基于psa磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型所述基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其包括盒體，與盒體相連接的用于對所述盒體進行封閉的盒蓋，盒體底部設有固定板，用于分別豎直放置有增強液試劑瓶、濃縮清洗液試劑瓶和反應緩沖液試劑瓶的第一凹槽，以及用于分別豎直放置有包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶、PSA的校準品試劑瓶、銪標記fPSA單抗溶液試劑瓶和釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶的大小適配的多個第二凹槽；所述盒蓋的內表面設有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上設有罩體，用于蓋住所述第三凹槽，本實用新型試劑盒具有方便使用、操作簡單、穩定性好的優勢，且更高的檢測靈敏度和特異性，檢測更加準確可靠，并達到了較佳的性能參數。
【專利說明】
基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨焚光免疫分析試劑盒
技術領域
[0001]本實用新型涉及一種基于前列腺特異性抗原(PSA)磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，屬于免疫檢測分析技術和納米生物技術領域
【背景技術】
[0002]前列腺特異性抗原(prostate specific antigen，PSA)是人類前列腺上皮產生的一種絲氨酸蛋白酶，最早由Hara等于1971年從人類精楽中發現并命名為精楽蛋白(gammaseminoprotein)，1979年Wang等從前列腺上皮細胞中分離和提純出與此完全相同的糖蛋白，且證明其是前列腺特異的，因此將其命名為前列腺特異性抗原。
[0003]PSA是一種包含240個氨基酸的單鏈糖蛋白，分子量為34KD。正常前列腺上皮、增生前列腺組織及前列腺癌細胞均能產生PSA13PSA自上述細胞分泌后進人前列腺導管腔內，以高濃度儲存，其中極少的部分進入血循環系統，成為血清PSA13PSA在組織中的濃度是血清中的10倍。巨大濃度差異原因在于正常的上皮細胞與毛細血管、淋巴系統之間被完整的基底細胞層和基底膜所分隔。
[0004]在外周血中的PSA可大致分為兩大類:游離PSA(fPSA)以及Ct-1抗凝乳蛋白酶形成穩定復合物的結合型PSA(CPSA)t^fPSA占總PSA(tPSA)的5%-30%。在正常生理條件下，它存在于前列腺組織、前列腺液、精液、血清和尿中。目前，前列腺特異抗原(PSA)檢查作為一種篩選工具，已越來越普及。由于PSA的檢查，越來越多的癌腫在臨床早期就被發現。通常，PSA的正常值小于4yg/L。前列腺肥大與前列腺炎這兩種良性疾病，會造成PSA升高，濃度通常在4至lOyg/L之間。如果PSA濃度大于lOyg/L，發生前列腺癌的機會就增加，要進一步做直腸超聲波檢查支持診斷。如果PSA大于40yg/ml，就有可能發生晚期前列腺癌。如果前列腺癌治療后，PSA濃度上升，代表可能局部復發或有遠處擴散的情形。但PSA有一定的漏癥率，1/3具有重要臨床意義的癌癥病例，必須配合直腸指檢、直腸超聲波檢查才能減少誤診率。
[0005]fPSA在良性前列腺肥大時顯著增高，與單獨檢測tPSA相比，檢測fPSA和tPSA并計算f PSA/tPSA對鑒別良性前列腺肥大與前列腺癌極為有利。
[0006]時間分辨突光免疫分析技術(Time-resolved fluoroimmunoassay ,TrFIA)又稱解離-增強鑭系突光免疫分析(dissociat1n-enhancement lanthanidefluoroimmunoassay，DELFIA)，是用三價稀土離子及其螯合物作為示蹤物，當反應體系發生后，用時間分辨熒光免疫分析儀，測定反應物中的熒光強度，定量分析待測物質的含量。其靈敏度高，可達10-17mol/孔，技術上具有獨特優勢，應用范圍廣泛。銪(Eu)標記時間分辨熒光免疫技術是一種非放射標記超微量免疫檢測技術，利用光譜分辨、時間分辨、解離-增強原理，具有熒光壽命極長、Stokes位移大、熒光特異性強、Eu3+離子的發光范圍寬的特點。TRFIA是繼酶聯免疫技術和放免技術之后發展起來的新興技術，相對于后兩者化學發光免疫技術具有高靈敏度、高特異性，操作簡便、快速，標記結合物穩定，同時無放射性同位素損傷和污染等特點，因此近年來在臨床檢測分析中被廣泛推廣使用。然而現有技術中配套設置的時間分辨熒光免疫分析的檢測試劑盒，該試劑盒都是采用將各種試劑瓶、盛裝抗體的試劑瓶、微孔板簡單收納的方式將其放入試劑盒內部，沒有對試劑盒內部進行進一步的輔助設置，使得上述試劑盒內簡單收納的試劑瓶、微孔板在運輸過程中容易發生錯位和相互碰撞，不僅不利于試劑盒內試劑、抗體和微孔板保存，而且摩擦或碰撞過程中可能導致試劑瓶和微孔板發生磨損，使得試劑瓶容易產生裂痕或發生破裂，導致試劑瓶內的有效物質流淌到瓶外發生混合，或試劑瓶內進入空氣影響試劑或抗體的質量，進而使得試劑盒內試劑盒內試劑、抗體減少或失效。
