本發(fā)明涉及一種殺菌組合物，尤其是一種含有picarbutrazox的殺菌組合物及其防治農(nóng)作物病害的應(yīng)用，屬于農(nóng)用殺菌劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
馬鈴薯晚疫病(Potato Late Blight)由致病疫霉引起，導(dǎo)致馬鈴薯莖葉死亡和塊莖腐爛的一種毀滅性卵菌病害。主要癥狀：葉片染病先在葉尖或葉緣生水浸狀綠褐色斑點(diǎn)，病斑周圍具淺綠色暈圈，濕度大時(shí)病斑迅速擴(kuò)大，呈褐色，并產(chǎn)生一圈白霉，即孢囊梗和孢子囊，尤以葉背最為明顯；干燥時(shí)病斑變褐干枯，質(zhì)脆易裂，不見白霉，且擴(kuò)展速度減慢。莖部或葉柄染病現(xiàn)褐色條斑。發(fā)病嚴(yán)重的葉片萎垂、卷縮，終致全株黑腐，全田一片枯焦，散發(fā)出腐敗氣味。塊莖染病初生褐色或紫褐色大塊病斑，稍凹陷，病部皮下薯肉亦呈褐色，慢慢向四周擴(kuò)大或爛掉。
馬鈴薯晚疫病在多雨年份，空氣潮濕或溫暖多霧條件下發(fā)病重。種植感病品種，植株又處于開花階段，只要出現(xiàn)白天22℃左右，相對(duì)濕度高于95％持續(xù)8小時(shí)以上，夜間10～13℃，葉上有水滴持續(xù)11～14小時(shí)的高濕條件，本病即可發(fā)生，發(fā)病后10～14天病害蔓延全田或引起大流行。
馬鈴薯晚疫病在世界各地馬鈴薯產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，流行年一般減產(chǎn)30％。19世紀(jì)40年代愛爾蘭馬鈴薯因晚疫病大面積死亡，減產(chǎn)一半，使100多萬人餓死，200萬人移居海外。
黃瓜霜霉病，俗稱“跑馬干”、“干葉子”，苗期成株都可受害，主要為害葉片和莖，卷須及花梗受害較少。黃瓜霜霉病病原為鞭毛菌亞門假霜霉屬古巴假霜霉菌(Pseudoperonospora cubensis)，該病菌的孢子囊靠氣流和雨水傳播。黃瓜霜霉病是黃瓜栽培中發(fā)生最普遍、為害最嚴(yán)重的病害。病情來勢猛，發(fā)病重，傳播快，如不及時(shí)防治，將給黃瓜造成毀滅性的損失。
在馬鈴薯晚疫病和黃瓜霜霉病的防治上，主要依賴甲霜靈、烯酰嗎啉和一些保護(hù)性藥劑。這些藥劑因?yàn)殚L期使用已產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，防治效果降低。同時(shí)藥劑的大量使用增加了農(nóng)藥殘留，危害食品安全，加重了環(huán)境污染。
picarbutrazox，為新型肟醚類殺菌劑，分子式:C20H23N7O3，分子量409.4。該藥劑主要對(duì)卵菌有效。該殺菌劑結(jié)構(gòu)特殊，與其它殺菌劑無交互抗性。
將picarbutrazox與其它結(jié)構(gòu)類型的農(nóng)藥有效成分組合應(yīng)用，有增效作用的組合物不僅能夠明顯提高實(shí)際防效，降低用藥量和成本，還有助于避免病菌抗性的發(fā)生和延緩抗藥性的產(chǎn)生速度，可以解決目前農(nóng)藥單劑應(yīng)用過程中的抗性和成本等問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種抗性風(fēng)險(xiǎn)小、成本低、藥效好、持效期長的殺菌組合物。
發(fā)明人通過大量的室內(nèi)生測和田間藥效試驗(yàn)，意外的發(fā)現(xiàn)picarbutrazox和氟吡菌胺以一定的比例混配后，對(duì)馬鈴薯晚疫病菌、黃瓜霜霉病菌等病害有顯著的增效作用。
所述氟吡菌胺(fluopicolide)，分子式C14H8Cl3F3N2O，化學(xué)名稱2,6-二氯-N-[(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基)甲基]苯甲酰胺，為吡啶酰胺類殺菌劑，主要用于防治卵菌綱病害如霜霉病、疫病等。該藥保護(hù)性好、滲透性強(qiáng)，能從植物葉基向葉尖方向傳導(dǎo)，對(duì)卵菌綱病害有很好的防治效果。
發(fā)明人在上述發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過對(duì)組合物進(jìn)行聯(lián)合作用的定量分析，形成了本發(fā)明的技術(shù)方案，即：一種含有picarbutrazox的殺菌組合物，其有效成分picarbutrazox與氟吡菌胺的質(zhì)量比為50︰1～1︰50，優(yōu)選質(zhì)量比為30︰1～1︰30，更優(yōu)選質(zhì)量比為15︰1～1︰15。組合物中活性組分的總質(zhì)量百分含量為5％～80％。
