熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現指印的方法
【專利摘要】本發明的目的是提供一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現指印的方法。所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種；所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有熒光藻紅蛋白的納米PEI?Fe3O4粒子與納米貴金屬粒子的結合體；所述納米PEI?Fe3O4粒子是指經過聚乙烯亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。本發明制備的熒光磁性納米金蛋熒光量子產率高，且熒光持續時間長，具有低毒性；本發明的指印顯現方法操作快速高效，可清晰顯現30天的陳舊指印且效果優于傳統試劑的顯現方法。
【專利說明】熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現指印的方法
[0001]
技術領域
[0002]本發明屬于公安刑事技術指印鑒定領域，具體涉及一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現指印的方法。
【背景技術】
[0003]指紋具有人各不同、終生不變、觸物留痕特性，有“人體身份證”和“證據之王”的美稱，對揭露、證實犯罪和識別罪犯有不可忽視的作用。人雙手手指指頭的乳突花紋上分布有汗孔，汗孔分泌的汗液常含有油脂以及其他微小物質。因此遺留在客體上的汗潛指印成分包含少量的水、少量的無機物、蛋白質、油脂等有機物。
[0004]指印顯現技術已有上百年的歷史，傳統顯現方法有502熏顯法、茚三酮法、DFO法等。隨著納米技術的飛速發展，新型納米材料應用于潛指印顯現引起了科研工作者的關注，出現了利用金屬、上轉換發光、磁性納米材料顯現指印等方法。
[0005]作為傳統顯現方法的磁粉，顆粒大小約為800目，由于顆粒具有磁性，用于潛指印刷顯時被磁粉刷吸引而不懸浮于空氣中，因此是刑科人員在現場勘驗時的首選。受此啟發，磁性粒子也開始受到關注，被納入潛指印顯現的方法試劑中。關于功能化納米磁珠的報道很多，其中一種是類似啞鈴狀的納米金功能化的納米Fe3Ck(尺寸控制4-20nm)。納米金具有特殊的穩定性、小尺寸效應等特點，使它能與含巰基、氨基的有機物如蛋白質等結合，與含苯環的熒光素形成共價鍵，增強熒光素的熒光效果等。因此，該功能化后Au-Fe3O4納米粒子具有可選擇性、兼容性和超順磁特性，可以應用于生物醫學、MRI成像、癌細胞診斷、控制毒品分散等領域，也有關于其在潛指紋顯現的報道，但是該復合的磁性納米粒子因為粒子的顏色等特點，應用于背景反差不大的潛指紋顯現中受到了一定的限制。
[0006]藻紅蛋白作為一種新型的熒光標記試劑，在特定波長激發下，藻紅蛋白能發射強烈的熒光，其熒光強度是熒光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子產率，在可見光譜區有很寬的激發及發射范圍。其多通過常規的標記方法和生物素、親和素和各種單克隆抗體結合起來制成熒光探針，用于臨床診斷及生物工程技術如免疫檢測、熒光顯微技術和流式細胞熒光測定等。但在刑事科學技術領域的研究與應用鮮有文獻報道，仍處起步階段。
【發明內容】
[0007]本發明的目的是提供一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現指印的方法。
[0008]本發明一種焚光磁性貴金屬納米蛋，其特征在于，所述焚光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。
[0009]本發明一種熒光磁性貴金屬納米蛋的制作方法，其特征在于，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述制作方法為利用靜電吸附作用將納米PE1- FΘ304粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結合;再將熒光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3O4粒子與納米貴金屬的結合體表面形成熒光磁性貴金屬納米蛋;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。
[00?0]進一步的，所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子，包括以下步驟:
制備納米Fe304，將3mol二價鐵鹽FeSO4.7H20和6mol三價鐵鹽FeCl3.6H20溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮氣氣氛保護下將氨水溶液加到反應體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫;攪拌30min后結束反應，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
制備納米PEI_Fe304粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL、4g/L的聚乙稀亞胺PEI溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應后用外加磁場進行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1-Fe3O4粒子。
[0011 ] 進一步的，所述納米貴金屬溶液為納米Au溶液、納米Ag溶液和納米Pt溶液中的任意一種;所述納米貴金屬溶液的制備，包括:
制備納米Au溶液，將100mL、0.0206moVL的HAuC14溶液與25mL、0.0025moVL的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250°C微波條件下加熱lmin，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.0206mol/L的納米Au溶液并于4°C的冰箱中保存；
制備納米Ag溶液，將10mL、0.0103mo 1/L的硝酸銀溶液與25mL、0.0025moI/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245°C微波條件下加熱5min，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度約為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4°C的冰箱中保存；
制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇，13mL、10g/50mL的氯鉑酸溶液，0.4mL、0.04mol/L的KOH溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245°C，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至lOOmL，得到濃度約為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存。
[0012]進一步的，所述采用靜電吸附作用將納米PE1-Fe3O4粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結合;包括:
制備納米Fe3O4OAu，將2mL PE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散3min后進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、0.lmol/L的NaOH溶液，并逐次滴加0.5mL、1%HAuC14溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAu ；
