本發明屬于多肉植物栽培技術領域,具體涉及一種蘆薈的組培快繁方法。
背景技術:
多肉植物(succulent)這一概念由瑞士植物學家瓊·鮑漢提出,最早主要指具有肥厚多汁的莖、根或葉片的一類植物,園藝上一般還稱為多肉花卉。多肉植物品種多樣,管理粗放,抗逆性強,加之色彩豐富,具有一定的空氣凈化功能,是深受廣大消費者喜愛的景觀植物之一。近年來由于多肉植物需求量增加與其繁殖量小的矛盾日益凸顯,因此,高效大量的繁殖是解決上述問題的重要途徑。
蘆薈(aloeveral.)為百合科(liliaceae)蘆薈屬多年生常綠多肉質草本植物,含有許多對人體有益的物質,尤其對各種灼傷、燙傷、曬傷及皮膚病有明顯療效,并具有較高的觀賞價值,是集藥用、食用、美容及觀賞等于一身的熱帶植物,是一種很有開發應用前景的經濟作物。蘆薈植株要生長數年后才開花結實,加之雌雄花開放時間不一致,故種子很少。蘆薈種子很細小,存放一年發芽率即降低,一般是采后及時播種。但是,用種子育苗手續繁雜,生產上多用插枝法或分株法繁殖,這些方法繁殖速度很慢,而且容易積累病菌,影響生長,甚至造成退化。利用組織培養技術,通過試管繁殖可達到復壯、快繁的目的,但是如果提高可重復性和繁殖效率,需要進一步研究。
技術實現要素:
本發明的目的是解決現有組培方法可重復性低、繁殖效率差的技術問題,提供一種蘆薈的組培快繁方法。
一種蘆薈的組培快繁方法,包括以下步驟:
步驟1,外植體的選擇與消毒:取蘆薈頂芽,用清水洗凈后進行消毒滅菌處理;
步驟2,愈傷組織培養:將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導培養基上進行培養形成愈傷組織,繼續培養,形成叢生苗;
步驟3,分化培養:將步驟2所得叢生苗接種到分化培養基上進行培養形成叢苗;
步驟4,生根培養:將步驟3所得叢苗接種到生根培養基上進行培養完成生根形成幼苗;
步驟5,移苗移栽:將步驟4所得幼苗移栽,即可;
所述愈傷組織誘導培養基是由ms、0.3-0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.04-0.12mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述分化培養基是由ms、0.3-0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08-0.2mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述生根培養基是由ms、0.2-0.5mg/l吲哚丁酸、0.01-0.03wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。
優選地,步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min,最后用無菌水沖洗。
優選地,步驟2中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
優選地,步驟3中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
優選地,步驟4中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
優選地,步驟5中移栽采用的基質是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成,泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1-2:1-2:1-2:1-2。
采用本發明的組培快繁方法,可大量快繁蘆薈,實現產業化生產。
具體實施方式
實施例1
一種蘆薈的組培快繁方法,包括以下步驟:
步驟1,外植體的選擇與消毒:取蘆薈頂芽,用清水洗凈后進行消毒滅菌處理;
步驟2,愈傷組織培養:將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導培養基上進行培養形成愈傷組織,繼續培養,形成叢生苗;
步驟3,分化培養:將步驟2所得叢生苗接種到分化培養基上進行培養形成叢苗;
步驟4,生根培養:將步驟3所得叢苗接種到生根培養基上進行培養完成生根形成幼苗;
步驟5,移苗移栽:將步驟4所得幼苗移栽,即可;
所述愈傷組織誘導培養基是由ms、0.3mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.04mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述分化培養基是由ms、0.3mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述生根培養基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.01wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。
其中,步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min,最后用無菌水沖洗。
步驟2中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟3中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟4中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟5中移栽采用的基質是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成,泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1:1:1:1。
采用上述方法的成活率在63%。
實施例2
一種蘆薈的組培快繁方法,包括以下步驟:
步驟1,外植體的選擇與消毒:取蘆薈頂芽,用清水洗凈后進行消毒滅菌處理;
步驟2,愈傷組織培養:將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導培養基上進行培養形成愈傷組織,繼續培養,形成叢生苗;
步驟3,分化培養:將步驟2所得叢生苗接種到分化培養基上進行培養形成叢苗;
步驟4,生根培養:將步驟3所得叢苗接種到生根培養基上進行培養完成生根形成幼苗;
步驟5,移苗移栽:將步驟4所得幼苗移栽,即可;
所述愈傷組織誘導培養基是由ms、0.5mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述分化培養基是由ms、0.6mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.13mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述生根培養基是由ms、0.4mg/l吲哚丁酸、0.02wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。
其中,步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min,最后用無菌水沖洗。
步驟2中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟3中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟4中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟5中移栽采用的基質是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成,泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1:2:2:1。
采用上述方法的成活率在68%。
實施例3
一種蘆薈的組培快繁方法,包括以下步驟:
步驟1,外植體的選擇與消毒:取蘆薈頂芽,用清水洗凈后進行消毒滅菌處理;
步驟2,愈傷組織培養:將步驟1所得頂芽接種到愈傷組織誘導培養基上進行培養形成愈傷組織,繼續培養,形成叢生苗;
步驟3,分化培養:將步驟2所得叢生苗接種到分化培養基上進行培養形成叢苗;
步驟4,生根培養:將步驟3所得叢苗接種到生根培養基上進行培養完成生根形成幼苗;
步驟5,移苗移栽:將步驟4所得幼苗移栽,即可;
所述愈傷組織誘導培養基是由ms、0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.12mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述分化培養基是由ms、0.9mg/l6-芐氨基腺嘌呤、0.2mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成;
所述生根培養基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.03wt.%水楊酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%瓊脂組成。
其中,步驟1中消毒滅菌處理是將蘆薈頂芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-5min,最后用無菌水沖洗。
步驟2中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟3中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟4中培養條件為溫度25±2℃、光照強度1000-1200lux、光照時間為12-16h/d、相對濕度50-60%。
步驟5中移栽采用的基質是由泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末組成,泥炭土、蛭石、腐殖土、鋸末的重量比為1-2:1-2:1-2:1-2。
采用上述方法的成活率在66%。