一種檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條的制作方法
【技術領域】
[0001] 本實用新型涉及一種檢測禽腦脊髓炎病毒的器具，特別是涉及一種檢測禽腦脊髓 炎病毒的試紙條。
【背景技術】
[0002] 禽腦脊髓炎（AvianEncephalomyelieis，AE)是由禽腦脊髓炎病毒（Avian Encephalomyelieisvirus，AEV)引起一種以主要侵害幼禽中樞神經系統為特征的急性、高 度接觸性傳染病，又稱流行性震顫（EpidemicTremor)。AE主要引起雛雞發生運動失調、站 立不穩和頭頸部的快速震顫，病死率為20% -50% ;產蛋雞感染后主要表現為產蛋突然下 降，降幅為5 % -30 %，孵化率降低，并通過種蛋垂直傳播，給養禽業造成了很大危害。
[0003]AE廣泛存在于世界各地，對養禽業的危害日趨嚴重。該病于1932年首次在美國 發現，20世紀80年代初傳入我國，目前國內廣泛存在，近年來疫情有上升的趨勢。由于AEV 屬小RNA病毒，無囊膜，對氯仿和乙醚等有較強的抵抗力，很難從環境中消除，并且可通過 水平接觸和垂直傳播，極大影響了我國養雞業的健康發展。
[0004] 及時、快速診斷AE，是有效控制AE的前提。目前AE的診斷主要有常規實驗室檢測 和分子生物學兩大類方法。常規方法主要有病毒分離鑒定和AEV抗體的血清學檢測，包括 瓊脂免疫擴散試驗（AGP)、間接免疫熒光抗體試驗（IFA)、ELISA等方法。分子生物學方法 主要有PCR和核酸探針技術等。但AEV的病毒分離培養、AGP、IFA、ELISA、PCR和核酸探針 等檢測技術操作復雜，需要昂貴的儀器設備、過程較長、耗時費力，需要特定儀器設備和專 業技術人員操作，很難在基層普及，不能滿足生產一線或疫病現場的快速診斷需要。因此， 研宄一種快速檢測禽禽腦脊髓炎病毒感染的檢測技術非常重要而迫切。 【實用新型內容】
[0005] 本實用新型的一個目的是解決至少上述問題或缺陷，并提供至少后面將說明的優 點。
[0006] 本實用新型還有一個目的是提供了一種結果顯示直觀、準確、快速檢測禽腦脊髓 炎的試紙條，與其他檢測方法相比，該試紙條特異性強、靈敏度高、操作簡便、結果顯示快 速，檢測成本低廉。
[0007] 為了實現根據本實用新型的這些目的和其它優點，本實用新型提供的技術方案 為：
[0008] 一種檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，包括：
[0009] 檢測層，其包括依次連接的樣品吸附層、結合層、纖維素膜層和吸水層，所述樣品 吸附層限定了用于接觸待檢測樣品的第一端，所述吸水層限定了遠離待檢測樣品的第二 端，所述結合層包含有膠體金標記的禽腦脊髓炎病毒的第一抗體；
[0010] 檢測線，其設置在所述纖維素膜層上，所述檢測線包含包被的禽腦脊髓炎病毒的 第二抗體，所述第一抗體和所述第二抗體與所述禽腦脊髓炎病毒結合的位點不同，且第一 抗體與病毒結合不干擾第二抗體與病毒結合，這樣，即使第一抗體和禽腦脊髓炎病毒特異 性結合后，由于結合位點不同，也不影響第二抗體與及喉管炎病毒的特異性結合。
[0011] 對照線，其也設置在所述纖維素膜層上且比所述檢測線遠離所述第一端，所述對 照線包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G(IgG)。
[0012] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述第一抗體為禽腦脊髓炎 病毒的單克隆抗體或多克隆抗體，所述第二抗體為禽腦脊髓炎病毒的多克隆抗體或單克隆 抗體。
[0013] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述纖維素膜層為硝酸纖維 素膜、纖維素膜、羧化纖維素膜和聚偏二氟乙烯膜中的任意一種制成。
[0014] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，還包括：
[0015] 支撐層，所述檢測層固定在所述支撐層的上表面。
[0016] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，還包括：
[0017] 第一保護膜，其設置在所述檢測層的上面，且一端向下彎折包覆住所述第一端，而 另一端延伸到所述纖維素膜層一端的上方；
[0018] 第二保護膜，其設置在所述檢測層的上方，且一端向下彎折包覆住所述第二端，而 另一端延伸到所述纖維素膜層另一端的上方；
[0019] 其中，所述第一保護膜為白色，所述第二保護膜的顏色與所述第一保護膜的顏色 不相同。
[0020] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述第一保護膜設置有樣 品標記線，所述樣品標記線與遠離所述第一端的所述樣品吸附層的一側的距離為0.3~ 0? 7cm處。
[0021] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述支撐層由不吸水的硬質 塑膠片或硬紙條制成；所述吸水層用吸水紙制成。
