一種利用銹菌防治意大利蒼耳的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物防治領域，特別是一種利用銹菌防治意大利蒼耳的方法，具體涉及蒼耳銹菌菌種保藏、菌種復壯、菌種收集、接種方法。
【背景技術】
[0002]意大利蒼耳(Xanthium i tali cum )，別名瘤突蒼耳，是一種具有二形性種子的一年生菊科植物，原產于北美洲，隨進口農副產品或包裝物攜帶傳入我國，是一種重要的危險性植物，已被我國列入《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》。意大利蒼耳果實產量高，對環境的適應能力強，尤其是在濕潤地帶能快速形成優勢種群，其在東北地區已成為危害較重的入侵植物之一，給農作物生產和生態環境帶來嚴重危害
意大利蒼耳危害苜蓿、牧草、大豆等旱田作物。目前防治意大利蒼耳主要依賴人工拔除、化學藥劑防治，未見用專性寄生真菌防治意大利蒼耳。防治方法主要有播前翻耕、中耕及化學除草。果園和非耕地使用2，4-D 丁酯(2，4-D)、敵草快(Diquat)、西瑪津(Simazine)、阿特拉津(Atrazine)和草甘膦(Glyphosate)等化學藥劑處理以及人工多次拔除。靠人力拔除非常費力，故經常使用刀割，同時戴上防護手套，工作量極大。對于散布于其他作物中的意大利蒼耳，大規模用藥不僅成本高，而且易對其他作物造成危害，并造成環境污染。
[0003]目前我國防治意大利蒼耳主要還是利用人工拔除和化學防治。由于意大利蒼耳植株高大，分枝多，莖粗、質地堅硬，人工拔除時費時費力；意大利蒼耳葉子厚，表皮發達，使用化學藥劑時用量需高于常用量，易危害其他植物，并造成環境污染。
[0004]生物材料蒼耳柄銹菌(Puccinia xanthii)，見公開發表的文獻:Zhao YZ et al.,First report of rust caused by Puccinia xanthii on Xanthium orientale subsp.1talicum in China, ((Plant Disease)), 2014, 98:1582-1582;蒼耳柄銹菌(Pucciniaxanthii Schwein.)，屬擔子菌亞門，銹菌綱，銹菌目，柄銹菌科，柄銹菌屬，為短生活史型銹菌。該菌冬孢子堆在葉背面形成，棕色至黑褐色，大小0.5?1.5_。冬孢子橢圓形至長圓形，末端稍突起，分隔處稍縊縮，柄淡褐色;冬孢子萌發產生擔孢子，大小0.05?0.2mm。單主寄生于蒼耳屬葉上。如果使用銹菌防治意大利蒼耳，無殘留，無污染，也不會侵染其他作物，具有環境安全性。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是針對上述問題，提供一種利用蒼耳柄銹菌(PucciniaxanthiiSchwein.)防治意大利蒼耳的方法，操作簡便，成本低，無殘留，無污染，也不會侵染其他作物，具有環境安全性。
[0006]本發明的目的是通過如下技術方案實現的:
7月份于野外采集帶有銹菌冬孢子的意大利蒼耳葉片，陰干后冷凍備用。
[0007]將意大利蒼耳種子利用清水浸泡3- 5天，可以軟化其種皮;于日光溫室中播種，土壤濕度85%以上，溫度20°C-25°C，覆土3 - 5cm;待意大利蒼耳長到3 - 5片葉，備用。
