一種茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法
【專利摘要】本發明的提供一種茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法，通過冷凍干燥待測茶蜂花粉、破壁、過篩，用色差計測定待測茶蜂花粉粉末樣品的a、b值，以色差計測得茶蜂花粉粉末樣品a值和b值判定待測樣品的新鮮度：若a值在13以下，b值在50以下，即可判定該茶蜂花粉是在相當于35℃以上高溫貯存3個月以上，認定為不新鮮。本發明借助色差儀精確測量經干燥后機械破壁茶蜂花粉a值和b值，進而根據該指標判定茶蜂花粉新鮮度。本發明方法設計合理，具有操作簡便，耗時短，在數分鐘內即可完成；靈敏度高，重復性好，易于標準化；設備要求不高，極其容易普及推廣。可在快速檢測茶蜂花粉新鮮度或其它蜂花粉新鮮度中應用。
【專利說明】
一種茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法
技術領域
[0001] 本發明屬于蜂產品檢測領域，涉及一種蜂產品新鮮度的檢測方法，尤其涉及一種 茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法，確切地說是一種采用色差法判定茶蜂花粉新鮮度的方 法。
【背景技術】
[0002] 蜂花粉是蜜蜂從被子植物雄性花藥和裸子植物小孢子葉上的小孢子囊采集的花 粉粒，經過蜜蜂加工而成的花粉團狀物。作為一種自然資源，蜂花粉中不僅含有非常豐富的 蛋白質、脂肪、糖類、微量元素、維生素，還含有對生物體生理功能具有特殊功效的核酸、黃 酮類、激素等生物活性物質，被譽為"全能營養庫"、"完全營養品"。隨著對蜂花粉研究的深 入，其具有的多種生理藥理功能被逐步發掘，如預防衰老、養顏美容、增強免疫力、抗缺氧 等，同時對前列腺疾病、心腦血管病、肝病、習慣性便秘、貧血、糖尿病等有一定治療和輔助 治療功能，因此也被譽為"濃縮的天然藥庫"。
[0003] 然而，隨著蜂花粉貯存時間的延長以及貯存條件的變化，蜂花粉中的營養成分和 生物活性物質會逐漸減少，相應地，蜂花粉所具有的保健功效也會有所降低甚至消失。研究 發現，蜂花粉在室溫下保存一年后，會損失超過50 %的抗氧化能力。因此，蜂花粉新鮮度與 其品質之間存在密切的關系。
[0004]早在上個世紀，國外科研工作者就開始對蜂花粉組分和貯存條件之間的關系進行 了研究，并對一些在蜂花粉貯存過程中能夠量化的指標進行了研究。但由于蜂花粉的成分 復雜，不同植物來源花粉的成分差異比較大，而且對儲存環境較為敏感，尋找并確立蜂花粉 新鮮度的合適指標并非易事。迄今為止，國際上沒有一個公認的可如實反映蜂花粉新鮮度 并能在實際應用中推廣的指標，也沒有一種適合的評價方法。
[0005] 我國現有蜜蜂900多萬群，年產蜂花粉4500噸左右(不包括蜂農自留為飼料部分）， 國內加工和零售量大約為2500噸，出口 2000噸左右。而在這巨大市場需求的上游，在采集、 貯存和運輸等各個環節中，嚴重缺乏保持其新鮮度的意識一一日光曝曬、高溫烘干、非冷藏 運輸等操作均能造成蜂花粉新鮮度急劇下降，進而使加工原料的品質大大下降。
[0006] 因此，尋找合適的蜂花粉新鮮度指標以及相應的檢測方法已經迫在眉睫，這不僅 有助于規范蜂花粉市場，也是對蜂花粉科研領域的拓展與深入，對蜂花粉產業的發展具有 重大的戰略意義。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的是提供一種茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法。該方法為借助色差儀 精確測量經干燥后機械破壁茶蜂花粉a值和b值，進而根據該指標判定茶蜂花粉新鮮度。