[0022] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述樣品吸附層由玻璃棉、尼 龍纖維和聚酯纖維中的任意一種制成。
[0023] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述結合層由玻璃棉、尼龍纖 維和聚酯纖維中的任意一種制成。
[0024] 優選的是，所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條中，所述檢測線和所述對照線的
【主權項】
1. 一種檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，包括： 檢測層，其包括依次連接的樣品吸附層、結合層、纖維素膜層和吸水層，所述樣品吸附 層限定了用于接觸待檢測樣品的第一端，所述吸水層限定了遠離待檢測樣品的第二端，所 述結合層包含有膠體金標記的禽腦脊髓炎病毒的第一抗體； 檢測線，其設置在所述纖維素膜層上，所述檢測線包含包被的禽腦脊髓炎病毒的第二 抗體，所述第一抗體和所述第二抗體與所述禽腦脊髓炎病毒結合的位點不同； 對照線，其也設置在所述纖維素膜層上且比所述檢測線遠離所述第一端，所述對照線 包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。
2. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述第一抗體為 禽腦脊髓炎病毒的單克隆抗體或多克隆抗體，所述第二抗體為禽腦脊髓炎病毒的多克隆抗 體或單克隆抗體。
3. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述纖維素膜層 為硝酸纖維素膜、纖維素膜、羧化纖維素膜和聚偏二氟乙烯膜中的任意一種制成。
4. 如權利要求1至3任一項所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，還包 括： 支撐層，所述檢測層固定在所述支撐層的上表面。
5. 如權利要求4所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，還包括： 第一保護膜，其設置在所述檢測層的上面，且一端向下彎折包覆住所述第一端，而另一 端延伸到所述纖維素膜層一端的上方； 第二保護膜，其設置在所述檢測層的上方，且一端向下彎折包覆住所述第二端，而另一 端延伸到所述纖維素膜層另一端的上方； 其中，所述第一保護膜為白色，所述第二保護膜的顏色與所述第一保護膜的顏色不相 同。
6. 如權利要求4所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述第一保護膜 設置有樣品標記線，所述樣品標記線與遠離所述第一端的所述樣品吸附層的一側的距離為 0? 3 ~0? 7cm處。
7. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述支撐層由不 吸水的硬質塑膠片或硬紙條制成；所述吸水層用吸水紙制成。
8. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述樣品吸附層 由玻璃棉、尼龍纖維和聚酯纖維中的任意一種制成。
9. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述結合層由玻 璃棉、尼龍纖維和聚酯纖維中的任意一種制成。
10. 如權利要求1所述的檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，其特征在于，所述檢測線和所 述對照線的形狀排列為"II"、"++"、"TT"、和"卜I"中的任意一種。
【專利摘要】本實用新型公開了一種檢測禽腦脊髓炎病毒的試紙條，包括：檢測層，其包括依次連接的樣品吸附層、結合層、纖維素膜層和吸水層，樣品吸附層限定了用于接觸待檢測樣品的第一端，吸水層限定了遠離待檢測樣品的第二端，結合層包含有膠體金標記的禽腦脊髓炎病毒的第一抗體；檢測線，其設置在纖維素膜層上，檢測線包含包被的禽腦脊髓炎病毒的第二抗體，第一抗體和所述第二抗體與禽腦脊髓炎病毒結合的位點不同；對照線，其也設置在纖維素膜層上且比檢測線遠離第一端，所述對照線包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。與其他檢測方法相比，該試紙條特異性強、靈敏度高、操作簡便、結果顯示直觀、準確、快速，檢測成本低廉。
【IPC分類】G01N33-532, G01N33-577
【公開號】CN204495837
【申請號】CN201520097978
【發明人】趙樸, 鄭玉姝, 鄭麗敏, 高杰, 郭文娟, 郭燕, 韓紅霞, 苗培, 陳磊, 牛然, 馬小靜, 聶紅敏, 耿向華, 姚雪靜, 丁靜靜
【申請人】河南科技學院
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2015年2月11日