一種甲胎蛋白雙向免疫電泳檢測試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種甲胎蛋白雙向免疫電泳檢測試劑合
ΙΤΓΤ.0
【背景技術】
[0002]肝細胞癌是一種發病率不斷上升的癌癥，正常人體肝細胞不產生甲胎蛋白，但肝癌發生時，由于癌變肝細胞無限制增殖，就又恢復了合成甲胎蛋白的能力。獲得更有效治療的關鍵在于能夠更早和更準確的診斷。
[0003]血清甲胎蛋白(AFP)的測定廣泛應用于肝細胞癌的診斷。肝癌患者體內，AFP的水平呈現顯著上升。甲胎蛋白是分子量為70KD的糖蛋白。正常情況下，在胎兒發育早期由肝臟和卵黃囊合成，小量由胎兒卵黃素細胞及胎兒胃腸道合成。AFP是最主要的胎兒血清蛋白，出生后在血清中的含量急速下降，第二年末降至最低值直至成年。臨床上發現肝癌細胞和生殖系腫瘤細胞可以合成AFP，使血清AFP濃度升高，因此血清AFP含量是早期診斷這類腫瘤的重要指標。非惡性疾病的成人血清AFP升高的情況，主要出現在妊娠女性的第6-9個月，以及一些肝病患者尤其是出現肝細胞病變者，如肝硬化、急慢性肝炎和肝壞死。妊娠女性AFP值的異常預示發生唐氏癥(Down syndrome)的可能。目前臨床上檢測AFP的方法主要有ELISA法，化學發光法等。
【實用新型內容】
[0004]本實用新型需要解決的現有技術的問題是:現有的用于檢測甲胎蛋白的試劑盒，其檢測靈敏度和特異性低。
[0005]為了解決上述問題，本實用新型提出了如下技術方案。
[0006]具體而言，本實用新型提供了一種甲胎蛋白雙向免疫電泳檢測試劑盒，包括盒體1，還包括電泳板2和試劑瓶，所述試劑瓶包括甲胎蛋白瓶3和抗甲胎蛋白抗體瓶4，所述電泳板2包括底板5和瓊脂容納腔6。
[0007]優選的，所述瓊脂容納腔6的高度為3?5mm。
[0008]優選的，所述甲胎蛋白瓶3裝有甲胎蛋白，其容積為10ml-30ml。
[0009]優選的，所述抗甲胎蛋白抗體瓶4為裝有抗甲胎蛋白的抗體，其容積為10ml-30mlo
[0010]優選的，所述電泳板2還包括固定擋板7。
[0011]優選的，所述固定擋板7的高度為3?5_。
[0012]優選的，所述電泳板2分別設有輸入接口和輸出接口。
[0013]本試劑盒的檢測原理為:凝膠環境在pH值為8.6時，抗AFP抗體只攜帶微弱的負電荷，而且它分子又較大，所以泳動慢，受電滲作用的影響也大，往往不能抵抗電滲作用，故在電泳時，由于電滲作用，反而向負極倒退。故而將抗AFP抗體置于陽極時其受電滲作用向負極移動，AFP攜帶較強負電荷故而將其置于陰極，受電泳影響向陽極移動，因此，AFP和抗AFP抗體在電流作用下會匯合形成沉淀線，同時，由于AFP電泳泳動比抗AFP抗體電滲移動快的原因，因此在靠近抗AFP抗體一側形成沉淀線。
[0014]本實用新型的有益效果是:應用本實用新型的檢測試劑盒，通過幫助抗AFP抗體定向移動，加速了反應的出現，同時限制了瓊脂擴散時，抗原抗體向四周自由擴散的傾向，因而也提高了敏感性，提高了對甲胎蛋白的檢測靈敏度和特異性，縮短了反應時間。
[0015]下面結合附圖和各個【具體實施方式】，對本實用新型及其有益技術效果進行詳細說明。
【附圖說明】
[0016]圖1為實施例一所述試劑盒的結構示意圖。
[0017]圖2為實施例一所述試劑盒的電泳板的結構示意圖。
[0018]其中，I為盒體，2為電泳板，3為甲胎蛋白瓶，4為抗甲胎蛋白抗體瓶，5為底板，6為瓊脂容納腔，7為固定擋板。
【具體實施方式】
[0019]如上所述，本實用新型的目的在于:提供一種檢測甲胎蛋白雙向免疫電泳的檢測試劑盒，提高甲胎蛋白的檢測靈敏性和特異性，極大的方便肝癌患者的早期診斷。
[0020]下面結合附圖和具體實施例對本實用新型作進一步詳細的說明。
[0021]實施例中所用各試劑的生產廠商如下:
[0022]巴比妥，購自上海研一生物科技有限公司；
[0023]巴比妥鈉，購自上海紫一試劑廠；
[0024]甲胎蛋白，購自上海科敏生物科技有限公司；
[0025]抗甲胎蛋白抗體，購自上海科敏生物科技有限公司。
[0026]實施例一
[0027](一 )檢測試劑盒
[0028]實施例一提供了一種甲胎蛋白雙向對流免疫電泳檢測試劑盒，包括盒體1，還包括電泳板2和試劑瓶，所述試劑瓶為甲胎蛋白瓶3和抗甲胎蛋白抗體瓶4，所述電泳板2包括底板5和瓊脂容納腔6。
[0029]所述甲胎蛋白瓶裝有甲胎蛋白，其容積為10ml。
[0030]所述抗甲胎蛋白抗體瓶4為裝有抗甲胎蛋白的抗體，其容積為10ml。