[0007]為此，本實用新型提供了一種基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，通過在試劑盒內部設置輔助裝置，重新收納試劑瓶、盛裝抗體的試劑瓶、微孔板，避免試劑盒內的試劑瓶和微孔板在運輸過程中容易發生錯位和相互碰撞，使得試劑盒內的試劑、抗體保存完好，且穩定性高，同時具有方便使用、操作簡單的優勢。
【實用新型內容】
[0008]因此，本實用新型要解決的技術問題在于一種方便使用、操作簡單、穩定性好、檢測更加準確可靠和靈敏度和特異性高的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒。
[0009]為此，本實用新型提供了一種基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其包括盒體，與所述盒體相連接的用于對所述盒體進行封閉的盒蓋，所述盒體底部設有固定板，分別豎直放置有增強液試劑瓶、濃縮清洗液試劑瓶和反應緩沖液試劑瓶的大小適配的多個第一凹槽，以及分別豎直放置有包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶、PSA的校準品試劑瓶、銪標記fPSA單抗溶液試劑瓶和釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶的大小適配的多個第二凹槽;所述盒蓋的內表面設有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上設有罩體，所述罩體與所述第三凹槽槽口可拆卸連接，用于蓋住所述第三凹槽并固定所述微孔板。
[0010]所述的試劑盒，所述罩體的一端與所述第三凹槽槽口的一端轉動連接，另一端設有通孔與所述盒蓋內表面設置的卡扣相配合將所述罩體扣在所述第三凹槽上。
[0011]所述的試劑盒，所述卡扣包括固定部和連接部，所述連接部與所述盒蓋內表面連接，所述固定部通過所述通孔固定所述罩體。
[0012]所述的試劑盒，所述通孔為長方形，所述固定部為長方形滑片，所述滑片與所述連接部活動連接。
[0013]所述的試劑盒，所述固定部一端設有倒鉤，另一端與所述連接部轉動連接。
[0014]所述的試劑盒，所述第一凹槽、第二凹槽依次沿所述固定板的長度方向排列設置。
[0015]所述的試劑盒，所述微孔板由可拆式酶標板和放置在其上的酶標條組成。
[0016]所述的試劑盒，所述微孔板為透明的96孔板。
[0017]上述試劑瓶為市售產品，所述試劑瓶中盛裝的反應緩沖液試劑、濃縮清洗液試劑、增強液試劑、包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑、若干PSA的校準品試劑、銪標記fPSA單抗溶液試劑和釤標記的tPSA單抗溶液試劑可以為市售產品，在本實用新型中上述試劑均由江蘇省原子醫學研究所提供。
[0018]本實用新型相比現有技術的技術方案，具有如下優點:
[0019](I)本實用新型所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其包括盒體，與所述盒體相連接的用于對所述盒體進行封閉的盒蓋，所述盒體底部設有固定板，分別豎直放置有增強液試劑瓶、濃縮清洗液試劑瓶和反應緩沖液試劑瓶的大小適配的多個第一凹槽，以及分別豎直放置有包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶、PSA的校準品試劑瓶、銪標記fPSA單抗溶液試劑瓶、釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶的大小適配的多個第二凹槽;所述盒蓋的內表面設有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上設有罩體，所述罩體與所述第三凹槽槽口可拆卸連接，用于蓋住所述第三凹槽并固定所述微孔板;通過在所述盒體內設置的固定板上設置第一凹槽和第二凹槽，以便于所述試劑瓶豎直插入所述第一凹槽