制備納米Fe3O4O Ag，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散2min后進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、
0.lmol/L的NaOH溶液，并逐次滴加0.35mL、0.1552mol/L的AgNO3溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAg; 制備納米Fe3O4OPt，取2mL PE1- Fe3O4溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲波洗滌儀頻率為80KHz分散Imin后進行磁性分離。將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmU
0.lmol/L的 NaOH水溶液，并逐次滴加0.5mL、l%H2PtCl5水溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl水溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OPt。
[0013]進一步的，所述將焚光藻紅蛋白包覆在PE1-Fe304粒子與納米貴金屬的結合體表面形成熒光磁性貴金屬納米蛋體系，包括:
制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、l.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該PBS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋試劑；
制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、l.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該PBS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋試劑；
制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe3O4OPt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL1.0mg/mL、的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該PBS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋試劑。
[0014]本發明還提供了一種熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現陳舊汗潛指印的方法，包括以下步驟:
51、配置汗潛指印顯現試劑，該顯現試劑為熒光磁性貴金屬納米蛋，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述焚光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子；
52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃、塑料、保鮮膜、金屬客體上捺印汗潛指印，獲得指印樣本。
[0015]S3、將步驟SI制得的的顯現試劑滴顯步驟S2制得的汗潛指印，反應10分鐘；
54、使用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗潛指印浮色；
55、將步驟S4洗去浮色后的汗潛指印烘干；
56、在顯現觀察系統下，觀察固定步驟S5烘干后的汗潛指印圖像。
[0016]進一步的，所述步驟S2的指印樣本的存放時間為7—30天。
[0017]進一步的，所述步驟S3為用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的貴金屬納米簇顯現試劑，使其沿指印乳突紋線順時針滴顯，并與指印物質充分反應2h。
[0018]進一步的，所述步驟S6中顯現觀察系統為利用多波段光源、有色濾光鏡、數碼單反相機搭建的顯現觀察系統。
[0019]本發明提供了一種新型汗潛指印顯現試劑，創新的使用了藻紅蛋白修飾了納米金、銀、鉑包覆的磁性四氧化三鐵納米粒子。利用它們粒徑小、體系穩定且兼具磁性與高熒光量子產率等特點，借助自主搭建顯現觀察系統，對熒光磁性貴金屬納米蛋體系顯現的汗潛指印進行觀察固定。
[0020]本發明具有如下優點:
1.本發明將藻紅蛋白應用于納米貴金屬包覆的磁性四氧化三鐵體系屬首創；
2.制備的熒光磁性納米金蛋熒光量子產率高，且熒光持續時間長，具有低毒性；
3.指印顯現操作快速高效，可清晰顯現30天的陳舊指印；
4.本發明制備的熒光磁性貴金屬納米蛋顯現陳舊指印的性能優于傳統顯現試劑；
5.顯現觀察系統能較高的固定指印信息，有利于檢驗鑒定。
【附圖說明】
[0021]圖1為熒光磁性貴金屬金納米蛋體系合成原理圖(銀、鉑類似)。
[0022]圖2為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋、熒光磁性鉑納米蛋在玻璃客體顯現陳舊指印圖。
[0023](A)為熒光磁性金納米蛋在玻璃客體顯現陳舊指印圖；
(B)為熒光磁性銀納米蛋在玻璃客體顯現陳舊指印圖；
(C)為熒光磁性鉑納米蛋在玻璃客體顯現陳舊指印圖。
[0024]圖3為顯現觀察系統及顯現原理示意圖。
[0025]圖4為貴金屬納米簇顯現試劑顯現汗潛指印的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0026]實施例1
熒光磁性金納米蛋的制備:
(I)制備納米Au溶液，將10mL0.0206mol/L的HAuC14溶液與25mL0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250° C微波條件下加熱lmin，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.0206mol/L的納米Au溶液并于4° C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe304，將3mol二價鐵鹽(FeS04.7H20)和6mol三價鐵鹽(FeCl3.6H20)溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮氣氣氛保護下將氨水溶液加到反應體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結束反應，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe3O4加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應后用外加磁鐵進行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe3O4粒子；
(4)制備納米Fe3O4OAu，將2mLPE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀分散3min后(頻率為80KHz)，進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL0.lmol/L NaOH溶液，并逐次滴加0.5mLl%HAuCl4溶液和0.75mL0.2mol/L NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAu ； (5)制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋。
