一種測定胱抑素c的試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種測定胱抑素C的試劑盒及其制備方法，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分組成試劑盒：試劑R1：緩沖液、無機鹽離子、加速劑、穩定劑、防腐劑，試劑R2：緩沖液、穩定劑、助懸劑、表面活性劑、聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物、防腐劑、膠乳包被抗人胱抑素C抗體，制備方法為：按照組分含量配制好試劑；將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應；用全自動生化分析儀測定反應后的吸光度差值；根據吸光度變化值計算出樣本中的胱抑素C的濃度。本發明具有準確度高等優點。
【專利說明】
一種測定胱抑素 C的試劑盒及其制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及醫學及生物化學技術領域，具體來說是一種測定胱抑素 C的試劑盒及 其制備方法。
【背景技術】
[0002] 胱抑素 C(Cys-C)，是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，也被稱為γ -微量蛋白及γ -后 球蛋白，廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中，是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質， 分子量為13.3KD，由122個氨基酸殘基組成，可由機體所有有核細胞產生，產生率恒定，循環 中的胱抑素 C僅經腎小球濾過而被清除，是一種反映腎小球濾過率變化的內源性標志物，并 在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代謝分解，不返回血液，因此，其血中濃度由腎小球 濾過決定，而不依賴任何外來因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一種反映腎小球濾過率變 化的理想同源性標志物。
[0003] 正常情況下，胱抑素 C(Cys-C)在血清和血漿中的濃度為0.51_1.09mg/L，當腎功能 受損時，胱抑素 C(Cys-C)在血液中的濃度隨腎小球濾過率變化而變化，腎衰時，腎小球濾 過率下降，Cys-C在血液中濃度可增加10多倍;若腎小球濾過率正常，而腎小管功能失常時， 會阻礙Cys-C在腎小管吸收并迅速分解，使尿中的濃度增加100多倍。
[0004] 目前臨床檢測胱抑素 C的主要方法有酶聯免疫吸附法、膠體金法，酶聯免疫吸附 法操作復雜、耗時長，且對操作者有一定的專業技能要求，且無法定量檢測，膠體金法只能 定性檢測。
【發明內容】
[0005] 本發明所要解決的技術問題是為了克服操作復雜且不能定量檢測的缺陷，而提供 一種測定胱抑素 C的試劑盒及其制備方法。
[0006] 本發明解決上述技術問題提供的技術方案是:本發明公開了一種測定胱抑素 C的 試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分組成試劑盒，包括的成分及相應含量 為： 試劑R1: 緩沖液 40~180 mmol/L 無機鹽離子 5CK100 mmol/L 加速劑 5~20 g/L 穩定劑 5~15 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 40~180 mmol/L 穩定劑 10~30 g/L 助懸劑 5~35 mmol/L 表面活性劑 0.5~2.0 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.2~1.2 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體0.5~3.0 g/L 其溶劑為純化水。
[0007] 作為優選，本發明公開了一種測定胱抑素 C的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試 劑R2雙液體組分組成試劑盒，包括的成分及相應含量為： 試劑R1: 緩沖液 110 mmol/L 無機鹽離子 70 mmol/L 加速劑 12 g/L 穩定劑 10 g/L 防腐劑 0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 110 mmol/L 穩定劑 20 g/L 助懸劑 20 mmol/L 表面活性劑 1.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.7 g/L 防腐劑 0.8 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體2.0 g/L 其溶劑為純化水。
[0008] 作為優選，所述的試劑R1中，所述的緩沖液采用MES緩沖液、MOPS緩沖液、M0PS0緩 沖液、HEPES緩沖液、Tri s緩沖液、磷酸鹽緩沖液中的一種或多種的組合，所述的無機鹽離子 采用氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂中的一種或多種的組合，所述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-6000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種的組合，所述的穩 定劑采用牛血清白蛋白、甘露糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二鈉、果糖中的一種或多種的組合， 所述的防腐劑采用苯酚、苯甲酸鈉、疊氮鈉中的一種或多種的組合。
[0009] 作為優選，所述的試劑R2中，所述的緩沖液采用MES緩沖液、MOPS緩沖液、M0PS0緩 沖液、HEPES緩沖液、Tris緩沖液、磷酸鹽緩沖液中的一種或多種的組合，所述的穩定劑采用 牛血清白蛋白、甘露糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二鈉、果糖中的一種或多種的組合，所述的助 懸劑采用阿拉伯膠、海藻酸鈉、膠體二氧化硅、甘油中的一種或多種組合而成，所述的表面 活性劑采用曲拉通X-100,所述的防腐劑采用苯酚、苯甲酸鈉、疊氮鈉中的一種或多種的組 合。 作為優選，所述的試劑R2中，所述的膠乳包被抗人胱抑素 C抗體的制備方法為：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為30~200nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質 量濃度為1.5%的溶液，然后每毫升溶液中加入0.8 mg的1 -乙基-3-( 3-二甲基胺丙基)碳化 二亞胺鹽酸鹽，在20°C~37°C的條件下反應2小時，使用離心機，在20000 rpm/min的轉速下 離心30分鐘，去上清，然后將沉淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖液中，超聲分散，再使用離心 機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖 液中，使得溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為3.0%，超聲分散，然后邊分散邊加入等 體積的含8mg/ml的抗人胱抑素 C抗體的MES緩沖液，混合攪拌，在20°〇37 °C的條件下反應2 小時，直至溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為1.5%為止，加入牛血清白蛋白，使得牛 血清白蛋白的最終濃度為10 g/L為止，在4°C條件下封閉12~18小時，即可制備得到膠乳包 被抗人胱抑素 C抗體。
