本發明屬于林木快速繁殖技術領域，涉及一種林木組培苗溫室煉苗馴化的簡易高效方法。
背景技術：
林木組培育苗是在無菌條件下，人為創造適合林木生長發育所需營養和環境條件，培養木本植物的組織或器官，使之成為一獨立植株。林木組培育苗的方式尤其適用于繁殖珍稀樹種或母本性狀優良的園藝品種，又因其可獲得脫毒種苗，可用于種質資源的保存和高品質脫毒種苗的生產，對促進林木植物的良種選育有重要的意義。林木組織培養在脫毒苗培育和工廠化快速育苗方面將有廣泛的應用。
許多林木植物現已成功建立了組培快繁體系，但林木植物有生長周期長的特點，在組培育苗中仍存在一些難題，如培養過程中褐化、玻璃化、污染及生根困難的問題，煉苗馴化及移栽成活率低，組培成本過高等。這些因素制約了林木組培育苗生產中實現規模化、工業化。
針對林木組培苗煉苗及移栽的研究在不斷深入，煉苗馴化方面，首先將已生根組培苗放置在培養室或溫室開蓋煉苗1～7d，使組培苗逐漸適應外界有菌環境；然后在不傷根的前提下用清水清洗根部；將組培苗栽到裝有基質的容器中，基質常為草炭、珍珠巖、蛭石、園土、河沙等中的幾種按一定比例混合均勻，并用多菌靈、代森錳鋅、百菌清或高錳酸鉀等提前殺菌消毒，根據移栽組培苗大小，容器常用不同大小的穴盤、營養缽和雙色盆等；將移栽至容器中的組培苗放置在智能溫室或塑料拱棚內煉苗馴化，根據不同的林木種類，控制適宜的溫濕度和光照條件，溫度多控制在20-30℃之間，濕度范圍一般為50-80％，自然光條件下遮陰處理；移栽馴化幾十天至幾個月后，即可達到定植或銷售要求。目前煉苗馴化中存在的問題有:(1)為保證成活率，瓶內煉苗時間過長，影響成苗效率；(2)環境條件控制繁瑣，成本過高。移栽煉苗的組培苗需要在智能溫室或拱棚等設施內進行，溫度、水分、光照等的控制必須精細，否則容易爛根，成活率下降。
技術實現要素：
為了解決現有技術不足，本發明提供了一種實現林木組培苗溫室內簡易高效的煉苗馴化方法。包含以下步驟：
(1)煉苗溫室準備：選擇常規的溫、濕度易控制的玻璃溫室，有內、外遮陽網，苗床整理，苗床及周圍環境噴灑300-500倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選植株健壯，且生根整齊一致，達到出苗標準的組培苗，將該組培苗所在組培瓶移至煉苗溫室苗床上，光照強度控制在3000-5000lx范圍內，溫度一般為18-30℃，濕度60-80％，煉苗1-3d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗4-6d；
將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，這樣可以穩定組培苗煉苗環境的溫濕度，使之前處在恒溫恒濕無菌培養環境下的組培苗逐步適應外界環境，提高煉苗成功率；
(3)栽培基質與容器準備：選擇常規的草炭土和珍珠巖作為栽培基質，草炭和珍珠巖體積比為1:1～3:2，根據組培苗大小選擇合適的穴盤，一般為15孔、21孔、32孔、50孔穴盤，填裝基質，抹平，用800-1000倍多菌靈溶液噴灑消毒，根據穴盤大小選擇蝴蝶蘭專用白色透明營養缽，用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒，規格一般為1.5寸～2.5寸；
蝴蝶蘭專用白色透明營養缽生產上已規模化應用，規格齊全，容易獲得，并且可以回收利用；
(4)組培苗移栽：將步驟(2)獲得的組培苗用鑷子取出，在不傷根的前提下用清水將培養基沖洗干凈，將組培苗根部放入1000倍多菌靈溶液中浸泡2min，取出稍微攤晾后定植于步驟(3)處理后的穴盤中，定植時根系舒展，將基質壓實，壓實后基質距穴盤上沿約1-2cm，植株根不露出，基部露出0.5-1cm，用噴淋方式澆透水，將相應大小的白色透明營養缽倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：溫室內環境濕度管理參考現有技術，一般在60-80％范圍內，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水，營養缽底部有透水小孔，倒扣在穴盤上維持基質與環境濕度的同時，使小環境中的濕度不至于過大，造成爛根，而且不至于形成水霧而影響光照；
光照管理：移栽后前7-15d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在5000-8000lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：根據所移栽的林木種類不同，溫室內溫度一般控制在18-30℃之間；