本發(fā)明組合物可以用已知的方法制備成適合農(nóng)業(yè)使用的任意一種劑型，較好的劑型有懸浮劑、可濕性粉劑或水分散粒劑等。這些制劑可由通用的方法制備，例如，將活性物質(zhì)與液體溶劑和/或固體載體混合，同時(shí)加入表面活性劑如乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑，還可以加入粘合劑、消泡劑、氧化劑、染料等。
對(duì)于懸浮劑，可使用的分散劑如聚羧酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽如木質(zhì)素磺酸鈉鹽、烷基萘磺酸鹽中的一種或多種；乳化劑如農(nóng)乳700#(通用名烷基酚甲醛樹脂聚氧乙烯醚)、二丁基萘磺酸鈉甲醛縮合物、農(nóng)乳2201#、斯盤-60#(通用名山梨醇酐單硬脂酸脂)、農(nóng)乳1601#(通用名三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物)、TERSPERSE 4894(2500)中的一種或多種；潤濕劑如烷基酚聚氧乙烯基醚甲醛縮合物磷酸鹽、茶枯粉、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸鹽、烷基磺酸鹽、萘磺酸鹽中的一種或多種；增稠劑如黃原膠、聚乙烯醇、膨潤土中的一種或多種；防腐劑如甲醛、苯甲酸、苯甲酸鈉中的一種或多種；消泡劑如有機(jī)硅類消泡劑；防凍劑如乙二醇、丙二醇、甘油、尿素、無機(jī)鹽類如氯化鈉中的一種或多種。
對(duì)于水分散粒劑，可使用的分散劑如聚羧酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽、NNO4、烷基萘磺酸鹽中的一種或多種；潤濕劑如壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯醇、烷基硫酸鹽、烷基磺酸鹽、萘磺酸鹽中一種或多種；崩解劑如硫酸銨、尿素、蔗糖、葡萄糖中一種或多種；粘結(jié)劑如硅藻土、玉米淀粉、PVA、羧甲基(乙基)纖維素中的一種或多種；填料如硅藻土、碳酸氫鈣、高嶺土、白炭黑、滑石粉、陶土中的一種或多種。
對(duì)于可濕性粉劑，可使用的分散劑如聚羧酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽、烷基萘磺酸鹽中一種或多種；潤濕劑如烷基硫酸鹽、烷基磺酸鹽、萘磺酸鹽中一種或多種；填料如硫酸銨、尿素、蔗糖、葡萄糖、硅藻土、高嶺土、白炭黑、輕鈣、滑石粉、凹凸棒土、陶土中的一種或多種。
本發(fā)明組合物可以呈成品制劑形式提供，即組合物中各物質(zhì)已經(jīng)混合；組合物的成分也可以以單劑制劑提供，使用前在桶(罐)中按比例混合。本發(fā)明的濃縮物通常與水混合得到所需要活性物質(zhì)的濃度。
本發(fā)明的組合物可用于防治由子囊菌、卵菌等引起的重要病害，尤其適合于防治晚疫病、霜霉病。本發(fā)明的組合物施用場所為農(nóng)田、果園等。
本發(fā)明的組合物也可以與其它具有除草、殺蟲或殺菌性能的化合物特別是保護(hù)性殺菌劑混合使用，也可以與殺線蟲劑、防護(hù)劑、生長調(diào)節(jié)劑、植物營養(yǎng)素或土壤調(diào)節(jié)劑混合使用。
本發(fā)明還包括一種現(xiàn)場殺滅真菌的方法，在作物和/或果實(shí)感病之前或之后，向作物和/或果實(shí)及其生長或儲(chǔ)存的場所施用本發(fā)明的組合物?？梢园雌胀ǖ姆椒ㄊ┯?，如澆注、噴射、噴霧、撒粉、散布。本發(fā)明的施用量隨天氣條件或作物狀態(tài)變化。保護(hù)作用的持續(xù)時(shí)間通常與組合物中單個(gè)化合物的含量有關(guān)，與外界因素相關(guān)，例如氣候，但通過使用適當(dāng)?shù)膭┬涂梢詼p緩氣候的影響。
本發(fā)明的組合物具備以下優(yōu)點(diǎn)：一是組合物增效作用明顯，藥效大幅提高；二是組合物藥效提高，田間用量下降，降低了生產(chǎn)和使用成本，減少農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染；三是組合物由不同作用機(jī)制的有效成分組成，作用位點(diǎn)增加，有利于克服和延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生。
具體實(shí)施方式
不同的農(nóng)藥有效成分混合后，通常表現(xiàn)出三種作用類型：相加作用、增效作用和拮抗作用。但具體為何種作用，無法預(yù)測，只有通過大量試驗(yàn)才能知道。復(fù)配增效很好的配方，由于明顯提高了實(shí)際防治效果，降低了農(nóng)藥的使用量，從而大大地延緩了病菌抗藥性的產(chǎn)生速度，是科學(xué)防治病害的重要手段。
發(fā)明人進(jìn)行了大量的室內(nèi)生物測定試驗(yàn)和田間藥效試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)picarbutrazox與氟吡菌胺組合對(duì)馬鈴薯晚疫病菌和黃瓜霜霉病菌等具有顯著的協(xié)同增效作用，而不僅僅是兩種藥劑的簡單相加(詳見生物測定實(shí)例1)。
