一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法
【專利摘要】本發明提供一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法，該方法包括分別配制溴化銨乙腈溶液、磷酸緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液，再加水稀釋過濾為流動相。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；檢測波長為254nm；流速為1.5ml/min。該方法在滿足雜質A、雜質C與相鄰峰的分離要求外，其他各雜質的分離也更易達到要求，具有可靠、準確、穩定、方法專屬性強、靈敏度高、重復性好等特點，非常適合用于工業生產和日常雜質檢測中。
【專利說明】
_種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法
技術領域
[0001]本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法。
【背景技術】
[0002]頭孢曲松鈉是第三代水溶性半合成頭孢菌類抗生素，已經被多國藥典收載。該藥品為長效、廣譜頭孢菌素，通過抑制細胞壁的合成產生抗菌作用，對格蘭氏陽性菌和陰性菌具有較強的殺菌作用。對包括青霉素霉和頭孢菌素酶在內的內酰胺酶有高度穩定性。主要適用于對本品敏感的致病菌引起的肺炎、耳鼻喉感染、泌尿系統感染、敗血癥、腦膜炎、骨和關節感染、皮膚軟組織感染、腹膜炎、膽道及胃腸道感染、包括淋病在內的生殖系統感染等，也可用于術前預防感染。
[0003]在工業生產中，由于頭孢曲松鈉的生產工藝比較復雜，藥物本身性質不夠穩定，在生產和貯藏過程中極易產生雜質，且雜質種類和產生途徑較多、雜質含量低，給其雜質研究帶來一定困難。該藥物容易水解生成雜質C(三嗪環)和含羥基化合物，前者也是合成頭孢曲松鈉的起始原料，后者容易在偏酸性的條件下縮合形成內脂;頭孢曲松鈉在光照條件下容易形成雜質Α(反式頭孢曲松)；反應的起始原料7-ACA、三嗪環和AE活性酯以及中間體7-ACT也都有可能出現在最終產品中。這些雜質的存在，不僅使藥效降低，抗菌活性減弱，甚至可能對人體產生危害。石藥集團中奇制藥技術(石家莊)有限公司和中國醫學科學院醫藥生物技術研究所采用斑馬魚胚胎毒性試驗發現在10—3mol/L濃度下雜質Α、雜質C和7-ACA可引起斑馬魚胚胎畸形和死亡，其中低劑量的雜質A即可引起斑馬魚胚胎毒性反應，毒性在三種雜質中最大。為了保證藥品質量和臨床用藥的安全有效，必須對產品中的有可能出現的雜質進行分析研究。
[0004]注射用頭孢曲松鈉現有的有關物質檢測方法，各中間體及降解雜質的分離度，特別是雜質A、雜質C與相鄰峰的分離效果不好。為使各雜質的分離度達到要求，更適合有關物質的檢測，從雜質檢測準確、方法檢測可行等方面考慮，我們建立了一個新的注射用頭孢曲松鈉質量控制方法，使得雜質A、雜質C與相鄰峰的分離度符合要求，同時也使得其他各雜質分離度符合要求，且系統適用性良好。
【發明內容】
[0005]我們采用常見的高效液相色譜法，通過優化流動相、流速、檢測波長等指標并采用已知雜質定位，加校正因子的自身對照法，注重對注射用頭孢曲松鈉雜質A和雜質C的控制，建立了一種新的檢測方法。該方法可使雜質A、雜質C與相鄰峰更好得分離，也使其他各雜質分離的更好，更適合有關物質的檢測。
[0006]為實現上述目的，本發明采用以下技術方案:
本發明提供一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法，其特征在于:
1、色譜條件:
分別配制溴化銨乙腈溶液、磷酸緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液，再加水稀釋過濾為流動相。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;檢測波長為254nm;流速為1.5ml/min;柱溫為30°C。
[0007]2、系統適用性實驗:
分別稱取5mg頭孢曲松對照品、5mg雜質A對照品和5mg雜質C對照品，至10mI量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。
[0008]量取20μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，雜質A峰、雜質C峰與頭孢曲松峰的相對保留時間分別約為1.3、0.5，頭孢曲松峰與雜質A峰之間的分離度應不小于3.0。
[0009]3、供試品溶液:
取裝量差異項下的內容物適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋制成每Iml中約含
0.3mg的溶液，作為供試品溶液;精密量取1.0ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。
[0010]4、本方法還進行了專屬性、線性與范圍、方法精密度等一系列方法驗證，均符合要求。
[0011]綜上所述，本發明提供一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法，在滿足雜質A、雜質C與相鄰峰的分離要求外，其他各雜質的分離也更易達到要求，具有準確、可靠、穩定、方法專屬性強、靈敏度高、重復性好等特點，非常適合用于工業生產和日常雜質檢測中。
【具體實施方式】
