一種益生菌和益生元復合制劑及其制備方法和應用
【專利摘要】本申請公開了一種益生菌和益生元復合制劑，所述益生菌和益生元復合制劑由按重量百分比計的復合益生菌10?40%、復合益生元65?85%、玉米淀粉2?4%、食用葡萄糖0.5?1%、乳糖2?6%、白砂糖1?2%、檸檬酸0.3?0.8%混合而成。本申請提供了的益生菌和益生元復合制劑由四種益生菌優化組成，結合β?葡聚糖和菊粉做益生元，加快益生菌在腸道內的定植，抑制有害腸道有害微生物菌群，維持菌群平衡，同時延長能夠延長保質期。
【專利說明】
[0001] 一種益生菌和益生元復合制劑及其制備方法和應用
技術領域
[0002] 本發明涉及食品加工技術領域，具體涉及一種益生菌和益生元復合制劑及其制備 方法和應用。
[0003]
【背景技術】
[0004] 肥胖是遺傳因素與環境因素共同作用所導致的營養代謝障礙性疾病，肥胖會帶來 各種健康問題和社會問題。而且隨著世界經濟的全球化，威脅人類健康的肥胖癥在世界各 地迅速蔓延。目前肥胖現象有逐漸向青少年發展和由第一世界向第三世界蔓延的趨勢。肥 胖已經成為世界性問題。
[0005] 目前有研究表明，人類腸道菌群對肥胖的產生起到至關重要的作用。對一個健康 的成人，腸道菌群的總重量可以達到1.5kg，包含的細胞數量可以達到人體自身細胞的10倍 以上。腸道菌群在人體內可以合成維生素、協助消化以及保護腸道等。因此，腸道菌群是人 體內具有重要作用的特殊的生物群體。根據腸道菌群在宿主體內的生化反應及對宿主的作 用效果，可分為有益菌和有害菌兩大類。有害菌通過產生毒素，引起腸黏膜破壞，誘發腸吸 收和排泄障礙，導致毒素和代謝垃圾在體內積聚，進而引發肥胖。有益菌通過自身的代謝活 動供給或促進營養物質的吸收，提高人體代謝功能，加快脂肪分解。
[0006]臨床上肥胖患者常伴有腸道菌群失調，及伴有其他腸道菌群減少或增多。因此增 殖肥胖者體內益生菌數量可以達到降脂減肥的目的。目前，主要存在兩種針對腸道菌群的 調整手段:活菌補充和自身腸道菌增殖。前者通過活菌腸道定殖，后者通過益生元補菌。益 生元補菌，主要是利用益生元不能被上消化道分解和吸收，直接進入大腸后選擇性地刺激 大腸中的一種或少數幾種有益細菌的生長，從而對宿主產生有益的作用。目前常用的益生 元有低聚木糖、低聚果糖、低聚半乳糖等，其化學本質都是不能被消化吸收的短鏈碳水化合 物，統稱為低聚糖。低聚糖是最主要、研究最多的一類益生元。多糖作為益生元研究的較少， 但多糖大量、緩慢的發酵可為整個大腸提供更持久性的可發酵碳源，比低聚糖更有益，更有 研究前景。益生菌補菌目前存在的最為關鍵的問題是產品在貯藏和消費過程中活菌含量的 下降。尤其是厭氧型益生菌對營養條件要求較高，對氧極為敏感，對低值的抵抗力差，活性 保持較困難。比如雙歧桿菌液體制劑在幾天內活菌數就會下降一個數量級。即使利用冷凍 干燥技術研制的干菌粉，在一般貯存溫度下也會很快失活。另外，益生菌要對生物體產生有 益作用，必需在通過胃環境后仍有大量的存活菌到達腸道并定植于腸粘膜上。但由于胃酸 的殺菌作用，益生菌的活菌數在此過程中會大幅度下降。
[0007] 因此，保障益生菌活菌數的含量是本領域技術人員急需解決的問題。
[0008]
【發明內容】
[0009] 針對現有技術中存在的問題，本發明的目的在于提供一種益生菌和益生元復合制 劑及其制備方法和應用，該益生菌和益生元復合制劑由四種益生菌優化組成，結合葡聚 糖和菊粉做益生元，加快益生菌在腸道內的定植，抑制有害腸道有害微生物菌群，維持菌群 平衡，同時延長能夠延長保質期。
[0010] 為實現上述目的，本發明采用以下技術方案： 一種益生菌和益生元復合制劑，所述益生菌和益生元復合制劑由按重量百分比計的復 合益生菌10-40%、復合益生元65-85%、玉米淀粉2-4%、食用葡萄糖0.5-1%、乳糖2-6%、白砂糖 1-2%、檸檬酸0.3-0.8%混合而成。
[0011] 進一步，所述復合益生菌由嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四 種菌按設定重量比構成。