生物測定實(shí)施例1：picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)的室內(nèi)毒力測定試驗(yàn)
試驗(yàn)采用菌絲生長速率法。取5ml配好的實(shí)驗(yàn)藥液加入到裝有45ml熱培養(yǎng)基(黑麥培養(yǎng)基，45-50℃)的錐形瓶中，搖勻后，迅速倒入直徑90mm玻璃培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿倒入帶藥培養(yǎng)基12ml，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)，水平靜置，冷卻后即成平板。用直徑5mm打孔器從培養(yǎng)5d的供試菌邊緣切取菌餅，用挑針將帶有菌絲的一面接到帶毒培養(yǎng)基上，所有操作均在超凈工作臺(tái)進(jìn)行無菌操作。處理后將平板放在25℃的恒溫?zé)o菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，10d后采用十字交叉法分別測量各處理的菌落直徑，計(jì)算各處理菌落直徑的平均值、菌落直徑的平均凈生長量和菌絲生長抑制率。
凈生長量(mm)＝測量菌落直徑－5
菌絲生長抑制率(％)＝[(對(duì)照組凈生長量－處理組凈生長量)/對(duì)照組凈生長量]×100
將菌絲生長抑制率換算成幾率值(y)，藥液濃度(μg/ml)轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)值(x)，以最小二乘法計(jì)算毒力方程和抑制中濃度EC50，依孫云沛法計(jì)算藥劑的毒力指數(shù)及共毒系數(shù)(CTC)。
實(shí)測毒力指數(shù)(ATI)＝(標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/供試藥劑EC50)×100
理論毒力指數(shù)(TTI)＝A藥劑毒力指數(shù)×混劑中A的百分含量+B藥劑毒力指數(shù)×混劑中B的百分含量
共毒系數(shù)(CTC)＝[混劑實(shí)測毒力指數(shù)(ATI)/混劑理論毒力指數(shù)(TTI)]×100。
CTC≤80為拮抗作用，80＜CTC＜120為相加作用，CTC≥120為增效作用。
從表1結(jié)果可知，picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配，在配比為50:1～1:50之間時(shí)，共毒系數(shù)都在120以上，對(duì)馬鈴薯晚疫病菌具有增效作用，尤其在30:1～1:30之間時(shí)，共毒系數(shù)都在170以上。
表1 picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的離體試驗(yàn)結(jié)果
生物測定實(shí)施例2：picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)黃瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)的室內(nèi)毒力測定試驗(yàn)
本試驗(yàn)采用盆栽法。選取長勢一致的兩片真葉期黃瓜苗，每個(gè)處理選用5盆供試瓜苗，編號(hào)備用。用Potter噴霧塔在50PSI壓力下噴霧，每盆5mL。每個(gè)藥劑設(shè)置5個(gè)濃度梯度，以噴施等量清水的為空白對(duì)照。藥劑處理24h后噴霧接種黃瓜霜霉病菌孢子囊懸浮液，孢子囊懸浮液的配置過程如下：取采自田間的帶有霜霉病菌的黃瓜葉片，用毛筆蘸取10℃左右的蒸餾水洗下背面的孢子囊，配成濃度為3×105個(gè)/mL的孢子囊懸浮液。接種后將黃瓜苗置于人工氣候箱中(相對(duì)濕度100％，溫度15-20℃)培養(yǎng)，24h后保持溫度15-24℃、相對(duì)濕度90％左右保濕誘發(fā)，10d后調(diào)查記載發(fā)病情況，計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。
黃瓜霜霉病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):
0級(jí)：葉片無病斑；
1級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的5％以下；
3級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的6-10％；
5級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的11-25％；