[0008]配制冬孢子懸浮液:將帶有冬孢子的干燥意大利蒼耳葉片用小型粉碎機粉碎，過60目篩，獲取冬孢子粗粉;將冬孢子粗粉加入水溶液，加入質量比的終濃度0.5%-1%的木糖或乳糖，用顯微鏡檢查使冬孢子濃度15-1O6CFUmL即為備用的冬孢子懸浮液。
[0009]將制備好的冬孢子懸浮液裝入小型噴霧器中，搖勻后均勻地噴灑于意大利蒼耳幼苗的葉片上，以葉片表面濕潤，但不形成水流為好;溫室室內溫度20 - 25°C、相對濕度97%。
[0010]接種7-15天后，意大利蒼耳葉子發病，取病斑面積超過葉面積50%的葉子，浸入水中，用硬毛刷將冬孢子刷下，配成15個/mL的水溶液，在每500mL的水溶液中加入l-2mL吐溫80和1-2mL透明質酸，即為冬孢子懸浮液。
[0011]于傍晚用小型噴霧器將冬孢子懸浮液加水噴灑在意大利蒼耳葉表面。
[0012]上述的冬孢子粗粉儲藏條件為-20度。
[0013]本發明的積極效果是:操作簡便，成本低，無殘留，無污染，也不會侵染其他作物，具有環境安全性。
【具體實施方式】
[0014]7月份于野外采集帶有銹菌冬孢子的意大利蒼耳葉片，陰干后冷凍備用。
[0015]將意大利蒼耳種子利用清水浸泡3-5天，可以破壞意大利蒼耳種皮;于日光溫室中播種，土壤濕度85%以上，溫度20°C-25°C，覆土 3-5cm;待意大利蒼耳長到3-5片葉，備用。
[0016]配制冬孢子懸浮液:將帶有冬孢子的干燥意大利蒼耳葉片用小型粉碎機粉碎，過60目篩，獲取冬孢子粗粉;將冬孢子粗粉加入水溶液，加入質量比的終濃度0.5%_1%的木糖或乳糖，用顯微鏡檢查使冬孢子濃度15-1O6個/mL，即為備用的冬孢子懸浮液。
[0017]將制備好的冬孢子懸浮液裝入小型噴霧器中，搖勻后均勻地噴灑于意大利蒼耳草幼苗的葉片上;溫室室內溫度20?25°C、相對濕度97%。
[0018]接種7-15天后，意大利蒼耳葉子發病，取病斑面積超過葉面積50%的葉子，浸入水中，用硬毛刷將冬孢子刷下，配成15個/mL的水溶液，在每500mL的水溶液中加入l-2mL吐溫80和1-2mL質量體積比為2%的透明質酸，S卩為冬孢子懸浮液。
[0019]將上述冬孢子懸浮液按體積比例1:250加水，于傍晚用小型噴霧器將溶液噴灑在意大利蒼耳葉表面即可。
[0020]前述的冬孢子粗粉(即蒼耳柄銹菌)儲藏條件為-20度。
實施例
[0021]1.以在東北地區防治I畝河道中意大利蒼耳為例，說明本發明應用方法。
[0022]取25L普通農用噴霧器，加入濃度為15個/mL冬孢子懸浮液1mL，加水至25L，搖勻。選取陰天傍晚噴灑在意大利蒼耳葉面。最好連噴3天。
[0023]通過對試驗小區銹病危害程度的調查和分析，發現蒼耳銹病對寄主植株的影響主要表現為數量性狀，即降低單株種子百粒重，空癟率明顯增加，但對籽粒數目的影響并不顯著。在調查的256個植株中，株高差異不大，平均株高0.45m，有81.3%的調查植株種子的百粒重損失達50%以上。銹病發生和危害程度越高，單株種子百粒重明顯下降，影響到種子的生命力。
[0024]效益分析 I畝土地使用銹菌防治意大利蒼耳可比使用農藥(草甘膦)節省15元，而且還不存在農藥污染。如果按照銹菌人工釋放傳播距離為50公里/年計算，人工釋放1.5公頃，可獲得經濟效益:50000米X50000米/666平方米/畝X 15元/畝=5685萬元。人工釋放銹菌費用1500元，
可忽略不計。
[0025]
參考文獻