[0012] 進一步，所述復合益生菌中四種菌的重量百分比為:嗜酸乳桿菌15-30%、乳雙歧桿 菌20-25%、長雙歧桿菌10-15%和嗜熱鏈球菌30-55%。
[0013] 進一步，所述益生菌和益生元復合制劑中嗜酸乳桿菌含量為108-101()CFU/g，乳雙 歧桿菌含量為l〇 8-l〇1()CFU/g，長雙歧桿菌含量為108-101()CFU/g，嗜熱鏈球菌含量為IO 8-IO10CFlVg。
[0014] 進一步，所述復合益生元由β-葡聚糖和菊粉兩種益生元菌按設定重量比構成。
[0015] 進一步，所述復合益生元中兩種益生元菌的重量百分比為:β-葡聚糖20%-80%、菊 粉30%-90%。
[0016] 進一步，所述β-葡聚糖為燕麥β-葡聚糖。
[0017] -種制備的益生菌和益生元復合制劑的方法，其特征在于，所述方法包括如下步 驟： 1) 將嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種冷凍保藏的菌種用PTYG 液體培養基試管活化，在ΡΗ7.0，37 °C下培養48h，再在相同條件下以6%的接種量將試管中的 菌種接種到500mL三角瓶中擴大培養，得1.5L種子液后上25L小罐； 2) 取2000mL水，加入質量百分數為8%的糖蜜、0.05%的豆柏提取液和0.05%的磷酸二氫 鉀，制備成糖蜜培養基，在PH7.0，36 °C下培養36h，然后發酵所得菌液上小罐，最后上大罐， 發酵結束后用離心機在12000r/min離心，收集菌絲體，零下4°C保藏； 3) 向離心收集的菌體中加入玉米淀粉、食用葡萄糖和白砂糖，制備菌懸液，用攪拌機攪 拌30min，再加入乳糖、菊粉和檸檬酸進行賦形，用注射器噴灑β-葡聚糖溶液進行成囊反應， 反應完成后，再向溶液中噴灑菊粉和β-葡聚糖混合溶液，進一步固化，離心收集復合制劑進 行保藏。
[0018] 本申請的益生菌和益生元復合制劑在制備預防和/或治療肥胖、控制體重的藥物、 保健品和/或食品中的應用。
[0019] 本發明具有以下有益技術效果： 本申請的益生菌和益生元復合制劑由四種益生菌優化組成，結合β-葡聚糖和菊粉做益 生元，加快益生菌在腸道內的定植，抑制有害腸道有害微生物菌群，維持菌群平衡，同時延 長能夠延長保質期。
[0020]
【具體實施方式】
[0021] 下面結合實施例對本發明做進一步說明。
[0022] 實施例1 本申請的益生菌和益生元復合制劑由按重量百分比計的復合益生菌1 〇%，復合益生元 80%，玉米淀粉2%，食用葡萄糖0.5%，乳糖2%，白砂糖1%，檸檬酸0.3%;其中，復合益生元中β-葡聚糖占20%，菊粉占80%;復合益生菌中嗜酸乳桿菌占15%、乳雙歧桿菌20%、長雙歧桿菌15% 和嗜熱鏈球菌50%。
[0023] 具體加工步驟如下： (1) 將嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種冷凍保藏的菌種用PTYG 液體培養基試管活化，在ΡΗ7.0，37 °C下培養48h，再在相同條件下以6%的接種量將試管中的 菌種接種到500mL三角瓶中擴大培養，得1.5L種子液后上25L小罐，然后取2000mL水，加入質 量百分數為16g的糖蜜、1.0 g的豆柏提取液和1.0 g的磷酸二氫鉀，制備成糖蜜培養基，在 PH7.0,36°C下培養36h，然后發酵所得菌液上小罐，最后上大罐，發酵結束后用離心機在 12000r/min離心，收集菌絲體，零下4°C保藏； (2) 向離心收集的菌體中加入1000 g玉米淀粉、500g食用葡萄糖和750g白砂糖，制備菌 懸液，用攪拌機攪拌30min，再加入乳糖1500g、菊粉3000g和梓檬酸150g進行賦形，用注射器 噴灑燕麥葡聚糖溶液進行成囊反應，反應完成后，再向溶液中噴灑菊粉和燕麥葡聚糖 混合溶液，進一步固化，離心收集復合制劑進行保藏。
