本發明涉及一種組織培養技術,具體是一種水塔花的離體快速繁殖方法。
背景技術:
水塔花(Billbergia pyramidalis Lindl.)鳳梨科多年生常綠草本多漿植物,莖甚短。葉闊披針形,急尖,邊緣有細鋸齒,硬革質,鮮綠色,表面有厚角質層和吸收鱗片。穗狀花序直立,高出葉叢,苞片粉紅色,花冠朱紅色,花瓣外卷,邊緣帶紫色。葉片從根莖處旋疊狀叢生,基部呈蓮座狀,中心呈筒狀。多于冬春季開花。葉片革質;青翠而光澤,叢生成蓮座狀,端莊秀麗;葉基部相互抱合,使植株中心成筒狀,內可盛水而不漏,狀似水塔,故得名“水塔花”。喜溫暖、濕潤、半陰環境。不耐寒。稍耐旱,原產巴西。水塔花株叢青翠,花色艷麗,是良好的盆栽花卉。盛開的水塔花是點綴陽臺、廳室的佳品,為良好的室內室栽觀葉植物。原產美洲熱帶,附生在熱帶森林的樹上或腐殖質中。中國溫室多有栽培,尤其是南方地區。然而,水塔花傳統的育苗繁殖方法產量降低,病毒積累嚴重,品種退化,品質和產量大幅度下降,種植效益下降。組培快繁技術已在很多植物上作為經濟、高效的繁殖方法應用,周期短、繁殖系數高、成本低,并不受時間和空間的制約。
然而,矮珍珠傳統的育苗繁殖方法產量降低,病毒積累嚴重,品種退化,品質和產量大幅度下降,種植效益下降。組培快繁技術已在很多植物上作為經濟、高效的繁殖方法應用,周期短、繁殖系數高、成本低,并不受時間和空間的制約。
技術實現要素:
本發明針對現有技術的不足,滿足人工快速繁育、大面積豐產栽培的需要,提供一種水塔花的離體快速繁殖方法。
為了實現上述目的,本發明采用了以下技術方案:
一種水塔花的離體快速繁殖方法,包括如下步驟:
(1)獲取外植體并消毒
選取健壯植株新生的幼嫩枝芽,自來水洗滌枝芽表面污垢塵土,先酒精浸泡,再升汞消毒,最后無菌水沖洗干凈后得到消毒外植體,
(2)初代培養
將消毒外植體分割成0.6~1.0cm的帶芽莖段,然后接入初代培養基中培養32~36天獲得不定芽,
初代培養條件為:溫度為28±2℃,濕度為55~60%,光照時間為8~10小時/天,光照強度為1800~20001x,初代培養第1~7天,每天施加超聲場3~4小時,超聲場功率為10~15W/cm2,超聲場頻率為25~28KHz,初代培養第8~15天,每天施加超聲場4~6小時,超聲場功率為20~22W/cm2,超聲場頻率為30~35KHz;
初代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硫酸鐵的濃度調整為3.0~3.2mg/L,將硫酸鈉的濃度調整為160~180mg/L,再添加天冬氨酸6~8mg/L,添加吲哚乙酸2~3mg/L;
(3)繼代培養
將不定芽轉移至繼代培養基中培養40~45天獲得繼代培養苗,
繼代培養條件為:溫度為30±2℃,濕度為65~70%,光照時間為12~15小時/天,光照強度為3000~35001x,
繼代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硼酸的濃度調整為2.0~2.2mg/L,將氧化鉬的濃度調整為0.0003~0.0005mg/L,另外再添加維生素K1 0.5~0.8mg/L,添加吲哚乙酸1~1.2mg/L,添加萘乙酸1.2~1.5mg/L;
(4)生根培養
將繼代培養苗轉移至生根培養基中培養20~25天得到水塔花幼苗,
生根培養條件為:溫度為30±2℃,濕度為40~50%,光照時間為12~15小時/天,光照強度為5000~60001x,
生根培養基為:在B5培養基基礎上,另外再添加鉬酸銨0.01~0.02mg/L,添加赤霉素2~3mg/L,用石灰水調節pH為6.5;
(5)煉苗和移栽
生根培養結束后,打開培養瓶蓋,在自然光下進行開瓶練苗5~7天,然后將水塔花幼苗用清水多次沖洗去除殘留培養基,用質量分數3%的多菌靈浸泡根部30min后再清水清洗后移入塑料小盆中,塑料小盆放置在遮光率60%~70%的大棚中2~3周,大棚中溫度25~28℃,噴霧灑水保持濕度為75~85%,大棚煉苗一個月后移栽至定植地中。
與現有技術相比較,本發明具備的有益效果:
有效地提高水塔花的繁殖系數,為水塔花商業化生產提供充足的種苗源。與播種繁殖相比,組織培養法能有效縮短育苗周期,能夠在室內大量連續地生產,實現工廠化、專業化和規模化,提高種苗的載培成活率,提高產量和品質。
具體實施方式