[0031]所述電泳板還包括固定擋板7，固定于所述底板的四周，固定擋板的高度為3_。由固定擋板沿底板圍成一圈，形成瓊脂容納腔，相應的瓊脂容納腔的高度為3mm，用于承裝由瓊脂形成的瓊脂板。該瓊脂容納腔在加入瓊脂形成帶有加樣孔的瓊脂板之后，依照樣品的加入分成了兩部分，其中一部分用作甲胎蛋白的加入，另一部分用作抗甲胎蛋白抗體的加入。
[0032]所述電泳板分別設有輸入接口和輸出接口，所述輸入接口靠近抗甲胎蛋白抗體加樣孔，所述輸出接口靠近甲胎蛋白加樣孔，所述輸入接口和輸出接口通過外接電線與電源進行連接。
[0033]( 二 )試劑盒的使用方法
[0034](I)取巴比妥5.52g與巴比妥鈉30.9g，加水定容至2000ml，制備得到ρΗ8.6的巴比妥緩沖液，用ΡΗ8.6的巴比妥緩沖液配成質量分數為1.2%的瓊脂板，60°C微波加熱融化，并倒在瓊脂容納腔中，使瓊脂的厚度為2.6mm。待瓊脂冷卻下來，取一根孔徑為0.5cm的硬質空心管分別在瓊脂容納腔的兩側打孔，所述小孔與小孔之間的孔距為0.5cm,瓊脂容納腔的兩側分別打有相同數目的排形小孔，相應小孔的中心連線與電流走向一致。
[0035](2)加樣:在瓊脂容納腔的一側小孔內(靠近輸出接口 )分別加入含有抗甲胎蛋白抗體0.01mg/ml 50ul，在瓊脂容納腔的另一側小孔內(靠近輸入接口)分別加入血清樣本 50ulo
[0036](3)電泳:調節電壓為4.5V/cm，電泳時間60min，若血清樣本中含有甲胎蛋白，貝Ij甲胎蛋白和抗甲胎蛋白抗體在外界電壓的作用下相向泳動，一定時間后AFP和Ant1-AFP抗體將在兩孔間相遇，并在比例適當的地方形成肉眼可見的沉淀線。
[0037]實施例二
[0038]實施例二與實施例一的不同之處在于:
[0039]實施例二中固定擋板的高度為5_，瓊脂容納腔的高度為5_。所述甲胎蛋白瓶裝有甲胎蛋白，其容積為30ml。所述抗甲胎蛋白抗體瓶為裝有抗甲胎蛋白的抗體，其容積為30ml ο
[0040]實施例三
[0041]實施例三與實施例一的不同之處在于:
[0042]實施例二中固定擋板的高度為4mm，瓊脂容納腔的高度為4mm。所述甲胎蛋白瓶裝有甲胎蛋白，其容積為20ml。所述抗甲胎蛋白抗體瓶4為裝有抗甲胎蛋白的抗體，其容積為20ml ο
[0043]以上所述僅為本實用新型較佳實施例，并不用于局限本實用新型，凡在本實用新型的精神和原則之內所做的修改、等同替換和改進等，均需要包含在實用新型的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種甲胎蛋白雙向免疫電泳檢測試劑盒，包括盒體(I)，其特征在于:還包括電泳板(2)和試劑瓶，所述試劑瓶包括甲胎蛋白瓶(3)和抗甲胎蛋白抗體瓶(4)，所述電泳板(2)包括底板(5)和瓊脂容納腔(6)。2.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述瓊脂容納腔(6)的高度為3?5mm ο3.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述甲胎蛋白瓶(3)裝有甲胎蛋白，其容積為10ml-30ml。4.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述抗甲胎蛋白抗體瓶(4)為裝有抗甲胎蛋白的抗體，其容積為10ml-30ml。5.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述電泳板(2)還包括固定擋板(7)。6.根據權利要求5所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述固定擋板(7)的高度為3?5mm ο7.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述電泳板(2)分別設有輸入接口和輸出接口。
【專利摘要】本實用新型涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種甲胎蛋白雙向免疫電泳檢測試劑盒。該檢測試劑盒包括盒體(1)，還包括電泳板(2)和試劑瓶，所述試劑瓶包括甲胎蛋白瓶(3)、抗甲胎蛋白抗體瓶(4)，所述電泳板(2)包括底板(5)和瓊脂容納腔(6)。應用本實用新型的檢測試劑盒，提高甲胎蛋白的檢測靈敏性和特異性，極大的方便肝癌患者的早期診斷。
【IPC分類】G01N33/68
【公開號】CN204882576
【申請號】CN201520651589
【發明人】劉鵬飛, 陳威潼, 韓雪, 姬曉兵
【申請人】天津脈絡生物科技有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年8月26日