1表示本發明蛹蟲草生產方法的流程示意圖。
【具體實施方式】
[0009]下面結合附圖對本發明蛹蟲草生產方法作具體說明。
[0010]本發明蛹蟲草生產方法用馬鈴薯、玉米粉、蠶蛹粉、大豆粉、豆柏粉、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏(粉)、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素氏等為原料，經配制后做為北蟲草的營養基質。其中，玉米粉、蠶蛹粉、大豆粉、豆柏粉為市售產品，要求無結塊無變質；馬玲薯出芽變綠的不能使用；蛋白胨、酵母膏(粉)為生化試劑；葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂為化學純以上級試劑；瓊脂、維生素B1為食品級以上產品；水為自來水等可飲用水。
[0011]本發明蛹蟲草生產方法使用的培養容器為:
1.固體母種生產容器，使用玻璃試管和膠塞，試管規格為18X 180mm或20X 200mm，試管塞一般采用膠塞，保存時間短直接用于液體生產種的可以使用棉塞，不能使用脫脂棉做試管塞。
[0012]2.液體生產種生產容器，使用250ml、500ml玻璃輸液瓶，用聚丙烯塑料薄膜和乳膠圈封口。
[0013]參見圖1，本發明蛹蟲草生產方法包括以下方法:
培養基配制一分裝一滅菌冷卻一接種一培養一檢查一成品，其中:
培養基配制，分固體母種培養基和液體生產種培養基；
固體母種培養基配方為:
(1).馬鈴薯200.0g,葡萄糖20.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，維生素B1 10.0mg,瓊脂 20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
⑵.葡萄糖100.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏1.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，瓊脂20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
液體生產種培養基配方為:
(1).馬鈴薯200.0g,蠶蛹粉10.0g,葡萄糖20.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，維生素 B1 50 mg,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
⑵.葡萄糖100.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏1.0g,磷酸二氫鉀3.0g,硫酸鎂1.5g，瓊脂20.0g,水 1000ml，pH 值 6.0 ?7.0 ;
分裝，對于固體母種培養基，按配方稱好各種原料，將馬鈴薯洗凈去皮去芽眼，稱取200g,切成3?5mm薄片,加水1000ml,文火煮沸20?30分鐘,用4層紗布過濾,濾液放回鍋內，加入瓊脂充分溶化，再依次加入其它成分，攪拌溶解后，加開水補足至100ml，趁熱分裝試管，裝量為試管的1/4?1/5，塞入膠塞；
對于液體生產種培養基，按配方稱好各種原