一種鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法
【專利摘要】本發明涉及一種藥品中金屬殘留的測定方法,具體涉及一種原料藥鹽酸納布啡中鈀金屬殘留的測定方法。所述方法包括制備鈀標準使用液、制備供試品溶液、空白溶液、制備標準曲線、供試品溶液測定、空白溶液測定、計算。本發明提供的鹽酸納布啡中鈀元素殘留測定方法，操作步驟簡單，可定性定量檢測出原料藥鹽酸納布啡中鈀元素可能的殘留量。對鹽酸納布啡生產工藝中鈀催化劑回收完全具有指導意義，并防止了鹽酸納布啡原料中殘留的金屬進一步帶入到制劑中，提高了臨床用藥安全性，為鹽酸納布啡質量標準的提高提供了依據。
【專利說明】
一種鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法
技術領域
[0001] 本發明涉及一種藥品中金屬殘留的測定方法，具體涉及一種原料藥鹽酸納布啡中 鈀金屬殘留的測定方法。
【背景技術】
[0002] 化學藥合成過程中的起始原料、催化劑、副產物、未反應完全的試劑、金屬容器、管 道以及其他不耐酸堿的金屬工具均可能引入金屬雜質，而原輔料中的金屬殘留物會進一步 帶入到藥物制劑中。這些金屬雜質通常無治療作用，基于藥物安全性和質量控制的要求應 當予以嚴格控制。
[0003] 鹽酸納布啡(Nalbuphine hydrochloride)為(-)_17_(環丁燒甲基)_4，5a_環氧 基-3,6a，14-三羥基嗎啡喃鹽酸鹽，是一種嗎啡類中樞鎮痛藥，其化學結構與納洛酮和羥嗎 啡酮極為相似。鹽酸納布啡是阿片受體的激動-拮抗混合型鎮痛劑，成癮性極小，可用于各 種疾病引起的中度到重度疼痛的止痛治療。其不良反應與嗎啡及其它阿片藥相似，但比嗎 啡輕，其依賴性僅與WHO肯定的非麻醉藥噴他佐辛相當，然而其鎮痛作用卻是噴他佐辛的3 倍，且鹽酸納布啡在精神、擬交感、呼吸抑制等方面的副作用都比噴他佐辛和嗎啡等藥物 低，因而有廣泛的應用價值，國外已作為麻醉輔助用藥以及手術后止痛藥等用于臨床。鹽酸 納布啡原料的合成工藝，需要經過氧化、水解、乙酰化、氫化、酰胺還原、成鹽、精制等過程， 才能得到最終的成品，在氫化反應過程中使用了鈀金屬做催化劑，該金屬可能在原料藥中 以最初形式殘留，也可能在后續化學反應過程以其他形式存在。
[0004] 依據EMEA/CHMP頒布(2008年9月1日實施）的金屬催化劑或金屬試劑殘留量限度的 指導原則（GUIDELINE ON THE SPECIFICATION LIMITS FOR RESIDUES OF METAL CATALYSTS OR METAL REAGENTS)對鹽酸納布啡進行金屬鈀殘留的分析研究。依據指導原 則，金屬鈀的分類為第I類的1A亞組，作為靜脈和□服用原料，鹽酸納布啡的每日最大計量 未超過l〇g，方法中鈀的濃度限度確定為lppm。
[0005] 目前國內對許多藥物中金屬殘留量的控制限度還缺乏明確的技術要求，現有技術 中針對鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬的限量測定方法也未見公開。
【發明內容】
[0006] 為了彌補現有技術的不足，本發明提供一種鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測 定方法，該方法采用原子吸收分光光度法以石墨爐為原子化器對原料藥鹽酸納布啡中可能 殘留的鈀金屬進行檢測，具有專屬性強、靈敏度高、檢測限低等優點，提高了鹽酸納布啡的 用藥安全性，也為其它藥物中金屬殘留量的檢測和控制限度提供了參考依據。
[0007] 本發明技術方案為：
[0008] -種鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法，所述方法包括如下步驟：
[0009] 1)制備鈀標準使用液:精密量取1000iig/ml的鈀單元素標準溶液1.0ml于100ml量 瓶中，加入5ml光譜純硝酸，用超純水定容至100ml，制得濃度為lOμg/ml的鈀單元素標準溶 液，取濃度為lOμg/ml的鈀單元素標準溶液10.Oml于100ml量瓶中，用超純水定容至100ml， 制得濃度為1邱/1111的鈀單元素標準溶液，取濃度為1辟/1111的鈀單元素標準溶液5.〇1111于 100ml容量瓶中，以0.2%硝酸定容至100ml，得濃度為0.05μg/ml(50yg/L)鈀標準使用液； [0010] 2)制備供試品溶液:取供試品約0.2g，精密稱定，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入 8ml光譜純硝酸，置微波消解儀中進行程序消化，至溶液澄清，消解完全后置電熱板上加熱 至近干，用0.2%硝酸洗入10ml量瓶中；