(6)移栽后馴化時間一般為25-45d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分管理改為定期噴水，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求。
本申請中所用的多菌靈溶液均由有效成分為50％的多菌靈可濕性粉劑配制而成，如1000倍多菌靈溶液是由1g有效成分為50％的多菌靈可濕性粉劑配制而成的1000g多菌靈溶液；
本發明提供了一種簡易高效的林木組培苗溫室煉苗馴化方法，具有以下優點：
(1)本發明煉苗前對苗床及周圍環境用高濃度多菌靈殺菌，與現有技術相比，降低了組培苗感菌的幾率，提高苗木的成活率和苗木質量；
(2)本發明用蝴蝶蘭生產用白色透明營養缽與相應大小穴盤形成較均一穩定的馴化環境，與現有技術相比，本發明更加簡單易行，且穴盤和營養缽可回收利用，大大降低了生產成本，可規模化推廣；
(3)本發明所述煉苗前、煉苗中和煉苗后的措施綜合效果，可縮減林木組培苗溫室內移栽后煉苗馴化時間至少1個月時間，煉苗成活率提高5-15個百分點，人工及物料成本平均降低30％左右，組培苗生長量較常規煉苗方法提高30-50％，植株生長健壯。
附圖說明
圖1為本發明所述蝴蝶蘭專用白色透明營養缽使用示意圖。
附圖標記
圖中1為營養缽，2為穴盤。
具體實施方式
以下實施例進一步說明本發明的具體實施過程，但不以任何方式限制本發明。
實施例1黑果腺肋花秋組培苗溫室煉苗馴化
(1)煉苗溫室準備：地點選擇公司花卉種植玻璃連棟溫室，外遮陽網折光率為75％，內遮陽網折光率為45％，整理苗床，苗床及周圍噴灑300倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選生根整齊一致、生長健壯的黑果腺肋花秋組培苗，將該部分苗所在組培瓶整齊擺放至連棟溫室苗床上，開啟內外遮陽網，并在苗床上搭架蓋一層遮陽網，使光照強度控制在3000-4000lx范圍內，溫度范圍控制在24-28℃，濕度75％左右，煉苗3d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗4d；
(3)栽培基質與容器準備：將草炭土和珍珠巖均勻混合作為栽培基質，草炭和珍珠巖體積比v草炭：v珍珠巖＝1:1，黑果腺肋花秋組培苗平均高度約5cm，選用21孔穴盤(3×7，)，填裝基質，抹平，用1000倍多菌靈溶液噴灑消毒，選擇1.5寸蝴蝶蘭專用白色透明營養缽(口徑*高*底徑＝4.8*4.8*3，回收利用的)，用1000倍多菌靈溶液消毒；
(4)組培苗移栽：將將步驟(2)獲得的組培苗用鑷子取出，在不傷根的前提下用清水將培養基沖洗干凈，將組培苗根部放入1000倍多菌靈溶液中浸泡2min，取出稍微攤晾后定植于穴盤2當中，注意根系舒展，將基質壓實，用噴淋方式澆透水，植株基部露出基質約0.5cm，基質距穴盤上沿約1cm，將1.5寸白色透明營養缽1倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：控制溫室內環境濕度在75％左右，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水；
光照管理：移栽后前15d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在5000-6000lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：溫室內溫度控制在24-28℃之間；
(6)黑果腺肋花秋組培苗移栽后馴化時間為45d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分管理改為定期噴水，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求；
(7)黑果腺肋花秋組培苗經本發明煉苗馴化后成活率高達97％，比常規煉苗成活率提高約10％(高曄華等，.黑果腺肋花楸組培苗生根培養及馴化的研究，北方園藝2013(09)：105-108)，煉苗后地上部分生長量比對比試驗(未用白色透明營養缽倒扣，水分管理改為定期噴水，其他控制保持一致)提高約50％。
實施例2黑果枸杞組培苗溫室煉苗馴化
(1)煉苗溫室準備：地點選擇同樣在實施例1所述玻璃連棟溫室，苗床及周圍噴灑400倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選生根至少2條且整齊一致的黑果枸杞組培苗，將該部分苗所在組培瓶整齊擺放至連棟溫室苗床上，開啟內外遮陽網，并在苗床上搭架蓋一層遮陽網，使光照強度控制在,4000-5000lx范圍內，溫度范圍控制在18-24℃，濕度約70％，煉苗2d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗5d；