[0027]實施例2
9?光磁性銀納米蛋的制備:
(1)制備納米Ag溶液，將10mL0.0103mol/L的硝酸銀溶液與25mL0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245° C微波條件下加熱5min，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度約為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4° C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe304，將3mol二價鐵鹽(FeS04.7H20)和6mol三價鐵鹽(FeCl3.6H20)溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮氣氣氛保護下將氨水溶液加到反應體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結束反應，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe3O4加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應后用外加磁鐵進行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe3O4粒子；
(4)制備納米Fe3O4OAg，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀分散2min后(頻率為80KHz)，進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL0.lmol/L NaOH溶液，并逐次滴加0.35mL0.1552moL/L的AgNO3溶液和0.75mL 0.2mol/L NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAg;
(5)制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋。
[0028]實施例3
9?光磁性銷納米蛋的制備:
(1)制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇、13mL 10g/50mL氯鉑酸溶液、
0.4mL 0.04mol/LK0H溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245°C，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe3O4，將一定量二價鐵鹽(FeS04■ 7H20)和三價鐵鹽(FeCl3 ■ 6H20)混合溶液加入到三口燒瓶中，滴液漏斗中加入一定濃度的沉淀劑NH3 ■ H20，在氮氣氣氛下將氨水溶液加到反應試劑中，使試劑的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結束反應，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60°C下真空干燥后，研磨即得納米Fe304;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應后用外加磁鐵進行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe304粒子；
(4)制備納米Fe3O4OPt，取2mL PEI_Fe304溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲波洗滌儀分散Imin后(頻率為80KHz)，進行磁性分離。將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL 0.lmol/L NaOH 水溶液，并逐次滴加 0.5mLl%H2PtC15 水溶液和 0.75mL 0.2mol/LNH20H-HC1水溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe304@Pt;
(5)制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe304@Pt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋。
[0029]實施例4
一種利用熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現陳舊汗潛指印的方法，包括以下步驟:
51、貴金屬納米蛋顯現試劑的制備；
52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃上捺印汗潛指印，獲得指印樣本，指印樣本擺放間距適中，為模仿案件現場上遺留的陳舊汗潛指印，本實驗指印樣本在自然條件下存放在干凈托盤內，存放時間為30d ；
53、用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的金納米簇顯現試劑，使其沿指印乳突紋線順時針滴顯，并與指印物質充分反應Ih;
54、用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗潛指印浮色；
55、將步驟S4洗去浮色后的汗潛指印在烘箱機中真空、37°C條件下烘干0.5h;
56、利用多波段光源、有色濾光鏡、數碼單反相機搭建顯現觀察系統對熒光汗潛指印進行觀察固定，在黑暗條件下，將多波段光源照射被金納米簇顯現的汗潛指印，指印產生的熒光透過有色濾光鏡被數碼單反相機記錄，將指印乳突紋線及其細節特征固定下來。
[0030]以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的宗旨和范圍，其均應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。
【主權項】
1.一種熒光磁性貴金屬納米蛋，其特征在于，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結合體;所述納米PE1- Fe304粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。2.—種焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述焚光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;采用靜電吸附作用將納米PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結合;再將焚光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬的結合體表面形成焚光磁性貴金屬納米蛋;所述納米PE1- Fe304粒子是指經過聚乙稀亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。3.