[0008] 本發明方法通過以下步驟實現：
[0009] (1)將待測茶蜂花粉經冷凍干燥后，進行機械破壁，過100目的篩子，稱取大于2克 樣品平鋪于樣品皿中測定；
[0010] (2)用色差計測定茶蜂花粉粉末樣品的a、b值，獨立測定3次，取平均值；
[0011] (3)以色差計測得茶蜂花粉粉末樣品a值和b值判定待測樣品的新鮮度:若a值低于 13,且b值低于50,即可判定該茶蜂花粉是在相當于35°C以上高溫貯存3個月以上，認定為不 新鮮;如果a和b值分別高于13和50，就認為是新鮮的。
[0012] 國內外普遍采用分光測色儀對固體和液體顏色進行量化，用Lab色度系統表示顏 色數據，Lab系統是國際照明委員會發布的一種均勻色度系統，即顏色之間視覺上的距離與 顏色坐標上的歐幾里德距離成正比，這是目前最為常用的色度系統之一。在該系統中，有一 個明度因數L和兩個色度因數a和b:L值在0~100之間，L值越大表示越亮，反之越暗;a、b值 在-120~120之間，+a表示紅色，-a表示綠色，+b表示黃色，-b表示藍色。任何顏色的色彩變 化可以用a、b數值來表示，任何顏色的層次變化可以用L數值來表示。本發明采用a、b數值對 不同儲存條件下的茶蜂花粉的顏色進行量化，從而判定茶蜂花粉的新鮮程度。
[0013] 本發明的另一個目的是提供所述的方法在茶蜂花粉新鮮度的快速檢測中應用。
[0014] 本發明是借助色差儀精確測量經干燥后機械破壁茶蜂花粉a值和b值，進而根據該 指標檢測茶蜂花粉新鮮度。本發明方法設計合理，具有以下特點：（1)操作簡便，耗時短，在 數分鐘內即可完成。（2)靈敏度高，重復性好，易于標準化。（3)設備要求不高，極其容易普及 推廣。
【附圖說明】
[0015] 圖1是35 °C下不同貯存時間處理茶蜂花粉的顏色比較。
[0016]圖2是室溫下不同貯存時間處理茶蜂花粉的顏色比較。
【具體實施方式】
[0017] 本發明結合附圖和實施例作進一步的說明。
[0018] 實施例1
[0019]茶蜂花粉35 °C下貯存1個月、2個月、3個月、6個月和12個月，進行機械破壁，過100 目的篩子，稱取大于2克樣品平鋪與樣品皿中測定，用色差計測定茶蜂花粉粉末樣品的a、b 值，獨立測定3次，取平均值。
[0020]稱取約0.3g已粉碎的待測蜂花粉樣品，加入7.5mL乙醇超聲輔助提取，提取完全 后，過0.22μπι濾膜，獲得濾液，并用乙醇作相應的稀釋后待測。精密稱取DPPH標準品約15mg， 用乙醇定容至15mL，即得DPPH標準工作液（lmg/mL)，低溫(4°C)、避光保存備用。以維生素 C 為對照品，在酶標儀波長517nm處測定吸光度，使其讀數在0.2~0.8之間。
[0021 ] DPPH清除率（％ ) = (A0-AS)/A0 X 100%
[0022] 式中:AS:加入樣品提取液的DPPH溶液的吸光度；
[0023] A0:加入無水乙醇的DPPH溶液的吸光度。
[0024]計算清除50%DPPH所需樣品及維生素 C對照品的濃度，即半抑制濃度IC50,比較樣 品清除DPPH自由基活性。
[0025]表1茶蜂花粉35 °C下儲存不同時間的a、b值及抗氧化活性
[0027] 從表1可見，茶蜂花粉在35°C下儲存3個月時，a、b值顯著下降，IC50值明顯升高。結 合圖1顏色反應可見，茶花粉儲存2個月以上時，色澤明顯變淺，因此，可根據茶蜂花粉在35 °C貯存3個月時的數據作為對照，即若a值在13以下，或b值在50以下，即可判定茶蜂花粉是 相當于在35°C以上高溫貯存3個月以上，認定為不新鮮。
[0028] 實施例2