或第二凹槽內，不僅保證固定所述試劑瓶，避免試劑瓶在所述盒體內與其他試劑瓶發生碰撞，避免試劑瓶和微孔板發生磨損破裂，進而致使試劑瓶內的有效物質流淌到瓶外發生混合，使得試劑盒內試劑盒內試劑、抗體減少或失效，而且還極大的節省了所述盒體內的空間，使得所述試劑盒內部更加緊湊，縮小了所述試劑盒的體積，便于試劑盒的運輸降低了成本，同時通過在盒蓋內表面設有容置有微孔板的第三凹槽，所述微孔板可以嵌入所述第三凹槽內，同時通過罩體蓋住所述第三凹槽，使得所述微孔板固定在所述第三凹槽內，進一步避免微孔板與其他試劑瓶碰撞，使得試劑瓶內的試劑、抗體保存完好，穩定性高，試劑瓶內的試劑或抗體更加均相，進而使得檢測結果更加穩定、準確可靠，又由于所述試劑盒通過輔助設置，合理利用了試劑盒的空間，使得試劑盒結構更加緊湊，更加易于運輸，方便使用，而且操作簡單，綜上，本實用新型所述的試劑盒具有方便使用、操作簡單、穩定性好，且具有更高的檢測靈敏度和特異性，檢測結果更加準確可靠，達到了較佳的性能參數；
[0020]進一步的，由于所述試劑盒中的試劑瓶固定可靠，保證了在運輸過程中試劑瓶中的試劑、抗體保持完好，穩定性高，進而使得所述試劑盒中的試劑接近均相，能夠提供一個均相的反應體系，有利于檢測的進行，使得當利用所述試劑盒進行檢測fPSA和tPSA時，大大縮短反應時間，提高檢測靈敏度，大大減少了配對抗體用量以及提高檢測的精密度和靈敏度，可以保證不超過0.5ng/mL的血清(漿)樣本不需要稀釋，可以直接檢測，操作簡單，同時還具有量程寬，樣品濃度值介于0.5-100ng/mL的都能準確檢測，檢測時間短，從樣品孵育到檢測，約25min完成，樣品需求量少，一次上樣只需50yL。
[0021](2)本實用新型所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，通過將所述罩體的一端與所述第三凹槽槽口的一端轉動連接，另一端設有通孔與所述盒蓋2內表面設置的卡扣相配合，當將所述微孔板嵌入所述第三凹槽中后，可以轉動所述罩體扣在所述第三凹槽槽口上方，然后通過所述罩體上的通孔與所述卡扣配合，將所述罩體扣在所述第三凹槽上，使得所述盒蓋在合在盒體上時，置于盒蓋內表面的微孔板不掉下來。
[0022](3)本實用新型所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，通過將所述卡扣設置為包括固定部和連接部，所述連接部與所述第三凹槽槽口的一端連接，所述固定部通過所述通孔固定所述罩體，將所述罩體扣在所述第三凹槽上，使得所述盒蓋在合在盒體上時，置于盒蓋內表面的微孔板不掉下來。
[0023](4)本實用新型所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，通過將所述第一凹槽、第二凹槽依次沿所述固定板的長度方向排列設置，達到了合理的利用所述盒體內部的空間，大大縮小了所述盒體的體積，便于所述試劑盒的運輸，降低了成本。
【附圖說明】
[0024]為了更清楚地說明本實用新型【具體實施方式】或現有技術中的技術方案，下面將對【具體實施方式】或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本實用新型的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。
[0025]圖1為本實用新型的一種實施方式中所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒結構示意圖；
[0026]圖2為本實用新型的一種實施方式中所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒結構示意圖；
[0027]圖3為本實用新型實施方式中所述的固定板結構示意圖；
[0028]圖4為本實用新型實施方式中所述的盒蓋結構示意圖；
[0029]圖5為本實用新型另一種實施方式中所述的盒蓋的結構示意圖；
[0030]圖6為本實用新型實施方式中所述的卡扣結構示意圖[0031 ]圖7為本實用新型實施方式中所述的微孔板結構示意圖；
[0032]圖8為本實用新型實施方式中所述的試劑瓶結構示意圖。
[0033]附圖標記說明:
[0034]1-盒體，2-盒蓋，21-第三凹槽，22-罩體，221-通孔，23-卡扣，231-固定部，2311-倒鉤，232-連接部，3-固定板，31-第一凹槽，32-第二凹槽，4-增強液試劑瓶，5-濃縮清洗液試劑瓶，6-反應緩沖液試劑瓶，7-包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶，8-PSA的校準品試劑瓶，9-銪標記fPSA單抗溶液試劑瓶，I O-釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶，11 -微孔板。