下面通過實施例對本發明的技術方案作進一步闡述。
實施例1
一種水塔花的離體快速繁殖方法,包括如下步驟:
(1)獲取外植體并消毒
選取健壯植株新生的幼嫩枝芽,自來水洗滌枝芽表面污垢塵土,先酒精浸泡,再升汞消毒,最后無菌水沖洗干凈后得到消毒外植體,
(2)初代培養
將消毒外植體分割成1.0cm的帶芽莖段,然后接入初代培養基中培養36天獲得不定芽,
初代培養條件為:溫度為30℃,濕度為60%,光照時間為10小時/天,光照強度為20001x,初代培養第1~7天,每天施加超聲場4小時,超聲場功率為15W/cm2,超聲場頻率為28KHz,初代培養第8~15天,每天施加超聲場6小時,超聲場功率為22W/cm2,超聲場頻率為35KHz;
初代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硫酸鐵的濃度調整為3.2mg/L,將硫酸鈉的濃度調整為180mg/L,再添加天冬氨酸8mg/L,添加吲哚乙酸3mg/L;
(3)繼代培養
將不定芽轉移至繼代培養基中培養45天獲得繼代培養苗,
繼代培養條件為:溫度為32℃,濕度為70%,光照時間為15小時/天,光照強度為35001x,
繼代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硼酸的濃度調整為2.2mg/L,將氧化鉬的濃度調整為0.0005mg/L,另外再添加維生素K1 0.8mg/L,添加吲哚乙酸1.2mg/L,添加萘乙酸1.5mg/L;
(4)生根培養
將繼代培養苗轉移至生根培養基中培養25天得到水塔花幼苗,
生根培養條件為:溫度為32℃,濕度為50%,光照時間為15小時/天,光照強度為60001x,
生根培養基為:在B5培養基基礎上,另外再添加鉬酸銨0.02mg/L,添加赤霉素3mg/L,用石灰水調節pH為6.5;
(5)煉苗和移栽
生根培養結束后,打開培養瓶蓋,在自然光下進行開瓶練苗5~7天,然后將水塔花幼苗用清水多次沖洗去除殘留培養基,用質量分數3%的多菌靈浸泡根部30min后再清水清洗后移入塑料小盆中,塑料小盆放置在遮光率70%的大棚中3周,大棚中溫度28℃,噴霧灑水保持濕度為85%,大棚煉苗一個月后移栽至定植地中。
實施例2
一種水塔花的離體快速繁殖方法,包括如下步驟:
(1)獲取外植體并消毒
選取健壯植株新生的幼嫩枝芽,自來水洗滌枝芽表面污垢塵土,先酒精浸泡,再升汞消毒,最后無菌水沖洗干凈后得到消毒外植體,
(2)初代培養
將消毒外植體分割成0.6cm的帶芽莖段,然后接入初代培養基中培養32天獲得不定芽,
初代培養條件為:溫度為26℃,濕度為55%,光照時間為8小時/天,光照強度為18001x,初代培養第1~7天,每天施加超聲場3小時,超聲場功率為10W/cm2,超聲場頻率為25KHz,初代培養第8~15天,每天施加超聲場4小時,超聲場功率為20W/cm2,超聲場頻率為30KHz;
初代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硫酸鐵的濃度調整為3.0mg/L,將硫酸鈉的濃度調整為160mg/L,再添加天冬氨酸6mg/L,添加吲哚乙酸2mg/L;
(3)繼代培養
將不定芽轉移至繼代培養基中培養40天獲得繼代培養苗,
繼代培養條件為:溫度為28℃,濕度為65%,光照時間為12小時/天,光照強度為30001x,
繼代培養基為:在改良White培養基基礎上,先將硼酸的濃度調整為2.0mg/L,將氧化鉬的濃度調整為0.0003mg/L,另外再添加維生素K1 0.5mg/L,添加吲哚乙酸1mg/L,添加萘乙酸1.2mg/L;
(4)生根培養
將繼代培養苗轉移至生根培養基中培養20~25天得到水塔花幼苗,
生根培養條件為:溫度為28℃,濕度為40%,光照時間為12小時/天,光照強度為50001x,
生根培養基為:在B5培養基基礎上,另外再添加鉬酸銨0.01mg/L,添加赤霉素2mg/L,用石灰水調節pH為6.5;
(5)煉苗和移栽
生根培養結束后,打開培養瓶蓋,在自然光下進行開瓶練苗5~7天,然后將水塔花幼苗用清水多次沖洗去除殘留培養基,用質量分數3%的多菌靈浸泡根部30min后再清水清洗后移入塑料小盆中,塑料小盆放置在遮光率60%~70%的大棚中2~3周,大棚中溫度25~28℃,噴霧灑水保持濕度為75~85%,大棚煉苗一個月后移栽至定植地中。