[0011] 3)制備空白溶液:取8ml光譜純硝酸，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入8ml硝酸，置 微波消解儀中進行程序消化，至溶液澄清，消解完全后置電熱板上加熱至近干，用〇. 2 %硝 酸洗入l〇ml量瓶中；
[0012] 4)制備標準曲線：使用安捷倫AA240Z石墨爐原子吸收分光光度器，采用高溫熱解 涂層，塞曼接頭石墨管，采用塞曼背景方式，工作站參數設置如下：
[0013] 波長：244.8nm;
[0014] 狹縫：〇.2nm;
[0015] 電流:5.0A;
[0016] 進樣量:10yl;
[0017] 以鈀標準使用液作為母液、0.2%硝酸為制備液，以空白調零，自動進樣器分別取 母液2、4、6、8、10yl，用制備液稀釋成最大濃度不超過75yg/L的標準系列樣品，以吸光度為 縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；
[0018] 5)供試品溶液測定:在標準曲線的同等儀器條件下，測定供試品溶液的吸光度，從 標準曲線上求得供試品溶液的濃度P1;
[0019] 6)空白溶液測定:在標準曲線的同等儀器條件下，測定空白溶液的吸光度，從標準 曲線上求得空白溶液的濃度P0;
[0020] 計算:將上述得到的PI、P0代入如下公式，可算出供試品溶液中鈀金屬的含量，即 鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留量，單位mg/kg表示，結果用ppm表示，
[0022]其中:P1-表示樣品代入標準曲線公式得到的濃度，單位:yg/L;
[0023] P0-表示空白代入標準曲線公式得到的濃度，單位:yg/L;
[0024] v一表示樣品定容體積，單位:ml;
[0025] M一表示樣品質量，單位:g;
[0026] 完成鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定。
[0027] 所述步驟2)、步驟3)中程序消化參數設置如下：
[0028] 第一階段:溫度不高于120°C，不低于100°C，保持時間在5-8分；
[0029] 第二階段:溫度不高于130°C，不低于160°C，保持時間在5-8分鐘；
[0030] 第三階段:溫度不高于180°c，不低于150°C，時間保持在5-10分鐘；
[0031] 第四階段:溫度不高于200°C，不低于180°C，時間保持在5-10分鐘。
[0032]優選的，所述步驟2)、步驟3)程序消化參數設置如下表1:
[0033]表1程序消化設置參數
[0035]優選地，所述步驟4)制備標準曲線所需標準系列樣品濃度為：10iig/L、20iig/L、30ii g/L、40yg/L、50yg/L。測得吸光度對應如下表2:
[0036]表2標注使用液的吸光度
[0038]所述步驟4)中石墨爐升溫程序參數設置如下表3:
[0039]表3石墨爐升溫程序參數設置
[0041 ]本發明有益效果：
[0042] 1、本發明提供的鹽酸納布啡中鈀元素殘留測定方法，操作步驟簡單，可定性定量 檢測出原料藥鹽酸納布啡中鈀元素可能的殘留量。對鹽酸納布啡生產工藝中鈀催化劑回收 完全具有指導意義，并防止了鹽酸納布啡原料中殘留的金屬進一步帶入到制劑中，提高了 臨床用藥安全性，為鹽酸納布啡質量標準的提高提供了依據。
[0043] 2、本發明的測定方法中采用244.8nm的譜線，提高了檢測靈敏度;使用塞曼背景校 正使消除更多干擾，提高檢測準確性;制備方法使用微波消解法，使溶劑使用量更少、自動 化更高、易于操作。
【附圖說明】
[0044]附圖1本發明檢測方法標準曲線。
【具體實施方式】
[0045]下面結合實施例來進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于實施 例表述的范圍。
[0046] 一、制備標準曲線：
[0047] 1)、制備鈀標準使用液:精密量取1000μg/ml的鈀單元素標準溶液1.0ml于100ml量 瓶中，加入5ml光譜純硝酸，用超純水定容至100ml，制得濃度為lOμg/ml的鈀單元素標準溶 液，取濃度為l〇μg/ml的鈀單元素標準溶液10.0ml于100ml量瓶中，用超純水定容至100ml， 制得濃度為1邱/1111的鈀單元素標準溶液，取濃度為1辟/ 1111的鈀單元素標準溶液5.〇1111于 100ml容量瓶中，以0.2%硝酸定容至100ml，得濃度為0.05μg/ml(50yg/L)鈀標準使用液，使 用安捷倫AA240Z石墨爐原子吸收分光光度器，采用高溫熱解涂層，塞曼接頭石墨管，采用塞 曼背景方式，工作站參數設置如下：