【具體實施方式】
[0035]下面將結合附圖對本實用新型的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本實用新型一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本實用新型中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本實用新型保護的范圍。
[0036]在本實用新型的描述中，需要說明的是，術語“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“內”、“外”等指示的方位或位置關系為基于附圖所示的方位或位置關系，僅是為了便于描述本實用新型和簡化描述，而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構造和操作，因此不能理解為對本實用新型的限制。此外，術語“第一”、“第二”、“第三”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性。
[0037]在本實用新型的描述中，需要說明的是，除非另有明確的規定和限定，術語“安裝”、“相連”、“連接”應做廣義理解，例如，可以是固定連接，也可以是可拆卸連接，或一體地連接;可以是機械連接，也可以是電連接;可以是直接相連，也可以通過中間媒介間接相連，可以是兩個元件內部的連通。對于本領域的普通技術人員而言，可以具體情況理解上述術語在本實用新型中的具體含義。
[0038]此外，下面所描述的本實用新型不同實施方式中所涉及的技術特征只要彼此之間未構成沖突就可以相互結合。
[0039]如圖1-4，圖7-8所示，本實用新型所述的基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其包括盒體I，與所述盒體I相連接的用于對所述盒體I進行封閉的盒蓋2，所述盒體I底部設有固定板3，分別豎直放置有增強液試劑瓶4、濃縮清洗液試劑瓶5和反應緩沖液試劑瓶6的大小適配的多個第一凹槽31，以及分別豎直放置有包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶7、PSA的校準品試劑瓶8、銪標記PSA單抗溶液試劑瓶9和釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶10的大小適配的多個第二凹槽32;所述盒蓋2的內表面設有容置有微孔板11的第三凹槽21，所述第三凹槽21上設有罩體22，所述罩體22與所述第三凹槽21槽口可拆卸連接，用于蓋住所述第三凹槽21并固定所述微孔板11。
[0040]通過在所述盒體I內設置的固定板上設置第一凹槽31和第二凹槽32，以便于所述試劑瓶豎直插入所述第一凹槽31或第二凹槽32，不僅保證固定所述試劑瓶，避免試劑瓶在所述盒體I內與其他試劑瓶發生碰撞，提高了試劑瓶內試劑、抗體的穩定性，而且還極大的節省了所述盒體I內的空間，使得所述試劑盒內部更加緊湊，縮小了所述試劑盒的體積，便于試劑盒的運輸，降低了成本。又通過在所述盒蓋2內表面設置容置有所述微孔板11的第三凹槽21，所述第三凹槽21上設有罩體22，用于蓋住所述第三凹槽21并固定所述微孔板11，通過所述第三凹槽21和所述罩體22的配合，可以將所述微孔板11固定在所述盒蓋2的內表面上，進一步避免所述微孔板11與其他試劑瓶碰撞，使得試劑瓶試劑、抗體保存完好，穩定性高，試劑瓶內的試劑或抗體更加均相，進而使得檢測結果更加穩定、準確可靠、檢測靈敏度和特異性高，又由于所述試劑盒通過合理收納所述試劑瓶和微孔板11，合理利用了所述試劑盒的空間，使得試劑盒結構更加緊湊，體積小，更加易于運輸，方便使用。
[0041]進一步的，如圖1-2所示，所述罩體22的一端與所述第三凹槽21槽口的一端轉動連接，所述罩體22的另一端設有通孔221與所述盒蓋2內表面設置的卡扣23相配合將所述罩體22扣在所述第三凹槽21上。通過將所述罩體22的一端與所述第三凹槽21槽口的一端轉動連接，所述罩體22可以轉動，便于所述罩體22扣在所述所述第三凹槽21槽口上或開啟所述罩體22，通過在所述罩體22的另一端設置通孔221與所述盒蓋2內表面設置的卡扣23相配合，使得所述罩體22可以扣在所述第三凹槽21槽口上，進而固定所述第三凹槽21內容置的所述微孔板11，避免所述盒蓋2合在所述盒體I上時，所述盒蓋2內表面的所述微孔板11掉落。