[1]丁暉，徐海根，強勝，孟玲，韓正敏，繆錦來，胡白石，孫紅英，黃成，雷軍成，樂志芳.中國生物入侵的現狀與趨勢[J].生態與農村環境學報，2011,27(3):35-41.[2]吳昊，丁建清.入侵生態學最新研究動態[J].科學通報，2014(6):438-448.[3 ]閆小玲，劉全儒，壽海洋，曾憲鋒，張勇，陳麗，劉演，馬海英，齊淑艷，馬金雙.中國外來入侵植物的等級劃分與地理分布格局分析[J].生物多樣性，2014，22(5): 667-676.[4]王惠惠，劉晶嵐，張容，劉佳凱，鄒瑀琦，鄒大林，南海龍，張振明.北京外來入侵植物研究[J].農學學報，2014,4(6):49-52.[5]吳冬，黃姝博，李宏慶.意大利蒼耳二形性種子萌發，植株生長差異及生態適應性[J].生態學報，2009,29(10): 5258-5264.[6]李楠，朱麗娜，翟強，祝明瑋，陳旭輝，曲波.一種新入侵遼寧省的外來有害植物-意大利蒼耳[J].植物檢疫，2010，24(5):49-52.[7]李長田.中國蒼耳屬一新歸化種——瘤突蒼耳[J].吉林農業大學學報，2011，34
(5):508-510.[8]車晉滇，胡彬.外來入侵雜草意大利蒼耳[J].雜草科學，2007(2): 58-59.[9]劉慧圓，明冠華.外來入侵種意大利蒼耳的分布現狀及防控措施[J].生物學通報，2009,43(5):15-16.
【主權項】
1.一種利用銹菌防治意大利蒼耳的方法，其特征在于: 7月份于野外采集帶有銹菌冬孢子的意大利蒼耳葉片，陰干后冷凍備用； 將意大利蒼耳種子利用清水浸泡3 - 5天;于日光溫室中播種，土壤濕度85%以上，溫度20°C_25°C，覆土3 - 5cm;待意大利蒼耳長到3 - 5片葉，備用; 配制冬孢子懸浮液:將帶有冬孢子的干燥意大利蒼耳葉片用小型粉碎機粉碎，過60目篩，獲取冬孢子粗粉;將冬孢子粗粉加入水溶液，加入質量比的終濃度0.5%-1%的木糖或乳糖，用顯微鏡檢查使冬孢子濃度15-1O6CFUmL即為備用的冬孢子懸浮液； 將制備好的冬孢子懸浮液裝入小型噴霧器中，搖勻后均勻地噴灑于意大利蒼耳幼苗的葉片上;溫室室內溫度20 - 25°C、相對濕度97%; 接種7-15天后，意大利蒼耳葉子發病，取病斑面積超過葉面積50%的葉子，浸入水中，用硬毛刷將冬孢子刷下，配成15個/mL的水溶液，在每500mL的水溶液中加入l-2mL吐溫80和l-2mL透明質酸，即為冬孢子懸浮液； 于傍晚用小型噴霧器將冬孢子懸浮液加水噴灑在意大利蒼耳葉表面。2.根據權利要求1所述的利用銹菌防治意大利蒼耳的方法，其特征在于:上述的冬孢子粗粉儲藏條件為-20度。
【專利摘要】一種利用銹菌防治意大利蒼耳的方法，其特征在于按下述步驟操作：野外采集帶有銹菌冬孢子的意大利蒼耳葉片，陰干后冷凍備用；將意大利蒼耳種子于日光溫室中播種；將帶有冬孢子的干燥意大利蒼耳葉片制備成冬孢子懸浮液；將制備好的冬孢子懸浮液裝入小型噴霧器中，噴灑于意大利蒼耳幼苗的葉片上；取病斑面積超過葉面積50%的葉子，制成冬孢子懸浮液；于傍晚用小型噴霧器將冬孢子懸浮液加水噴灑在意大利蒼耳葉表面。本發明方法簡單，操作方便，易于保存，并且可離體保存，能夠達到生物防治的目的。
【IPC分類】A01C1/00, A01G7/06, A01G13/00, A01G1/00
【公開號】CN105638206
【申請號】
【發明人】曲波, 許玉鳳, 邵美妮
【申請人】沈陽農業大學
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月8日