[0048] 波長：244.8nm;
[0049] 狹縫：〇.2nm;
[0050] 電流 5.0A;
[0051] 進樣量：10yl;
[0052]以鈀標準使用液作為母液、0.2%硝酸為制備液，以空白調零，自動進樣器分別取 母液4、8、12、16、20辟，用制備液稀釋，配制成濃度為：10辟/1、20邱/1、30辟/1、40邱/1、5011 g/L的標準系列樣品，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線見附圖1;
[0053] 回歸方程為:A = 0.00429C+0.01355,其中r = 0.9990>0.99,為有效曲線，A為吸光 度、C為濃度。
[0054] 2)、空白液制備與測定
[0055]制備空白溶液:取8ml光譜純硝酸，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入8ml硝酸，置微 波消解儀中進行程序消化，至溶液澄清，消解完全后置電熱板上加熱至近干，用0.2%硝酸 洗入10ml量瓶中；
[0056]在標準曲線的同等儀器條件下，測定空白溶液的吸光度，從標準曲線上求得空白 溶液的濃度P0。
[0057] 3)供試品制備與測定：
[0058] 實施例1
[0059] 取編號為NB160301(R)供試品0.2g，精密稱定，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入 8ml硝酸，置微波消解儀中以空白溶液設定的相同程序進行消化，至溶液澄清。消解完全后 置電熱板上加熱至近干，用0.2%硝酸洗入10ml量瓶中。
[0060] 將供試溶液通過以石墨爐為原子化器的原子吸收分光光度計，儀器方法與鈀標準 使用液的測定相同。比較供試品溶液和標準曲線上各點的吸光度值，供試品中檢測出的鈀 元素吸光度值小于標準曲線中20yg/L的鈀濃度溶液吸光度值，則限度符合規定。
[0061] 記錄供試品在鈀燈下的吸光度值，通過標準曲線查得相應的濃度，將得到的供試 品濃度帶入下列計算公式，可算出供試品溶液中鈀的含量，即鹽酸納布啡原料藥中鈀元素 殘留量，用mg/kg表示。
[0066] 實施例2
[0067] 取編號為NB160303(R)供試品0.2g，精密稱定，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入 8ml硝酸，置微波消解儀中以空白溶液設定的相同程序進行消化，至溶液澄清。消解完全后 置電熱板上加熱至近干，用0.2%硝酸洗入10ml量瓶中。
[0068] 將供試溶液通過以石墨爐為原子化器的原子吸收分光光度計，儀器方法與鈀標準 使用液的測定相同。比較供試品溶液和標準曲線上各點的吸光度值，供試品中檢測出的鈀 元素吸光度值小于標準曲線中20yg/L的鈀濃度溶液吸光度值，則限度符合規定。
[0069] 記錄供試品在鈀燈下的吸光度值，通過標準曲線查得相應的濃度。得到的供試品 濃度帶入下列計算公式，可算出供試品溶液中鈀的含量，即鹽酸納布啡原料藥中鈀元素殘 留量，用mg/kg表示。
[0074] 實施例3
[0075] 取編號為NB121201(長36)供試品0.2g，精密稱定，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加 入8ml硝酸，置微波消解儀中以空白溶液設定的相同程序進行消化，至溶液澄清。消解完全 后置電熱板上加熱至近干，用0.2 %硝酸洗入10ml量瓶中。
[0076]將供試溶液通過以石墨爐為原子化器的原子吸收分光光度計，儀器方法與鈀標準 使用液的測定相同。比較供試品溶液和標準曲線上各點的吸光度值，供試品中檢測出的鈀 元素吸光度值小于標準曲線中20yg/L的鈀濃度溶液吸光度值，則限度符合規定。
[0077]記錄供試品在鈀燈下的吸光度值，通過標準曲線查得相應的濃度。得到的供試品 濃度帶入下列計算公式，可算出供試品溶液中鈀的含量，即鹽酸納布啡原料藥中鈀元素殘 留量，用mg/kg表示。