根據權利要求2所述焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述納米PE1-Fe304粒子是指經過聚乙稀亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子，包括以下步驟: 制備納米Fe304，將3mol二價鐵鹽FeSO4.7H20和6mol三價鐵鹽FeCl3.6H20溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮氣氣氛保護下將氨水溶液加到反應體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫;攪拌30min后結束反應，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4; 制備納米PE1- Fe304粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL、4g/L聚乙稀亞胺PEI溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應后用外加磁場進行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即得到經過聚乙烯亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。4.根據權利要求2所述焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述納米貴金屬溶液為納米Au溶液、納米Ag溶液和納米Pt溶液中的任意一種； 所述納米貴金屬溶液的制備，包括: 制備納米Au溶液，將1001^、0.020611101/1的說11(:14溶液與251^、0.002511101/1的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250° C微波條件下加熱Imin，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至lOOmL，得到濃度為0.0206mo VL的納米Au溶液并于4° C的冰箱中保存； 制備納米Ag溶液，將10mL、0.0103mol/L的硝酸銀溶液與25mL、0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245° C微波條件下加熱5min，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4° C的冰箱中保存； 制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇，13 mL、10g/50mL氯鉑酸溶液，0.4mL、0.04mol/LK0H溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245 °C，反應結束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存。5.根據權利要求2所述熒光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述采用靜電吸附作用將納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結合;包括: 制備納米Fe3O4OAu，將2mL PE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散3min后進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110!111^、0.11]101凡的NaOH溶液，并逐次滴加0.5mL、1%HAuC14溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAu ； 制備納米Fe3O4O Ag，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散2min后進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110!111^、0.11]101凡的 NaOH 溶液，并逐次滴加 0.35mL、0.1552moL/L 的 AgNO3 溶液和 0.75mL、0.2mo I/L 的 NH2OH-HCI溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe3O4OAg ； 制備納米Fe3O4OPt，取2mL PE1- Fe3O4溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散Imin后進行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、0.lmol/L的NaOH水溶液，并逐次滴加0.5mL、l%H2PtCl5水溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl水溶液，最后利用外加磁場分離所得的納米Fe304@Pt。6.根據權利要求2所述熒光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述將熒光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬的結合體表面形成焚光磁性貴金屬納米蛋體系，包括: 制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該PBS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋試劑； 制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋試劑； 制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe3O4OPt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該PBS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋試劑。7.—種熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現陳舊汗潛指印的方法，其特征在于，采用權利要求I所述熒光磁性貴金屬納米蛋顯現陳舊汗潛指印，或者采用權利要求2至7中任意一項所述制備方法制備的熒光磁性貴金屬納米蛋顯現陳舊汗潛指印，包括以下步驟: 51、配置汗潛指印顯現試劑，該顯現試劑為熒光磁性貴金屬納米蛋，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述焚光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子； 52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃、塑料、保鮮膜、金屬客體上捺印汗潛指印，獲得指印樣本； 53、將步驟SI制得的的顯現試劑滴顯步驟S2制得的汗潛指印，反應10分鐘； 54、使用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗潛指印浮色； 55、將步驟S4洗去浮色后的汗潛指印烘干； 56、在顯現觀察系統下，觀察固定步驟S5烘干后的汗潛指印圖像。8.根據權利要求7所述的顯現陳舊汗潛指印的方法，其特征在于，所述步驟S2的指印樣本的存放時間為7—30天。9.根據權利要求7所述的顯現陳舊汗潛指印的方法，其特征在于，所述步驟S3為用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的貴金屬納米簇顯現試劑，使其沿指印乳突紋線順時針滴顯，并與指印物質充分反應2h。10.根據權利要求7至9中任一項所述的顯現陳舊汗潛指印的方法，其特征在于，所述步驟S6中顯現觀察系統為利用多波段光源、有色濾光鏡、數碼單反相機搭建的顯現觀察系統。
【文檔編號】A61B5/1172GK105962947SQ201610283027
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月3日
【發明人】黃銳, 張凌燕, 劉睿, 陳虹宇
【申請人】西南政法大學