[0024] 益生菌和益生元復合制劑中嗜酸乳桿菌含量為108-101()CFU/g，乳雙歧桿菌含量為 10 8-101()CFU/g，長雙歧桿菌含量為108-101()CFU/g，嗜熱鏈球菌含量為10 8-101()CFU/g。
[0025] 實施例2 本申請的益生菌和益生元復合制劑由按重量百分比計的復合益生菌20%，復合益生元 70%，玉米淀粉3%，食用葡萄糖0.8%，乳糖4%，白砂糖1.5%，檸檬酸0.6%;其中，復合益生元中 葡聚糖占50%，菊粉占50%;復合益生菌中嗜酸乳桿菌占20%、乳雙歧桿菌22%、長雙歧桿菌 13%和嗜熱鏈球菌45%。
[0026] 具體加工步驟如下： (1) 將嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種冷凍保藏的菌種用PTYG 液體培養基試管活化，在ΡΗ7.0，37 °C下培養48h，再在相同條件下以6%的接種量將試管中的 菌種接種到500mL三角瓶中擴大培養，得1.5L種子液后上25L小罐，然后取2000mL水，加入質 量百分數為16g的糖蜜、1.0 g的豆柏提取液和1.0 g的磷酸二氫鉀，制備成糖蜜培養基，在 PH7.0,36°C下培養36h，然后發酵所得菌液上小罐，最后上大罐，發酵結束后用離心機在 12000r/min離心，收集菌絲體，零下4°C保藏； (2) 向離心收集的菌體中加入1000 g玉米淀粉、500g食用葡萄糖和750g白砂糖，制備菌 懸液，用攪拌機攪拌30min，再加入乳糖1500g、菊粉3000g和梓檬酸150g進行賦形，用注射器 噴灑燕麥葡聚糖溶液進行成囊反應，反應完成后，再向溶液中噴灑菊粉和燕麥葡聚糖 混合溶液，進一步固化，離心收集復合制劑進行保藏。
[0027]益生菌和益生元復合制劑中嗜酸乳桿菌含量為108-101()CFU/g，乳雙歧桿菌含量為 108-101()CFU/g，長雙歧桿菌含量為108-101()CFU/g，嗜熱鏈球菌含量為10 8-101()CFU/g。
[0028] 實施例3 本申請的益生菌和益生元復合制劑由按重量百分比計的復合益生菌30%，復合益生元 65%，玉米淀粉4%，食用葡萄糖1%，乳糖5%，白砂糖2%，檸檬酸0.8%;其中，復合益生元中β-葡 聚糖占70%，菊粉占30%;復合益生菌中嗜酸乳桿菌占30%、乳雙歧桿菌25%、長雙歧桿菌10%和 嗜熱鏈球菌35%。
[0029]具體加工步驟如下： (1) 將嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種冷凍保藏的菌種用PTYG 液體培養基試管活化，在ΡΗ7.0，37 °C下培養48h，再在相同條件下以6%的接種量將試管中的 菌種接種到500mL三角瓶中擴大培養，得1.5L種子液后上25L小罐，然后取2000mL水，加入質 量百分數為16g的糖蜜、1.0 g的豆柏提取液和1.0 g的磷酸二氫鉀，制備成糖蜜培養基，在 PH7.0,36°C下培養36h，然后發酵所得菌液上小罐，最后上大罐，發酵結束后用離心機在 12000r/min離心，收集菌絲體，零下4°C保藏； (2) 向離心收集的菌體中加入1000 g玉米淀粉、500g食用葡萄糖和750g白砂糖，制備菌 懸液，用攪拌機攪拌30min，再加入乳糖1500g、菊粉3000g和梓檬酸150g進行賦形，用注射器 噴灑燕麥葡聚糖溶液進行成囊反應，反應完成后，再向溶液中噴灑菊粉和燕麥葡聚糖 混合溶液，進一步固化，離心收集復合制劑進行保藏。
[0030]益生菌和益生元復合制劑中嗜酸乳桿菌含量為108-101()CFU/g，乳雙歧桿菌含量為 108-101()CFU/g，長雙歧桿菌含量為108-101()CFU/g，嗜熱鏈球菌含量為10 8-101()CFU/g。
[0031 ] 實驗測定益生菌和益生元制劑的效果： KM系清潔級小鼠20只，體重26-32g，雌雄各半，隨機分為普通組和實驗組，在22°C、66% 相對濕度的實驗室環境中自由進食和飲水，適應環境一周后開始實驗。實驗過程中，普通組 飼喂基礎飼料（熱量值16.34 kj/g)，實驗組飼喂基礎飼料+5%益生菌和益生元復合制劑 (在基礎飼料中添加質量分數5%的益生菌和益生元復合制劑，熱量值15.68 kj/g)，自由攝 食飲水，飼喂8周。在飼喂結束前ld，將KM系小鼠過夜禁食12 h，脊柱脫臼致死，然后測定每 只小鼠的體重和體脂率，計算平均值。下表為普通組和實驗組體重對比結果：
