一種鼠婦提取物及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及制藥領域，具體涉及一種鼠婦提取物及其應用。
【背景技術】
[0002] 血栓是三大致死性心血管疾病（心臟病、中風和靜脈血栓栓塞癥）的根源，發病率 較高，在全球范圍內呈現漸增之勢。國際血栓與止血學會提供的資料顯示，在美國，每年有 10萬-30萬人死于靜脈血栓；在歐洲，每年有50萬人死于靜脈血栓，超過艾滋病、乳腺癌、 前列腺癌和高諫公路交通事故死亡人數之和;在中國，因血栓性疾病及其并發癥死亡的人 數也眾多。目前，臨床應用的抗栓藥物雖然能大幅度降低死亡率和致殘率，但是這些溶栓藥 物仍然存在缺點，諸如出血副作用大，劑量難以控制，可能出現再阻塞和再梗死。此外，在 臨床治療血栓性疾病過程中，一般先使用溶栓藥物將已經形成的血栓溶解，然后使用抗凝 藥物，避免血栓再次形成。然而，目前市場上很少有藥物同時具有溶栓和抗凝作用，因此，尋 找一種副作用小，避免再阻塞和再梗死的溶栓抗凝藥物勢在必行。
[0003] 鼠婦為甲殼綱等足目鼠婦科動物鼠婦scaAer 的干燥蟲體， 別名潮蟲，地虱，西瓜蟲，豌豆蟲等，始載于《神農本草》，具有破血利水，解毒止痛之功效。鼠 婦是一味傳統的蟲類中藥，可用于治療中重度癌性疼痛，扁平疣，痔瘡，百日咳等。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種鼠婦提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性較溫和。
[0005] 本發明的另一目的是提供上述鼠婦提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用。
[0006] 本發明的目的采用如下技術方案實現。
[0007] 本發明提供一種鼠婦提取物，具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法制備：將鼠婦采 用濕法超微粉碎，離心，取上清液，得到鼠婦提取物。
[0008] 在本發明中，將所述上清液采用硫酸銨沉淀法進行純化，得到鼠婦提取物。
[0009] 優選的技術方案中，所述硫酸銨沉淀法如下：在所述上清液中加入硫酸銨至飽和 度為55-65%，離心，取上清液，加入硫酸銨至飽和度為75-85%，離心，取沉淀，得到鼠婦提取 物。
[0010] 優選的技術方案中，將所述鼠婦提取物采用透析法除去硫酸銨。
[0011] 在本發明中，在鼠婦中加入所述鼠婦質量6-10倍的水，浸泡0. 5-2h，然后加入超 微粉碎機中進行濕法超微粉碎。
[0012] 優選的技術方案中，所述濕法超微粉碎的溫度為0-40°C，時間為5-10分鐘。
[0013] 本發明還提供所述鼠婦提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用。
[0014] 本發明提供一種鼠婦提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性較溫和。本發明鼠 婦提取物并非是直接溶解纖維蛋白，而是通過激活纖溶酶原，使纖溶酶原轉化為纖溶酶，進 而溶解纖維蛋白，因此，該鼠婦提取物的溶栓作用相對溫和，因而不會出現大量出血傾向， 降低了組織大出血的風險。另外，本發明所提供鼠婦提取物，制備方法行之有效，工藝過程 簡便，易操作，適應于工業化生產。本發明鼠婦提取物還可以應用于制備治療血栓性疾病藥 物。
【附圖說明】
[0015]圖1是鼠婦濕法超微粉碎粗提物和水煎煮粗提物的體外溶栓活性比較。
[0016] 圖2顯示了鼠婦提取物溶栓活性。其中"高"對應的孔中加入高濃度鼠婦提取物 溶液，"中"對應的孔中加入了中濃度鼠婦提取物溶液，"低"對應的孔中加入低濃度提取物 溶液，"空白"對應的孔中加入去離子水，"尿激酶"對應的孔中加入了尿激酶。
[0017] 圖3顯示了陰、陽性平板中鼠婦提取物的溶栓活性。
【具體實施方式】
[0018] 實施本發明可以按如下實施例進行，但并不意味著對本發明范圍的限制。
[0019] 實施例1鼠婦濕法超微粉碎和水煎煮粗提物的制備及活性比較。
[0020] 1.鼠婦濕法超微粉碎粗提物的制備 稱取干燥鼠婦200. 0g，加入鼠婦質量8倍、25°C的蒸餾水，浸泡1h后，加入超微粉碎 機中在25°C條件下采用濕法超微粉碎10min。將粉碎后得到的漿料在4 °C條件下，10000 r/min離心10min，取上清液，冷凍干燥可得鼠婦濕法超微粉碎粗提物。