[0082]上述的實施例僅為本發明的優選技術方案，而不應視為對于本發明的限制，本申 請中的實施例及實施例中的特征在不沖突的情況下，可以相互任意組合。本發明的保護范 圍應以權利要求記載的技術方案，包括權利要求記載的技術方案中技術特征的等同替換方 案為保護范圍。即在此范圍內的等同替換改進，也在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法，其特征在于，所述方法包括如下 步驟： 1) 制備鈀標準使用液:精密量取1 〇〇〇μg/ml的鈀單元素標準溶液1.0ml于100ml量瓶中， 加入5ml光譜純硝酸，用超純水定容至100ml，制得濃度為lOμg/ml的鈀單元素標準溶液，取 濃度為l〇μg/ml的鈀單元素標準溶液10.0ml于100ml量瓶中，用超純水定容至100ml，制得濃 度為lμg/ml的鈀單元素標準溶液，取濃度為lμg/ml的鈀單元素標準溶液5.0ml于100ml容量 瓶中，以0.2%硝酸定容至100ml，得濃度為0.05μg/ml鈀標準使用液； 2) 制備供試品溶液:取供試品約0.2g，精密稱定，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入8ml 光譜純硝酸，置微波消解儀中進行程序消化，至溶液澄清，消解完全后置電熱板上加熱至近 干，用0.2 %硝酸洗入10ml量瓶中； 3) 制備空白溶液:取8ml光譜純硝酸，置于100ml聚四氟乙烯罐中，加入8ml硝酸，置微波 消解儀中進行程序消化，至溶液澄清，消解完全后置電熱板上加熱至近干，用〇. 2 %硝酸洗 入l〇ml量瓶中； 4) 制備標準曲線:使用安捷倫AA240Z石墨爐原子吸收分光光度器，采用高溫熱解涂層， 塞曼接頭石墨管，采用塞曼背景方式，工作站參數設置如下： 波長:244.8nm; 狹縫:0.2nm; 電流:5.0A; 進樣量:l〇yl; 以鈀標準使用液作為母液、〇. 2%硝酸為制備液，以空白調零，自動進樣器分別取母液 2、4、6、8、lOiil，用制備液稀釋成最大濃度不超過75iig/L的標準系列樣品，以吸光度為縱坐 標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線； 5) 供試品溶液測定:在標準曲線的同等儀器條件下，測定供試品溶液的吸光度，從標準 曲線上求得供試品溶液的濃度P1; 6) 空白溶液測定:在標準曲線的同等儀器條件下，測定空白溶液的吸光度，從標準曲線 上求得空白溶液的濃度P0; 計算:將上述得到的Pl、P〇代入如下公式，可算出供試品溶液中鈀金屬的含量，即鹽酸 納布啡原料藥中鈀金屬殘留量，單位mg/kg表示，結果用ppm表示，其中:P1-表示樣品代入標準曲線公式得到的濃度，單位:yg/L; P0-表示空白代入標準曲線公式得到的濃度，單位:yg/L; V-表示樣品定容體積，單位:ml; M-表示樣品質量，單位:g; 完成鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定。2. 根據權利要求1所述的鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法，其特征在于，所 述步驟2)、步驟3)中程序消化參數設置如下： 第一階段:溫度不高于120°C，不低于KKTC，保持時間在5-8分； 第二階段:溫度不高于130°C，不低于160°C，保持時間在5-8分鐘； 第三階段:溫度不高于180°C，不低于150°C，時間保持在5-10分鐘； 第四階段:溫度不高于200°C，不低于180°C，時間保持在5-10分鐘。3. 根據權利要求1所述的鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法，其特征在于:所 述步驟4)制備標準曲線所需標準系列樣品濃度為：10iig/L、20iig/L、30iig/L、40iig/L、50iig/ L〇4. 根據權利要求1所述的鹽酸納布啡原料藥中鈀金屬殘留的測定方法，其特征在于:所 述步驟4)中石墨爐升溫程序參數設置如下： 第1階段:85°C，保持時間5s，內部氣流量0.3L/min; 第2階段:95°C，保持時間40s，內部氣流量0.3L/min; 第3階段：120°C，保持時間10s，內部氣流量0.3L/min; 第4階段：1000°C，保持時間5. Os，內部氣流量0.3L/min; 第5階段：1000°C，保持時間1. Os，內部氣流量0.3L/min; 第6階段：1000°C，保持時間2. Os，內部氣流量0.0 L/min; 第7階段:2500 °C，保持時間0.8s，內部氣流量0.0L/min; 第8階段:2500°C，保持時間2.0s，內部氣流量0.0L/min; 第9階段:2500°C，保持時間2.0s，內部氣流量0.3L/min。
【文檔編號】G01N21/31GK106053363SQ201610345574
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月23日
【發明人】羅瀟瀟, 汪汶, 田軍, 鐘麗君
【申請人】宜昌人福藥業有限責任公司