[0042]進一步的，如圖4所示，所述卡扣23包括固定部231和連接部232，所述連接部232與所述盒蓋2內表面連接，所述固定部231通過所述通孔221固定所述罩體22，可以將所述罩體22扣在所述第三凹槽21上，使得所述盒蓋2在合在盒體I上時，置于所述盒蓋2內表面的微孔板11不掉落。
[0043]進一步的，如圖4所示，所述通孔221為長方形，所述固定部231為長方形滑片，所述滑片與所述連接部232活動連接。通過將所述固定部231設置為長方形滑片，所述滑片可以通過所述通孔221，然后旋轉所述滑片，所述滑片可以固定住所述罩體22，進而將所述罩體22的一端固定在所述卡扣23上，實現固定所述第三凹槽21內的微孔板11。
[0044]進一步的，如圖5-6所示，所述固定部231—端設有倒鉤2311，所述固定部231另一端與所述連接部232轉動連接，當所述固定部231通過所述通孔221，然后轉動所述固定部231，將所述固定部231上的倒鉤2311勾住所述罩體22，固定住所述罩體22，進而將所述罩體22的一端固定在所述卡扣23上，實現固定所述第三凹槽21內的微孔板11。
[0045]進一步的，如圖3所示，所述第一凹槽31、第二凹槽32依次沿所述固定板3的長度方向排列設置，大大利用了空間，減少了試劑盒的體積，方便運輸。
[0046]進一步的，所述微孔板11由可拆式酶標板和放置在其上的酶標條組成。
[0047]進一步的，所述微孔板11為透明的96孔板。
[0048]顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發明創造的保護范圍之中。
【主權項】
1.一種基于PSA磁微粒的雙標記時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其包括盒體(I)，與所述盒體(I)相連接的用于對所述盒體(I)進行封閉的盒蓋(2)，其特征在于，所述盒體(I)底部設有固定板(3)，分別豎直放置有增強液試劑瓶(4)、濃縮清洗液試劑瓶(5)和反應緩沖液試劑瓶(6)的大小適配的多個第一凹槽(31)，以及分別豎直放置有包被PSA單克隆抗體的磁微粒試劑瓶(7)、PSA的校準品試劑瓶(8)、銪標記f PSA單抗溶液試劑瓶(9)和釤標記的tPSA單抗溶液試劑瓶(10)的大小適配的多個第二凹槽(32);所述盒蓋(2)的內表面設有容置有微孔板(11)的第三凹槽(21)，所述第三凹槽(21)上設有罩體(22)，所述罩體(22)與所述第三凹槽(21)槽口可拆卸連接，用于蓋住所述第三凹槽(21)并固定所述微孔板(11)。2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述罩體(22)的一端與所述第三凹槽(21)槽口的一端轉動連接，所述罩體(22)的另一端設有通孔(221)與所述盒蓋(2)內表面設置的卡扣(23)相配合將所述罩體(22)扣在所述第三凹槽(21)上。3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述卡扣(23)包括固定部(231)和連接部(232)，所述連接部(232)與所述盒蓋(2)內表面連接，所述固定部(231)通過所述通孔(221)固定所述罩體(22)。4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述通孔(221)為長方形，所述固定部(231)為長方形滑片，所述滑片與所述連接部(232)活動連接。5.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述固定部(231)—端設有倒鉤(2311)，另一端與所述連接部(232)轉動連接。6.根據權利要求1-5任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述第一凹槽(31)、第二凹槽(32)依次沿所述固定板(3)的長度方向排列設置。7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述微孔板(II)由可拆式酶標板和放置在其上的酶標條組成。8.根據權利要求1或2或4或5或7所述的試劑盒，其特征在于，所述微孔板(II)為透明的96孔板。
【文檔編號】G01N33/573GK205608005SQ201620422012
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月11日
【發明人】黃飚, 周彬, 范俊, 張藝, 張玨, 郭明明, 鄧黎莉, 朱嵐
【申請人】江蘇省原子醫學研究所