[0010]作為優選，所述的抗人胱抑素 C抗體為含有能與人胱抑素 C特異性結合的Fab功能 部位的完整抗體或抗體片段。
[0011] 作為優選，本發明還公開了上述測定胱抑素 C的試劑盒的制備方法和使用方法，包 括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 本發明公開了一種測定胱抑素 C的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組 分組成試劑盒，包括的成分及相應含量為： 試劑R1: 緩沖液 40~180 mmol/L 無機鹽離子 50~100 mmol/L 加速劑 5~20 g/L 穩定劑 5~15 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 40~180 mmol/L 穩定劑 10~30 g/L 助懸劑 5~35 mmol/L 表面活性劑 0.5~2.0 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.2~1.2 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體0.5~3.0 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應； (c) 用全自動生化分析儀測定反應后的吸光度差值； (d) 根據吸光度變化值計算出樣本中的胱抑素 C的濃度。
[0012] 作為優選，步驟(b)中，所述的試劑R1與試劑R2的體積比為9:2。
[0013] 作為優選，步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1: 5到1:100之間。
[0014] 本發明的檢測原理是:樣品中胱抑素 C可與試劑中相應的特異性抗-Cys-C抗體結 合形成抗原-抗體復合物，產生一定池度，該池度高低在一定抗體存在時與抗原的含量成正 比，在一定波長下測定濁度并通過多點定標曲線可進行胱抑素 C的定量測定。
式中：△ At以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值 ΔAs以空白管吸光度作對照的校準管吸光度值 Cs校準液中Cys-C的濃度 與現有技術相比，本發明具有以下有益優點：本發明在試劑R2中添加了甘油作為助懸 劑，在表面活性劑的作用下，使得膠乳包被抗人胱抑素 C抗體可均勻懸浮于試劑R2中，同時 在試劑R2中添加了聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物，該共聚物可使膠乳顆粒之間不相互聚集，大 大提高了試劑R2的穩定性和抗體的效價，在加入樣本后參與反應時，在試劑R1中加速劑的 作用下，可迅速與膠乳包被抗人胱抑素 C抗體發生反應，因膠乳包被抗人胱抑素 C抗體懸浮 分散均勻，即使在較低的濃度下，也可迅速發生反應，使得試劑的檢測靈敏度也進一步提 高，檢測的準確度也就大大提高，而且操作方便。
【具體實施方式】
[0016]以下結合具體實施例進一步說明，但本發明并不僅限于這些實施例。
[0017] 實施例1 本發明的試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: Tris緩沖液 110 mmol/L 氯化鉀 70 mmol/L 聚乙二醇-6000 12 g/L 牛血清白蛋白 10 g/L 苯酚 0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 110 mmol/L 甘露糖 20 g/L 海藻酸鈉 20 mmol/L 曲拉通X-100 1.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.7 g/L 苯酚 0.8 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體2.0 g/L 其溶劑為純化水。
[0018] 實施例2 本發明的試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: MOPS緩沖液 40 mmol/L 氯化鈉 100 mmol/L 聚乙二醇-8000 20 g/L 山梨醇 5 g/L 苯甲酸鈉 0.4 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MOPS緩沖液 180 mmol/L 牛血清白蛋白 10 g/L 海藻酸鈉 35 mmol/L 曲拉通X-100 0.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 1.2 g/L 疊氮鈉 0.4 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體3.0 g/L 其溶劑為純化水。 實施例3 試劑盒的制備和使用方法 1、 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體的制備：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為120nm的聚苯 乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質量濃度為1.5%的溶液，然后每毫升溶液中加入 0.8 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反應2小時，使 用離心機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，然后將沉淀懸浮于50 mmol/L的 MES緩沖液中，超聲分散，再使用離心機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，再 將沉淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖液中，使得溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為 3.0%，超聲分散，然后邊分散邊加入等體積的含8mg/ml的抗人胱抑素 C抗體的MES緩沖液，混 合攪拌，在25 °C的條件下反應2小時，直至溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為1.5%為 止，加入牛血清白蛋白，使得牛血清白蛋白的最終濃度為10 g/L為止，在4°C條件下封閉15 小時，即可制備得到膠乳包被抗人胱抑素 C抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: Tris緩沖液 110 mmol/L 氯化鉀 70 mmol/L 聚乙二醇-6000 12 g/L 牛血清白蛋白 10 g/L 苯酚 0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 110 mmol/L 甘露糖 20 g/L 海藻酸鈉 20 mmol/L 曲拉通X-100 1.