(3)栽培基質與容器準備：將草炭土和珍珠巖均勻混合作為栽培基質，草炭和珍珠巖體積比v草炭：v珍珠巖＝5:4，黑果枸杞組培苗平均高度約7cm，選用21(3×7)孔穴盤，填裝基質，抹平，用1000倍多菌靈溶液噴灑消毒，選擇1.8寸蝴蝶蘭專用白色透明營養缽(口徑*高*底徑＝4.8*4.8*3),用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒；
(4)組培苗移栽：將組培苗用鑷子取出，用清水將培養基沖洗干凈，注意保護組培苗根部不受傷害，將組培苗根部放入1000倍多菌靈溶液中浸泡2min，取出稍微攤晾后定植于穴盤2當中，注意根系舒展，將基質壓實，用噴淋方式澆透水，植株基部露出基質約1cm，基質距穴盤上沿約1cm，將1.8寸白色透明營養缽1倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：控制溫室內環境濕度在70％左右，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水；
光照管理：移栽后前10d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在7000-8000lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：溫室內溫度控制在18-24℃之間；
(6)黑果枸杞組培苗移栽后馴化35d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分、溫度、光照管理參考常規溫室管理技術，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求；
(7)黑果枸杞組培苗經本發明煉苗馴化后成活率達到100％，比對比試驗(未用白色透明營養缽倒扣，水分管理改為定期噴水，其他控制保持一致)提高約15％。煉苗后地上部分生長量比對比試驗增加約30％。
實施例3接骨木組培苗溫室煉苗馴化
(1)煉苗溫室準備：地點選擇在實施例1、2所述玻璃連棟溫室，苗床及周圍噴灑500倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選生長健壯、生根整齊一致的接骨木組培苗，將該部分苗所在組培瓶整齊擺放至連棟溫室苗床上，開啟內外遮陽網，并在苗床上搭架蓋一層遮陽網，使光照強度控制在,3500-4500lx范圍內，溫度范圍控制在25-30℃，濕度60-70％，煉苗1d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗6d；
(3)栽培基質與容器準備：將草炭土和珍珠巖均勻混合作為栽培基質，草炭和珍珠巖體積比v草炭：v珍珠巖＝3:2，接骨木組培苗平均高度達到10cm，選用15(3×5)孔穴盤，填裝基質，抹平，用1000倍多菌靈溶液噴灑消毒，選擇2.5寸蝴蝶蘭專用白色透明營養缽(口徑*高*底徑＝7.5*8*5),用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒；
(4)組培苗移栽：將組培苗用鑷子取出，用清水將培養基沖洗干凈，注意保護組培苗根部不受傷害，將組培苗根部用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒2min，取出稍微攤晾后定植于穴盤2當中，注意根系舒展，將基質壓實，用噴淋方式澆透水，植株基部露出基質約0.5cm，基質距穴盤上沿約2cm，將2.5寸白色透明營養缽1倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：控制溫室內環境濕度在60-70％范圍內，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水；
光照管理：移栽后前7d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在6500-7500lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：溫室內溫度控制在25-30℃之間；
(6)接骨木組培苗移栽后馴化25d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分、溫度、光照管理參考常規溫室管理技術，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求；