7級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的26-50％；
9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的50％以上。
用最小二乘法計(jì)算抑制中濃度EC50，再依孫云沛法計(jì)算共毒系數(shù)(CTC)。
實(shí)測毒力指數(shù)(ATI)＝(標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/供試藥劑EC50)×100
理論毒力指數(shù)(TTI)＝A藥劑毒力指數(shù)×混劑中A的百分含量+B藥劑毒力指數(shù)×混劑中B的百分含量
共毒系數(shù)(CTC)＝[混劑實(shí)測毒力指數(shù)(ATI)/混劑理論毒力指數(shù)(TTI)]×100。
CTC≤80為拮抗作用，80＜CTC＜120為相加作用，CTC≥120為增效作用。
從表2結(jié)果可知，picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配，在配比為50:1～1:50之間時(shí)，共毒系數(shù)都在120以上，對(duì)黃瓜霜霉病菌具有增效作用，尤其在30:1～1:30之間時(shí)，共毒系數(shù)都在170以上。
表2 picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)黃瓜霜霉病菌的活體試驗(yàn)結(jié)果(室內(nèi))
以下用具體實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明絕非限于這些例子。以下所述僅為本發(fā)明較好的實(shí)施例，僅僅用以解釋本發(fā)明，并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
所有制劑配比中百分含量均為質(zhì)量百分比。
懸浮劑例
按配方比例，將活性成分、分散劑、潤濕劑、增稠劑、抗凍劑和水等各組分按配方的比例混合均勻，經(jīng)研磨或高速剪切后制成懸浮劑。
實(shí)施例1：31％picarbutrazox·氟吡菌胺懸浮劑
picarbutrazox 30％，氟吡菌胺1％，甲基萘磺酸鈉甲醛縮合物(分散劑)10％、十二烷基硫酸鈉(潤濕劑)3％、黃原膠(增稠劑)2％、膨潤土(增稠劑)1％、甘油(抗凍劑)5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例2：31％picarbutrazox·氟吡菌胺懸浮劑
picarbutrazox1％，氟吡菌胺30％，聚羧酸鹽(分散劑)10％、茶枯粉(潤濕劑)3％、聚乙烯醇(增稠劑)2％、膨潤土(增稠劑)1％、乙二醇(抗凍劑)5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例3:5％picarbutrazox·氟吡菌胺懸浮劑
picarbutrazox2.5％，氟吡菌胺2.5％，甲基萘磺酸鈉甲醛縮合物(分散劑)10％、十二烷基硫酸鈉(潤濕劑)3％、黃原膠(增稠劑)2％、膨潤土(增稠劑)1％、尿素(抗凍劑)5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例4：16％picarbutrazox·氟吡菌胺懸浮劑
picarbutrazox15％，氟吡菌胺1％，聚羧酸鹽(分散劑)10％、茶枯粉(潤濕劑)3％、聚乙烯醇(增稠劑)2％、膨潤土(增稠劑)1％、丙二醇(抗凍劑)5％，水補(bǔ)足至100％。
可濕性粉劑例
將農(nóng)藥活性組分、助劑、填料按比例混合經(jīng)氣流粉碎后再混合制得可濕性粉劑。主要設(shè)備：混合機(jī)、氣流粉碎機(jī)。
實(shí)施例5：80％picarbutrazox·氟吡菌胺可濕性粉劑
picarbutrazox50％，氟吡菌胺30％，十二烷基硫酸鈉(濕潤劑)2％，木質(zhì)素磺酸鈉(分散劑)3％，白碳黑10％(填料)，高嶺土補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例6：51％picarbutrazox·氟吡菌胺可濕性粉劑
picarbutrazox50％，氟吡菌胺1％，烷基硫酸鹽(濕潤劑)3％，聚羧酸鹽(分散劑)3％，白碳黑(填料)11％，膨潤土補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例7：16％picarbutrazox·氟吡菌胺可濕性粉劑
picarbutrazox1％，氟吡菌胺15％，烷基磺酸鹽(濕潤劑)3％，木質(zhì)素磺酸鈉(分散劑)3％，白碳黑(填料)11％，陶土補(bǔ)足至100％。
水分散粒劑例