[0021] 2.鼠婦水煎煮粗提物的制備 稱取200g干燥鼠婦，加入鼠婦質量8倍的蒸餾水，浸泡1h后煎煮3h。取煎煮液，在 4°C條件下，10000r/min離心10min取上清液，60 °C減壓濃縮，冷凍干燥可得鼠婦水煎煮 粗提物。
[0022] 3.鼠婦濕法超微粉碎和水煎煮粗提物體內抗凝活性比較 將鼠婦濕法超微粉碎粗提物和水煎煮粗提物分別配制成生藥濃度為200mg/mL和 400mg/mL的溶液。昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，即空白對照組，濕法超微粉 碎高、低劑量組和水煎煮高、低劑量組。空白對照組灌胃生理鹽水〇. 2mL/10g，濕法超微粉 碎高、低劑量組分別灌胃生藥濃度為200mg/mL和400mg/mL的鼠婦濕法超微粉碎粗提物溶 液0? 2mL/10g，水煎煮高、低劑量組分別灌胃生藥濃度為200mg/mL和400mg/mL的鼠婦水 煎煮粗提物溶液〇. 2mL/10g。連續給藥7天，末次給藥lh以后，摘眼球取血。分別按照 PT(凝血酶原時間)，TT(凝血酶時間)，APTT(活化部分凝血活酶時間）試劑盒(北京中勤世 帝科學儀器有限公司，批號分別為STY50101-52，STY50301-32，STY50201-39)說明測定各 組的PT，TT，APTT。各體外診斷試劑盒的測定結果見表1，與空白對照組相比，水煎煮低劑量 組的PT，TT，APTT均無顯著性差異，水煎煮高劑量組僅能稍微延遲APTT。雖然濕法超微粉 碎低劑量組與空白對照組比較，PT，TT，APTT均無顯著性差異，但是濕法超微粉碎高劑量組 均能顯著延遲PT，TT，APTT，而且APTT的延遲時間顯著大于水煎煮高劑量組。
[0023] 延遲率（小）=(給藥組測定值-空白對照組測定值）/空白對照組測定值*100% 表1體內抗凝活性分析比較
【主權項】
1. 一種鼠婦提取物，其特征在于所述鼠婦提取物具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法 制備：將鼠婦采用濕法超微粉碎，離心，取上清液，得到鼠婦提取物。
2. 根據權利要求1所述鼠婦提取物，其特征在于將所述上清液采用硫酸銨沉淀法進行 純化，得到鼠婦提取物。
3. 根據權利要求2所述鼠婦提取物，其特征在于所述硫酸銨沉淀法如下：在所述上清 液中加入硫酸銨至飽和度為55-65%，離心，取上清液，加入硫酸銨至飽和度為75-85%，離 心，取沉淀，得到鼠婦提取物。
4. 根據權利要求3所述鼠婦提取物，其特征在于將所述鼠婦提取物采用透析法除去硫 酸銨。
5. 根據權利要求1-4之一所述鼠婦提取物，其特征在于在鼠婦中加入所述鼠婦質量 6-10倍的水，浸泡0. 5-2h，然后加入超微粉碎機中進行濕法超微粉碎。
6. 根據權利要求5所述鼠婦提取物，其特征在于所述濕法超微粉碎的溫度為0-40°C， 時間為5-10分鐘。
7. 權利要求1-6之一所述鼠婦提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用。
【專利摘要】本發明提供一種鼠婦提取物及其應用，涉及制藥領域。所述鼠婦提取物，具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法制備：將鼠婦采用濕法超微粉碎，離心，取上清液，得到鼠婦提取物。該鼠婦提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性較溫和。本發明鼠婦提取物并非是直接溶解纖維蛋白，而是通過激活纖溶酶原，使纖溶酶原轉化為纖溶酶，進而溶解纖維蛋白，因此，該鼠婦提取物的溶栓作用相對溫和，因而不會出現大量出血傾向，降低了組織大出血的風險。另外，本發明所提供鼠婦提取物，制備方法行之有效，工藝過程簡便，易操作，適應于工業化生產。本發明鼠婦提取物還可以應用于制備治療血栓性疾病藥物。
【IPC分類】A61P7-02, A61K35-64
【公開號】CN104523758
【申請號】CN201510042710
【發明人】吳勉華, 李博, 郭立瑋, 田周
【申請人】南京中醫藥大學
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2015年1月28日