(7)接骨木組培苗經本發明煉苗馴化后成活率達到100％，煉苗后地上部分生長量比對比試驗(未用白色透明營養缽倒扣，水分管理改為定期噴水，其他控制保持一致)提高約40％。
實施例4金葉榆組培苗溫室煉苗馴化
(1)煉苗溫室準備：地點同前述實施例，苗床及周圍噴灑300倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選生長健壯、生根整齊一致的金葉榆組培苗，將該部分苗所在組培瓶整齊擺放至連棟溫室苗床上，開啟內外遮陽網，并在苗床上搭架蓋一層遮陽網，使光照強度控制在,3000-3500lx范圍內，溫度范圍控制在22-28℃，濕度約75％，煉苗2d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗5d；
(3)栽培基質與容器準備：將草炭土和珍珠巖均勻混合作為栽培基質，草炭和珍珠巖體積比v草炭：v珍珠巖＝1:1，金葉榆組培苗平均高度達到7cm，穴盤、營養杯選用及消毒處理同實施例2黑果枸杞組培苗煉苗馴化；
(4)組培苗移栽：將組培苗用鑷子取出，用清水將培養基沖洗干凈，注意保護組培苗根部不受傷害，將組培苗根部用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒5min，取出稍微攤晾后定植于穴盤2當中，注意根系舒展，將基質壓實，用噴淋方式澆透水，澆完水后基質距穴盤上沿約2cm，植株基部稍稍露出約1cm，將1.8寸白色透明營養缽1倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：控制溫室內環境濕度在75％左右，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水；
光照管理：移栽后前15d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在5500-6500lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：溫室內溫度控制在22-28℃之間；
(6)金葉榆組培苗移栽后馴化35d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分、溫度、光照管理參考常規溫室管理技術，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求；
(7)金葉榆組培苗經本發明煉苗馴化后成活率達到98％，煉苗后地上部分生長量比對比試驗(未用白色透明營養缽倒扣，水分管理改為定期噴水，其他控制保持一致)提高約20％，成活率提高約15％。
實施例5垂絲海棠組培苗溫室煉苗馴化
(1)煉苗溫室準備：地點同前述實施例，苗床及周圍噴灑300倍多菌靈溶液殺菌；
(2)組培苗出瓶前煉苗管理：挑選生長健壯、生根整齊一致的垂絲海棠組培苗，將該部分苗所在組培瓶整齊擺放至連棟溫室苗床上，開啟內外遮陽網，并在苗床上搭架蓋一層遮陽網，使光照強度控制在,4500-5000lx范圍內，溫度范圍控制在24-30℃，濕度75-80％，煉苗3d后，將組培瓶瓶蓋擰開但不拿下，繼續煉苗4d；
(3)栽培基質與容器準備：栽培基質草炭和珍珠巖體積比v草炭：v珍珠巖＝3:2，垂絲海棠組培苗平均高度約為5cm，穴盤、營養杯選用及消毒處理同實施例1黑果腺肋花秋組培苗煉苗馴化；
(4)組培苗移栽：將組培苗用鑷子取出，用清水將培養基沖洗干凈，注意保護組培苗根部不受傷害，將組培苗根部用1000倍多菌靈溶液浸泡消毒5min，取出稍微攤晾后定植于穴盤2當中，注意根系舒展，將基質壓實，用噴淋方式澆透水，澆完水后基質距穴盤上沿約1.5cm，植株基部稍稍露出約0.5cm，將1.5寸白色透明營養缽1倒扣在定植后的穴盤上；
(5)移栽后馴化管理：
水分管理：控制溫室內環境濕度在80％左右，穴盤與倒扣的營養杯之間形成相對穩定的小環境，馴化期間無需噴水；
光照管理：移栽后前10d，通過溫室內外遮陽網的使用控制光強在7000-8000lx之間，之后打開外遮陽網馴化；
溫度管理：溫室內溫度控制在24-30℃之間；
(6)垂絲海棠組培苗移栽后馴化45d，之后將倒扣的透明營養缽撤去，水分、溫度、光照管理參考常規溫室管理技術，即可達到換盆生產營養缽苗或直接大田移栽的要求；
(7)垂絲海棠組培苗經本發明煉苗馴化后成活率達到95％，較常規方法提高5％左右(張玲玲，垂絲海棠組織培養技術體系，西北農林科技大學，碩士論文，2012)，煉苗后地上部分生長量比對比試驗(未用白色透明營養缽倒扣，水分管理改為定期噴水，其他控制保持一致)提高約20％，成活率提高約10％。