[0012]下面進一步闡述本發明的【具體實施方式】，但本發明的實施方式不限于此，任何對本發明的實施做出的非實質性簡單改變或者替換，都應被包含在本發明的范圍內。
[0013]實施例1
高效液相色譜儀:島津LC-20AT/SPD-20A;色譜柱:大連依利特0DS2(C18柱)，柱長250111111，內徑4.6111111，粒徑54111;群檢測器:波長25411111;流速:1.51111/111；[11;進樣量:2(^1;柱溫:30Γ。
[0014]流動相:溴化銨乙腈溶液一水一磷酸緩沖液-枸櫞酸鹽緩沖液。
[0015]系統適用性試驗:
分別稱取5mg頭孢曲松對照品、5mg頭孢曲松雜質A對照品和5mg頭孢曲松雜質C對照品，置10ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為系統適用性溶液，量取20μ1注入液相色譜儀，記錄色譜圖，頭孢曲松雜質A峰、頭孢曲松雜質C峰與頭孢曲松峰的相對保留時間分別約為1.3、0.5，頭孢曲松峰與頭孢曲松雜質A峰之間的分離度應不小于3.0。
[0016]供試品溶液:
取裝量差異項下的內容物，混合均勻，精密稱取適量(約30mg)，置10ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
[0017]對照溶液:
精密移取上述供試品溶液1.0ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。
[0018]測定法:
精密量取取對照溶液20μ1，注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的25%;精密量取供試品溶液和對照溶液各20μ1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。
[0019]限度: 供試品溶液色譜圖中雜質峰，頭孢曲松雜質A按校正后的峰面積計算(乘以校正因子
1.2)不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%)，雜質C峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.8倍(0.8%)，其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.2倍(0.2%)，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)，供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積0.05倍(0.05%)的峰可忽略不計，其出峰順序依次為:內脂，7-ACA，雜質C(三嗪環)，7-ACT，頭孢曲松，雜質A(頭孢曲松反式異構體)，見液相色譜圖1。
[0020]計算公式:
雜質C和其他單一雜質按下式計算:
X雜=(A雜/A對)X 1%
雜質A按下式計算:
X雜=(A雜 Xf/A對)X1%
總雜質按下式計算:
父雜=(々雜4\1.2 + A雜質C+A單雜+A…)/A對Xl%。
[0021 ]式中:A雜為供試品溶液中各雜質峰的峰面積。
[0022]f為雜質峰的校正因子。
[0023]A對為對照溶液主峰的峰面積。
【附圖說明】
[0024]圖1是液相色譜圖。
【主權項】
1.一種注射用頭孢曲松鈉質量控制方法，其特征在于: 1)色譜條件: 分別配制溴化銨乙腈溶液、磷酸緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液，再加水稀釋過濾為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為254nm，流速為1.5ml/min，柱溫為30 V ； 2)系統適用性實驗: 分別稱取5mg頭孢曲松對照品、5mg雜質A對照品和5mg雜質C對照品，至1 Om I量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取20μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，雜質A峰、雜質C峰與頭孢曲松峰的相對保留時間分別約為1.3、0.5，頭孢曲松峰與雜質A峰之間的分離度應不小于3.0; 3)供試品溶液: 取裝量差異項下的內容物適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋制成每Iml中約含0.3mg的溶液，作為供試品溶液;精密量取1.0ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。2.根據權利要求1所述，以溴化銨乙腈溶液一水一磷酸緩沖液-枸櫞酸鹽緩沖液為流動相，其特征在于對應組分的體積比為400?480: 460?500: 58?61: 5?6。3.根據權利要求1所述，溴化銨乙腈溶液的百分含量為0.833%?1%;磷酸緩沖液中，磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀體積之比為I: I，調pH至7.0 ±0.2 ；枸櫞酸鹽緩沖液的百分含量為2%?2.05%，調節 pH至5.0 ±0.2。
【文檔編號】G01N30/88GK106093263SQ201610517884
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月1日
【發明人】彭繼先, 薛洪智, 王艷紅, 張春蘭, 任麗顏
【申請人】山東潤澤制藥有限公司