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.7 g/L 苯酚 0.8 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體2.0 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數設置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長546nm，副波長800nm; (c) 反應時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應方向：正反應； 4、 檢測步驟 (a) 取225μ1試劑R1與3μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入50μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化 ΔΑ = A2-A1; (d) 根據樣本中胱抑素 C(Cys-C)活性1計算出樣本中的胱 抑素 C的濃度。
[0019] 實施例4 試劑盒的制備和使用方法 1、 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體的制備：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為70nm的聚苯 乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質量濃度為1.5%的溶液，然后每毫升溶液中加入 0.8 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反應2小時，使 用離心機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，然后將沉淀懸浮于50 mmol/L的 MES緩沖液中，超聲分散，再使用離心機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，再 將沉淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖液中，使得溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為 3.0%，超聲分散，然后邊分散邊加入等體積的含8mg/ml的抗人胱抑素 C抗體的MES緩沖液，混 合攪拌，在25 °C的條件下反應2小時，直至溶液中的聚苯乙烯微球的最終質量濃度為1.5%為 止，加入牛血清白蛋白，使得牛血清白蛋白的最終濃度為10 g/L為止，在4°C條件下封閉15 小時，即可制備得到膠乳包被抗人胱抑素 C抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: MOPS緩沖液 40 mmol/L 氯化鈉 100 mmol/L 聚乙二醇-8000 20 g/L 山梨醇 5 g/L 苯甲酸鈉 0.4 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MOPS緩沖液 180 mmol/L 牛血清白蛋白 10 g/L 海藻酸鈉 35 mmol/L 曲拉通X-100 0.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 1.2 g/L 疊氮鈉 0.4 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體3.0 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數設置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長546nm，副波長800nm; (c) 反應時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應方向：正反應； 4、 檢測步驟 (a) 取225μ1試劑R1與3μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min;
(c) 加入50μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化 ΔΑ = A2-A1; (d) 根據樣本中胱抑素 C(Cys-C)活性 計算出樣本中的胱 抑素 C的濃度。
[0020] 表1為實施例1所制得的測定胱抑素 C的試劑盒以及實施例2所制得的測定胱抑素 C 的試劑盒分別對質控品1進行測定的結果，其中質控品1中的胱抑素 C的濃度為1.00 mg/L， 測定結果見表1:
由表1可知，本發明所制得的測定胱抑素 C的試劑盒對質控品1的測定結果偏差較小，因 此測定準確度高，而且實施例1為最優的選擇。
[0021] 表2為實施例1所制得的測定胱抑素 C的試劑盒以及實施例2所制得的測定胱抑素 C的試 劑盒分別對質控品2進行測定的結果，其中質控品2中的胱抑素 C的濃度為2.40 mg/L，測定 結果見表2:
由表2可知，本發明所制得的測定胱抑素 C的試劑盒對質控品2的測定結果偏差較小，因 此測定準確度高，而且實施例1為最優的選擇。
[0022] 表3為實施例3所制得的測定胱抑素 C的試劑盒對同一待測樣本進行的多次反復測 定以及實施例4所制得的測定胱抑素 C的試劑盒對同一待測樣本進行的多次反復測定，對所 得的結果進行SD和CV的計算，結果如下：
由表3可知本發明所制得的測定胱抑素 C的試劑盒的精密度比較好，而且由表1可知，實 施例3為最優的選擇。
[0023] 上述實施例僅例示性說明本發明的原理及其功效，而非用于限制本發明。任何熟 悉此技術的人士皆可在不違背本發明的精神及范疇下，對上述實施例進行修飾或改變。因 此，舉凡所屬技術領域中具有通常知識者在未脫離本發明所揭示的精神與技術思想下所完 成的一切等效修飾或改變，仍應由本發明的權利要求所涵蓋。
【主權項】