_L·凹以|迎只疋力J J阢叨半漢叨，四砍牲/?牛力J半漢μ力井·^網I収丁以丄大那1'列，彳可<盱半漢 明思想的各種變通形式均在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述益生菌和益生元復合制劑由按重 量百分比計的復合益生菌10-40%、復合益生元65-85%、玉米淀粉2-4%、食用葡萄糖0.5-1%、 乳糖2-6%、白砂糖1-2%、檸檬酸0.3-0.8%混合而成。2. 根據權利要求1所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述復合益生菌由嗜 酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種菌按設定重量比構成。3. 根據權利要求2所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述復合益生菌中四 種菌的重量百分比為:嗜酸乳桿菌15-30%、乳雙歧桿菌20-25%、長雙歧桿菌10-15%和嗜熱鏈 球菌 30-55%。4. 根據權利要求2所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述益生菌和益生元 復合制劑中嗜酸乳桿菌含量為l〇8_l〇 1()CFU/g，乳雙歧桿菌含量為108-101()CFU/g，長雙歧桿 菌含量為l〇 8-l〇1()CFU/g，嗜熱鏈球菌含量為108-101()CFU/g。5. 根據權利要求1所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述復合益生元由β_ 葡聚糖和菊粉兩種益生元菌按設定重量比構成。6. 根據權利要求5所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述復合益生元中兩 種益生元菌的重量百分比為:β-葡聚糖20%-80%、菊粉30%-90%。7. 根據權利要求5或6所述的益生菌和益生元復合制劑，其特征在于，所述β-葡聚糖為 燕麥葡聚糖。8. -種制備權利要求1-7任一所述的益生菌和益生元復合制劑的方法，其特征在于，所 述方法包括如下步驟： 1) 將嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌四種冷凍保藏的菌種用PTYG 液體培養基試管活化，在ΡΗ7.0，37 °C下培養48h，再在相同條件下以6%的接種量將試管中的 菌種接種到500mL三角瓶中擴大培養，得1.5L種子液后上25L小罐； 2) 取2000mL水，加入質量百分數為8%的糖蜜、0.05%的豆柏提取液和0.05%的磷酸二氫 鉀，制備成糖蜜培養基，在PH7.0，36 °C下培養36h，然后發酵所得菌液上小罐，最后上大罐， 發酵結束后用離心機在12000r/min離心，收集菌絲體，零下4°C保藏； 3 )向離心收集的菌體中加入玉米淀粉、食用葡萄糖和白砂糖，制備菌懸液，用攪拌機攪 拌30min，再加入乳糖、菊粉和檸檬酸進行賦形，用注射器噴灑β-葡聚糖溶液進行成囊反應， 反應完成后，再向溶液中噴灑菊粉和β-葡聚糖混合溶液，進一步固化，離心收集復合制劑進 行保藏。9. 權利要求1-7任一所述的益生菌和益生元復合制劑在制備預防和/或治療肥胖、控制 體重的藥物、保健品和/或食品中的應用。
【文檔編號】A61K35/747GK105942527SQ201610328565
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月18日
【發明人】田雷
【申請人】田雷