[0029] 茶蜂花粉室溫下貯存1個月、2個月、3個月、6個月和12個月，進行機械破壁，過100 目的篩子，稱取大于2克樣品平鋪與樣品皿中測定，用色差計測定茶蜂花粉粉末樣品的a、b 值，獨立測定3次，取平均值。
[0030] 稱取約0.3g已粉碎的待測蜂花粉樣品，加入7.5mL乙醇超聲輔助提取，提取完全 后，過0.22μπι濾膜，獲得濾液，并用乙醇作相應的稀釋后待測。精密稱取DPPH標準品約15mg， 用乙醇定容至15mL，即得DPPH標準工作液（lmg/mL)，低溫(4°C)、避光保存備用。以維生素 C 為對照品，在酶標儀波長517nm處測定吸光度，使其讀數在0.2~0.8之間。
[0031 ] DPPH清除率（％ ) = (A0-AS)/A0 X 100%
[0032] 式中:AS:加入樣品提取液的DPPH溶液的吸光度；
[0033] A0:加入無水乙醇的DPPH溶液的吸光度。
[0034]計算清除50%DPPH所需樣品及維生素 C對照品的濃度，即半抑制濃度IC50,比較樣 品清除DPPH自由基活性。
[0035]表2茶蜂花粉室溫下儲存不同時間的a、b值及抗氧化活性
[0037]從表2可見，茶蜂花粉在室溫下儲存12個月時，a、b值顯著下降，色澤明顯變淺， IC50值明顯升高，可根據茶蜂花粉在35°C貯存3個月時的數據作為對照，即若a值在13以下， b值在50以下，即可判定茶蜂花粉相當于是在35°C以上高溫貯存3個月以上，認定為不新鮮。 結合表2和圖2可見，茶花粉儲存6個月時，色澤變淺，a、b值下降，相當于35°C儲存2個月時的 顏色。
[0038] 實施例3
[0039]茶蜂花粉4°C下貯存1個月、2個月、3個月、6個月和12個月，進行機械破壁，過100目 的篩子，稱取大于2克樣品平鋪與樣品皿中測定，用色差計測定茶蜂花粉粉末樣品的a、b值， 獨立測定3次，取平均值。
[0040]稱取約0.3g已粉碎的待測蜂花粉樣品，加入7.5mL乙醇超聲輔助提取，提取完全 后，過0.22μπι濾膜，獲得濾液，并用乙醇作相應的稀釋后待測。精密稱取DPPH標準品約15mg， 用乙醇定容至15mL，即得DPPH標準工作液（lmg/mL)，低溫(4°C)、避光保存備用。以維生素 C 為對照品，在酶標儀波長517nm處測定吸光度，使其讀數在0.2~0.8之間。
[0041 ] DPPH清除率（％ ) = (A0-AS)/A0 X 100%
[0042] 式中:AS:加入樣品提取液的DPPH溶液的吸光度；
[0043] A0:加入無水乙醇的DPPH溶液的吸光度。
[0044]計算清除50%DPPH所需樣品及維生素 C對照品的濃度，即半抑制濃度IC50，比較樣 品清除DPPH自由基活性。
[0045]表3茶蜂花粉4 °C下儲存不同時間的a、b值及抗氧化活性
[0048]從表3可見，茶蜂花粉在4°C下儲存12個月時，a、b值均無顯著變化，盡管IC50值升 高，但仍具有較強抗氧化活力，說明茶蜂花粉可以在4°C下保鮮一年仍然較新鮮。
【主權項】
1. 一種茶蜂花粉新鮮度的快速檢測方法，其特征在于，通過以下步驟實現： (1) 將待測茶蜂花粉經冷凍干燥后，進行機械破壁，過100目的篩子，稱取大于2克樣品 平鋪于樣品皿中測定； (2) 用色差計測定茶蜂花粉粉末樣品的a、b值，獨立測定3次，取平均值； (3) 新鮮度檢測：若a值在13以下，b值在50以下，判定該茶蜂花粉是在相當于35°C以上 高溫貯存3個月以上，認定為不新鮮。2. 根據權利要求1所述的方法在茶蜂花粉新鮮度的快速檢測中的應用。
【文檔編號】G01N33/02GK106093320SQ201610452690
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月20日
【發明人】胡福良, 平舜, 張翠平, 鄭火青, 盧媛媛
【申請人】浙江大學