1. 一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組 分組成試劑盒，包括的成分及相應含量為： 試劑R1: 緩沖液 40~180 mmol/L 無機鹽離子 50~100 mmol/L 加速劑 5~20 g/L 穩定劑 5~15 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 40~180 mmol/L 穩定劑 10~30 g/L 助懸劑 5~35 mmol/L 表面活性劑 0.5~2.0 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.2~1.2 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 膠乳包被抗人胱抑素 C抗體 0.5~3.0 g/L 其溶劑為純化水。2. 根據權利要求1所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨立的試 劑R1和試劑R2雙液體組分組成試劑盒，包括的成分及相應含量為： 試劑R1: 緩沖液 110 mmol/L 無機鹽離子 70 mmol/L 加速劑 12 g/L 穩定劑 10 g/L 防腐劑 0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 110 mmol/L 穩定劑 20 g/L 助懸劑 20 mmol/L 表面活性劑 1.5 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.7 g/L 防腐劑 0.8 g/L 膠乳包被抗人胱抑素C抗體 2.0 g/L 其溶劑為純化水。3. 根據權利要求1或2所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:所述的試劑R1 中，所述的緩沖液采用MES緩沖液、MOPS緩沖液、M0PS0緩沖液、HEPES緩沖液、Tris緩沖液、磷 酸鹽緩沖液中的一種或多種的組合，所述的無機鹽離子采用氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸 鎂中的一種或多種的組合，所述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-6000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種的組合，所述的穩定劑采用牛血清白蛋白、甘露糖、 山梨醇、乙二胺四乙酸二鈉、果糖中的一種或多種的組合，所述的防腐劑采用苯酚、苯甲酸 鈉、疊氮鈉中的一種或多種的組合。4. 根據權利要求1或2所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:所述的試劑R2 中，所述的緩沖液采用MES緩沖液、MOPS緩沖液、MOPSO緩沖液、HEPES緩沖液、Tris緩沖液、磷 酸鹽緩沖液中的一種或多種的組合，所述的穩定劑采用牛血清白蛋白、甘露糖、山梨醇、乙 二胺四乙酸二鈉、果糖中的一種或多種的組合，所述的助懸劑采用阿拉伯膠、海藻酸鈉、膠 體二氧化硅、甘油中的一種或多種組合而成，所述的表面活性劑采用曲拉通X-100,所述的 防腐劑采用苯酚、苯甲酸鈉、疊氮鈉中的一種或多種的組合。5. 根據權利要求1或2所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:所述的試劑R2 中，所述的膠乳包被抗人胱抑素 C抗體的制備方法為：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為30 ~200nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質量濃度為1.5%的溶液，然后每毫 升溶液中加入0.8 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在20°C~37°C的 條件下反應2小時，使用離心機，在20000 rpm/min的轉速下離心30分鐘，去上清，然后將沉 淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖液中，超聲分散，再使用離心機，在20000 rpm/min的轉速下 離心30分鐘，去上清，再將沉淀懸浮于50 mmol/L的MES緩沖液中，使得溶液中的聚苯乙烯微 球的最終質量濃度為3.0%，超聲分散，然后邊分散邊加入等體積的含8mg/ml的抗人胱抑素 C 抗體的MES緩沖液，混合攪拌，在20 °037 °C的條件下反應2小時，直至溶液中的聚苯乙烯微 球的最終質量濃度為1.5%為止，加入牛血清白蛋白，使得牛血清白蛋白的最終濃度為10 g/ L為止，在4°C條件下封閉12~18小時，即可制備得到膠乳包被抗人胱抑素 C抗體。6. 根據權利要求5所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒，其特征在于:所述的抗人胱抑素 C 抗體為含有能與人胱抑素 C特異性結合的Fab功能部位的完整抗體或抗體片段。7. 根據權利要求1或2所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒的制備方法和使用方法，其特 征在于:包括以下步驟： (a)按照下列組分含量配制好試劑： 本發明公開了一種測定胱抑素 C的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組 分組成試劑盒，包括的成分及相應含量為： 試劑R1: 緩沖液 40~180 mmol/L 無機鹽離子 50~100 mmol/L 加速劑 5~20 g/L 穩定劑 5~15 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 40~180 mmol/L 穩定劑 10~30 g/L 助懸劑 5~35 mmol/L 表面活性劑 0.5~2.0 mL/L 聚氧丙烯聚氧乙烯共聚物 0.2~1.2 g/L 防腐劑 0.4~1.2 g/L 膠乳包被抗人胱抑素C抗體 0.5~3.0 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應； (c) 用全自動生化分析儀測定反應后的吸光度差值； (d) 根據吸光度變化值計算出樣本中的胱抑素 C的濃度。8. 根據權利要求7所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒的制備方法和使用方法，其特征在 于:步驟(b )中，所述的試劑R1與試劑R2的體積比為9:2。9. 根據權利要求7所述的一種測定胱抑素 C的試劑盒的制備方法和使用方法，其特征在 于:步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:5到1:100之間。
【文檔編號】G01N21/31GK106093426SQ201610376097
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月31日
【發明人】蔡曉輝, 莊慶華, 吳錚, 徐運
【申請人】安徽伊普諾康生物技術股份有限公司