按配方比例，將原藥和粉狀載體、濕潤展著劑及粘結(jié)劑等進(jìn)行混合粉碎，再加水捏合后，加入裝有一定規(guī)格篩網(wǎng)的造粒機(jī)中進(jìn)行造粒。然后再經(jīng)干燥、篩分(按篩網(wǎng)范圍)即得顆粒狀產(chǎn)品。
實(shí)施例8：51％picarbutrazox·氟吡菌胺水分散粒劑
picarbutrazox1％，氟吡菌胺50％，聚羧酸鹽(分散劑)5％，木質(zhì)素磺酸鈉(分散劑)7％，十二烷基硫酸鈉(濕潤劑)2％，硫酸銨(崩解劑)5％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例9：40％picarbutrazox·氟吡菌胺水分散粒劑
picarbutrazox20％，氟吡菌胺20％，烷基萘磺酸鈉(分散劑)5％，木質(zhì)素磺酸鈉(分散劑)7％，十二烷基硫酸鈉(濕潤劑)2％，尿素(崩解劑)5％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
田間應(yīng)用例1：picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)馬鈴薯晚疫病的田間藥效試驗(yàn)
試驗(yàn)地點(diǎn)河北張家口。選取馬鈴薯晚疫病常年發(fā)病較重的地塊。試驗(yàn)藥劑及用量見表3，每處理4個(gè)小區(qū)重復(fù)，每個(gè)小區(qū)面積20平方米。在病害發(fā)生初期進(jìn)行第一次施藥，全株均勻噴霧，噴至葉片滴水為止，以清水處理為空白對(duì)照。7天后施第二次藥。在第一次藥前和第二次藥后7天調(diào)查馬鈴薯晚疫病的發(fā)病情況。每小區(qū)采用五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查5株，每株調(diào)查所有葉片，以病斑面積占整個(gè)葉面積的百分率來分級(jí)記載。計(jì)算各處理病情指數(shù)和防治效果。
分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：
0級(jí)：無病斑；
1級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的5％以下；
3級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的6％-15％；
5級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的16％-25％；
7級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的26％-50％；
9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的50％以上。
藥效計(jì)算方法：
從表3可以看出：picarbutrazox、氟吡菌胺各單劑對(duì)馬鈴薯晚疫病的防效分別為79.3％和73.1％、，而本發(fā)明實(shí)施例殺菌組合物在防效上均有顯著提高，最低防效為88.4％，最高達(dá)到了94.1％。田間試驗(yàn)的結(jié)果充分表明，picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配后對(duì)馬鈴薯晚疫病具有顯著的協(xié)同增效作用，在有效成分用量減少的情況下，防治效果大幅提高。因此，本發(fā)明組合物具有降低成本、延緩抗性、減少施藥次數(shù)和農(nóng)藥殘留的有益作用。
表3 picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)馬鈴薯晚疫病的田間試驗(yàn)結(jié)果
田間應(yīng)用例2：picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)黃瓜霜霉病田間藥效試驗(yàn)
試驗(yàn)方法和調(diào)查方法同田間應(yīng)用例1
試驗(yàn)地點(diǎn)廣東肇慶。
從表4可以看出：picarbutrazox、氟吡菌胺各單劑對(duì)黃瓜霜霉病的防效分別為78.4％和72.7％，而本發(fā)明實(shí)施例殺菌組合物在防效上均有顯著提高，最低防效為89.9％，最高達(dá)到了94.9％。田間試驗(yàn)的結(jié)果充分表明，picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配后對(duì)黃瓜霜霉病具有顯著的協(xié)同增效作用，在有效成分用量減少的情況下，防治效果大幅提高。因此，本發(fā)明組合物具有降低成本、延緩抗性、減少施藥次數(shù)和農(nóng)藥殘留的有益作用。
表4 picarbutrazox與氟吡菌胺復(fù)配對(duì)黃瓜霜霉病的田間試驗(yàn)結(jié)果